A bél mikroflóra egyensúlyát szabályozó gyógyszer Bacillus subtilis. Bacillus subtilis baktériumtörzs, amelyet mezőgazdasági gasztrointesztinális betegségek megelőzésére és kezelésére szolgáló probiotikus készítmény előállítására használnak.

480 dörzsölje. | 150 UAH | 7,5 USD ", MOUSEOFF, FGCOLOR, "#FFFFCC",BGCOLOR, "#393939");" onMouseOut="return nd();"> Szakdolgozat - 480 RUR, szállítás 10 perc, éjjel-nappal, a hét minden napján és ünnepnapokon

Gataullin Airat Gafuanovics. A Bacillus subtilis törzsek biológiai tulajdonságai új probiotikumok létrehozására ígéretesek: Dis. ...folypát. biol. Tudományok: 03.00.07 Moszkva, 2005 131 p. RSL OD, 61:05-3/1040

Bevezetés

1. fejezet Mikrobás antagonizmus – a diszbiotikus állapotok korrekciójára szolgáló bioterápiás gyógyszerek létrehozásának alapja 9

2. fejezet Spóraprobiotikumok és hatásuk a makroorganizmusra 18

2.1. A Bacillus 18 nemzetségbe tartozó baktériumokból származó készítmények

2.2. Modern ötletek a Bacillus 26 nemzetségbe tartozó baktériumokból származó probiotikumok terápiás és profilaktikus hatásának mechanizmusairól

2.3. Aerob spóraképző baktériumok által termelt biológiailag aktív anyagok 32

2.4. A Bacillus 34 nemzetségbe tartozó baktériumok patogenitási tényezői

3. fejezet A kutatás tárgyai és módszerei 41

3.1. Kutatási tárgyak 41

3.2. Kutatási módszerek 43

3.2.1. Felszerelés és technika 45

4. fejezet. Az izolált törzsek jellemzői 53

4.1. A törzsek morfológiai és élettani-biokémiai tulajdonságainak vizsgálata 53

4.2. B.subtilis törzsek antagonisztikus és adhéziós aktivitása in vitro kísérletekben 55

4.3. A B. subtilis törzsek antibiotikum rezisztenciájának és plazmid profiljának meghatározása 57

5. fejezet. A B. subtilis 1719 törzs hatása a makroorganizmusra 62

5.1. A B. subtilis 1719 törzs toxicitásának, toxicitásának, virulenciájának és probiotikus aktivitásának vizsgálata in vivo kísérletekben 62

5.2. A B.subtilis 1719 törzs immunitási paraméterekre gyakorolt ​​hatásának vizsgálata in vivo kísérletes dysbiosissal végzett kísérletekben 70

6. fejezet. A B.subtilis 1719 törzs technológiai jellemzői a probiotikus készítmény alapjaként 76

6.1. A növekedési tulajdonságok értékelése különböző folyékony táptalajokon 76

6.2. A B. subtilis 1719 törzs életképességének és antagonista aktivitásának vizsgálata a tárolás során 84

7. fejezet A B.subtilis törzs\l\9 és egyes kereskedelemben kapható probiotikus készítmények alapját képező törzsek tulajdonságainak összehasonlító jellemzői. 94

98. következtetés

Következtetések 107

Hivatkozások 108

Bevezetés a műbe

A probléma relevanciája

V Be modern színpadújak jelentek meg az orvosi mikrobiológiában

adatok, amelyek indokolják a szaprofita mikroflóra alkalmazását, amely élettevékenysége során képes olyan biológiailag aktív anyagokat (BAS) termelni, amelyek elnyomják a kórokozó mikroorganizmusok, rosszindulatú daganatok növekedését és normalizálják az emberi szervezetben zajló különféle kóros és biokémiai folyamatokat.

Az elmúlt évtizedben a spóraképző baktériumok élő mikrobiális tenyészetén alapuló biológiai termékeket széles körben alkalmazták a gyomor-bél traktus betegségeinek megelőzésére és kezelésére.

Baktérium nemzetség Bacilus, A mikroorganizmusok egyik legváltozatosabb és legelterjedtebb csoportja, az emberi és állati exogén flóra fontos alkotórészei.

* Nemzetség Bacilusősidők óta felkeltette a kutatók figyelmét. Nako-

- szerzett ismereteket a mikrobiológia, élettan, biokémia, genetika területén

a baktériumok jótékony hatást jeleznek Bacilus mint biológiailag aktív anyagok termelői: enzimek, antibiotikumok, rovarölő szerek. A különféle életkörülményekhez való magas alkalmazkodóképesség (oxigén jelenléte vagy hiánya, növekedés és fejlődés széles hőmérséklet-tartományban, különféle szerves vagy szervetlen vegyületek táplálékforrásként történő felhasználása stb.) hozzájárul a bacilusok terjedéséhez a talajban, vízben, levegő, élelmiszerek és egyéb külső tárgyak

]t környezetben, valamint az emberek és állatok testében.

I Az anyagcsere-folyamatok változatossága, genetikai és biokémiai

variabilitás, a lítikus és emésztőenzimekkel szembeni rezisztencia indokaként szolgált a bacilusok alkalmazásának az orvostudomány különböző területein.

"4 cin. Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hatóság

Amerikai pénzeszközök, jogtalanul eltulajdonítva Bacillus subtilis GRAS állapot (általában biztonságosnak tekinthető) - teljesen biztonságos szervezetek, ami előfeltétel

5 e baktériumok gyógyszergyártásban való felhasználására.

A bacilusok aktivitása a patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusok széles körével szemben nyilvánul meg. Különféle enzimek és egyéb anyagok szintézisének köszönhetően szabályozzák és serkentik az emésztést, antiallergén és antitoxikus hatásúak. Bacillusok alkalmazásakor a makroorganizmus nem specifikus rezisztenciája jelentősen megnő. Ezek a mikroorganizmusok könnyen gyárthatók, eltarthatóak és ami a legfontosabb, környezetbarátak.

Jelenleg a probiotikus gyógyszerek közé sorolják azokat a terápiás és profilaktikus, élő, nem patogén mikrobák alapú gyógyszereket, amelyek természetes adagolási móddal képesek a gazdaszervezet fiziológiai és biokémiai funkcióira kedvező hatást gyakorolni a mikrobiológiai állapot optimalizálása révén.

A bacilusok közül a legnagyobb érdeklődésre számot tartó törzsek B. subtilis. A genetikai és élettani tulajdonságok ismeretében a második helyet foglalják el E. coli. Nagy lehetőségekről B. subtilis A biotechnológiában ezt bizonyítja egy adatbank létrehozása a törzs molekuláris genetikájáról - a SubtiList, amelybe a baktérium genomjával kapcsolatos összes információ bekerül.

A hazánkban és külföldön végzett tudományos kutatások eredményeinek elemzése jelzi a nemzetséghez tartozó baktériumok alkalmazásának mértékét Bacilus a bakteriális biomasszából vagy metabolitjaikból származó termékek előállítása. A nemzetséghez tartozó baktériumok tenyésztésének ismert módszerei Bacilus számos baktérium- és enzimkészítmény előállításának technológiájának alapja. .

A Bacillus nemzetséghez tartozó élő baktériumok alapján olyan probiotikus készítményeket hoztak létre, amelyek ártalmatlanok a makroorganizmusra, számos terápiás és profilaktikus hatást fejtenek ki, és környezetbarátak. Az állattenyésztéssel kapcsolatos eredmények tudományos és gyakorlati jelentőséggel bírnak.

nemzetség új mikrobiális kultúrái Bacilus emberek és haszonállatok gyomor-bélrendszeri betegségeinek kezelésére.

Jelenleg a jól ismert probiotikus gyógyszereket széles körben alkalmazzák a gyakorlati egészségügyben: baktisubtil, sporobacterin, biosporin, baktisporin, subalin, cereobiogen, enterogermin és mások.

Ezeknek a gyógyszereknek a terápiás alkalmazási indikációit és terápiás hatékonyságát az előállításukhoz használt törzsek tulajdonságai korlátozzák. Meghatározó jelentőségű az antagonista hatás spektruma a patogén és opportunista mikroorganizmusokkal szemben, amelyek mikroökológiai zavarokat okoznak az emberi vagy állati szervezet különböző biotópjain. Emellett nem lehet figyelmen kívül hagyni a bacilusok biológiailag aktív anyagok (polipeptid antibiotikumok, enzimek stb.) termelésére való képességét és antibiotikum-rezisztenciáját.

Egyrészt a diszbiotikus rendellenességek kialakulásában szerepet játszó mikroorganizmusok sokfélesége és kialakuló antibiotikum-rezisztenciája, valamint a különböző törzsek bioszintetikus képességeinek változékonysága. B. subtilis, másrészt meghatározzák a probiotikus aktivitást célzó és/vagy különféle biológiailag aktív anyagokat termelő törzsek folyamatos monitorozásának célszerűségét.

A munka célja:

Tanulmányozza az izolált törzsek biológiai tulajdonságait B. subtilisés értékeli azok alkalmazásának lehetőségét egy eredeti spóraprobiotikum kifejlesztésére.

Kutatási célok:

1. Az izolált kultúrák morfológiai, fiziológiai-biokémiai, antagonista, tapadó és egyéb tulajdonságainak tanulmányozása B. subtilis in vitro kísérletekben, és válassza ki a legígéretesebb törzset további kutatásokhoz.

Értékelje a kiválasztott törzs probiotikus aktivitását B. subtilis in vivo kísérletekben.

Olyan tápközeget válasszunk, amely optimális a vizsgált törzs biomasszájának felhalmozásához B. subtilis.

Határozza meg a kiválasztott törzs életképességét és antagonista aktivitását B. subtilis tárolás során.

Hasonlítsa össze az eredeti törzs tulajdonságait! B. subtilisés a kereskedelmi forgalomban kapható probiotikus készítmények előállításához használt tenyészetek.

Tudományos újdonság.

Az izolált törzsek morfológiai, fiziológiai-biokémiai, genetikai és egyéb biológiai tulajdonságainak vizsgálata alapján plazmidmentes törzset választottunk ki. B. subtilis 1719, amely antagonizmust mutat különböző taxonómiai csoportok opportunista és patogén mikroorganizmusaival szemben, alacsony tapadó aktivitással, rezisztens gentamicinnel, polimixinnel és eritromicinnel szemben.

Kísérletileg alátámasztották a termelési technológia kialakításának megközelítéseit, beleértve a törzs növekedési tulajdonságainak tanulmányozását is. B. subtilis 1719 eredeti táptalajokon, életképességének stabilizálásának feltételei és antagonista aktivitása, mint egy új probiotikus gyógyszer előállítása.

Találmányi kérelmet nyújtottak be (2005. április 19-i szám: 2005111301): „Baktériumtörzs Bacillus subtilis Az 1719 a kórokozók elleni antagonista hatású biomassza, valamint proteolitikus, amilolitikus és lipolitikus enzimek termelője.

Gyakorlati jelentősége.

Izolált és azonosított törzs B. subtilis 1719. letétbe helyezve a GISC Állami Kultúrák Gyűjteményében. L.A. Tarasevics 277. szám alatt és

A védekezésre benyújtott főbb rendelkezések:

Az azonosított három baktériumtenyészet törzs morfológiai, fiziológiai, biokémiai és egyéb tulajdonságait tekintve megfelel a fajnak. B. subtilis. Nem tartalmaznak plazmidokat, antagonista hatásúak a különböző taxonómiai csoportokhoz tartozó opportunista és patogén baktériumokkal szemben, alacsony vagy közepes adhéziós szinttel rendelkeznek.

Szűrd le B.subtilis Az 1719 probiotikus tulajdonságokkal rendelkezik, amelyek az opportunista és patogén mikroorganizmusok eltávolításában nyilvánulnak meg a mennyiségi és minőségi összetétel normál mikroflóra kísérleti dysbiosisban, és immunmoduláló hatással is rendelkezik a makroorganizmusra.

A technológiai jellemzők szerint a törzs B.subtilis Az 1719 javasolható jelöltként egy eredeti probiotikus gyógyszer létrehozására.

9 IRODALMI ÁTTEKINTÉS 1. fejezet A mikrobiális antagonizmus az alapja a diszbiotikus állapotok korrekciójára szolgáló bioterápiás gyógyszerek létrehozásának

A makroorganizmus és mikroflórája egyetlen ökológiai rendszer, amely a születés pillanatától kezd kialakulni, és dinamikus egyensúlyi állapotban van, természetes védekező mechanizmus a kóros hatásokkal szemben. A nyitott biocenózist képviselve a gyomor-bél traktus mikroflórája számos helyi mikrobiocenózist foglal magában, amelyek az emberi vagy állati test egyik vagy másik biotópját foglalják el. Az emésztőrendszer biotópjai függőleges (proximodisztális) és vízszintes irányban helyezkednek el. A vízszintes bélmikroflóra a lumen mellett a nyálkahártya két szakaszán lokalizálható: a nyálkaglikoproteinek rétegében, a hámsejtek membránja feletti glikoproteinekből és glikolipidekből álló glikokalixban.

Normál mikroflóra egészséges emberekés az állatokat általában őshonos vagy rezidens, az adott fajra jellemző és átmeneti jellegűekre osztják. Körülbelül 500 mikroorganizmus-fajt találtak az emésztőrendszerben. Az összes bélbaktérium több mint 97%-a nem spórás anaerobokat tartalmaz. Bifidobacterium, Bacteroides, Lactobacillus, Eubacterium, amelynek tartalma eléri a 10% CFU-t 1 gramm székletben A fakultatív anaerob mikroorganizmusok száma (Escherichia coli, Enterococcus spp., Staphylococcus spp. stb.) több százszor alacsonyabb.

A normál mikroflórájú baktériumok védő funkciójának egyik fontos szempontja a patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusokkal szembeni antagonista aktivitás. Az emésztőrendszer mikroökológiai rendszerének képviselőinek biokémiai aktivitásának köszönhetően, amelyek biztosítják a kifejezett antagonista aktivitású anyagok termelését, a kívülről bejutó kórokozó mikroorganizmusok gyorsan elpusztulnak.

10 a belekből. Ez megakadályozza a fertőző folyamat kialakulását.

* Bakteriális antagonizmus végezhető a sejtes eredetű

kontaktus, melynek eredményeként az antibakteriális szerek átkerülnek az inhibitor törzsekből a céltörzsbe. Egyes esetekben a kolonizációs rezisztencia a normál mikroflóra egyes képviselőinek és (vagy) metabolitjainak antagonista hatásának, valamint specifikus antitestek megjelenésének kombinációján keresztül valósul meg.

Fuller R. és Lenzner A.A. társszerzővel igazolta a lactobacillusok szerepét a mikrobiális egyensúly fenntartásában a tejsavtermelés és a vastagbél hámjához való specifikus tapadás miatt. Különösen igazolták a patogén baktériumokkal szembeni antagonista hatásukat Salmonella typhimurium.

Az ecetsavat és tejsavat termelő bifidobaktériumok megakadályozzák a rothadó és patogén mikroflóra elszaporodását, normalizálják a peri-

^ acél, valamint elősegíti a kalcium, a vas, a D-vitamin és a D-vitamin felszívódását

részt vesz a vitaminképzési folyamatokban.

Vollaard E.J. et al. megjegyezte, hogy az E. coli befolyásolja a nyálkahártyához kapcsolódó helyi immunrendszer fejlődését és állapotát, és védelmet nyújt a gazdaszervezet számára az enteropatogén mikroorganizmusok által okozott fertőzésekkel szemben. Részt vesz a fehérjék és szénhidrátok lebontásában, a koleszterin, epesavak anyagcsere-átalakításában, zsírsavak.

U E. coli karcinolitikus tulajdonságokkal is rendelkeznek. Karapetyan A.O.

J izolált Escherichia coli törzsek és széklet

go enterococcus, amely in vitro képes volt rákos sejtek elhalását okozni. Ugyanakkor a rákos betegekből izolált baktériumok

t nem rendelkeztek ilyen tulajdonságokkal. Ez a mikroba 8 vi-

taminok: B] 5 B 2, B 6, B12, K, nikotinsav és pantoténsav, biotin. Kívül, E. coli megteremti a szigorú anaerobhoz szükséges anaerob környezetet

bov, elnyelő Og diffúzióval keringési rendszer a bélfalon keresztül a lumenbe. Az újszülöttek belei természetes mikrobiális kolonizációjának megfigyelései és a mikrobák gnotobiológiai állatok beleibe történő beültetésével kapcsolatos kísérletek során azt találták, hogy az anaerob baktériumok általában csak azután kezdik meg a kolonizációt, hogy a baktériumok, mint pl. E. coli.

A bélben a baktériumok szaporodásának fontos szabályozói a különféle biológiailag aktív anyagok, exoenzimek és bakteriocinek, például colicinek, mikrocinek, lizozim stb. A legtöbb szerző úgy véli, hogy a bakteriocinok szűkebb spektrumban különböznek a „klasszikus” antibiotikumoktól. antibakteriális hatás, mivel specifikusan gátolják az azonos vagy filogenetikailag rokon fajba tartozó baktériumok növekedését. Például a patogén enterobaktériumok elnyomják a normál mikroflórát, és akadálytalanul terjednek a belekben. Lehetséges, hogy az Escherichia coli képviselőiben a colicinek a mikroorganizmusok növekedésének elnyomásával szerepet játszanak a makroorganizmus természetes rezisztenciájának tényezőiben.

