Definicija citokina klasifikacija vrsta djelovanja. Za šta su potrebni citokini - karakteristike ćelija koje kontrolišu imunitet
Citokini, po svojoj prirodi, su proteini koje proizvode ćelije imunološki sistem(često se u literaturi nazivaju „faktorima“). Oni učestvuju u diferencijaciji novorođenih ćelija imunog sistema, dajući im određene karakteristike koje su izvor raznovrsnosti imunih ćelija, a takođe obezbeđuju međućelijsku interakciju. Da bi se ovaj proces lakše razumio, proces proizvodnje imunoloških ćelija može se uporediti sa fabrikom. U prvoj fazi, identične praznine ćelija napuštaju transporter, zatim u drugoj fazi, koristeći razne grupe citokini, svaka ćelija je obdarena posebnim funkcijama i sortirana u grupe za naknadno učešće u imunološkim procesima. Tako se iz identičnih ćelija dobijaju T-limfociti, B-limfociti, neutrofili, bazofili, eozinofili i monociti.
Za nauku je zanimljiva posebnost djelovanja citokina na ćeliju, što dovodi do proizvodnje drugih citokina u ovoj ćeliji. To jest, jedan citokin pokreće reakciju proizvodnje drugih citokini.
Citokini se, ovisno o njihovom djelovanju na imunološke stanice, dijele u šest grupa:
- Interferoni
- Interleukini
- Faktori koji stimulišu kolonije
- Faktori rasta
- Hemokini
- Faktori nekroze tumora
Interferoni su citokini koje proizvode stanice kao odgovor na virusnu infekciju ili druge podražaje. Ovi proteini (citokini) blokiraju reprodukciju virusa u drugim ćelijama i učestvuju u interakciji imune ćelije i ćelije.
Prvi tip (ima antivirusno i antitumorsko djelovanje):
interferon-alfa
interferon beta
Interferon-gama
Interferoni alfa i beta imaju sličan mehanizam djelovanja, ali ih proizvode različite stanice.
Interferon-alfa proizvode mononuklearni fagociti. Odatle proizilazi njegov naziv - “ leukocitni interferon».
Interferon-beta proizvode fibroblasti. Otuda i njegovo ime - “ fibroblast interferon».
Interferoni prve vrste imaju svoje zadatke:
- Povećajte proizvodnju interleukina (IL1)
- Smanjite pH nivo u međućelijskom okruženju sa povećanjem temperature
- Veže se za zdrave ćelije i štiti ih od virusa
- Sposoban da inhibira ćelijsku proliferaciju (rast) blokiranjem sinteze aminokiselina
- U sprezi s prirodnim stanicama ubojicama, one induciraju ili potiskuju (u zavisnosti od situacije) stvaranje antigena
Interferon-gama proizvode T limfociti i prirodne ćelije ubice. Nosi ime – “ imuni interferon»
Interferon druge vrste također ima zadatke:
- Aktivira T-limfocite, B-limfocite, makrofage, neutrofile,
- inhibira proliferaciju timocita,
- Jača ćelijski imunitet i autoimunitet,
- Reguliše apoptozu normalnih i inficiranih ćelija.
Interleukini(skraćeno IL) su citokini koji regulišu interakciju između leukocita. Nauka je identifikovala 27 interleukina.
Faktori koji stimulišu kolonije– to su citokini koji regulišu podelu i diferencijaciju matičnih ćelija koštana srž i prekursori krvnih zrnaca. Ovi citokini su odgovorni za sposobnost limfocita da formiraju klonove, a također su u stanju stimulirati funkcionalnost stanica izvan koštane srži.
Faktori rasta – regulišu rast, diferencijaciju i funkcionalnost ćelija u različitim tkivima
Do danas su otkriveni sljedeći faktori rasta:
- transformirajući faktori rasta alfa i beta
- epidermalni faktor rasta
- faktor rasta fibroblasta
- faktor rasta koji potiče od trombocita
- faktor rasta nervnih ćelija
- faktor rasta sličan insulinu
- faktor rasta koji vezuje heparin
- faktor rasta endotelnih ćelija
Funkcije transformirajućeg faktora rasta beta se smatraju najviše proučavanim. Odgovoran je za suzbijanje rasta i aktivnosti T-limfocita, potiskuje neke funkcije makrofaga, neutrofila i B-limfocita. Iako je ovaj faktor klasifikovan kao faktor rasta, on je zapravo uključen u obrnutim procesima, odnosno potiskuje imuni odgovor (suprimira funkcije ćelija uključenih u imunološku odbranu), kada je infekcija eliminisana i rad imunoloških ćelija više nije potreban. Pod uticajem ovog faktora pojačava se sinteza kolagena i proizvodnja imunoglobulina IgA tokom zarastanja rana i stvaraju memorijske ćelije.
Hemokini su citokini male molekularne težine. Njihova glavna funkcija je privlačenje leukocita iz krvotoka na mjesto upale, kao i regulacija pokretljivosti leukocita.