Meg kell jegyezni, hogy a kolonizációs rezisztenciát mind az uralkodó anaerob mikroflóra képviselői, mind a fakultatív aerob baktériumok biztosítják, amelyek jelentőségét a múlt század 70-es éveiben kezdték mesterségesen alábecsülni. Védő tulajdonságok E. coli nemcsak anyagcsere-szintű antagonizmusok (bifidobaktériumok, laktobacillusok bakteroidok) okozzák, hanem a makroorganizmuson keresztül közvetetten is. Azonban az intim kapcsolat E. coli vele a bélnyálkahártya hámjának „érését” és az úgynevezett természetes immunitás kialakulását biztosítva a mikroba „agresszívebb” viselkedését is okozza.

A normál mikroflóra fontos kiváltó szerepet játszik az immunitás kialakulásának mechanizmusában és a makroorganizmus posztnatális fejlődésében a specifikus protektív reakciók kialakulásában.

A mikroflóra szerepe az immunválasz kialakulásában univerzális immunmoduláló tulajdonságainak köszönhető, amelyek közé tartozik az immun-

stimuláció és immunszuppresszió, valamint fontos adjuváns és immunogén tulajdonságok. Ismeretes, hogy a bakteriális lipopoliszacharidok (LPS) immunszabályozó hatást fejtenek ki az Ig A - immunválaszra, és adjuvánsként játszanak szerepet. A mikroflóra biztosítja a nem specifikus és specifikus immunológiai reakciók komplexének kialakulását, adaptációs és védőmechanizmusokat képezve.

Az emésztőrendszer mikroflóráját tehát egyetlen, az evolúció során kialakult mikroökológiai rendszernek kell tekinteni, amely a gazdaszervezet számos funkcióját látja el és szabályozza, fenntartja a kolonizációs ellenállást és ezáltal fenntartja a homeosztázisát.

Francia kutatók cáfolták azt az uralkodó véleményt, hogy a normál mikroflóra átmeneti részének közömbös, mind más baktériumokkal, mind a makroorganizmussal kapcsolatban. Néhány tranziens Escherichia és bifidobaktérium törzs jelentősen csökkentette a toxintermelést C.difficile V béltraktus gnotobiont állatok. Bacillus cereus- talajból izolált aerob spóraképző mikroorganizmust használtak az átmeneti mikroflóra képviselőjeként a "Cereobiogen" (Kína) gyógyszerben gyermekek hasmenéses betegségeinek kezelésére. Belekben való tartózkodásának időtartama 4 nap, de ez idő alatt elősegíti a bifid flóra elszaporodását és a betegség klinikai tüneteinek szinte teljes eltűnését. Indiai tudósok azt találták, hogy az átmeneti állapotú mikrobák, és nem csak a rezidens mikroflóra képviselői, képesek vitaminokat termelni és méregteleníteni a mérgező termékeket. Meghatározták a nemzetség fajait Bacilus patkányok vékonybeléből, képes elpusztítani az idegméregeket, a babban található hemagglutinineket. A nemzetségek képviselői Bacillus ésKlebsiella szintetizálja a B6, B2, B^ vitaminokat, nikotint és folsav.

Különféle fertőző és nem fertőző betegségek, valamint sok más kedvezőtlen tényezők(az éghajlati viszonyok változása-

13 loviy, sugárterhelés, étkezési hibák, általános fiziológiai állapot romlása, szomatikus rendellenességek, használat gyógyszerek, életkorral összefüggő változások a szervezetben stb.), közvetve vagy közvetlenül hatnak, negatív hatással vannak a makroorganizmus komplex mikroökológiai rendszerére, a feltételesen patogén mikroflóra aktiválódása javára.

Dysbiosis- ez egy személy vagy állat normál mikroflórájának összetételében az adott biotópra jellemző mennyiségi vagy minőségi változás, amely különböző exogén és endogén tényezők hatásából ered, és amely kifejezett klinikai megnyilvánulásokat von maga után. a makroorganizmus, vagy a benne kialakuló kóros folyamatok következménye. A mikroflóra zavaraihoz vezető tényezők, pl. dysbiosis, nagyon sok. Nyilván ezért is szenved hazánk lakosságának közel 90%-a valamilyen mértékben dysbiosisban. Általában az immunrendszer zavaraihoz kapcsolódnak. Nyilvánvalóan a normál flóra változásait, az immunállapot állapotát és a betegség manifesztációját egységben kell figyelembe venni, és a triád szerepe minden esetben a triád ezen összetevőihez tartozhat. Egyes esetekben a dysbiosis közvetlenül a kóros folyamat kialakulásához ad lendületet, más esetekben az immunhiány kialakulásán keresztül, más esetekben ezeket az egymással összefüggő folyamatokat idézi elő.

Azonban in Utóbbi időben A bélrendszeri dysbiosis egyre inkább a kialakuló immunológiai rendellenességek következménye.

A dysbiosis klinikai megnyilvánulásai változatosak: dyspeptikus rendellenességek (székrekedés, hasmenés), anyagcserezavarok, hurutos gyulladásos betegségek (gastritis, duodenitis), gennyes-gyulladásos betegségek és különböző lokalizációjú szövődmények, gyomor- és nyombélfekély, hepatitis, rosszindulatú daganatok , allergia stb. .

A dysbiosis megelőzésére és kezelésére csak antimikrobiális gyógyszerek alkalmazására tett kísérletek hatástalannak bizonyultak, és egyes esetekben súlyosbították a megindult folyamatot. Ez határozza meg a korrekciós terápia alkalmazásának célszerűségét, ideértve a probiotikumokat, étrend-kiegészítőket és gyógynövénykészítményeket az eubiózis helyreállítására.

Amióta felfedezték a különféle mikrobakultúrák azon képességét, hogy elnyomják más mikroorganizmusok, különösen a patogén mikroorganizmusok növekedését, a legjelentősebb természettudósok dolgoznak a problémán. gyakorlati használat a mikrobiális antagonizmus jelenségei (L. Pasteur, I. I. Mechnikov, N. F. Gamaleya stb.). A kompozíció szabályozásának megvalósíthatóságának ötlete bél mikroflóra az I. I. Mechnikov által kifejezett megsértése az orvostudomány új irányának kifejlesztéséhez vezetett - a bakteriális terápia, biológiai probiotikus készítmények létrehozása élő baktériumokból, a normál emberi mikroflóra képviselőiből.

A „probiotikumok” kifejezést 1974-ben Parker javasolta olyan szervezetekre és anyagokra, amelyek biztosítják a bél mikroflóra egyensúlyát. Számos kritériumot javasoltak a mikroorganizmus törzsek probiotikus készítményként való kiválasztására: apatogenitás, specifikus Gram festődés, savakkal és oxidálószerekkel szembeni rezisztencia, kolonizáció és (vagy) adhézió az emésztőrendszer sejtjeihez, antikoliform faktorok felszabadulása, epe rezisztencia , életképesség és stabilitás.

A probiotikumokat a mikroökológiai rendellenességek korrigálására használják akut és krónikus betegségekés a gyomor-bél traktus működési zavarai, anyagcserezavarok, antibakteriális, hormonális és sugárterápia után, preoperatív és posztoperatív időszakban, kedvezőtlen körülmények között stb. . Bioterápiás hatásuk összefüggésbe hozható a patogén és opportunista mikrobák közvetlen antagonista hatásával, ami számuk csökkenéséhez vezet, hatással lehet anyagcseréjükre, vagy az immunrendszer stimulálására.

A készítmények - probiotikumok - olyan élő, antagonista hatású baktériumokból készülnek, amelyek az emberi bél normál mikroflórájának képviselői: E. coli (colibacterin), bifidobaktériumok (bifidumbacterin, bifidumbacterin forte, bifilis), E. coli és bifidobaktériumok keveréke (bificol). ), laktobacillusok (laktobakterin, acilakt, acipol). BAN BEN utóbbi évek A dysbiosis kezelésére a nemzetség élő apatogén antagonista aktív képviselőin alapuló hazai gyógyszereket vezettek be az orvosi gyakorlatba. Bacilus: sporobacterin, bactis-porin, biosporin.

Per os szedve a probiotikumok alapját képező mikroorganizmusok, amelyek többsége a gasztrointesztinális traktus normál flórájának képviselői is, benépesítik, hozzájárulva a biocenózis normalizálásához, ennek következtében az emésztési, anyagcsere- és védőfunkciók helyreállításához. Hasonló hatásmechanizmus lép fel más alkalmazási módoknál (például hüvelyi).

A probiotikumok szedése során általában nem fejlődnek ki mellékhatások, és nincs ellenjavallata a használatuknak.

A legtöbb probiotikum (bifidumbacterin, lactobacterin, acipol, acylact, bifiliz) az élet első napjaitól kezdve alkalmazható, beleértve a koraszülötteket is.

Jelenleg a mikroorganizmusok termelőtenyészeteinek kiválasztásakor és jellemzésekor a következő mutatókat veszik figyelembe: az antagonista aktivitás spektruma és szintje, gyárthatóság, i.e. a biomassza gyors felhalmozódásának képessége, fagyasztva szárítással szembeni ellenállás, életképesség a tárolás során. Az antibiotikum-rezisztencia spektruma is fontos.

Különös figyelmet fordítanak az emberi egészségre használt törzsek biztonsági kritériumaira.

A fiziológiai és biokémiai tulajdonságok, valamint a biológiai aktivitást befolyásoló tényezők kombinációja alapján a legígéretesebbek a probiotikumok előállításához.

a nem őshonos mikroflóra bacilusoknak bizonyult, főként a B. subtilis, B. pumilus, B. polymyxa. Ezek a különféle biotópokból, köztük melegvérű állatok, rovarok és növények testéből és szöveteiből stabilan izolált fajok az utóbbiakban nem okoztak kóros elváltozást.

Különösen érdekes az emberi vagy állati szervezetből izolált spórabaktériumok biológiai tulajdonságainak kérdése a makroorganizmusra gyakorolt ​​hatásuk mechanizmusainak megértése szempontjából. Ezen túlmenően ez a probléma fontos a hatékony terápiás és profilaktikus gyógyszerek létrehozásához szükséges új tartalékok azonosítása szempontjából, mivel az izolált bacilusok közel fele antagonista tulajdonságokat mutat különböző patogén és feltételesen patogén baktériumokkal és gombákkal szemben, a törzsek pedig a legnagyobb aktivitást mutatják. Bacillus subtilis.

Megállapították, hogy képesek alacsony molekulatömegű polipeptid antibiotikumokat szintetizálni.

Egy törzset javasoltak a Mycobacterium tuberculosis antagonistájaként B. subtilisMZh-6, amely az esetek 96,2%-ában elnyomta növekedésüket in vitro. .

Felfedezték, hogy a nemzetséghez tartozó baktériumok Bacilus képes antagonista hatást kifejteni különböző típusú baktériumokra Klebsiella(336 termés). Különféle törzsek B. subtilis a növények 57-83%-ának növekedését elnyomta K. ozaenae, 50-100% termés K. rhinoscleromatis, 64-95% - K. pneumoniae. A nemzetséghez tartozó baktériumok szinte minden tesztelt törzse Klebsiellaérzékenynek bizonyult bizonyos kultúrákra V. subtilis, ugyanakkor jelentős számú Klebsiella volt egyidejűleg érzékeny több Bacillus subtilis tenyészet hatására.

150 frissen izolált törzs antagonista aktivitásának vizsgálatakor B. subtilis viszonylag K. rhinos cleromatis in vivo és in vitro kísérletekben 114 tenyészetben mutattak ki antagonizmust 5 teszttörzzsel kapcsolatban K.rhinoscleromatis. A vizsgált bacillustörzsek közül a legaktívabbak a haszonállatok gyomor-bél traktusából izolált bacilustörzsek voltak.

17 A nemzetséghez tartozó baktériumok azonosított egyedi biológiai tulajdonságai alapján Bacilus, Az elmúlt évtizedekben felkeltették a kutatók figyelmét az élő spóraképző aerob baktériumokon alapuló gyógyszerek létrehozásának és a makroorganizmusra gyakorolt ​​hatásának vizsgálatának problémái.

Modern ötletek a Bacillus nemzetségbe tartozó baktériumokból származó probiotikumok terápiás és profilaktikus hatásának mechanizmusairól

A jelenlegi szakaszban megállapítottnak tekinthető, hogy a spóraprobiotikumok terápiás hatását számos tényező határozza meg, beleértve a patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusok növekedését elnyomó bakteriocinok, nagy aktivitású enzimek (proteázok, ribonukleázok, transzaminázok és mások), valamint olyan anyagok, amelyek semlegesítik a bakteriális toxinokat. A makroorganizmussal szembeni ártalmatlanság bizonyítékát azok a kísérleti adatok szolgáltatják, amelyek szerint a B. subtilis a parenterális beadást követően néhány napon belül kiürül a szervezetből.

A probiotikus gyógyszerek emberi és állati szervezetre kifejtett terápiás és profilaktikus hatásának mechanizmusának vizsgálata kimutatta, hogy a bacilusok képesek behatolni a gyomor-bél traktusból a vérbe, majd onnan a lézióba, fenntartva az életképességet. Szájon át történő alkalmazás után már az első percekben az összes baktérium körülbelül 0,1%-a behatolt a parenchymás szervekbe az oropharynx, a nyelőcső és a gyomor nyálkahártyáján keresztül. A mikroorganizmusok tünetmentes transzlokációját a gyógyszer egyszeri adagja után 6-8 órával figyelték meg, amely meghatározta a hatóanyag makroorganizmussal való érintkezésének idejét. Kétdimenziós elektroforézis szerint a B. subtilis 168 törzs a spórák csírázását követően 0-10 percen belül 65, 10-20 perc múlva 210 fehérjét, a vegetatív sejtnövekedés során összesen 260 fehérjét szintetizált.

Feltételezhető, hogy a mikroorganizmusok egészséges egyének szerveibe és szöveteibe történő áttelepülése egy evolúciósan kialakult dinamikus folyamat, amely nagymértékben meghatározza az általános normál mikroflóra részvételét a makroorganizmus védőreakcióinak kialakulásában.

A bacilusoknak a melegvérű állatok vérébe és szerveibe történő transzlokációja következtében kóros elváltozás nem következik be. Ezt a folyamatot úgy kell tekinteni, mint a természetes mechanizmus egyik kezdeti láncszemét, amely az összes mikroorganizmussal szembeni nem specifikus rezisztenciát serkenti. Ugyanakkor a makroorganizmusra gyakorolt ​​lehetséges káros következmények nem zárhatók ki olyan esetekben, amikor a kórokozó mikroorganizmusok behatolása a védőmechanizmusok általános vagy helyi gyengülése miatt következik be.

A normál mikroflóra exogén komponensének (élelmiszerrel, levegővel, vízzel érkező) koncepciójának és a bacilusoknak a szervekbe és vérbe történő ezzel kapcsolatos transzlokációjának fényében a probiotikumok orális adagolásának megvalósíthatósága a mikroflóra exogén képviselői alapján alakult ki. megerősített. .

A bacillusok antagonista hatását különböző természetű biológiailag aktív anyagok termelése okozza: polipeptid antibiotikumok, lizozim, lítikus enzimek.

A bacillusok magas enzimaktivitása pozitív érték a gyomorváladék további, ezen belül paradigesztatív enzimekkel való dúsítása szempontjából. Kimutatták például, hogy a Biosporinban vagy a Bakterin-SL-ben lévő tenyészetek kifejezett pektolitikus aktivitást mutattak (0,1-0,2 egység/ml), cellulolitikus tulajdonságokkal rendelkeznek, és proteolitikus enzimek komplexét szintetizálták. A teljes proteolitikus aktivitás 4,2-5,7 egység/ml, amiláz aktivitás 11-15 egység/ml, lipáz - 70-127 µmol, olajsav - 5-10 egység/ml. A B. subtilis törzs tenyészfolyadéka a következő enzimaktivitásokat tartalmazta: 1,3-1,4 glukanáz, 1,3-1,4 glükozidáz, .

A pyelonephritis egereken végzett modelljének felhasználásával kimutatták, hogy a Biosporin alkalmazása a makrofágok stimulálása révén hozzájárult a S. aureus gyorsabb eliminációjához a vesékből, mint a kontroll állatoknál. A kapott adatok arra utalnak, hogy a bacilusokból származó biológiai termékek nemcsak a gyomor-bél traktus mikroflórájának korrekciójában ígéretesek, hanem valószínűleg a gyomor-bél traktuson kívül lokalizált bakteriális fertőzések kezelésére is.

A törzsek morfológiai és élettani-biokémiai tulajdonságainak vizsgálata

A peritoneális neutrofilek felhalmozására az állatokat intraperitoneálisan 2 ml 1%-os kazeinoldattal injektáltuk; 4-5 óra elteltével az egereket a nyakcsigolyák transzlokációjával, éteres premedikációval leöltük, az állatok kíméletes bánásmódjának szabályai szerint. A peritoneális folyadékot úgy nyertük ki, hogy a hasüreget Hanks-oldattal heparinnal átöblítettük, hogy elkerüljük a neutrofil aggregációt. Egy állatcsoport 5 egeréből nyert hashártya-folyadékból sejtpoolt képeztünk. Morfológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a sejttartalom 70-85%-a neutrofil volt. A sejtek életképessége meghaladta a 95%-ot. A sejtkészletet 1500 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 10 percig. Ezután 300 μl szarvasmarha szérumot (borjúszérum) és 3%-os ecetsavat adtunk hozzá, és egy Goryaev kamrában megszámoltuk az izolált neutrofilek számát.