Faktori nekroze tumora(skraćeno TNF) su dvije vrste citokina (TNF-alfa i TNF-beta). Rezultati njihovog djelovanja: razvoj kaheksije (ekstremni stepen iscrpljenosti organizma kao rezultat usporavanja aktivnosti enzima, koji pospješuje nakupljanje masti u tijelu); razvoj toksičnog šoka; inhibicija apoptoze (ćelijske smrti) ćelija imunog sistema, indukcija apoptoze tumorskih i drugih ćelija; aktivacija trombocita i zacjeljivanje rana; inhibicija angiogeneze (vaskularna proliferacija) i fibrogeneze (degeneracija tkiva u vezivno tkivo), granulomatoze (formiranje granuloma - proliferacija i transformacija fagocita) i mnogi drugi rezultati.
3. Citokini: opća svojstva, klasifikacija. Interleukini.
Citokini– to su peptidni medijatori koje luče aktivirane ćelije koji regulišu interakcije, aktiviraju sve karike samog SI i utiču na različite organe i tkiva. Opća svojstva citokini: 1. Oni su glikoproteini. 2. Djelovati na samu ćeliju i njeno neposredno okruženje. To su molekuli na kratkim udaljenostima.3. Djeluju u minimalnim koncentracijama. 4. Citokini imaju specifične receptore koji im odgovaraju na površini ćelije 5. Mehanizam djelovanja citokina je da nakon interakcije sa receptorom prenesu signal sa ćelijske membrane na njen genetski aparat. U ovom slučaju, ekspresija ćelijskih proteina se mijenja s promjenom funkcije stanice (na primjer, oslobađaju se drugi citokini). Citokini se dijele u nekoliko glavnih grupa .1. Interleukini (IL)2. Interferoni 3. Grupa faktora tumorske nekroze (TNF) 4. Grupa faktora stimulacije kolonija (na primjer, faktor stimulacije kolonije granulocita-makrofaga - GM-CSF) 5. Grupa faktora rasta (faktor rasta endotela, faktor rasta nerava, itd.) 6. Hemokini . Citokini koje luče prvenstveno ćelije imunog sistema nazivaju se interleukini (IL) – faktori interakcije interleukocita. Numerirani su redom (IL-1 - IL-31). Oslobađaju ih leukociti kada su stimulirani mikrobnim produktima i drugim antigenima. IL-1 luče makrofagi i dendritične ćelije, izaziva povećanje temperature, stimuliše i aktivira matične ćelije, T-limfocite, neutrofile i učestvuje u razvoju upale. Postoji u dva oblika – IL-1a i IL-1b. IL-2 luče T pomoćne ćelije (uglavnom tip 1, Th1) i stimuliše proliferaciju i diferencijaciju T i B limfocita, NK ćelija i monocita. IL-3 je jedan od glavnih hematopoetskih faktora, stimuliše proliferaciju i diferencijaciju ranih hematopoetskih prekursora, makrofaga i fagocitozu. IL-4 je faktor rasta B-limfocita, stimuliše njihovu proliferaciju u ranoj fazi diferencijacije; luče T-limfociti 2. tipa i bazofili IL-5 stimuliše sazrevanje eozinofila, bazofila i sintezu imunoglobulina B-limfocitima koje proizvode T-limfociti pod uticajem antigena. IL-6 je citokin sa višestrukim djelovanjem, koji luče T limfociti, makrofagi i mnoge ćelije izvan imunološkog sistema, stimuliše sazrijevanje B limfocita u plazma ćelije, razvoj T ćelija i hematopoezu, te aktivira upalu. IL-7 je limfopoetski faktor, aktivira proliferaciju prekursora limfocita, stimuliše diferencijaciju T ćelija, formiraju ga stromalne ćelije, kao i keratociti, hepatociti i druge ćelije bubrega.IL-8 je regulator hemotakse neutrofa i T ćelije (hemokin); luče T ćelije, monociti, endotel. Aktivira neutrofile, izaziva njihovu usmjerenu migraciju, adheziju, oslobađanje enzima i reaktivnih kisikovih vrsta, stimulira hemotaksiju T-limfocita, degranulaciju bazofila, adheziju makrofaga, angiogenezu. IL-10 - luče T limfociti (pomoćne ćelije tipa 2 Th2 i regulatorne T pomoćne ćelije - Tr). Suzbija oslobađanje proinflamatornih citokina (IL-1, IL-2, TNF, itd.) IL-11 - koji proizvode stromalne stanice koštane srži, hematopoetski faktor, djeluje slično kao IL-3. IL-12 – izvor – monociti-makrofagi, dendritske ćelije izazivaju proliferaciju aktiviranih T-limfocita i prirodnih ćelija ubica, pojačavaju dejstvo IL-2. IL-13 – luče T limfociti, aktivira diferencijaciju B ćelija IL-18 – proizvode monociti i makrofagi, dendritske ćelije, stimuliše T pomoćne ćelije tipa 1 i njihovu proizvodnju interferona gama, inhibira sintezu IgE.
Citokini su oko 100 kompleksnih proteina uključenih u mnoge imunološke i upalne procese u ljudskom tijelu. Ne akumuliraju se u stanicama koje ih proizvode i brzo se sintetiziraju i izlučuju.