A nitroblue tetrazólium redukciós teszt (NBT teszt) elvégzésének módszertana, spontán és in vitro stimulált. A módszer a neutrofilek azon képességén alapul, hogy abszorbeálják a nitrokék tetrazóliumot, és oldhatatlan diformazán (DF) kék szemcséjévé redukálják. Az NBT helyreállítását a fagocitózis folyamatát kísérő „metabolikus robbanás” redox reakcióinak energiája és termékei, valamint az aktivált neutrofil metabolizmusának fokozódása biztosítja. Vannak spontán és indukált NBT-tesztek. A spontán teszteredmények jelzik az aktivált sejtek számát a mintákban. A stimulált teszt eredményei képet adnak a vizsgált neutrofil A in vitro aktiválási képességéről. A reakciót 96 lyukú lapos fenekű lemezeken végeztük immunológiai vizsgálatok céljából. A spontán aktivitás elemzésekor a következőket adtuk a lyukba: 50 μl 0,4%-os NCT oldatot, 50 μl inkubációs táptalajt (IS-0,85% NaCl oldat 20% szarvasmarha vérszérummal) és 100 μl sejtszuszpenziót. . Az indukált aktivitás elemzéséhez minden lyukba a következőket adtuk: 50 μl NCT oldatot, 50 μl stimulátor szuszpenziót (opszonizált (o/z) és nem opszonizált (n/z) zimozán 20 részecske/arányban sejt) és 100 μl sejtszuszpenzió. Mindegyik reakcióváltozatot 2 párhuzamos tesztben végeztük el. A reagens kontrollját úgy végeztük, hogy a sejtszuszpenziót ekvivalens térfogatú IS-re cseréltük. A lemezt 20 percig 37 °C-on inkubáltuk. Az NBT redukciós reakciójának és a DF-et tartalmazó sejtek ülepedésének leállítására a lemezt 10 percig 500 g-vel centrifugáltuk. A lyukakba helyezett sejteket 96%-os etil-alkohollal fixáltuk, és egyszer mostuk 0,85%-os NaCl-oldattal. A sejtpusztítást és a képződött DF feloldását úgy értük el, hogy 130 μl dimexidot és 70 μl 2 M KOH-t adtunk minden egyes lyukhoz, majd 20 percig 60 °C-on inkubáltuk. A kutak tartalma türkiz színt kapott, melynek intenzitása a kivont DF mennyiségétől függött. A reakció eredményeit spektrofotométeren rögzítettük a teszt (630 nm) és a referencia (490 nm) hullámhosszon mért extinkciók különbsége alapján.

A kapott eredményeket a neutrofilek spontán aktivitásának (sNST), a neutrofilek indukált o/z aktivitásának (o/zNST), a neutrofilek indukált n/o aktivitásának (n/zNST) szintjével értékeltük. A vizsgálati eredményeket optikai sűrűségben (mOD) fejeztük ki. A sejtek funkcionális aktivitásának tartalékait aktiválási koefficiensekkel (KAo és KAn), a sejtaktivitás különböző ingerekkel szembeni diszkrétségének mértékét az opszonizációs együtthatóval (CO) határoztuk meg. (n=5).

A fagociták kemilumineszcenciájának elemzése feltárja a sejtekben reaktív oxigéngyökök képződését, beleértve a szuperoxid-aniont, a szingulett oxigén- és hidroxilgyököt, valamint a fagociták mieloperoxidázának bizonyos mértékig való részvételét, amely a sejtlégzés intenzitásának mutatója a fagocitózis során.

Elemzési eljárás: 200 μl lxlO6 luminolt adtunk minden fiolába szcintillációs számlálás céljából, majd 200 μl neutrofil szuszpenziót adtunk hozzá úgy, hogy végső koncentrációjuk 0,5 x 106 per 1 ml legyen. Az 51 fiolát összekevertük, számlálóba helyeztük, és 37 C-on 0,1 perces időközönként 90-120 percen keresztül mértük a kemilumineszcenciát. Jellemzően a mérés megkezdése után 45-60 perccel véget ért a sejt tapadása az üveghez, és a kemilumineszcencia intenzitása megközelítette a kezdeti szintet. Ezalatt az időszak alatt 20 μl zimozán szuszpenziót (opszonizált és nem opszonizált) adtunk ugyanabba a palackba (az eredeti, 20 mg/ml-es felengedés utáni szuszpenziót 10-szeresre hígítottuk, és ezt a hígítást adtuk a palackhoz). Ezt követően ismét megmértük a kemilumineszcenciát, és 60 percig rögzítettük a percenkénti impulzusok számát. Ezután a számokat 1 sejtenként újraszámoltuk, és a kemilumineszcenciát hagyományosan count/perc/sejt egységben fejeztük ki. (n=5).

Plazmid DNS elemzés. E vizsgálat céljai alapján standard eljárást végeztünk a plazmid DNS tisztítására alkalikus lízissel. 2 ml biomasszát szuszpendáltunk 2 ml a következő összetételű oldatban: 50 mM glükóz, 20 mM Tris-HCl; 10 mM EDTA; pH 8,0. 20 μl lizozimot (8 mg/ml) adtunk hozzá, összekevertük és +4 - + 8C-on 20 percig inkubáltuk. Ezt követően 4 ml lízisoldatot (0,2 M NaOH, 1% SDS) adunk hozzá, összekeverjük és ugyanezen a hőmérsékleten 5 percig tovább inkubáljuk. Az idő letelte után 3 ml semlegesítő oldatot (3 M kálium-acetát, pH 4,8) adtunk hozzá, óvatosan összekevertük és 30 percig +4-+8C-on inkubáltuk. Ezután a csövet centrifugáltuk (Backman J2-21, rotor JA-14) 30 percig +4 °C-on 10 000 fordulat/perc sebességgel. A felülúszót kémcsövekbe gyűjtöttük, és 2,5 térfogat etanolt adtunk hozzá. -70 C-on 10-15 percig inkubáltuk és +4 C-on 20 percig centrifugáltuk (Backman J2-21, JA-20 rotor) 10 000 fordulat/perc sebességgel. Az üledéket 600 μl vízben feloldottuk, mikrocentrifuga csövekbe vittük, 400 μl 7,5 M Na-acetátot adtunk hozzá és -20 C-on 30 percig inkubáltuk. Ezután 10 percig centrifugáltuk 18000 g sebességgel +4 C-on. A csapadékot 70%-os etanollal mossuk, majd levegőn szárítjuk. A kapott gyógyszert 400 μl TE pufferben (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8,0) oldottuk, és fenol-kloroformos extrakciónak vetettük alá. Hozzáadunk azonos térfogatú fenol/kloroform (1:1) elegyet, amely telített trisz-HCl pufferoldattal (pH 8,0). Az elegyet erőteljesen vortexeljük és 6 percig centrifugáljuk 13000 g sebességgel szobahőmérsékleten. A felülúszót tiszta kémcsövekbe visszük át, és azonos térfogatú kloroform/izoamil-alkohol (25:1) keveréket adunk hozzá. A csövet vortex segítségével ráztuk és 16000 g-vel +4 C hőmérsékleten centrifugáltuk 2 percig. A felülúszót tiszta csövekbe vittük át, és az oldatból 2,5 térfogatrész etanol és 1/10 térfogatrész nátrium-acetát-oldat hozzáadásával kicsaptuk a DNS-t. A csövet -70 C-on 10-15 percig inkubáltuk, majd 10 percig centrifugáltuk 16000 g-vel és +4 C-os hőmérsékleten. A felülúszót eltávolítottuk, és a csapadékot 70%-os alkohollal mostuk (200-500 hozzáadásával és eldobásával). μl). Az üledéket levegőn szárítottuk, és 200 μl ribonukleáz A 5-10 μg/ml koncentrációjú vizes oldatában oldottuk, majd 40 percig inkubáltuk termosztátban +37 C hőmérsékleten. A DNS kicsapási eljárást megismételtük. etanol és nátrium-acetát felhasználásával. A DNS üledéket 200 μl TE pufferben oldottuk.

A B. subtilis 1719 törzs toxicitásának, toxicitásának, virulenciájának és probiotikus aktivitásának vizsgálata in vivo kísérletekben

Az élő apatogén mikroorganizmusokon alapuló gyógyszerek ipari előállítása közvetlenül kapcsolódik a tenyésztéshez szükséges táptalaj kiválasztásához és optimalizálásához.

Az összetevők optimális megválasztása a táptalajban hozzájárul a biomassza maximális felhalmozódásához és a törzsek antagonista tulajdonságainak megnyilvánulásához, ami a termesztési folyamat magas termelékenységének indikátoraként szolgál.

A probiotikus törzsek azonban trofikus jellemzőkkel rendelkeznek. Ezeket figyelembe kell venni a „törzs - tápközeg” rendszerben. Továbbra is sürgető feladat marad a B. subtilis törzseken alapuló hatékony probiotikumok beszerzése, melynek megoldására a táptalaj összetételének a törzs tulajdonságainak megfelelő elve alkalmazható. Ennek a kérdésnek a tanulmányozása során a termesztést ismert összetételű és általunk kifejlesztett szójaliszt hidrolizátum (SPAS-2, SPAS-4, SPAS-6) vagy pepton (VK-2) táptalajokon végeztük.

A peptonos szójaliszt hidrolizátum (SPAS-2, SPAS-4, SPAS-6) és a peptonos táptalaj (VK-2) növekedési tulajdonságainak értékelésekor a tenyésztési mutatók összehasonlítását végeztük el a táptalajhoz viszonyítva. B. subtilis törzsek termesztésére használják - biológiailag aktív anyagok termelői (táptalajok: No. 5, No. 9, KG - burgonya-glicerin).

Mivel a tenyészet élettani tulajdonságai a különböző szénhidrátforrások hozzáadásának függvényében változhatnak, célszerű volt összehasonlítani a B. subtilis 1719 eredeti összetételű táptalajon, valamint glükóz, maltóz, szacharóz és laktóz hozzáadásával végzett tenyésztésének eredményeit. szénhidrátforrásként.

A tenyészfolyadékban lévő sejtek optikai sűrűségének (OD) és növekedési sebességének (s) összehasonlítása 18 órás tenyésztés során cukormentes táptalajon (6.1. ábra) azt mutatta, hogy az 5. számú táptalaj, a SPAS-6 és a burgonya- A glicerines tápközeg 0,24±0,01 (u=0,03 h"1), 0,22±0,01 (1)=0,0334-1) és 0,3±0,01 (u = 0,025 h 1) OD-vel biztosított törzsnövekedést. A táptalajon SPAS- 2, SPAS-4, No. 9, a maximális OP érték 0,42 + 0,03 (u = 0,067 h "1), 0,38 ± 0,02 (1 ) = 0,0541) és 0,58 ± 0,03 (1) = 0,037 h"1, rendre, és a VK-2 táptalajon - 0,85+0,6 (\ =0,068 h"). A maximális biomassza-koncentráció eléréséhez szükséges idő ezeken a táptalajokon 9±0,7 óra (SPAS-2) és 18±1,3 óra (KGG) között változott.

A maximális biomassza hozamot (BY) a VK-2 táptalajon, 0,068 h"1 növekedési sebességgel, a legalacsonyabbat a SPAS-6 táptalajon és 0,033 h"1 növekedési sebességgel detektáltuk. A glükóz hozzáadása a tápközeghez szénhidrátforrásként (6.2. ábra) a B. subtilis 1719 sejtek koncentrációjának közel kétszeres növekedését okozta, kivéve az 5., 9. és SPAS-6 táptalajokat: táptalajon. A 9. számú esetben az OD érték megbízhatatlan csökkenése 0,43-ra ±0,03 volt közel azonos növekedési ütem mellett (0,035 h"1), és a SPAS-6-on az OP érték változatlan maradt. A legnagyobb biomassza hozam a a VK-2 tápközeg, ahol az OP értéke 1,0±0, 09 (1-nél)=0,066 h"1) 18 óra növekedésig. A 9. és 5. számú tápközegben a maltóz (6.3. ábra) bizonyult az optimális szénhidrátnak. Az OP érték a 9. számú táptalajon 0,695±0,025 (i)=0,058 h"1) értékre nőtt 12 órával, és az 5. számú táptalajon - 0,51±0,045 (i=0,022 h"1) 18 órával. SPAS-en tápközeg -4 és CG esetén a biomassza hozam a glükóz használatához képest 0,8±0,06 (1)=0,063 h1-ről 0,33±0,01 (1)=0,040 h1-re és 0,62+0, 04-ről (D=0,03 h1) csökkent "1) 0,38±0,03-ra (u=0,025 h"1) rendre. A tenyészet VK-2 táptalajon történő növekedése általában csökkentette a biomassza hozamot, ami az OP érték 1,0±0,09 (1)=0,066 h1-ről 0,55±0,25-re (D=0,046 h1) való csökkenésében mutatkozott meg. A táptalajhoz adott laktóz (6.4. ábra) biztosította a B. subtilis 1719 növekedését 0,21±0,04-0,5±0,03 OD-szinten, kivéve a VK-2-t - 0,83±0,05. Szacharóz hozzáadása a táptalajhoz (6.5. ábra) csak a VK-2 táptalajon járult hozzá a biomassza magas felhalmozódásához, és az OD 17 órás tenyésztéssel 1,1 + 0,06 (u = 0,063 h"1) értéket ért el. További szénhidrát hozzáadása nélkül csak a VK-2 táptalaj bizonyult az optimális táptalajnak a biomassza felhalmozására. Glükóz, laktóz és szacharóz hozzáadásakor a baktériumsejtek legnagyobb felhalmozódását biztosította. A B. subtilis 1719 maximális biomassza hozamát VK-2 táptalajon glükóz (OD - 1,0±0,09) hozzáadásával 18+0,15 óra tenyésztéssel vagy szacharóz (OD - 1,1 + 0,06) 17 + 1,0 órás tenyésztéssel kaptuk. . Megállapítottam, hogy a táptalaj összetétele nem befolyásolta a törzs antagonista tulajdonságait.

A B. subtilis 1719 törzs életképességének és antagonista aktivitásának vizsgálata a tárolás során

A bacilusok számos enzimet képesek kiválasztani a tápfolyadékba. Fontos ipari telephelyként szolgálnak az élelmiszerek, detergensek és orvosbiológiai anyagok előállításához használt proteolitikus és amilolitikus enzimek előállításához. Az elmúlt évtizedben részvételükkel számos új antibiotikum, bakteriális rovarirtó és egyéb biológiailag aktív anyag került elő.

Annak ellenére, hogy a B. subtilis GRAS státuszú, az irodalomban izolált jelentések vannak patogenitási faktorok jelenlétéről egyes B. subtilis törzsekben. Jelezzük, hogy ez nem állandó jel, mivel az újravetés során eltűnik. Feltételezik, hogy a baktériumok patogén tulajdonságai a plazmidok jelenlétével függnek össze. Például Le N. és Anagnostopoulos S. 83 vizsgált alany 8 B. subtilis törzséből izolált plazmidokat. A plazmid DNS-t csak a B. subtilis toxigén törzseinek sejtjeiben határozták meg, és nem találták meg ugyanazon fajhoz tartozó más törzsek sejtjeiben, amelyek nem toxikusak. A toxigén törzsek plazmidjainak eliminációja elimináló szerek hatására a tenyészet szűrleteinek toxigén tulajdonságainak megszűnéséhez vezetett. A plazmidok genetikai szerepét azonban nem vizsgálták kellőképpen.

Vizsgálataink során a három vizsgált B. subtilis törzs izolált DNS-preparátumában nem találtunk plazmidot.

A bacilusok melegvérű állatok szervezetére gyakorolt ​​hatását vizsgáló szerzők arra a következtetésre jutottak, hogy a B. subtilis törzsek teljesen ártalmatlanok az emberre és az állatokra. A makroorganizmusra való ártalmatlanság bizonyítéka az a kísérleti adat, hogy a parenterális beadást követően néhány napon belül a B.subtilis kiürül a szervezetből. Ezen növények terápiás hatásának mechanizmusait állatokon tanulmányozták. Jelenleg úgy gondolják, hogy a spóraprobiotikumok terápiás hatását számos tényező határozza meg, beleértve: a B. subtilis kultúrák által termelt bakteriocinokat, amelyek elnyomják a patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusok növekedését; nagy aktivitású enzimek szintézise: proteázok, ribonukleázok, transzaminázok stb.; olyan anyagok előállítása, amelyek semlegesítik a bakteriális toxinokat.