Citokini koji pravilno funkcionišu osiguravaju nesmetano i efikasno funkcionisanje imunog sistema. Njihova karakteristična karakteristika je svestranost djelovanja. U većini slučajeva pokazuju kaskadni efekat koji se zasniva na međusobnoj nezavisnoj sintezi drugih citokina. Upalni proces koji se razvija kontroliraju međusobno povezani proinflamatorni citokini.
Šta su citokini
Citokini su velika grupa regulatornih proteina čija se molekulska težina kreće od 15 do 25 kDa (kilodalton je atomska jedinica mase). Oni djeluju kao međućelijski signalni posrednici. Njihova karakteristična karakteristika je prijenos informacija između ćelija na kratkim udaljenostima. Oni su uključeni u kontrolu ključnih životnih procesa u tijelu. Oni su odgovorni za početak proliferacija, tj. proces umnožavanja stanica, nakon čega slijedi njihova diferencijacija, rast, aktivnost i apoptoza. Citokini određuju humoralne i ćelijske faze imunološkog odgovora.
Citokini se mogu smatrati vrstom hormoni imunog sistema. Ostala svojstva ovih proteina uključuju, posebno, sposobnost da utiču na energetsku ravnotežu tela kroz promene u apetitu i brzini metabolizma, efekte na raspoloženje, na funkcije i strukture kardiovaskularnog sistema i povećanu pospanost.
Posebna pažnja treba adresirati proinflamatorni i antiinflamatorni citokini. Prevlast prvih vodi do upalna reakcija sa groznicom, ubrzanim disanjem i leukocitozom. Drugi imaju prednost u stvaranju protuupalnog odgovora.
Karakteristike citokina
Glavne karakteristike citokina:
- redundantnost- sposobnost da se proizvede isti efekat
- pliotropija– sposobnost uticaja na različite tipove ćelija i uzroka u njima razne akcije
- sinergija- interakcija
- indukcija kaskade pozitivnih i negativnih povratnih informacija
- antagonizam– međusobno blokiranje efekata delovanja
Citokini i njihov utjecaj na druge stanice
Citokini posebno djeluju na:
- B limfociti su ćelije imunog sistema odgovorne za humoralni imuni odgovor, tj. proizvodnja antitijela;
- T limfociti su ćelije imunog sistema odgovorne za ćelijski imuni odgovor; proizvode, posebno, Th1 i Th2 limfocite, između kojih se opaža antagonizam; Th1 podržava ćelijski odgovor i Th2 humoralni odgovor; Th1 citokini negativno utiču na razvoj Th2, i obrnuto;
- NK ćelije su grupa ćelija imunog sistema koje su odgovorne za fenomene prirodne citotoksičnosti (toksični efekti na citokine koji ne zahtevaju stimulaciju specifičnih mehanizama u vidu antitela);
- Monociti su morfološki elementi krvi, zovu se bela krvna zrnca;
- Makrofagi su populacija ćelija u imunološkom sistemu koje potiču od prekursora krvnih monocita; djeluju kako u procesima urođenog imuniteta tako i stečenog (prilagodljivog);
- Granulociti su vrsta bijelih krvnih stanica koje pokazuju svojstva fagocita, što treba shvatiti kao sposobnost apsorpcije i uništavanja bakterija, mrtvih stanica i nekih virusa.
Proinflamatorni citokini
Proinflamatorni citokini sudjeluju u regulaciji imunološkog odgovora i hematopoeze (proces proizvodnje i diferencijacije morfotskih krvnih elemenata) i iniciraju razvoj upalne reakcije. Često se nazivaju imunotransmiterima.
Glavni proinflamatorni citokini uključuju:
- TNF ili faktor nekroze tumora, koji se ranije zvao kekqing. Pod ovim imenom postoji grupa proteina koji određuju aktivnost limfocita. Mogu izazvati apoptozu, prirodni proces programirana smrt ćelija raka. TNF-α i TNF-β su izolovani.
- IL-1, tj. interleukin 1. Jedan je od glavnih regulatora upalnog imunološkog odgovora. Posebno aktivan kod intestinalnih inflamatornih reakcija. Među njegovih 10 varijeteta izdvajaju se IL-1α, IL-1β, IL-1γ. Trenutno se opisuje kao interleukin 18.
- IL-6, odnosno interleukin 6, koji ima pleiotropni ili višesmjerni učinak. Njegova koncentracija je povećana u serumu pacijenata sa ulceroznim kolitisom. Stimuliše hematopoezu, pokazujući sinergiju sa interleukinom 3. Stimuliše diferencijaciju B limfocita u plazma ćelije.
Protuupalni citokini
Protuupalni citokini smanjuju inflamatorni odgovor potiskivanjem proizvodnje proupalnih citokina od strane monocita i makrofaga, posebno IL-1, IL-6, IL-8.