A kiválasztott törzs tulajdonságainak egereken végzett vizsgálata kimutatta, hogy avirulens, és nincs toxicitása vagy toxikus hatása. A probiotikumok makroorganizmusra gyakorolt ​​pozitív hatásának tényezői a következők: különféle termékek mikrobiális szintézis: aminosavak, polipeptid antibiotikumok, hidrolitikus enzimek és számos más, kisebb jelentőségű biológiailag aktív anyag. Ezért sürgős szükség van a Bacillus nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok által termelt védőanyagok tanulmányozására, izolálására, valamint az ezeken alapuló orvosbiológiai gyógyszerek létrehozására.

A gyomor-bél traktusban a bacilusok közvetlen antagonista hatása nyilvánul meg, amely túlnyomórészt szelektív a patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusokkal szemben. Ugyanakkor a normál mikroflóra képviselőivel szembeni antagonizmus hiánya jellemzi őket.

Vizsgálataink során a doxiciklin antibiotikum adásával kiváltott kísérleti dysbiosis korrekciója során a B. subtilis 1719 tenyésztése hozzájárult a bél mikroflóra összetételének és számának normalizálásához, valamint a feltételesen patogén mikroorganizmusok eliminációjához a bélrendszerben. parietális és luminális mikroflóra.

Az irodalomból az következik, hogy a Bacillus nemzetség ipari törzsei alacsony adhéziós aktivitást mutatnak az eritrocitákhoz, és gyenge vagy mérsékelt adhéziós képességgel rendelkeznek a bélhámsejtekhez. A B. subtilis 534 és ZN törzsek több adhezint az enterocita receptorokhoz, a B. licheniformis törzs a kolonocitákhoz, azaz a bélsejtekhez. Úgy tűnik, hogy a különböző törzsek különböző bélsejtek receptoraihoz tapadnak.

Tevékenységük a bél lumenében jelentkezik, és a kórokozó mikroorganizmusok ellen irányul anélkül, hogy antagonista hatást gyakorolna a normál mikroflóra képviselőire. Spóraprobiotikumok szedése során megvalósul az autoflóra helyreállításának lehetősége a különböző béllókuszokban, és 3-5 nap múlva megnő a laktobacillusok, bifidobaktériumok, E. coli stb. száma, majd visszaáll a normál szintre.

A mikroorganizmusok enterocitákon való adhéziójával kapcsolatos vizsgálataink eredményei valószínűsítik azt az állítást, hogy a bélsejtek adhéziós képessége a normál mikroflóra mennyiségi és minőségi összetételétől függ. Disbiotikus körülmények között az enterociták felületén felnyílnak a receptorok, amelyekhez feltételesen patogén és patogén mikroorganizmusok kapcsolódnak, majd a dysbiosis korrigálása során a bélben a normál mikroflóra és a felületéhez tapadni képes enterocita receptorok száma kolonizálódik. az őshonos mikroorganizmusok száma csökken.

Ismeretes, hogy a normál mikroflóra fontos kiváltó szerepet játszik az immunitás és a specifikus védőreakciók kialakulásának mechanizmusában a makroorganizmus posztnatális fejlődésében.

Ez a baktérium a természetben nagyon elterjedt mikrobák közé tartozik. A Bacillus subtilist 1835-ben írták le. A mikroorganizmus onnan kapta ezt a nevet, hogy eredetileg korhadt szénából izolálták. A laboratóriumban a szénát lezárt edényben folyadékban megfőzték, majd két-három napig infúzióban állították. Ezt követően kolónia alakult ki, így megkezdődött ennek a közönséges baktériumnak a részletes vizsgálata.

Tanul

A tudományban van egy ilyen kifejezés - „modellszervezet”. Amikor a természet képviselőit kiválasztják a folyamatok, tulajdonságok intenzív tanulmányozására és tudományos kísérletek elvégzésére. Kirívó példa a nálunk biológiaórákról jól ismert papucscsillós.

A Bacillus subtilis egyben modellszervezet is. Neki köszönhetően alaposan tanulmányozták a spórák kialakulását a bacilusokban. Modell a baktériumok flagella mechanizmusának megértéséhez, és szerepet játszott a molekuláris genetikai kutatásokban.

A tudósok kísérleteket végeztek a Bacillus Subtilis tenyésztésével a súlytalansághoz közeli körülmények között, a populáció genomjának változásait tanulmányozva. Ezeket a mikroorganizmusokat az űrből származó ultraibolya sugárzás hatásának és az élő szervezetek ehhez való alkalmazkodóképességének vizsgálatára is használják. A Bacillus subtilis példáján a naprendszer más bolygóinak körülményei között élő baktériumok lehetőségét vizsgálják (ma már egyre nagyobb figyelem irányul a Marsra).

Rövid jellemzők

A Bacillus subtilis egyenes és hosszúkás alakú, végük tompa lekerekített, általában színtelen. Átlagos átmérője 0,6 mikron, hossza 3-8 mikron. Ezekkel a paraméterekkel a Bacillus subtilis tökéletesen megvizsgálható mikroszkóp alatt, sőt a modern technológiák segítségével akár fényképezhető is. A bacilus mozgékony a flagelláknak köszönhetően. A sejt felszínén nőnek, és ez a fényképeken is látható.

Élőhely

A Bacillus szénát hagyományosan úgy emlegetik, hogy a növények levelére, gyümölcsére és zöldségére kerül. Ezenkívül megtalálható a levegőben és a vízi környezetben lévő porban. És még az állatok és az emberek bélmikroflórájának egy szegmense. +5 és +45 Celsius fok közötti hőmérsékleten fejlődik ki (optimálisan 30 körül).

Szénabot. Reprodukció

Más baktériumokhoz hasonlóan egyszerű sejtosztódással (hosszirányú) szaporodik. Az ilyen felezés eredményeként létrejövő új élőlények gyakran szállal kapcsolatban maradnak egymással. Az ilyen kapcsolatok könnyen megkülönböztethetők a fényképeken.

A Bacillus subtilis a spóraképző mikroorganizmusok közé tartozik. Ez lehetővé teszi a túlélést kedvezőtlen életkörülmények esetén. A bacilusok sporulációja így kezdődik: a sejt tartalma szemcsés szerkezetet vesz fel. A szemek egy része, általában a központi részen, növekedni kezd, és kemény héj borítja. Ezzel egyidejűleg az eredeti sejt héja megsemmisül. A végső folyamat egy jellegzetes vita külső környezetbe való kiemelésével zárul. Bármely sejt az osztódás után megtartja spóraképző képességét, amelyek többsége kerek vagy ovális alakú. Meglehetősen ellenállóak a külső tényezőkkel és a hőmérséklet-emelkedéssel szemben - például ellenállnak a 100 Celsius-fok feletti melegítésnek. Jellemző, hogy a spórából fejlődött baktérium mozdulatlan, a mozgásképesség csak a mikroorganizmus következő generációiban jelenik meg.

Hogyan táplálkozik a Bacillus subtilis?

Ez a baktérium szaprofitaként van besorolva, elhalt szerves anyagokkal táplálkozik. Heterotróf lévén a Bacillus subtilis nem képes szervetlen anyagokból szintetizálni a táplálkozásához szükséges anyagokat. Ezért olyan szerves anyagokat használ fel, amelyeket más szervezetek termeltek. Belőle vonja ki az energiacseréhez szükséges szenet.

A táplálkozásban a fő forrás a növényi eredetű (keményítő) és az állati eredetű (glikogén) poliszacharidok. A folyamat során aminosavak, vitaminok, különféle enzimek és antibiotikumok képződnek szintézis útján.

Kölcsönhatás más mikroorganizmusokkal

Ez a bacilus képes elnyomni az opportunista és patogén mikrobák fejlődését: szalmonella és streptococcus, staphylococcus és más „kártevők”. Például a ragadozók sok generációja kifejlesztett egy reflexet bizonyos típusú növények fogyasztására. És ez a módszer nem csak vitaminokat ad a szervezetnek, hanem segíti a Bacillus Subtilis spóráit is, amelyek elpusztíthatják a mikroflóra patogén fajtáit, egyúttal növelve az immunitást.

Ez a bacilus táplálékul is szolgálhat protozoonok számára. Például egy tápláléklánc kezdete így nézhet ki: bacillusok - csillópapucs - egy bizonyos típusú puhatestű - hal - ember.

Patogenitás

A különféle osztályozások szerint ez a bacilus nem patogén sem emberre, sem állatra. Részt vesz az élelmiszer emésztési folyamatában, lebontja a fehérjéket és a szénhidrátokat, küzd az emlősök bélrendszerének és bőrének kórokozói ellen. A kutatók azt találták, hogy a baktériumok között, amelyek például az emberi sebekbe kerülnek, a Bacillus subtilis mindig jelen van. Enzimeket termel, amelyek elpusztítják az elhalt szöveteket, valamint antibiotikumokat, amelyek gátolják a kórokozó mikroflórát, és antiallergiás gyógyszerként enyhe hatásúak. Tudományosan bebizonyosodott: ez a baktérium a sebészeti beavatkozások során is gátolja a fertőző ágensek kialakulását.

Azonban ennek a bacilusnak a negatív hatása is megjegyezhető: allergiát okozhat, amely a testen kiütésben nyilvánul meg; néha ételmérgezést okoz a mikroorganizmus tevékenysége által elrontott étel elfogyasztása után; súlyos szemfertőzést okozhat emberben.

A Földet általában az emberek bolygójának nevezik, bár az igazat megvallva, az emberek csak elenyésző részét alkotják lakóinak. Valójában a kék golyót a baktériumok bolygójának kell nevezni, mert ezek a „jelentéktelen” mikroorganizmusok nemcsak a legtöbbek, hanem a legtöbben is jelen vannak. Szó szerint mindenhol jelen vannak - nem csak a felszínen, hanem minden élőlény belsejében is, beleértve a kutyákat is.

A bél, mint csatatér

A baktériumok élete rendkívül érdekes és rendkívül összetett – ezt bármelyik bakteriológus megmondja. Beszélni fogunk Önnel a kedvenceink belében élő baktériumokról, mert nagyban függ tőlük a kutya egészsége. Gondoljunk csak bele, a farkasrendbe tartozó Canis familiaris húsevő állat belei ötször hosszabbak a testénél.

Ez nem csak egy hatalmas ugródeszka a legfontosabb életfolyamatokhoz, hanem egy igazi csatatér is. Itt csata folyik a kutyánk egészségéért, és a harcosok a „bolygó urai” - a baktériumok. Mint minden háborúban, itt is vannak „mieink”, és akik ellenzik őket. A belekben ezeket a szerepeket a jótékony és patogén mikroflóra tölti be.

Mindegyik arra törekszik, hogy minél több helyet foglaljon, és attól függően, hogy kinek sikerül ez jobban, a kutya egészsége múlik. A kórokozó mikroflóra oldalán sok szövetséges van. Ide tartozik a stressz, a rossz ökológia, a különféle betegségek, sőt a kezelésükre használt gyógyszerek is.

A jótékony mikroflóra azonban sokkal sérülékenyebb, harcosainak száma közvetlenül függ attól, hogy a kutya elegendő mennyiségű probiotikus baktériumot kap-e az étrendjében vagy sem.

A Bacillus subtilis kemény harcos

Nehéz elérni a tartós fegyverszünetet a belekben, és a kutya probiotikumokkal dúsított táplálékkal való etetése sürgetővé válik. Az állatorvosok szerint a legjobb étrend egy kutya számára a jó minőségű szárazeledel. A probléma csak az, hogy a legtöbb probiotikum nem éli túl az elkészítési folyamatot: túlságosan érzékeny a hőmérsékleti hatásokra.

Szerencsére azonban a baktériumok felbecsülhetetlen seregében is vannak kitartó harcosok. Hadd mutassam be: Bacillus subtilis. A teljes neve ünnepélyesen hangzik: Gram-pozitív spóraképző aerob baktérium, vagy egyszerűen csak - Bacillus subtilis. Senna - mert korábban a Bacillus subtilist kizárólag szénafőzetekből nyerték, a bacillust pedig - mert mikroszkóp alatt így néz ki a baktérium.

A Bacillus subtilis a természetben elterjedt, oxigén jelenlétében spórákat képez, ami lehetővé teszi, hogy a külső környezetben hosszú ideig fennmaradjon. A baktérium a talajban él, és mint mondják, minden időjárást túlél. Ez a hihetetlen stabilitás az egyik fő jellemzője a szénabotnak.

Nem pusztul el az antibiotikumok hatására, vegyszerek, magas hőmérsékleten, forrásig nem fél a fagytól. A Bacillus subtilis anélkül, hogy megsemmisülne, átjut a gyomor savas környezetén a vékonybélbe, ahol továbbra is rezisztens marad a flavomicinnel, kanamicinnel, tetraciklin antibiotikumokkal, penicillinnel és más mikroorganizmusokkal szemben agresszív anyagokkal szemben.

A szénabacilus előnyei

A Bacillus subtilis baktérium csak rezisztenciájában különbözik - a Bacillus subtilis biológiai aktivitása is figyelemre méltó. Mint minden probiotikum, emésztőenzimeket (amilázokat, lipázokat, proteázokat) választ ki, és sikeresen versenyez a kórokozó mikroorganizmusokkal a „napban elfoglalt helyükért”.

Ezen kívül a Bacillus subtilis maga is termel antibiotikumokat, amelyek elpusztítják ugyanezeket a kórokozókat, emellett aktív antitoxikus és immunstimuláló hatással is rendelkezik, interferont indukál és elősegíti az immunglobulinok szintézisét.

A Bacillus subtilis alapú készítményeket széles körben alkalmazzák a humán gyógyászatban gyomor-bélrendszeri betegségek, dysbacteriosis, tüdőfertőzések, patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusok (szalmonella, E. coli, aeromonádok, pszeudomonádok és mások) növekedésének visszaszorítása.

Blitz étel probiotikummal

Hogyan biztosíthatja, hogy a baktériumvilágnak ez az "univerzális katonája" minden nap a kutyája edényébe kerüljön? Mi sem lehetne egyszerűbb. Tápláld meg Blitz élelmiszerrel - egy száraz étrenddel, amelynek nincs analógja az orosz piacon, és nem csak a Bacillus subtilis probiotikummal, hanem az ugyanilyen hasznos és stabil Bacillus licheniformis baktériummal is dúsított.

A Blitz táplálékkal kutyája nem csak mindent megkap, amire mindennap szüksége van egy hosszú élethez aktív életet tápanyagokat és mikroelemeket, hanem megbízhatóan védett lesz. Végül is, ha ilyen harcosok vannak a bélrendszerében, a „mieink” mindig nyernek.

• Savustyanenko A.V.

Kulcsszavak

Bacillus subtilis / probiotikum / hatásmechanizmusok

annotáció tudományos cikk az orvostudományról és az egészségügyről, a tudományos munka szerzője - Savustyanenko A.V.

A B.subtilis baktérium az egyik legígéretesebb probiotikum, amelyet az elmúlt évtizedekben vizsgáltak. Probiotikus hatásmechanizmusai az antimikrobiális anyagok szintéziséhez, a nem specifikus és specifikus immunitás erősítéséhez, a normál bélmikroflóra növekedésének és szekréciójának serkentéséhez kapcsolódnak. emésztőenzimek. A B. subtilis riboszomálisan szintetizált peptideket, nem riboszomálisan szintetizált peptideket és nem peptid anyagokat választ ki, amelyek széles spektrumú antimikrobiális aktivitással rendelkeznek, beleértve a gram-pozitív, gram-negatív baktériumokat, vírusokat és gombákat. Ezekkel az antimikrobiális szerekkel szembeni rezisztencia ritka. A nem specifikus immunitás erősödése a makrofágok aktiválódásával és a belőlük pro-inflammatorikus citokinek felszabadulásával, a bélnyálkahártya barrier funkciójának növekedésével, valamint a vitaminok és aminosavak (beleértve az esszenciálisakat is) felszabadulásával jár. A specifikus immunitás erősítése a Ti B limfociták aktiválásával és az utóbbiakból származó immunglobulinok - IgG és IgA - felszabadulásával nyilvánul meg. A B.subtilis serkenti a normál bélmikroflóra, különösen a Lactobacillus és Bifidobacterium nemzetségekhez tartozó baktériumok növekedését. Ezenkívül a probiotikum növeli a bél mikroflóra változatosságát. A probiotikum az összes fő emésztőenzimet a bél lumenébe juttatja: amilázokat, lipázokat, proteázokat, pektinázokat és cellulázokat. Az élelmiszerek emésztése mellett ezek az enzimek elpusztítják a táplálékellenes tényezőket és a bejövő élelmiszerekben található allergén anyagokat. Listázott hatásmechanizmusok indokolttá tegye a B.subtilis használatát a bélfertőzések leküzdésére irányuló komplex terápia részeként; légúti fertőzések megelőzése a hideg évszakban; az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés megelőzése; emésztési zavarok korrekciójára és a különböző eredetű élelmiszerek népszerűsítésére (étrendi hibák, étrendi változások, gyomor-bélrendszeri betegségek, vegetatív idegrendszeri rendellenességek stb.). A B. subtilis általában nem okoz mellékhatásokat. Ezt a probiotikumot a hatékonyság és a biztonság magas aránya jellemzi.

Kapcsolódó témák az orvostudományról és az egészségügyről szóló tudományos munkák, a tudományos munka szerzője - Savustyanenko A.V.,

• A pre- és probiotikumok hatékonysága a bélmikrobiocenózis korrekciójában hemicolectomia után

  2011 / Lee I. A., Silvestrova S. Yu.

• A bélmikrobióta szerepe az elhízás kialakulásában életkori vonatkozásban

  2015 / Shcherbakova M. Yu., Vlasova A. V., Rozhivanova T. A.

• Új probiotikus enzim-kiegészítők alkalmazásának hatékonysága borjak takarmányozásában

  2012 / Nekrasov R.V., Anisova N.I., Ovchinnikov A.A., Meleshko N.A., Ushakova N.A.

• Bél biocenosis vastag- és végbélrákos betegeknél

  2012 / Starostina M. A., Afanasyeva Z. A., Gubaeva M. S., Ibragimova N. R., Sakmarova L. I.

• Bél diszbiózis és székrekedés GYERMEKEKNEK

  2010 / Khavkin A. I.

A B.subtilis baktérium az egyik legígéretesebb probiotikum, amelyet az elmúlt évtizedekben vizsgáltak. Probiotikus hatásmechanizmusai az antimikrobiális szerek szintéziséhez, a nem-specifikus és specifikus immunitás fokozásához, a bél normál mikroflóra növekedésének serkentéséhez és az emésztőenzimek felszabadulásához kapcsolódnak. A B.subtilis riboszomálisan szintetizált peptideket, nem riboszomálisan szintetizált peptideket és nem peptid anyagokat bocsát ki, amelyek széles spektrumú antimikrobiális aktivitással rendelkeznek, beleértve a Grampozitív, Gram-negatív baktériumokat, vírusokat és gombákat. Ezekkel az antimikrobiális szerekkel szembeni rezisztencia ritka. A nem specifikus immunitás fokozása a makrofágok aktivációjával és a belőlük pro-inflammatorikus citokinek felszabadulásával, a bélnyálkahártya barrier funkciójának fokozásával, vitaminok és aminosavak (beleértve az esszenciálisakat is) felszabadulásával jár. A specifikus immunitás fokozása a Tand B-limfociták aktiválásával és az utóbbiakból az immunglobulinok - IgG és IgA - felszabadulásával nyilvánul meg. A B.subtilis serkenti a normál bélflóra, különösen a Lactobacillus és Bifidobacterium nemzetségbe tartozó baktériumok növekedését. Ezenkívül a probiotikum növeli a bél mikroflóra változatosságát. A probiotikum az összes fő emésztőenzimet a bél lumenébe választja: amilázokat, lipázokat, proteázokat, pektinázokat és cellulázokat. Az emésztés mellett ezek az enzimek elpusztítják a táplálékban található táplálkozásellenes tényezőket és allergén anyagokat. Ezek a hatásmechanizmusok indokolttá teszik a B. subtilis alkalmazását a bélfertőzések kezelésére szolgáló kombinációs terápiában; légúti fertőzések megelőzése a hideg évszakban; az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés megelőzése; különböző eredetű táplálékemésztési és mozgási zavarok (étkezési hibák, étrendi változások, gyomor-bélrendszeri betegségek, vegetatív idegrendszeri zavarok stb.) korrekciójára. A B.subtilis rendszerint nem okoz mellékhatásokat. Ezt a probiotikumot magas hatékonysági és biztonsági arány jellemzi.

Tudományos munka szövege „A Bacillus subtilis alapú probiotikumok hatásmechanizmusai” témában

Egy gyakorló orvos segítésére

Segíteni a gyakorlónak

UDC 615.331:579.852.1

A BACILLUS SUBTILIS ALAPJÁN ALAPULÓ PROBIOTIKUMOK HATÁSMECHANIZMUSAI

Összegzés. A B.subtilis baktérium az egyik legígéretesebb probiotikum, amelyet az elmúlt évtizedekben vizsgáltak. Probiotikus hatásának mechanizmusai az antimikrobiális anyagok szintéziséhez, a nem specifikus és specifikus immunitás erősítéséhez, a normál bélmikroflóra növekedésének serkentéséhez és az emésztőenzimek felszabadulásához kapcsolódnak. A B. subtilis riboszomálisan szintetizált peptideket, nem riboszomálisan szintetizált peptideket és nem peptid anyagokat választ ki, amelyek széles spektrumú antimikrobiális aktivitással rendelkeznek, beleértve a gram-pozitív, gram-negatív baktériumokat, vírusokat és gombákat. Ezekkel az antimikrobiális anyagokkal szembeni rezisztencia ritkán fordul elő. A nem specifikus immunitás erősödése a makrofágok aktiválódásával és a belőlük pro-inflammatorikus citokinek felszabadulásával, a bélnyálkahártya barrier funkciójának növekedésével, valamint a vitaminok és aminosavak (beleértve az esszenciálisakat is) felszabadulásával jár. A specifikus immunitás erősítése a T- és B-limfociták aktiválásával és az utóbbiakból származó immunglobulinok - IgG és IgA - felszabadulásával nyilvánul meg. A B.subtilis serkenti a normál bélmikroflóra, különösen a Lactobacillus és Bifidobacterium nemzetségekhez tartozó baktériumok növekedését. Ezenkívül a probiotikum növeli a bél mikroflóra változatosságát. A probiotikum az összes fő emésztőenzimet a bél lumenébe juttatja: amilázokat, lipázokat, proteázokat, pektinázokat és cellulázokat. Az élelmiszerek emésztése mellett ezek az enzimek elpusztítják a táplálékellenes tényezőket és a bejövő élelmiszerekben található allergén anyagokat. A felsorolt ​​hatásmechanizmusok indokolják a B. subtilis alkalmazását a bélfertőzések leküzdésére szolgáló komplex terápia részeként; légúti fertőzések megelőzése a hideg évszakban; az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés megelőzése; emésztési zavarok korrekciójára és a különböző eredetű élelmiszerek népszerűsítésére (étrendi hibák, étrendi változások, gyomor-bélrendszeri betegségek, vegetatív idegrendszeri rendellenességek stb.). A B. subtilis általában nem okoz mellékhatásokat. Ezt a probiotikumot a hatékonyság és a biztonság magas aránya jellemzi.

Kulcsszavak: Bacillus subtilis, probiotikum, hatásmechanizmusok.

A probiotikumok „élő mikroorganizmusok, amelyek megfelelő mennyiségben adva pozitív hatással vannak a gazdaszervezet egészségére”. Míg ezek egy részének (Lactobacillus, Bifidobacterium) alkalmazása nagy figyelmet kapott, másokat a közelmúltban tanulmányoztak, és fontos terápiás hatásuk csak most válik világossá. Az egyik probiotikum a Gram-pozitív bacillus Bacillus subtilis (B.subtilis).

A Bacillus nemzetséghez tartozó baktériumok többsége (beleértve a B. subtilist is) nem veszélyes az emberre, és széles körben elterjedt a környezetben. Megtalálhatók a talajban, vízben, levegőben és élelmiszerekben (búzában, egyéb gabonákban, péksütemények, szójatermékek, teljes húsok, nyers és pasztőrözött tej). Ennek eredményeként folyamatosan bejutnak a gyomor-bélrendszerbe és a légzőrendszerbe, és ezeket a szakaszokat bevetik. A bélben lévő bacilusok száma elérheti a 107 CFU/g-ot, ami a Lactobacillushoz hasonlítható. Ebben a tekintetben számos kutató egynek tekinti a Bacillus nemzetséghez tartozó baktériumokat

a normál bélmikroflóra domináns összetevőiből.

Ugyanakkor a V. vilithv terápiás beadása lehetővé teszi ennek a mikroorganizmusnak a probiotikumként való alkalmazását négy fő módon: 1) a bélrendszeri kórokozók elleni védelemre; 2) légúti kórokozóktól; 3) a dysbiosis megszüntetése az antibiotikum-terápia során; 4) az emésztés fokozása és az élelmiszerek előmozdítása. A B. bilid probiotikus aktivitásának egyszerűsített diagramja a gyomor-bél traktus patológiájában az 1. ábrán látható. 1.

Így az elmúlt évtizedek tudományos munkája során jelentős előrelépések történtek a V. vitilius probiotikus aktivitási spektrumának feltárásában, ami ezt a baktériumot az egyik legvonzóbb gyógyászati ​​felhasználású probiotikummá teszi. Ebben az áttekintésben releváns kísérleti és klinikai vizsgálatokból származó adatokat mutatunk be, amelyek benyomást adnak a V. vilisv terápiás potenciáljáról.

antimikrobiális anyagok

A nem specifikus és specifikus immunitás erősítése

1 emésztőenzim felszabadulása

1. ábra: A B.subtIII-ok probiotikus aktivitásának egyszerűsített diagramja a gyomor-bél traktus patológiájában (ábrák alapján)

A Blilithv vegetatív sejtjeinek túlélése a gyomor-bél traktusban

A Nalibili alapú probiotikumokat általában szájon át szedik spórák vagy élő baktériumok (vegetatív sejtek) formájában. A spórák túlélése a gasztrointesztinális traktusban kétségtelen a különféle fizikai-kémiai tényezőkkel, különösen az extrém pH-értékekkel szembeni nagy ellenállásuk miatt. Ugyanakkor szóba került az a kérdés, hogy az élő baktériumok képesek-e áthatolni a gyomron túl, és probiotikus funkciót ellátni.

A helyzetet egy randomizált, kettős-vak, placebo-kontrollos vizsgálat során tisztázták egészséges önkénteseken (n = 81, életkor 18-50 év). Minden alanynak élő Blybium baktériumot szájon át kell bevennie 0,1 109 dózisban; 1,0 109 vagy 10 109 CFU/kapszula/nap vagy placebo 4 hétig. A vizsgálat végén kiszámították a székletben lévő élő baktériumok tartalmát. A kapott értékek 1,1 ± 0,1 1c^10 CFU/g1 a placebo-csoportban és 4,6 ± 0,1 CFU/g; 5,6 ± 0,1 k^10 CFU/g; 6,4 ± 0,1 CFU/g a Lylyshv három növekvő adagja esetén. Következésképpen a Halithv vegetatív sejtjeinek túlélése a gyomor-bél traktuson való áthaladás során igazolódott. Ezenkívül a hatás dózisfüggő volt, és jelentősen meghaladta a placebóét (p< 0,0001) .

A V.eulithv hatásainak hasonlósága spórák és vegetatív sejtek formájában

Az idézett irodalomban a Daibilis kísérleti és klinikai vizsgálatainak többségét e baktériumok spóráinak vagy vegetatív sejtjeiknek a bejuttatásával végezték. Ezzel kapcsolatban felmerül a kérdés,

1 A kolóniaképző egységek (CFU) számszerűen megegyeznek a vegetatív sejtek számával.

hogy a kapott hatásokat és a terápiás eredményeket külön kell-e figyelembe venni, vagy kombinálhatók-e.

A Bacillus nemzetséghez tartozó baktériumok tanulmányozása során számos tanulmány kimutatta, hogy a spórák szájon át történő lenyelése után megfigyelhető csírázásuk a gyomor-bél traktusban vegetatív sejtekké. Ezután megfigyelhető a spórákká való újbóli átalakulás (reszporuláció). Ezeket a ciklusokat többször megismételjük. Végül a székletanyaggal együtt a spórák a külső környezetbe kerülnek. Hasonlóképpen, vegetatív sejtek orális lenyelése után megfigyelhető a sporulációjuk a gyomor-bél traktusban. A csírázási és resporulációs ciklusokat többször megismételjük, mielőtt eliminálnák a gazdaszervezetből.

Így akár spóraként, akár vegetatív sejtként veszik a B. subtilis probiotikumokat, a baktérium mindkét formája jelen lesz a recipiens szervezetében, és a megfigyelt hatások és terápiás hatás valószínűleg azonos lesz. Ez a tény további megerősítést igényel speciális vizsgálatokban.

A probiotikum hatásmechanizmusai

B. subtilis aktivitása

Antimikrobiális anyagok szintézise

A bélfertőzéseket általában baktériumok vagy vírusok, ritkábban protozoonok okozzák. A jelenlegi irányelvek szerint az antibiotikumok a legtöbb esetben nem szükségesek. Fenn kell tartani a megfelelő folyadékpótlást, és a hasmenés magától elmúlik. Mindazonáltal a bélfertőzések enyhe és súlyos eseteiben az orvos dönthet úgy, hogy probiotikumokat is beépít a terápiába a hatékonyság növelése érdekében.

E tekintetben az egyik legígéretesebb baktérium a B. subtilis. A baktérium egyedisége abban rejlik, hogy genomjának 4-5%-a különböző antimikrobiális anyagok szintézisét kódolja. A közzétett áttekintések szerint 2005-ig körülbelül 24, 2010-ig pedig 66 ilyen anyagot izoláltak a B. subtilis különböző törzseiből, és a lista folyamatosan bővül. Az antimikrobiális anyagok többségét riboszómális és nem riboszómális szintetizált peptidek képviselik. A nem peptid anyagok, mint például a poliketidek, aminocukrok és foszfolipidek, kisebb mennyiségben találhatók meg. A B.subtilis néhány antimikrobiális anyagát a táblázat tartalmazza. 1. Nyilvánvaló, hogy sokuk tevékenysége a gram-pozitív baktériumok ellen irányul. Ezenkívül a hatásspektrum a gram-negatív baktériumokra, vírusokra és gombákra is kiterjed. Következésképpen gyakorlatilag minden olyan kórokozóra kiterjed, amely bélfertőzést okozhat.

Példa erre a B. subtilis VKPM B-16041 (DSM 24613) egyik új törzsével kapcsolatos vizsgálat eredményei. Magas antagonista aktivitást mutattak ki St.aureus és C.albicans ellen, közepes vagy alacsony - C.freundii, E.coli,

1. táblázat: A B. subtilis által szintetizált és szekretált néhány antimikrobiális anyag

Riboszómálisan szintetizált peptidek Bakteriocinek: - A típusú lantibiotikumok - B típusú lantibiotikumok Subtilin Ericin S Mersacidin 2 anyaghoz: pórusok kialakulása a citoplazma membránjában Sejtfalszintézis gátlása Gram-pozitív baktériumok Gram-pozitív baktériumok, beleértve a meticillin-rezisztens Staurephylocccus törzseket és vancomycin-rezisztens Enterococcus törzsek

Nem riboszomálisan szintetizált peptidek Lipopeptidek Surfactin Bacilysin Bacitracin Lipid membránok feloldása Nukleotidok, aminosavak és koenzimek szintézisében részt vevő glükózamin szintáz gátlása, ami a mikrobiális sejtek líziséhez vezet. m - pozitív baktériumok

Nem peptid anyagok Difficidin A fehérjeszintézis zavara Gram-pozitív baktériumok, Gram-negatív baktériumok

K. pneumoniae, P. vulgaris, P. aeruginosa, Salmonella spp., Sh. sonnei, Sh. flexneri IIa.

A B. subtilis különböző törzsei különböző antimikrobiális anyagokat választanak ki. Mindenesetre a bélkórokozókkal szembeni antagonizmus lefedett tartománya meglehetősen széles. Például a B. subtilis ATCC6633 törzs szubtiliint választ ki, amely egy gram-pozitív baktériumok elleni antibiotikum. Egy másik törzs, a B. subtilis A1/3, nem választ ki szubtiliint. De kiválasztja az ericin S nevű antibiotikumot, amelynek ugyanaz a hatásmechanizmusa és hatásspektruma, mint a szubtilinek. Ez azt jelenti, hogy bármelyik törzset használják is a probiotikum előállításához, a Gram-pozitív baktériumok spektruma lefedi.

A B. subtilis által kiválasztott antimikrobiális peptidek óriási előnyöket kínálnak a hagyományos antibiotikumokkal szemben. Az a tény, hogy közel állnak az emberi szervezetben szekretált antimikrobiális peptidekhez, és a veleszületett immunitás részét képezik. Hasonló anyagokat azonosítottak sokféle szövetben és hámfelületen, beleértve a bőrt, a szemet, a fület, a szájüreget, a beleket, az immunrendszert, az idegrendszert és a húgyúti rendszert. Közülük a leghíresebbek a defenzin, lizozim, katelicidin, dermcidin, lektin, hisztatin stb. A B.subtilis hasonló anyagokat termel, így ritka az ellenállás velük szemben, és általában nincsenek mellékhatásai. A humán antimikrobiális peptidekkel és a B.subtilis-szel szembeni rezisztencia hiánya azzal a ténnyel függ össze, hogy hatásuk gyakran a membránpórusok kialakítására irányul, ami a baktériumok elpusztulásához vezet. A hagyományos antibiotikumok aktivitása inkább a baktériumok metabolikus enzimjeire összpontosul, ami elősegíti a rezisztencia kialakulását.

A nem specifikus és specifikus immunitás erősítése

A V.tbshk a nem specifikus és specifikus immunitás serkentésével fokozza a bél- és légúti kórokozók elleni védelmet. A nem specifikus immunitás olyan védekező rendszer, amely egyformán működik számos mikroorganizmus ellen. A specifikus immunitás a „kulcs a zárhoz” elvén működik – speciális sejteket vagy antitesteket termelnek egy adott kórokozóhoz. A nem specifikus immunitást általában a szervezet védekező reakciójának első fázisának, a specifikus immunitást pedig a második fázisnak tekintik.