Među glavnim protuupalnim citokinima posebno se spominju IL-10, odnosno interleukin 10 (faktor koji inhibira sintezu citokina), IL 13, IL 4, koji kao rezultat indukcije lučenje citokina koji utiču na hematopoezu, ima pozitivan uticaj za proizvodnju krvnih zrnaca.
A.A. Almabekova, A.K. Kusainova, O.A. Almabekov
Asfendiyarov Kazahstanski nacionalni medicinski univerzitet, Odsjek za hemiju Almaty tehnološki univerzitet Odsjek za hemiju, hemijsko inženjerstvo i ekologiju
RAZVOJ NOVIH KOMPOZITNIH MATERIJALA OTPORNIH NA POŽAR
Rezime: Pažnju autora ovog članka privukli su poliimidi na bazi dianhidrida aril-alicikličnih poliheterocikala koji sadrže fluor. Ova jedinjenja imaju jedinstvena svojstva, kao što su visoka termička i vatrootpornost, hemijska otpornost, rastvorljivost, što ih uz ostale pozitivne karakteristike čini nezamenljivim u savremenoj tehnologiji. U tu svrhu razvijeni su kompozitni materijali na bazi aril-alicikličnih poliimida koji sadrže fluor, pronađeni su optimalni uslovi za dobijanje epoksidnih jedinjenja aril-aliciklične strukture kao učvršćivača korišćenjem lignosulfonata, i Proučavane su fizičko-hemijske, električne i termičke osobine sintetizovanog poliimida.
Ključne riječi: dianhidridi, diamini, polikondenzacija, epoksidna jedinjenja, poliimid, termoplastičnost, vatrootpornost, viskoznost.
Kazakh National medicinski univerzitet nazvan po S.D. Asfendijarov, Katedra za psihijatriju i narkologiju, Naučna kliničko-dijagnostička laboratorija
LABORATORIJSKA DIJAGNOSTIKA CITOKINA (PREGLEDNI ČLANAK)
Ovaj pregled posvećuje veliku pažnju ključnim i trenutno relevantnim pitanjima sadržaja citokina u različitim biološkim tekućinama u procjeni funkcionalne aktivnosti imunokompetentnih ćelija i regulaciji imunološkog odgovora. Ključne riječi: citokini, imunohemija.
Citokini.
Citokini se trenutno smatraju proteinsko-peptidnim molekulima koje proizvode različite ćelije u tijelu i provode međućelijske i međusistemske interakcije. Citokini su univerzalni regulatori životnog ciklusa ćelije, kontrolišu procese diferencijacije, proliferacije, funkcionalne aktivacije i apoptoze potonje. Citokini koje proizvode ćelije imunog sistema nazivaju se imunocitokini; oni predstavljaju klasu rastvorljivih peptidnih medijatora imunog sistema, neophodnih za njegov razvoj, funkcionisanje i interakciju sa drugim sistemima tela (Kovalchuk L.V. et al., 1999).
Kao regulatorni molekuli, citokini igraju važnu ulogu u realizaciji urođenih i adaptivnih imunoloških reakcija, osiguravaju njihovu interakciju, kontrolišu hematopoezu, upalu, zacjeljivanje rana, formiranje novih krvnih žila (angiogeneza) i mnoge druge vitalne procese. Trenutno postoji nekoliko različitih klasifikacija citokina, uzimajući u obzir njihovu strukturu, funkcionalnu aktivnost,
porijeklo, tip citokinskih receptora. Tradicionalno, u skladu sa njihovim biološkim efektima, uobičajeno je razlikovati sljedeće grupe citokina.
1) Interleukini (IL-1 - IL-18) - sekretorni regulatorni proteini imunog sistema, koji obezbeđuju interakciju medijatora u
imuni sistem i njegova povezanost sa drugim sistemima organizma;
2) Interferoni (IFNa, IFNr, IFNu) su antivirusni proteini sa izraženim imunoregulatornim i antitumorskim efektima;
3) Faktori tumorske nekroze (TNFa, TNFa-limfotoksin) - citokini sa citotoksičnim i regulatornim efektima;
4) Kolonije-stimulirajući faktori (CSF) - stimulatori rasta i diferencijacije hematopoetskih ćelija (GM-CSF, G-CSF, M-CSF);
5) hemokini - hemoatraktanti za leukocite;
6) Faktori rasta - regulatori rasta, diferencijacije i funkcionalne aktivnosti ćelija različitog porijekla (faktor rasta fibroblasta, faktor rasta endotelnih ćelija, epidermalni faktor rasta) i transformirajući faktor rasta - TGFr. Citokini se razlikuju po strukturi, biološkoj aktivnosti i nizu drugih karakteristika, ali imaju opšta svojstva, karakterističan za ovu klasu peptida. U pravilu, citokini su glikozilirani polipeptidi srednje molekularne težine (manje od 30 kDa). Citokine proizvode aktivirane stanice u niskim koncentracijama za kratko vrijeme, a njihova sinteza uvijek počinje transkripcijom gena. Citokini vrše svoj biološki efekat na ćelije preko receptora na površini ciljnih ćelija. Vezivanje citokina za odgovarajući receptor dovodi do aktivacije ćelije, proliferacije, diferencijacije ili smrti.