Nem specifikus immunitás

A legfontosabb sejtek A makrofágok részt vesznek a nem specifikus immunitásban. Fagocitizálják a kórokozót, megemésztik azt. Ezenkívül a kórokozó antigének a szervezet saját membránjainak felületén sorakoznak fel - ez az úgynevezett prezentáció, amely a szervezet védekező reakciójának második fázisának elindításához szükséges.

Számos tanulmány kimutatta, hogy a HbnI beadása makrofág aktiválást okoz. Az aktivált makrofágokban a gyulladást elősegítő citokinek szintézise és felszabadulása fokozódik: tumornekrózis faktor a, interferon-γ (N-7), interleukin (Sh-1p, Sh-6, Sh-8, Sh-10, Sh- 12, makrofág gyulladásos fehérje- 2. Ennek eredményeként komplex gyulladásos válasz alakul ki, melynek célja a kórokozó elpusztítása.Például az 1KK-y aktiválja a makrofágokat és megvédi a sejteket a vírusfertőzéstől Az Sh-6 serkenti a B-limfociták proliferációját és differenciálódását az antitestek szintéziséért felelős Sh-8 a neutrofilek erős kemotaktikus és parakrin mediátora.

Az aktivált neutrofilek fontos szerepet játszanak a gyulladás és az oxidatív stressz fenntartásában. Az IL-12 szabályozza a T-limfociták növekedését, aktivációját és differenciálódását.

Továbbra is tanulmányozzák azokat a mechanizmusokat, amelyek révén a B. subtilis aktiválja a makrofágokat. Az egyik tanulmány kimutatta, hogy ezért a probiotikus exopoliszacharidok felelősek.

A nemspecifikus immunitás következő fontos összetevője a hám barrier funkciója. A hámszövetek találkoznak először a kórokozók támadásával, és a betegség lefolyása nagymértékben függ ellenállásuktól.

A kutatók azt találták, hogy a baktériumok ugyanazon a fajon belül és a különböző fajok között egy speciális anyagcsoport, a kvórumérzékelő molekulák segítségével kommunikálnak egymással. Az egyik ilyen, a B. subtilis által kiválasztott molekulát kompetencia és sporulációs faktornak (CSF) nevezik. A CSF bélhámsejtekbe történő átvitele aktiválja az ezen sejtek túléléséhez szükséges kritikus jelátviteli útvonalakat. Először is ezek a p38 MAP kináz útvonal és a protein kináz B/AI útvonal. Ezenkívül a CSF hősokk-fehérjék (Hsps) szintézisét indukálja, amelyek megakadályozzák az oxidatív stressz kialakulását a hámsejtekben. Mindkét hatás - javítja a hámsejtek túlélését és csökkenti bennük az oxidatív stresszt - a bélnyálkahártya barrier funkciójának növekedéséhez vezet. Kevésbé válik sebezhetővé a kórokozókkal szemben.

A nem specifikus immunitás tényezői közé tartozik számos metabolikus anyag tartalma is, amelyek befolyásolják a szervezet fertőzésekkel szembeni általános ellenálló képességét.

Azt találták, hogy a B.subtilis számos vitamint szintetizál, különösen a tiamint (B1), a piridoxint (B6) és a menakinont (K2). A B. subtilis különböző törzsei különböző aminosavkészleteket állítanak elő, amelyek közül néhány esszenciális, mint például a valin.

Specifikus immunitás

A specifikus immunitás erősebb védekezési rendszer, mivel szelektíven egy adott kórokozót céloz meg. Különbséget tesz sejtes és humorális immunitás között. A sejtes immunitást a T-limfociták biztosítják, irányítva a vírusok elleni harcukat. A humorális immunitás az antitesteket (immunglobulinokat) kiválasztó B-limfociták működéséhez kapcsolódik. Ebben az esetben a harc a baktériumok ellen irányul.

Számos tanulmány megerősítette, hogy a B. subtilis képes a T- és B-limfociták aktivációját és proliferációját indukálni. Ez mind a perifériás vérben (mindkét sejttípus), mind a csecsemőmirigyben (T-limfociták) és a lépben (B-limfociták) fordul elő. Fentebb már szó volt arról, hogy ez a citokinek makrofágokból történő felszabadulása miatt válik lehetővé. Ezenkívül azt találták, hogy a B. subtilis sejtfalain, peptidoglikánjain és teichoinsavain keresztül közvetlenül stimulálják a limfocitákat.

2. ábra: A probiotikus B. subtilis szignifikánsan növelte a nyál IgA tartalmát idős betegekben.

Megjegyzés: a probiotikumot 4 adagban, 10 naponként vették be, köztük 18 napos szünetekkel. Az adatokat a vizsgálat végén (43) – 4 hónap elteltével – mutatjuk be.

Ш B.subtilis □ Placebo

és a GO-ról a Q. L-ről

3. ábra: A probiotikus B. subtilis szignifikánsan növelte idős betegek székletének 1dA tartalmát.

Megjegyzés: a probiotikumot 4 adagban, 10 naponként vették be, köztük 18 napos szünetekkel. Az adatokat a vizsgálat elején (VI), 10 nappal az első probiotikum bevétele után (VI + 10 nap) és a vizsgálat végén (43) – 4 hónappal később mutatjuk be.

A B limfocitákra gyakorolt ​​hatás következménye az immunglobulin (IgG és 1&L) tartalom növekedése a vérszérumban és 1&L a nyálkahártyák felszínén. Például az egyik vizsgálatban az 1&L tartalom növekedését találták a székletben, ami a bélfertőzések elleni fokozott immunitásra jellemző, valamint a nyálban, ami fontos az akut légúti fertőzések elleni védelem fokozása szempontjából (2. 3). Mint ismeretes, 1&L

az egyik fő molekula, amely megvédi a hámszövetet a kívülről bejutó kórokozóktól.

A normál bél mikroflóra növekedésének stimulálása

A normál mikroflóra a bélcső különböző részeit foglalja el, a szájüregtől a vastagbélig. Az emberi szervezetben körülbelül 1014 ilyen baktérium található, ami 10-szerese az emberi sejtek számának. A baktériumok teljes metabolikus aktivitása meghaladja a sejtjeinkét.

A normál bélmikroflórát alkotó baktériumfajok számát kétféleképpen határozták meg. Egy régebbi módszer, amely a baktériumok székletmintákból történő tenyésztésére épül, több mint 500 fajt azonosított. Az újabb, DNS-elemzésen alapuló módszerek azt mutatják, hogy valójában több mint 1000 ilyen faj létezik, számuk megnövekedett, mivel a normál mikroflóra olyan baktériumokat tartalmaz, amelyeket nem lehet a szokásos módon tenyészteni.

A normál bélmikroflóra fő funkciói a patogén mikrobák kolonizációja és növekedése elleni védelemre, a nem specifikus és specifikus immunitás stimulálására, valamint az élelmiszer-összetevők emésztésére korlátozódnak. Amint látható, ezek a funkciók egybeesnek a jelen áttekintésben a probiotikus B. subtilisszel kapcsolatban tárgyaltakkal.

Bélfertőzések esetén a bél mikroflóra egyensúlyának felborulása lép fel, mivel a kórokozó baktériumok kompetitív módon elnyomják a normál baktériumok aktivitását. Fentebb említettük a bélfertőzéseket, amikor a B.subtilis-ből izolált antimikrobiális anyagokat vizsgáltuk. Ezenkívül a terápiás és sebészeti betegségek antibiotikum-kezelése során egyensúlyhiány lép fel. Ebben az esetben az antibiotikum beadási módja nem számít - lehet orális vagy parenterális. Az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés előfordulása az alkalmazott antibiotikum típusától függ, és 2-25%, ritkábban - akár 44%. Az antibiotikum elnyomja a normál mikroflóra létfontosságú aktivitását, ami kórokozó baktériumok szaporodásához vezet.

Számos tanulmány igazolta a B. subtilis pozitív hatását a normál bélmikroflóra tartalmára. A probiotikum növelte a Lactobacillus mennyiségét és csökkentette az Escherichia coli tartalmát a belekben és a székletben, növelte a Bifidobacterium szintjét és csökkentette az Alistipes spp., Clostridium spp., Roseospira spp., Betaproteobacterium mennyiségét a székletben (4. ábra). Következésképpen a B. subtilis behurcolása a bél mikroflóra arányát a normál baktériumok számának növekedése és a patogén törzsek számának csökkenése irányába változtatta.

Ennek a jelenségnek a mechanizmusait továbbra is tanulmányozzák. Az eddigi bizonyítékok két lehetőséget sugallnak. Egyrészt a B.subtilis antimikrobiális anyagok felszabadulása miatt

Hatás a Lactobacillus tartalomra

o sh nem (Ez S

4. ábra A probiotikus B.subtilis a legnagyobb adagban szignifikánsan növelte a Lactobacillus tartalmát a malacok ürülékében

elnyomja a patogén mikroflóra fejlődését, ami megteremti a feltételeket a felszabaduló rést normál baktériumokkal való feltöltéséhez. Ezt a mechanizmust közvetve jelzik annak a vizsgálatnak az eredményei, amelyben a malacoknak neomicin-szulfát nevű antibiotikumot adtak. Ezt az eszközt az Escherichia coli növekedésének gátlása jellemzi, de nem befolyásolja a Lactobacillust. Ennek eredményeként az antibiotikum szedése várhatóan a széklet Escherichia coli tartalmának csökkenéséhez, ugyanakkor a Lactobacillus növekedéséhez vezetett. Ez a jelenség csak akkor lehetséges, ha a kórokozó baktériumok elnyomása miatt a normál bélmikroflóra elkezd kialakulni. Ugyanez történik, amikor a B. subtilis kiadja antimikrobiális anyagait.

A második lehetőség a normál bélmikroflóra B. subtilis, például Lactobacillus és Bifidobacterium általi közvetlen stimulálásával kapcsolatos. Erre utalnak a B. subtilist és Lactobacillust tartalmazó vegyes probiotikumok előállítására vonatkozó in vitro kísérletek eredményei. Azt találták, hogy a laktobacillusok életképessége az ilyen kombinációkban jelentősen megnőtt. Egy tanulmány eredményei azt mutatják, hogy ennek oka lehet a kataláz és a szubtilizin felszabadulása a B. subtilis-ből.

Egy másik felfedezett körülmény érdekes. Egyes tanulmányok kimutatták, hogy a B. subtilis fokozza a normál bélmikroflóra változatosságát. Úgy gondolják, hogy ez pozitív hatással van a gazdaszervezet egészségére. Különösen a B.subtilis növelte a bél mikroflóra diverzitását olyan baktériumok miatt, mint az Eubacterium coprostanoligenes, L.amylovorus, Lachnospiraceae baktérium, L.kitasatonis.

Egy időben meglehetősen széles körben vitatták meg azt a kérdést, hogy a probiotikumok károsíthatják-e a gazdaszervezetet, megváltoztatva azt a megszokott mikroflórát, amely évek óta kialakult a kívülről mesterségesen behurcolt idegen baktériumok számára. Később azonban kiderült, hogy az orvosi célból szedett probiotikumok a kúra befejezése után sem maradnak a gyomor-bél traktusban

kezeléseket teljesen eltávolítják belőle. A B.subtilis kapcsán még egy körülményt fontos figyelembe venni. Ez a baktérium, bár talajból, vízből, levegőből és táplálékból folyamatosan bejut az emésztőcsatornába, mégsem kolonizálja (ellentétben a Lactobacillusszal és a Bifidobacteriummal). A B.subtilis egyfajta tranzitbaktérium, amely folyamatosan mozog az emésztőcsőben és onnan. Ezért a B.subtilis nem tud gyökeret verni a belekben, és nem tudja megváltoztatni mikroflóránk stabil összetételét.

Fokozott emésztés és táplálékmozgás

Számos olyan betegség és állapot létezik, amelyek az emésztés és az élelmiszerek mozgásának megzavarásához vezetnek. Ilyenek lehetnek például a táplálkozási hibák, az étrend változásai, a gyomor-bél traktus betegségei (epehólyag-gyulladás, hasnyálmirigy-gyulladás stb.), az autonóm idegrendszer rendellenességei (funkcionális zavarokhoz vezet) stb.

A B. subtilis alapú probiotikum az emésztőenzimek felszabadításával fokozhatja az emésztést és a táplálék másodlagos mozgását. Tanulmányok kimutatták, hogy ezek a baktériumok szintetizálják az összes enzimcsoportot, amelyek az élelmiszerek sikeres lebontásához szükségesek: amilázok, lipázok, proteázok, pektinázok és cellulázok. Ezen enzimek nagy aktivitását bizonyítja, hogy a B.subtilist az élelmiszeriparban használják előállított termékek enzimes feldolgozására.

Az élelmiszerek táplálkozásellenes faktoroknak nevezett anyagokat tartalmaznak. Azért kapták ezt a nevet, mert jelenlétük csökkenti egy vagy több tápanyag-összetevő elérhetőségét az elfogyasztott élelmiszerből. Megállapították, hogy a B.subtilis enzimek elpusztítják az antinutricionális faktorokat, csökkentve azok tartalmát az élelmiszerekben. Ez különösen igaz az összes fenolra, tanninokra és koffeinre. Ez növeli az élelmiszer-összetevők elérhetőségét a gazdaszervezet számára.

Az élelmiszer olyan anyagokat is tartalmaz, amelyek allergiás reakciókat válthatnak ki egyes érzékeny egyéneknél. A B.subtilis enzimek azonban képesek elpusztítani ezeket az anyagokat, csökkentve az élelmiszer allergén potenciálját. Egy vizsgálatot végeztek, amelyben hasonló probiotikus hatásokat találtak a gliadin (búzában) és a p-laktoglobulin (a tehéntejben) esetében.

Példák klinikai vizsgálatokra

Ebben a részben nem törekedtünk arra, hogy kimerítő áttekintést adjunk a B. subtilisszel kapcsolatos összes rendelkezésre álló klinikai vizsgálatról. Inkább megvolt a vágy klinikai példák megerősíti a fent leírt probiotikus mechanizmusok működését.

Bélfertőzések. Gracheva et al. szalmonellában szenvedő betegek is szerepeltek

Az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés gyakorisága

o shno (H t S

30 25 20 15 10 5 0

5. ábra. A probiotikus B. ulcerus szignifikánsan csökkentette a hasmenés előfordulását orális és intravénás antibiotikumot szedő járóbetegeknél.

lez, ételmérgezés és vérhas. A kiválasztott betegcsoportok egyike B.subtilis-t kapott egy másik probiotikummal együtt (összszám: 2109 élő mikrobasejt) naponta kétszer 4-10 napon keresztül. A vizsgálat eredményei alapján a gyógyszer kifejezett terápiás hatását fedezték fel, amely a széklet felgyorsult normalizálásából, a hasi fájdalom eltűnéséből és a bélrendszeri dysbiosis csökkentéséből állt.

Antibiotikummal összefüggő hasmenés. Egy randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos klinikai vizsgálatban a T.V. Horosheva et al. A 45 év feletti járóbetegeket is bevontuk, akiknek legalább 5 napig egy vagy több orális vagy intravénás antibiotikumot írtak fel. Az egyik betegcsoport (n = 90) probiotikus B. subtilis-t (2109 élő mikrobiális sejt) kapott naponta kétszer, az antibiotikum-terápia megkezdése előtt 1 nappal kezdődően és az antibiotikum kezelés abbahagyása után 7 nappal befejezve. Ennek eredményeként azt találták, hogy a probiotikus csoportban az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés csak a betegek 7,8%-ánál (7/90) alakult ki, míg a placebo csoportban ez az arány 25,6% (23/90) (p< 0,001) (рис. 5). Пробиотик достоверно снижал частоту появления тошноты, рвоты, метеоризма и абдоминальной боли.

Az élelmiszerek emésztésének és mozgásának erősítése. Egy tanulmányban Y.P. Liu et al. Idős (74 ± 6 éves) járóbetegek és funkcionális székrekedésben szenvedő fekvőbetegek is szerepeltek. Az egyik kezelt csoport (n = 31) élő mikrobiális B. subtilis sejteket kapott 4 hétig. A vizsgálat végén azt találták, hogy a probiotikum a betegek 41,9%-ánál (13/31) volt hatásos.

Légúti fertőzések. Ez a javallat kissé szokatlannak tűnhet, tekintve, hogy a B. subtilis egy probiotikum, amely a gyomor-bél traktusban működik. A baktérium probiotikus hatásmechanizmusait vizsgálva azonban megemlítettük, hogy a légúti kórokozókat befolyásoló képessége az immunrendszer stimulálásával függ össze.

2015-ben a Cochrane közzétette a probiotikumok akut légúti fertőzések (ARI-k) megelőzésére való alkalmazásáról szóló szisztematikus áttekintésének eredményeit. A szerzők arra a következtetésre jutottak, hogy a probiotikumok 47%-kal hatékonyabbak voltak, mint a placebo az ARI-epizódok csökkentésében. Ezenkívül a probiotikumok 1,89 nappal csökkentették az ARI időtartamát. A probiotikumok kismértékben csökkenthetik az antibiotikum-használat gyakoriságát és az iskolából kihagyott napok számát. A probiotikumok mellékhatásai minimálisak voltak, a gyomor-bélrendszeri tünetek gyakoribbak voltak.

Biztonság

A B. subtilis biztonságosságát három fő területen tesztelték: patogén gének jelenléte, antibiotikum-rezisztencia és a mikrobiális azonosítás pontossága.

Patogén gének. Az ilyen gének jelenléte veszélyes, mert toxinok és egyéb káros anyagok képződéséhez vezetnek, amelyek negatívan hatnak a bélfalra és a test egészére. A szerzők arról számolnak be, hogy ezeket a géneket nem találták meg a B. subtilisben. Ezen túlmenően ennek a probiotikumnak a bélhámsejtekkel történő in vitro tenyésztése és in vivo beadása sokféle állatfajnak nem vezetett káros hatások vagy mellékhatások kialakulásához.

Antibiotikum rezisztencia. Ez a paraméter azért veszélyes, mert ha a probiotikumnak olyan génjei vannak, amelyek antibiotikum-rezisztenciát válthatnak ki, akkor azok végső soron átkerülhetnek kórokozó baktériumokra, amelyek szintén rezisztenssé válnak az antibiotikumokkal szemben. A jó hír az, hogy 3 vizsgálatban tesztelve a probiotikus B. subtilis érzékeny (nem rezisztens) volt az orvostudományban használt összes fő antibiotikummal szemben. Ezért a B. subtilis nem tud rezisztenciát közvetíteni patogén baktériumokkal szemben.

A mikrobiális azonosítás pontossága. 2003-ban egy tanulmányt tettek közzé, amely kimutatta, hogy a B. subtilis-t tartalmazó 7 probiotikum valójában más, közeli rokon baktériumot is tartalmazott. A mikrobiológusok azonban arról számolnak be, hogy ma már minden feltétel adott a B.subtilis megbízható azonosításához. Ezért a probiotikum helyes összetétele az azt előállító gyártó felelősségétől függ.

Nem szabad megfeledkezni arról, hogy más probiotikumokhoz hasonlóan a B.subtilis-t nem írják fel súlyos immunhiányos betegeknek (súlyos fertőzések, sugár- és kemoterápia utáni legyengülés, HIV/AIDS-es betegek stb.) a betegség általánossá válásának lehetősége miatt. fertőzés és szepszis kialakulása .

Az egyik publikáció felsorolta a „jó” probiotikum jellemzőit. A szerzők többek között a baktériumok szolgáltató képességét is magukban foglalták

pozitív hatással van a gazdaszervezetre, például növeli a betegségekkel szembeni ellenállást. A probiotikumnak nem patogénnek és nem mérgezőnek kell lennie. Képesnek kell lennie túlélni és fejlődni a gyomor-bél traktusban, azaz ellenállónak kell lennie az alacsony pH-értékekkel és a szerves savakkal szemben. Amint ebből az áttekintésből az következik, mindezek a tulajdonságok a B.subtilis probiotikus baktérium velejárói.

Kísérleti és klinikai vizsgálatok szerint számos javallat van, ha megfelelő a B.subtilis alapú probiotikum felírása. Mindenekelőtt ez a probiotikum beépítése a bélfertőzések, köztük az utazók hasmenése komplex terápiájába, valamint a légúti fertőzések megelőzésére való alkalmazása a hideg évszakban. A probiotikum hasznos lehet az orális vagy parenterális antibiotikum-terápia során az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés megelőzésére. Ezeknek a baktériumoknak a rendeltetése fontos lesz a különféle eredetű élelmiszerek emésztési és mozgási zavaraiban, amelyek táplálkozási hibákkal, étrendi változásokkal, gasztrointesztinális traktus betegségekkel, vegetatív idegrendszeri rendellenességekkel stb.

A B. subtilis alapú probiotikumokat a hatékonyság és a biztonság magas aránya jellemzi.

Bibliográfia

1. FAO/WHO (2001): Probiotikumok egészségügyi és táplálkozási tulajdonságai élelmiszerekben, beleértve az élő tejsavbaktériumokat tartalmazó tejport. Az Egyesült Nemzetek Élelmezésügyi és Mezőgazdasági Szervezete és az Egészségügyi Világszervezet szakértői konzultációs jelentése/FAO/WHO. - 2001. - ftp://ftp.fao.org.

2. Sorokulova I. A Bacillus baktériumok mint probiotikumok modern állapota és perspektívái // J. Prob. Egészség. - 2013. - Kt. 1, 4. sz. - sz. a publ. 1000e106.

3. Olmos J., Paniagua-Michel J. Bacillus subtilis Egy potenciális probiotikus baktérium az akvakultúra funkcionális takarmányozására // J. Microb. Biochem. Technol. - 2014. - Kt. 6, 7. sz. - P. 361-365.

4. A Bacillus subtilis R0179 értékelése a gasztrointesztinális életképességről és az általános egészségről: randomizált, kettős-vak, placebo-kontrollos vizsgálat egészséges felnőtteken/Hanifi A., Culpepper T., Mai V. et. al. // Előny. Mikrobák. - 2015. - Kt. 6, 1. szám - P. 19-27.

5. Leser T.D., Knarreborg A., Worm J. Bacillus subtilis és Bacillus licheniformis spórák csírázása és kinövése sertések gasztrointesztinális traktusában // J. Appl. Microbiol. - 2008. - Vol. 104., 4. sz. - P. 1025-1033.

6. Jadamus A., Vahjen W., Simon O. Spore forming probiotic strain növekedési viselkedése brojlercsirkék és malacok gastrointestinalis traktusában // Arch. Tiernernahr. - 2001. - 20. évf. 54, 1. szám - P. 1-17.

7. Bacillus subtilis spórák sorsa és elterjedése rágcsáló modellben / Hoa T.T., Duc L.H., Isticato R. et al. // Alkalmazott és környezeti mikrobiológia. - 2001. - 20. évf. 67, 9. sz. - P. 38193823.

8. The Intestinal Life Cycle of Bacillus subtilis and Close Relatives / Tam N.K.M., Uyen N.Q., Hong H.A. et al. // Bakteriológiai folyóirat. - 2006. - Vol. 188., 7. sz. - P. 2692-2700.

9. Stein T. Bacillus subtilis antibiotikumok: szerkezetek, szintézisek és specifikus funkciók // Mol. Microbiol. - 2005. - 20. évf. 56, 4. sz. - P. 845-857.

10. Antimikrobiális metabolitok előállítása Bacillus subtilis által Polyacrylamide Gel/Awais M, Immobilized in Polyacrylamide Gel/Awais M, Pervez, A., Yaqub Asim, Shah M.M. //Pakistan J. Zool. - 2010. - 20. évf. 42, 3. sz. - P. 267-275.

11. Lelyak A.A., Shternshis M.V. A szibériai Bacillus spp. törzsek antagonista potenciálja. az állat- és növénybetegségek kórokozóival kapcsolatban // A Tomszki Állami Egyetem közleménye. Biológia. - 2014. - 1. szám - P. 42-55.

12. A Bacillus spp. által termelt antimikrobiális vegyületek. and Applications in Food/ Baruzzi F., Quintieri L., Morea M., Caputo L. // Science against Microbial Pathogens: Communicating Current Research and Technological Advances (Vilas A.M., szerk.). - Badajoz, Spanyolország: Formatex, 2011. - P. 1102-1111.

13. Két különböző lantibiotikumszerű peptid a Bacillus subtilis A1/3 ericin gén klaszteréből származik / Stein T., Borchert S., Conrad B. et al. J. Bacteriol. - 2002. - 20. évf. 184., 6. sz. - P. 1703-1711.

14. Wang G. Humán antimikrobiális peptidek és fehérjék // Gyógyszerészet. - 2014. - Kt. 7, 5. sz. - P. 545-594.

15. A Bacillus nemzetség antimikrobiális peptidjei: az antibiotikumok új korszaka / Sumi C.D., Yang B.W., Yeo I.C., Hahm Y.T. //Tud. J. Microbiol. - 2015. - Kt. 61., 2. sz. - P. 93-103.

16. A Bacillus subtilis B10 spórák hatása az egér makrofágok életképességére és biológiai funkcióira/Huang Q., Xu X., Mao Y.L. et al. //Anim. Sci. J. - 2013. - Kt. 84, 3. sz. - P. 247-252.

17. A Bacillus subtilis BS02 moduláló hatása a RAW 264.7 egérmakrofágok életképességére és immunválaszaira / Huang Q., Li Y.L., Xu X. et al. // Journal of Animal and Veterinary Advances. - 2012. - Kt. 11., 11. sz. - P. 1934-1938.

18. A Bacillus subtilis (natto) B4 spórák immunmoduláló hatása rágcsáló makrofágokra/Xu X, Huang Q., Mao Y. et al. Microbiol. Immunol. - 2012. - Kt. 56, 12. sz. - P. 817-824.

19. A Bacillus subtilis alapú, közvetlen táplálású mikrobiálok fokozzák a makrofágok funkcióját brojlercsirkékben/Lee K.W., Li G., Lillehoj H.S. et al. //Res. Állatorvos. Sci. - 2011. - 20. évf. 91, 3. sz. - P. e87-e91.

20. Védelem a bélgyulladás ellen bakteriális exopoliszacharidok által / Jones S.E., Paynich M.L., Kearns D.B., Knight K.L. J. Immunol. - 2014. - Kt. 192, 10. sz. - P. 48134820.

21. A Bacillus subtilis quorum-érzékelő molekula, a CSF hozzájárul a bél homeosztázisához az OCTN2-n keresztül, amely egy gazdasejt membrán transzporter/Fujiya M., Musch M.W., Nakagawa Y. et al. // Sejtgazda mikroba. - 2007. - Vol. 1, 4. sz. - P. 299-308.

22. Zhang Y., Begley T.P. A Bacillus subtilisből származó tiamin bioszintézis gén, a thiA klónozása, szekvenálása és szabályozása // Gene. - 1997. - 1. évf. 198, 1-2. - P. 73-82.

23. A Bacillus subtilisből származó tiamin-foszfát-szintáz kristályszerkezete 1,25 A felbontásnál / Chiu H.J., Reddick J.J., Begley T.P., Ealick S.E. //Biokémia. - 1999. - 1. évf. 38., 20. sz. - P. 6460-6470.

24. A YaaD és a yaaE részt vesz a B6-vitamin bioszintézisében a Bacillus subtilis / Sakai A., Kita M., Katsuragi T. et al. // J. Biosci. Bioeng. - 2002. - 20. évf. 93., 3. sz. - P. 309-312.

25. Glycolaldehyde-forming route in Bacillus subtilis in relation to vitamin B6biosynthesis/Sakai A., Katayama K., Katsuragi T., Tani Y // J. Biosci. Bioeng. - 2001. - 20. évf. 91., 2. sz. - 147152. sz.

26. A Bacillus subtilis 1-dezoxi-D-xilulóz-5-foszfát-szintázának és transzketolázának vizsgálata a B6-vitamin bioszintézisével kapcsolatban / Sakai A., Kinoshita N., Kita M. et al. // J. Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokió). - 2003. - 1. évf. 49., 1. sz. - P. 73-75.

27. Ikeda H., Doi Y. A Bacillus subtilisből szekretált vitamin-K2-kötő faktor // Eur. J. Biochem. - 1990. - 1. évf. 192, 1. sz. -P. 219-224.

28. A menakinon bioszintézis első elkötelezett lépését katalizáló Bacillus subtilis MenD szerkezete és reakcióképessége / Dawson A., Chen M., Fyfe P.K. et al. // J. Mol. Biol. - 2010. - 20. évf. 401, 2. sz. - P. 253-264.

29. Bentley R., Meganathan R. K-vitamin (menakinon) bioszintézise baktériumokban // Mikrobiológiai áttekintések. - 1982. - 1. évf. 46., 3. sz. - P. 241-280.

30. Az aerob spóraképző baktériumok extracelluláris aminosavai / Smirnov V.V., Reznik S.R., Kudriavtsev V.A. et al. // Mikro-biologiia. - 1992. - 1. évf. 61., 5. sz. - P. 865-872.

31. Chattopadhyay S.P., Banerjee A.K. Valin előállítása egy Bacillus sp. // Z. Allg. mikrobiol. - 1978. - 1. évf. 18, 4. szám -P. 243-254.

32. Aktivációs markerek expressziója perifériás vér limfocitáin Bacillus subtilis spórák orális adagolását követően / Caruso A., Flamminio G., Folghera S. et al. //Int. J. Immunophar-macol. - 1993. - 1. évf. 15., 2. sz. - P. 87-92.

33. A Bacillus spórák immunstimuláló aktivitása / Huang J.M., La Ragione R.M., Nunez A., Cutting S.M. FEMS Immunol. Med. Microbiol. - 2008. - Vol. 53, 2. sz. - P. 195-203.

34. Sebastian A.P., Keerthi T.R. A probiotikus Bacillus subtilis MBTU PBBMI spórák immunmoduláló hatása Balb/C egerekben // International Journal of Engineering and Technical Research (IJETR). - 2014. - Kt. 2, 11. sz. - P. 258-260.

35. R&S&nen L., Mustikkam&ki U.P., Arvilommi H. Humán limfociták poliklonális válasza bakteriális sejtfalakra, peptidoglikánokra és teichoin savakra // Immunology. - 1982. - 1. évf. 46, 3. sz. - P. 481-486.

36. Bacillus subtilis natto hatása pézsmakacsák növekedési teljesítményére / Sheng-Qiu T., Xiao-Ying D., Chun-Mei J. et al. //Fordulat. Melltartók. Cienc. Avic. - 2013. - Kt. 15., 3. szám - 191197. o.

37. Bacillus subtilis és endospóra alapú probiotikum értékelése sertés egészséges tüdejének kinyerésében / Ayala L., Bocourt R., Milian G. et al. // Cuban Journal of Agricultural Science. - 2012. - Kt. 46, 4. sz. - P. 391-394.

38. A Bacillus subtilis CU1 probiotikus törzs stimulálja az idősek immunrendszerét a gyakori fertőző betegségek időszakában: randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos vizsgálat / Lefevre M., Racedo S.M., Ripert G. et al. // Immun. Öregedés. - 2015. - Kt. 12. - Zsibbadt. a publ. 24.

39. Eerola E., Ling W.H. Bél mikroflóra // Encyclopedia of Life Support Systems (EOLSS); http://www.eolss.net.

40. Horosheva T. V., Vodyanoy V., Sorokulova I. A Bacillus probiotikumok hatékonysága az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés megelőzésében: randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos klinikai vizsgálat // JMM Case Reports. - 2014. - DOI: 10.1099/jmmcr.0.004036.

41. Jeong J.S., Kim I.H. A Bacillus subtilis C-3102 spórák probiotikus takarmány-kiegészítőként hatása a növekedési teljesítményre, a káros gázok kibocsátására és a bél mikroflórájára brojlereknél // Baromfi. Sci. - 2014. - Kt. 93, 12. sz. - P. 3097-3103.

42. A Bacillus törzsek mint potenciális probiotikumok szűrése, majd a Bacillus subtilis MA139 in vivo hatékonyságának megerősítése sertésekben / Guo X., Li D., Lu W. et al. //Antonie Van Leeu-wenhoek. - 2006. - Vol. 90, 2. sz. - P. 139-146.

43. A Bacillus subtilis KN-42 hatása az elválasztott malacok növekedési teljesítményére, hasmenésére és fekáliás baktériumflórájára / Hu Y, Dun Y, Li S. et al. // Asian-Australas J. Anim. Sci. - 2014. - Kt. 27., 8. sz. - P. 1131-1140.

44. A Bacillus subtilis KD1 hatása a brojler bélflórájára / Wu B.Q., Zhang T., Guo L.Q., Lin J.F. //Csibe. Sci. - 2011. - 20. évf. 90, 11. sz. - P. 2493-2499.

45. A Bacillus subtilis natto takarmányozásának hatása a holsteini tejelő tehenek végbélfermentációjára és mikrobiotájára / Song D.J., Kang H.Y., Wang J.Q. et al. // Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. - 2014. - Kt. 27., 4. sz. - P. 495-502.

46. ​​Yang J.J., Niu C.C., Guo X.H. Vegyes kultúra modellek az Escheri-chia coli és a Lactobacillus közötti bélmikrobiális kölcsönhatások előrejelzésére probiotikus Bacillus subtilis//Benef jelenlétében. Mikrobák. - 2015. - Kt. 6, 6. sz. - P. 871877.

47. Zhang Y.R., Xiong H.R., Guo X.H. A Lactobacillus reuteri fokozott életképessége probiotikumok előállításához vegyes szilárd fázisú fermentációban, Bacillus subtilis jelenlétében // Folia Microbiol. (Práha). - 2014. - Kt. 59, 1. szám - P. 31-36.

48. A laktobacillusok jobb növekedése és életképessége Bacillus subtilis (natto), kataláz vagy szubtilizin jelenlétében / Hosoi T., Ametani A., Kiuchi K., Kaminogawa S. // Can. J. Microbiol. - 2000. - Vol. 46., 10. sz. - 892-897.

49. Segítség a betegeknek megalapozott döntéseket hozni a probiotikumokkal kapcsolatban: kutatási igény / Sharp R.R., Achkar J.-P., Brinich M.A., Farrell R.M. // The American Journal of gastroenterology. - 2009. - 1. évf. 104., 4. sz. - P. 809-813.