Citokini ispoljavaju svoje biološke efekte prvenstveno lokalno, radeći na mrežnom principu. Oni mogu djelovati zajedno i uzrokovati kaskadnu reakciju, sekvencijalno indukujući sintezu nekih citokina od strane drugih. Ova složena interakcija citokina neophodna je za nastanak upale i regulaciju imunoloških odgovora. Primjer sinergističke interakcije citokina je stimulacija inflamatornih reakcija IL-1, IL-6 i TNF, kao i sinteza IgE kombinovanim djelovanjem IL-4, IL-5 i IL-13. Antagonistička interakcija citokina također može biti negativan regulatorni mehanizam za kontrolu razvoja inflamatornog odgovora i sinteze proinflamatornih i antiinflamatornih citokina (inhibicija proizvodnje IL-6 kao odgovor na povećanje koncentracije TNF-a). Citokinska regulacija funkcija ciljnih stanica može se provoditi autokrinim, parakrinim ili endokrinim mehanizmom. Citokinski sistem uključuje ćelije proizvođače; rastvorljivi citokini i njihovi antagonisti; ciljne ćelije i njihove receptore. Ćelije proizvođača:
I. Glavna grupa ćelija koje proizvode citokine u imunološkom sistemu su limfociti.
ThO se proizvodi širok raspon citokini u vrlo niskim koncentracijama.
Th1 proizvodi IL-2, IFNa, IL-3, TNFa, neophodne za razvoj reakcija ćelijskog imuniteta (HRT, antivirusno,
antitumorska citotoksičnost, itd.) Skup citokina koje luči Th2 (IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IL-3) određuje razvoj humoralnog imunološkog odgovora. Poslednjih godina opisana je subpopulacija Th3 koja proizvodi TGFβ, koji potiskuje funkciju i Thl i Th2.
T-citotoksični (CD8+), B-limfociti i prirodne ćelije ubice su slabi proizvođači citokina.
II. Ćelije iz serije makrofaga i monocita proizvode citokine koji iniciraju imunološki odgovor i koji su uključeni u upalu i regeneraciju.
III. Ćelije koje nisu povezane sa imunološkim sistemom: ćelije vezivnog tkiva, epitela, endotela spontano, bez antigenske stimulacije, luče citokine koji podržavaju proliferaciju hematopoetskih ćelija i autokrinih faktora rasta (FGF, EGF, TFRR, itd.).
Imuni status je kompleksni indikator stanje imunog sistema, to je kvantitativna i kvalitativna karakteristika stanja
funkcionalna aktivnost organa imunog sistema i neki nespecifični mehanizmi antimikrobne odbrane. Metode za određivanje citokina. Određivanje sadržaja citokina u različitim biološkim tečnostima ima veliki značaj u procjeni funkcionalne aktivnosti
imunokompetentne ćelije i regulacija imunološkog odgovora. IN u nekim slučajevima(septički šok, bakterijski meningitis), kada citokini, posebno TNF-a, djeluju kao vodeći faktor u patogenezi, određivanje njegovog sadržaja u krvi ili cerebrospinalnoj tekućini postaje glavna metoda imunološke dijagnoze.
Ponekad se nivo citokina određuje u svrhu diferencijalne dijagnoze. Na primjer, kod bakterijskog meningitisa, TNF-a se otkriva u cerebrospinalnoj tekućini, a kod virusnog meningitisa u pravilu se u njemu nalazi samo IL-1. Međutim, određivanje prisustva citokina u krvnom serumu i drugim biološkim tekućinama može pružiti negativni rezultati zbog karakteristika ovih peptida. Budući da su uglavnom kratkotrajni regulatori, citokini imaju kratak poluživot (do 10 min). Neki citokini su sadržani u krvi u izuzetno niskim koncentracijama, akumulirajući se uglavnom na mjestu upale; osim toga, biološka aktivnost citokina može biti maskirana kada se vežu za molekule inhibitora koji cirkuliraju u krvi.
Postoje tri različita pristupa za kvantifikaciju citokina: imunohemijski testovi (ELISA), biološki testovi i molekularno biološki testovi. Biološko testiranje je najviše
osjetljiva metoda, ali inferiorna po specifičnosti u odnosu na ELISA. Postoje 4 vrste biotestiranja: citotoksičnim efektom, indukcijom proliferacije, indukcijom diferencijacije i antivirusnim djelovanjem. Sljedeći citokini su biotestirani na osnovu njihove sposobnosti da indukuju proliferaciju ciljnih ćelija: Ib-1, Ib-2, Ib-4, Ib-5, Ib-6, Ib-7. TNF-a i TNF-p su testirani na njihov citotoksični učinak na osjetljive ciljne stanice (T929). Shi-y je testiran na njegovu sposobnost da indukuje ekspresiju ShiA II molekula na ciljnim stanicama. 8 su testirane na njihovu sposobnost da pojačaju kemotaksu neutrofila. Biotestovi se više koriste u istraživačke svrhe ili za potvrdu ELISA rezultata.
Određivanje citokina u krvnom serumu i drugim biološkim materijalima korištenjem čvrste faze ELISA postalo je sve raširenije. Studija se izvodi u skladu sa protokolom koji je priložen uz dijagnostički test sistem. Najčešće korištena opcija je sendvič ELISA, koja se sastoji od sljedećeg: jedna vrsta mAb na određeni citokin se imobilizira na unutrašnjoj površini jažica istraživačkih ploča. Ispitni materijal i odgovarajući standardi i kontrole se dodaju u jažice ploče. Nakon inkubacije i ispiranja, u jažice se dodaje drugo mAb drugom epitopu datog citokina, konjugirano s indikatorskim enzimom (peroksidaza hrena). Nakon inkubacije i ispiranja ćelijama se dodaje supstrat, vodikov peroksid sa hromogenom. Tokom enzimske reakcije mijenja se intenzitet boje jažica, što se mjeri pomoću automatskog pločastog fotometra.
ELISA pomoću mAb protiv pojedinačnih epitopa u molekulu citokina je visoko osjetljiva i specifična, a prednost metode je i objektivno automatizirano snimanje rezultata. Međutim, ni ova metoda nije bez nedostataka, budući da detekcija prisustva molekula citokina još nije pokazatelj njihove biološke aktivnosti, mogućnost lažno pozitivnih rezultata je zbog
Zbog unakrsne reakcije antigenskih epitopa, upotreba ELISA ne omogućava određivanje citokina u sastavu imunoloških kompleksa.
ELISA se razlikuje od biotestiranja po nižoj osjetljivosti uz visoku specifičnost i reproduktivnost. Citokin se otkriva po njegovoj sposobnosti da se veže za dva različita monoklonska antitijela usmjerena protiv dva različita antigena epitopa na molekulu citokina. Na primjer, koristi se kompleks streptavidin - enzim - enzimski supstrat. Međutim, sposobnost većine citokina da formiraju komplekse sa serumskim proteinima, itd. može značajno iskriviti rezultate kvantifikacija nivoa citokina. Molekularno biološke metode omogućavaju određivanje ekspresije citokinskih gena u materijalu koji se proučava, tj. prisustvo odgovarajuće mRNA. Polimeraza reverzne transkriptaze smatra se najosjetljivijom lančana reakcija(RT-PCR). Reverzna transkriptaza (revertaza) se koristi za pravljenje kopija cDNK od mRNA izolirane iz stanica. Količina cDNK odražava početnu količinu mRNA i indirektno odražava aktivnost proizvodnje datog citokina.Proučavanje proizvodnje citokina u kulturama pune krvi ili mononuklearnih ćelija izolovanih iz krvi omogućava nam da karakterišemo sekretornu aktivnost krvnih monocita,
izazvana mitogenima: Con A, PHA, LPS. Interpretacija podataka tokom vremena omogućava predviđanje daljeg toka bolesti specifičnih za organ. autoimune bolesti, za multiplu sklerozu, prilikom procene efikasnosti primenjenih metoda imunoterapije tumora i dr.
Testiranje bioloških efekata općenito nije dovoljno osjetljivo, a ponekad i dovoljno informativno. Prisustvo molekula inhibitora ili antagonista u istoj biološkoj tekućini može prikriti biološku aktivnost citokina. U ovom slučaju, različiti citokini često pokazuju istu biološku aktivnost. Osim toga, inscenacija biološki testovi zahtijeva posebnu dodatnu opremu, izvodi se u nestandardnim uvjetima i koristi se prvenstveno u istraživačke svrhe. Zaključak.
Dakle, trenutno nema sumnje da su citokini najvažniji faktori u imunopatogenezi. Proučavanje nivoa citokina nam omogućava da dobijemo informacije o funkcionalnoj aktivnosti različitih tipova imunokompetentnih ćelija, o odnosu procesa aktivacije T-pomoćnika tipa I i II, što je veoma važno u diferencijalnoj dijagnozi niza infektivnih i imunopatoloških bolesti. procesi.
BIBLIOGRAFIJA
1 Gumilevskaya O.P., Gumilevsky B.Yu., Antonov Yu.V. Sposobnost limfocita periferna krv pacijenti s polenskom groznicom luče IL-4, INF tijekom poliklonalne stimulacije in vitro // Citokini i inflamacija. Materijali međunarodne naučno-praktične škole - konferencije. - Sankt Peterburg: 2002. - T. 1. - P. 94-98.
2 Bulina O.V., Kalinina N.M. Analiza parametara citokinske komponente imuniteta kod djece oboljele od atopijski dermatitis// Citokini i upala. - 2002. - br. 2. - Str. 92-97.
3 Sklyar L.F., Markelova E.V. Citokinska terapija rekombinantnim interleukinom-2 (ronkoleukinom) kod pacijenata sa virusni hepatitis// Citokini i upala. - 2002. - br. 4. - Str. 43-66.
4 Marty C, Misset B, Tamion F, et al. Cirkulirajuće koncentracije interleukina-8 u bolesnika s višestrukim zatajenjem organa septičkog i neseptičkog porijekla // Critical Care Medicine. - 1994. - V. 22. - P. 673-679.