50. Crislip M. Probiotikumok // 2009; https://www.sciencebased-medicine.org.

51. Chan K.Y., Au K.S. Tanulmányok a Bacillus subtilis celluláztermeléséről//Antonie Van Leeuwenhoek. - 1987. - 1. évf. 53, 2. sz. - P. 125-136.

52. Sharma A., Satyanarayana T. Mikrobiális savstabil a-amilázok: Jellemzők, géntechnológia és alkalmazások // Process Biochemistry. - 2013. - Kt. 48, 2. szám - 201211. o.

53. Guncheva M., Zhiryakova D. A Bacillus lipázok katalitikus tulajdonságai és lehetséges alkalmazásai // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. - 2011. - 20. évf. 68, 1. szám - P. 1-21.

54. Gupta R., Beg Q.K., Lorenz P. Bakteriális alkalikus proteázok: molekuláris megközelítések és ipari alkalmazások // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2002. - 20. évf. 59, 1. szám - P. 15-32.

55. Khan M., Nakkeeran E., Umesh-Kumar S. A pektináz lehetséges alkalmazása funkcionális élelmiszerek fejlesztésében // Annu. Fordulat. Food Sci. Technol. - 2013. - Kt. 4. - P. 21-34.

56. A biológiai kezelések befolyásolják a kávépép kémiai összetételét/ Ulloa Rojas J.B., Verreth J.A., Amato S., Huisman E.A. // Bioresour. Technol. - 2003. - 1. évf. 89, 3. sz. - P. 267-274.

57. A thai hagyományos fermentált élelmiszerekből származó proteolitikus baktériumok azonosítása és allergén redukáló potenciáljai / Phrom-raksa P., Nagano H., Boonmars T., Kamboonruang C. // J. Food Sci. - 2008. - Vol. 73, 4. sz. - P. M189-M195.

58. Pokhilenko V.D., Perelygin V.V. Spóraképző baktériumokon alapuló probiotikumok és biztonságosságuk // Kémiai és biológiai biztonság. - 2007. - 2-3. - P. 32-33.

59. Liu Y.P., Liu X., Dong L. Lactulose plus live binary Bacillus subtilis funkcionális székrekedésben szenvedő idősek kezelésében // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. - 2012. - Kt. 92, 42. sz. - P. 29612964.

60. Hao Q., Dong B.R., Wu T. Probiotikumok az akut felső légúti fertőzések megelőzésére // Cochrane Database of Systematic Reviews. - 2015. - Iss. 2. - Art. szám: CD006895.

61. Cartwright P. Bacillus subtilis – Azonosítás és biztonság // Probiotikus hírek. - 2009. - 2. szám - www.protexin.com.

62. A Tudományos Bizottság véleménye az EFSA kérésére az élelmiszerekben/takarmányokban és élelmiszer-/takarmány-adalékanyagok előállításában használt mikroorganizmusok EFSA általi biztonsági értékelésének általános megközelítésére vonatkozóan // EFSA Journal. - 2005. - 20. évf. 3, 6. sz. - DOI: 10.2903/j.efsa.2005.226.

63. Sanders M.E., Morelli L., Tompkins T.A. Spóraképzők, mint humán probiotikumok: Bacillus, SporoLactobacillus és BreviBacillus // Átfogó áttekintések az élelmiszertudományról és az élelmiszerbiztonságról. - 2003. - 1. évf. 2, 3. sz. - P. 101-110.

64. Chitra N. Az orvostudományban és a fogászatban probiotikumok használatához kapcsolódó bakteriémia // International Journal of Innovative Research in Science, Engineering and Technology. - 2013. - Kt. 2, 12. sz. - P. 7322-7325.

65. Fuller R. Probiotikumok emberben és állatokban // J. Appl. Bacteriol. - 1989. - 1. évf. 66., 5. sz. - P. 365-378.

Készítette: Ph.D. A.V. Savustyanenko ■

Savustyanenko A.V.

MEHASHMI DM PROBUTIYUV ON OCHOBi BACILLUS SUBTILIS

Összegzés. A baktérium az egyik legígéretesebb probuyant, a maradék tízezer között. Mehashzmi 11 probyutichno! dc pov "yazash 1z protimrobnyh re-chovin szintézise, ​​poslennyam nem specifikus 1 specifikus 1 pép-tetu, normális növekedést serkentve! a bél mikroflórája és a növényi enzimek megjelenése. B. subtilis vidshyae riboszomálisan szintetizált peptidek, nem szintetizált riboszomális peptidek peptidek 1 nem peptidek 1z termékek széles választéka -teamzrobno!aktivitás, scho hoplyuye gram-pozitív, gram-negatív baktérium, v1rusi 1 gribi. Rezisztencia cikh protimshrobnyh beszédekkel vinikae rschko. Posilennya ne-

specifikus immunitás a pov "yazan aktiváló macrofapv i vivshnennyam 1z őket pro-ingnition cytoishv, pshvishchennyam bar"erno ellen! a funkcionalitás nyálkás! membránok a belekben, vidshennyam vggamshv i amchosavs (beleértve a nem velúrt is). A specifikus immunitás erősítése a T-i B-lsh-focytsh és a vivshnennyam többi immunglobulin - IgG és IgA - aktiválásával nyilvánul meg. A B.subtilis normálisan stimulálódik! bél mikroflóra, zokrema baktériumok, 1b Lactobacillus és Bifidobacterium nemzetség. Ezenkívül a probytik a bél mikroflórájának széles választékával rendelkezik. A probutik jelen van a bélrendszerben, és a következő enzimeken alapul: amshazy, lshazy, proteáz, pektin-

zi i celluláz. Az emésztés mellett a qi enzimek tönkreteszik az aHraxap40Bi factori i allergensh beszédet, ami segít abban, hogy jól éljen. Át kell dolgoznia a mechanizmusait, hogy a raktári B.subtilis stagnálását átfogó módon elő tudja állítani! bélrendszeri rendellenességek; légúti fertőzések akciói hidegben Eljött a sors ideje, a fenék elleni védekezés szocializálódott"! diarei; korrekcióhoz porushen

különböző eredetű zsírok túlfőzése, szárítása (étkezési hibák, táplálékfelvétel, bélrendszeri betegségek, vegetatív! idegrendszer károsodása) - a biotikumok nem jellemzőek a biztonság magas hatékonyságára.

Kulcsszavak: Bacillus subtilis, probytik, dp mechanizmusai.

Savustyanenko A.V.

A BACILLUS SUBTILIS ALAPJÁN ALAPULÓ PROBIOTIKUMOK HATÁSMECHANIZMUSAI

Összegzés. A B.subtilis baktérium az egyik legígéretesebb probiotikum, amelyet az elmúlt évtizedekben vizsgáltak. Probiotikus hatásmechanizmusai az antimikrobiális szerek szintéziséhez, a nem-specifikus és specifikus immunitás fokozásához, a bél normál mikroflóra növekedésének serkentéséhez és az emésztőenzimek felszabadulásához kapcsolódnak. A B.subtilis riboszomálisan szintetizált peptideket, nem riboszomálisan szintetizált peptideket és nem peptid anyagokat bocsát ki, amelyek széles spektrumú antimikrobiális aktivitással rendelkeznek, beleértve a Grampozitív, Gram-negatív baktériumokat, vírusokat és gombákat. Ezekkel az antimikrobiális szerekkel szembeni rezisztencia ritka. A nem specifikus immunitás fokozása a makrofágok aktivációjával és a belőlük pro-inflammatorikus citokinek felszabadulásával, a bélnyálkahártya barrier funkciójának fokozásával, vitaminok és aminosavak (beleértve az esszenciálisakat is) felszabadulásával jár. A specifikus immunitás fokozása a T- és B-limfociták aktiválásával és az utóbbiakból az immunglobulinok - IgG és IgA - felszabadulásával nyilvánul meg. B.subtilis stimu-

késlelteti a normál bélflóra, különösen a Lactobacillus és Bifidobacterium nemzetségbe tartozó baktériumok növekedését. Ezenkívül a probiotikum növeli a bél mikroflóra változatosságát. A probiotikum az összes fő emésztőenzimet a bél lumenébe választja: amilázokat, lipázokat, proteázokat, pektinázokat és cellulázokat. Az emésztés mellett ezek az enzimek elpusztítják a táplálékban található táplálkozásellenes tényezőket és allergén anyagokat. Ezek a hatásmechanizmusok indokolttá teszik a B. subtilis alkalmazását a bélfertőzések kezelésére szolgáló kombinációs terápiában; légúti fertőzések megelőzése a hideg évszakban; az antibiotikumokkal összefüggő hasmenés megelőzése; különböző eredetű táplálékemésztési és mozgási zavarok (étkezési hibák, étrendi változások, gyomor-bélrendszeri betegségek, vegetatív idegrendszeri zavarok stb.) korrekciójára. A B.subtilis rendszerint nem okoz mellékhatásokat. Ezt a probiotikumot magas hatékonysági és biztonsági arány jellemzi.

Kulcsszavak: Bacillus subtilis, probiotikum, hatásmechanizmusok.

A Bacillus subtilis az aerob, Gram-pozitív fajok egyik képviselője. Tekintettel arra, hogy szénakivonatot használnak e mikroorganizmus dúsító tenyészeteinek előállítására, a bacilus második neve Bacillus subtilis. először a híres német természettudós, Christian Gottfried Ehrenberg vezette be 1835-ben, de az ő értelmezésében ezt a mikroorganizmust Vibrio subtilisnek hívták. A mai Bacillus subtilis nevet pedig már 1872-ben kapta. Ma a bacillusok nemzetségének egyik leghíresebb és legalaposabb tanulmányozott képviselője.

Biológiai tulajdonságok

A Bacillust egy egyenes rúd alakja jellemzi, amely átlátszó szerkezettel rendelkezik. A Bacillus subtilis hozzávetőleges vastagsága 0,7 mikrométer. És egy ilyen bacilus hossza elérheti a két-nyolc mikrométert.

A Bacillus subtilis más bacilusokhoz hasonlóan osztódással szaporodik. Egyes esetekben a keresztirányú osztódás után a baktériumok továbbra is vékony filamentumokká kapcsolódnak.

A Bacillus subtilisben rejlő legfontosabb biokémiai tulajdonságok közül ki kell emelni a környezet savanyító képességét, valamint az antibiotikumokat. Ezeknek a tulajdonságoknak köszönhető, hogy a Bacillus subtilis, a Bacillus nemzetség tagja, képes csökkenteni a különféle opportunista és patogén mikroorganizmusok hatását. A Bacillus subtilis a következők antagonistája:

• élesztő gombák;
• szalmonella;
• protea;
• streptococcusok;
• staphylococcusok.

A Bacillus egyéb jellemző tulajdonságai a következők:

• vitaminok, aminosavak és immunaktív faktorok szintézise;
• olyan enzimek aktív termelése, amelyek képesek eltávolítani a rothadó szövetbomlás termékeit.

A Bacillus subtilis baktériumra jellemző a peritrichus flagelláció, valamint az ovális alakú spórák központi elhelyezkedése és a sejt méretét nem meghaladó méret. A Bacillus telepek fehérek vagy rózsaszínűek, szélük hullámos, valamint száraz és bársonyos szerkezetűek, apró ráncokkal borítva.

Növekvő bacillusok

A hatékonyság érdekében többféle környezetre lehet szükség:

• folyékony közeg, nevezetesen húsleves;
• szilárd táptalaj - húskivonat agar;
• , szintetikusan nyert;
• növényi maradványokat tartalmazó környezet.

A hús pepton agar fogalma általában univerzálisat jelent, amely sűrű vagy félfolyékony állagú lehet. Ez a táptalaj olyan összetevőket tartalmaz, mint a húsvíz, konyhasó, valamint zúzott és alaposan megmosott agar. Az autoklávban történő sterilizáláshoz legalább 120 ºC hőmérséklet szükséges, és ennek a folyamatnak körülbelül húsz-harminc percig kell tartania. A sterilizálás befejezése után a kész tápközeg természetesen lehűl, és sűrűbb állagot kap.

A Bacillus subtilis legkedvezőbb fejlődése +5 és +45 ºC közötti levegőhőmérsékleten garantált.

Veszélyes vagy nem?

A Bacillus patogenitásával kapcsolatban több vélemény is létezik. Így az Orosz Föderáció területén hivatalosan hatályos egészségügyi szabályoknak és előírásoknak megfelelően a Bacillus subtilis az opportunista baktériumok nemzetségébe tartozik.

Jpg" alt="Lány néz mikroszkópon keresztül" width="300" height="188" srcset="" data-srcset="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/07/Vyjavlenie-bakterij-300x188..jpg 640w" sizes="(max-width: 300px) 100vw, 300px"> Однако Большая Советская Энциклопедия, а также авторитетные зарубежные источники твердо настаивают на безопасности Бациллюса субтилис, утверждая, что данный микроорганизм является абсолютно не патогенным. В результате научных исследований была доказана безопасность данных бактерий из рода бацилл как для людей, так и для животных. Таким образом, Управление по контролю качества лекарственных и продовольственных средств в Соединенных Штатах Америки справедливо присвоило Bacillus subtilis статус абсолютно безопасных организмов.!}

Ennek ellenére azonban a Bacillus széna jelenléte különféle konzervekben, különösen halban, húsban és zöldségben semmilyen körülmények között nem megengedett. Mindig szem előtt kell tartani, hogy ha valamilyen okból spórák maradtak a konzervekben, amelyek megőrizték életképességüket, ez azt jelenti, hogy a termék +20 ºC-ot meghaladó hőmérsékleten történő tárolása esetén elkerülhetetlen a kórokozók elszaporodása. Ezért annak érdekében, hogy megóvjuk a konzerveket a Bacillus-tartalomtól, gondosan be kell tartani az ilyen típusú termékek elkészítésére vonatkozó összes technológiát és szabványt. A Bacillus subtilis jelenlétét a konzerv élelmiszerekben általában egy jellegzetes szürkés bevonat jelzi. Ezenkívül bizonyos kedvezőtlen változások lépnek fel a konzervek illata és állaga.

Alkalmazás az orvostudományban és más területeken

Data-lazy-type="image" data-src="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus3-300x236.jpg" alt="baktisubtil" width="300" height="236" srcset="" data-srcset="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus3-300x236..jpg 382w" sizes="(max-width: 300px) 100vw, 300px"> Благодаря биохимическим свойствам достаточно широко распространено применение Бациллюса в производстве медицинских препаратов. Так, Bacillus subtilis из рода бацилл, согласно фармакологическому указателю, принадлежит к таким категориям, как:!}

• Hasmenés elleni szerek.
• Egyéb immunmodulátorok.

Az ilyen gyógyszerek fő funkciója a bélflóra normál aktivitásának és egyensúlyának szabályozása. Ennek fenntartása eredményeként normál szinten A dysbacteriosis minden megnyilvánulása teljesen megszűnik.

A Bacillus készítményeket olyan állapotokra írják fel, mint:

• bél dysbiosis, amelynek természete és eredete eltérő;
• akut bélfertőzések, széles körben elterjedt gyermekeknél;
• bakteriális vaginosis;
• posztoperatív időszak gennyes-szeptikus szövődményekkel.

A Bacillus subtilis készítmények ideális esetben megőrzik minden előnyös tulajdonságukat, ha a tárolási szabályokat betartják. Az optimális levegőhőmérséklet ebben az esetben 25 ºC. Emellett nagyon fontos odafigyelni a csomagoláson feltüntetett lejárati időre. A Bacillus subtilis gyógyszer szuszpenzió formájában van, 2, 5 és 10 milliliteres palackokban.

Emlékeztetni kell arra, hogy a Bacillus nemzetségből származó baktérium használatának bizonyos ellenjavallatai is vannak. Ez elsősorban a gyógyszerek alkotóelemeivel szembeni fokozott érzékenység.

A Bacillus hatóanyagként készített legnépszerűbb gyógyszerek a következők:

Data-lazy-type="image" data-src="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus1.jpg" alt="biosporin" width="300" height="185">!}

A thuringiensis baktérium jellemzői

Egy másik, a Bacillus thuringiensis nemzetségbe tartozó Gram-pozitív baktérium is képes a spórásodás során kristályszerű szerkezetű zárványokat képezni. Delta-endotoxinokat tartalmaz - az entomocid fehérjék kategóriájába tartozó anyagokat. Az ilyen „kristály” alakja különböző lehet - köbös, bipiramis vagy kerek. A baktérium különleges tulajdonságai lehetővé teszik a biológiai növényvédelem területén történő felhasználását.

A Bacillus subtilis fontos tulajdonságai és jellemzői

A Bacillust különleges tulajdonságok jellemzik, amelyek lehetővé teszik az orvostudományban való széles körben történő alkalmazását. A bacilusok fő típusai a következők:

• elterjedt a vadon élő állatokban;
• biztonság és ártalmatlanság mind az emberek, mind az állatok számára;
• magas enzimaktivitás az emésztőrendszer optimális szabályozásához és stimulálásához;
• kiváló ellenállás az emésztő és lítikus enzimekkel szemben;
• környezeti biztonság és széles hőmérsékleti tartományban való ellenállás.

Jpg" alt="bacillus széna" width="300" height="225" srcset="" data-srcset="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus4-300x225..jpg 285w, https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus4.jpg 640w" sizes="(max-width: 300px) 100vw, 300px"> !}