5 Shaimova V.A., Simbirtsev, A.Yu.Kotov. Proinflamatorni citokini u različitim vrstama gnojnih ulkusa rožnice // Citokini i inflamacija. Materijali međunarodne naučne i praktične škole. - Sankt Peterburg: 2002. - Br. 2. - P. 52-58.
6 Teitelbaum S.L. Resorpcija kostiju osteoklastima // Nauka. - 2000. - V. 289. - P. 1504-1508.
7 Borisov L.B. Medicinska mikrobiologija, virologija, imunologija. - M.: 2002. - 736 str.
8 W. Paul Immunology. - M.: Mir, 1987. - 274 s.
9 G. Frimel Imunološke metode. - M.: Medicina, 1987. - 472 str.
10 A.V. Karaulov Klinička imunologija. - M.: Medicinska informativna agencija, 1999. - 604 str.
11 Lebedev K.A., Ponyakina I.D. Imuni nedostatak. - M.: Medicinska knjiga, 2003. - 240 str.
12 J. Klaus Lymphocytes. Metode. - M.: Mir, 1990. - 214 str.
13 Menshikov I.V., Berulova L.V. Osnove imunologije. Laboratorijska radionica. - Izhevsk: 2001. - 134 str.
14 Petrov R.V. Imunologija. - M.: Medicina, 1987. - 329 str.
15 Royt A. Osnove imunologije. - M.: Mir, 1991. - 327 str.
16 Totolyan A.A., Freidlin I.S. // Ćelije imunog sistema. 1.2 volumen. -Sankt Peterburg, Nauka, - 2000 - 321 str.
17 Stefanii D.V., Veltishchev Yu.E. Klinička imunologija djetinjstvo. - M.: Medicina, 1996. - 383 str.
18 Freidlin I.S., Totolyan A.A. Ćelije imunog sistema. - Sankt Peterburg: Nauka, 2001. - 391 str.
19 Khaitov R.M., Ignatieva G.A., Sidorova I.G. Imunologija. - M.: Medicina, 2000. - 430 str.
20 Khaitov R.M., Pinegin B.V., Istamov Kh.I. Ekološka imunologija. - M.: VNIRO, 1995. - 219 str.
21 Belyaeva O. V., Kevorkov N. N. Uticaj kompleksna terapija o pokazateljima lokalnog imuniteta pacijenata s parodontitisom // Citokini i inflamacija. - 2002. - T. 1. - Br. 4. - P. 34-37.
22 Y.T. Polimorfizmi gena Chang citokina u kineskih pacijenata s psorijazom // British Journal of Dermatology. - 2007. - Vol. 156. - P. 899-905.
23 W. Baran Polimorfizmi gena promotora IL-6 i IL-10 u psorijazi vulgaris // Acta Derm Venereol. - 2008. - Vol. 88. -P. 113-116.
24 L. Borska Imunološke promjene u TNF-alfa, sE-selektinu, sP-selektinu, sICAM-1 i IL-8 kod pedijatrijskih pacijenata liječenih od psorijaze po Goeckermanovom režimu // Pedijatrijska dermatologija. - 2007. - Vol. 24. - br. 6. - str. 607-612.
25 M. O"Kane Povećana ekspresija siročad nuklearnog receptora NURR1 kod psorijaze i modulacija nakon inhibicije TNF-a // Journal of Investigative Dermatology. - 2008. - Vol. 128. - P. 300-310.
26 G. Fiorino Pregledni članak: psorijaza izazvana anti TNF-a kod pacijenata s inflamatornom bolešću crijeva // Aliment Pharmacol Ther. - 2009. - Vol. 29. - P. 921-927.
27 sati ujutro Tobin, B. Kirby TNFa inhibitori u liječenju psorijaze i psorijatičnog artritisa // Biodrugs. - 2005. - Vol. 19. - br. 1. - str. 47-57.
28 A.B. Serwin faktor nekroze tumora alfa (TNF-a) koji konvertuje enzim i rastvorljivi TNF-a receptor tip 1 kod pacijenata sa psorijazom u vezi sa hroničnom konzumacijom alkohola // Journal European Academy of Dermatology and Venereology. -2008. - Vol. 22. - P. 712-717.
29 O. Arican Serumski nivoi TNF-a, IFN-y, IL-6, IL-8, IL-12, IL-17 i IL-18 kod pacijenata sa aktivnom psorijazom i korelacija sa težinom bolesti // Medijatori upale . - 2005. - Vol. 5. - P. 273-279.
30 A. Mastroianni profili citokina tijekom monoterapije infliksimabom u psorijatičnom artritisu // British Journal of Dermatology. -2005. - Vol. 153. - P. 531-536.
A.Sh. Oradova, K.Z. Saduakasova, S.D. Lesova
S.Zh. Asfendiyarov atyndagi K,azats ¥lttyts medicine na univerzitetu Narkologija zhene Psihijatrijski odjeli, gylymi klinike-dijagnostika zertkhana
CYTOKINNYN, ZERTKHANALSH DIJAGNOSTIKA
Tushn: Sholuy bul ulken nazar man, yzdy belshgen zhene sura; kekeykesp K;a3ipri ua;ytta er TYrli biološki; sujschtyk;tarda imune kuzyrly zhasushalardy funkcionals; belsendshkt bagalauda cytokinderdsch mazmunia zhene immundi zhauaptyn, retteuk
TYYindi sezder: citokin, imunitet; hemija.
A.Sh. Oradova, K.Z. Saduakasova, S.D. Lesova
Asfendiyarov Kazahstanski nacionalni medicinski univerzitet, Odsjek za psihijatriju i narkologiju, Naučna klinička i dijagnostička laboratorija
LABORATORIJSKA DIJAGNOSTIKA CITOKINA
Sažetak: U ovom pregledu je velika pažnja posvećena kritičnim i aktuelnim pitanjima sadržaja citokina u različitim biološkim tečnostima u proceni funkcionalne aktivnosti imunih ćelija i regulaciji imunog odgovora. Ključne riječi: citokini, imunohemija.
UDK 616.831-005.1-056:616.12-008.331.1
A.Sh. Oradova, A.D. Sapargalieva, B.K. Dyusembayev
Kazahstanski nacionalni medicinski univerzitet nazvan po S.D. Asfendijarov, odeljenje patološka anatomija
MOLEKULARNI MARKERI RAZVOJA ISHEMIJSKOG MOŽDA (PREGLED LITERATURE)
Zadnji put značajan iznos istraživanje je posvećeno pronalaženju nasledni faktori, predisponirajući za razvoj vaskularne bolesti mozak Jedan od glavnih pravaca u ovim studijama je proučavanje uloge gena kandidata. U ovom pregledu sistematiziramo rezultate molekularno genetičkih studija posljednjih godina proučavati povezanost različitih klasa “gena kandidata” s rizikom od razvoja ishemijskog moždanog udara kod ljudi. Ključne riječi: ishemijski moždani udar, geni kandidati.
Trenutno, uloga faktora rizika za nastanak ishemijskog moždanog udara kao što su arterijska hipertenzija, ateroskleroza, poremećaji srčanog ritma, srčani udar, pušenje, dijabetes, poremećaji metabolizma lipida, promjene u hemostatskom sistemu, primjena oralni kontraceptivi, zlostavljanje
alkohol, itd. Poznato je da se težina ishemijskog moždanog udara povećava kombinacijom nekoliko faktora rizika, među kojima su značajni arterijska hipertenzija, hiperholesterolemija, povišeni nivoi lipoproteina niske gustine i pušenje. Implementacija u kliničku praksu racionalno
Citokini uključuju različite proteine s molekularnom težinom od 15-40 kDa, koje sintetiziraju različite stanice u tijelu. Citokini su molekuli koji osiguravaju interakciju ćelija imunog sistema, vaskularnog endotela, nervni sistem, jetra. Trenutno je poznato više od 200 citokina.
Isti citokini mogu se sintetizirati u stanicama različite vrste– imuni sistem, slezina, timus, vezivno tkivo. S druge strane, određena stanica je sposobna proizvesti mnogo različitih citokina. Najveću raznolikost citokina proizvode limfociti, zbog čega dolazi do interakcije limfocitnog imuniteta s drugim imuni mehanizmi i sa tijelom u cjelini.
Bitna karakteristika citokina, za razliku od hormona i drugih signalnih molekula, je isti, različiti ili čak suprotni rezultati njihovog djelovanja na različite stanice. One. konačan rezultat uticaja citokina ne zavisi od njegovog tipa, već od unutrašnjeg programa ciljne ćelije, od njenih pojedinačnih zadataka!
Funkcije citokina
Uloga citokina u regulaciji tjelesnih funkcija može se podijeliti u 4 glavne komponente:
1. Regulacija embriogeneze, formiranja i razvoja organa, uključujući i organe imunog sistema.
2. Regulacija procesa rasta tkiva:
3. Regulacija individualnih fizioloških funkcija:
- osigurava funkcionalnu aktivnost stanica,
- konzistentnost reakcija endokrinog, imunološkog i nervnog sistema,
- održavanje homeostaze (dinamičke konstantnosti) organizma.
4. Regulacija odbrambenih reakcija organizma na lokalnom i sistemskom nivou:
- promjena trajanja i intenziteta imunoloških reakcija (antitumorska i antivirusna odbrana organizma),
- modulacija upalnih reakcija,
- učešće u razvoju autoimunih reakcija.
- stimulacija ili inhibicija rasta stanica,
- učešće u procesu hematopoeze.
-
Milan Metropolitan: mapa, cijene karata i korisni savjeti Koliko koštaju karte?
-
Učenje čitanja Jeppesen dijagrama - Tutorial Instaliranje dodataka koji će značajno poboljšati grafiku i realizam simulatora
-
Kada i u kojim slučajevima pojedinačni preduzetnik treba da podnese nultu deklaraciju?
-
Šta je epitet i kako ga pronaći?
