Un medicament care reglează echilibrul microflorei intestinale Bacillus subtilis. O tulpină de bacterii bacil subtilis utilizată pentru obținerea unui preparat probiotic destinat prevenirii și tratarii bolilor gastrointestinale din agricultură.

480 de ruble. | 150 UAH | 7,5 USD ", MOUSEOFF, FGCOLOR, "#FFFFCC",BGCOLOR, "#393939");" onMouseOut="return nd();"> Disertație - 480 RUR, livrare 10 minute, non-stop, șapte zile pe săptămână și sărbători

Gataullin Airat Gafuanovici. Proprietățile biologice ale tulpinilor de Bacillus subtilis, promițătoare pentru crearea de noi probiotice: Dis. ...cad. biol. Științe: 03.00.07 Moscova, 2005 131 p. RSL OD, 61:05-3/1040

Introducere

Capitolul 1. Antagonismul microbian - baza creării de medicamente bioterapeutice pentru corectarea stărilor disbiotice 9

Capitolul 2. Probioticele cu spori și efectul lor asupra macroorganismului 18

2.1. Preparate din bacterii din genul Bacillus 18

2.2. Idei moderne despre mecanismele de acțiune terapeutică și profilactică a probioticelor din bacterii din genul Bacillus 26

2.3. Substanțe biologic active produse de bacteriile aerobe care formează spori 32

2.4. Factorii de patogenitate ai bacteriilor din genul Bacillus 34

Capitolul 3. Obiecte și metode de cercetare 41

3.1. Obiecte de cercetare 41

3.2. Metode de cercetare 43

3.2.1. Echipamente și tehnici 45

Capitolul 4. Caracteristicile tulpinilor izolate 53

4.1. Studiul proprietăților morfologice și fiziologico-biochimice ale tulpinilor 53

4.2. Activitatea antagonistă și adezivă a tulpinilor de B. subtilis în experimente in vitro 55

4.3. Determinarea rezistenței la antibiotice și a profilului plasmidic al tulpinilor de B.subtilis 57

Capitolul 5. Efectul tulpinii B.subtilis 1719 asupra macroorganismului 62

5.1. Studiul toxicității, toxicității, virulenței și activității probiotice a tulpinii B. subtilis 1719 în experimente in vivo 62

5.2. Studierea efectului tulpinii 1719 de B. subtilis asupra parametrilor de imunitate în experimente in vivo cu disbioză experimentală 70

Capitolul 6. Caracteristicile tehnologice ale tulpinii B.subtilis 1719 ca bază a unui preparat probiotic 76

6.1. Evaluarea proprietăților de creștere pe diferite medii nutritive lichide 76

6.2. Studiul viabilității și activității antagoniste a tulpinii B.subtilis 1719 în timpul depozitării 84

Capitolul 7. Caracteristici comparative ale proprietăților tulpinii B.subtilis\l\9 și tulpinilor care stau la baza unor preparate probiotice comerciale. 94

Concluzia 98

Concluzii 107

Referințele 108

Introducere în lucrare

Relevanța problemei

V Pornit scena modernă au apărut altele noi în microbiologia medicală

date care justifică utilizarea microflorei saprofite, care este capabilă să producă substanțe biologic active (BAS) în timpul activității lor de viață, care suprimă creșterea microorganismelor patogene, a tumorilor maligne și normalizează diferite procese patologice și biochimice din corpul uman.

În ultimul deceniu, produsele biologice bazate pe culturi microbiene vii de bacterii formatoare de spori au fost utilizate pe scară largă pentru prevenirea și tratamentul bolilor tractului gastrointestinal.

Genul de bacterii Bacil, Una dintre cele mai diverse și răspândite grupuri de microorganisme, acestea sunt componente importante ale florei exogene a oamenilor și animalelor.

* Genul Bacil a atras atenția cercetătorilor încă din cele mai vechi timpuri. Nako-

- a acumulat cunoștințe în domeniul microbiologiei, fiziologiei, biochimiei, geneticii

bacteriile indică beneficii Bacil ca producatori de substante biologic active: enzime, antibiotice, insecticide. Adaptabilitate ridicată la diferite condiții de viață (prezența sau absența oxigenului, creșterea și dezvoltarea într-o gamă largă de temperaturi, utilizarea diferiților compuși organici sau anorganici ca surse de hrană etc.) contribuie la răspândirea bacililor în sol, apă, aer, produse alimentare și alte obiecte externe

]t mediu, precum și în corpul oamenilor și al animalelor.

I Diversitatea proceselor metabolice, genetice și biochimice

variabilitatea, rezistența la enzimele litice și digestive, au servit drept justificare pentru utilizarea bacililor în diferite domenii ale medicinei.

„4 cins. Food and Drug Administration

Fonduri americane, deturnate Bacillus subtilis Statutul GRAS (în general considerat sigur) - organisme complet sigure, care este o condiție prealabilă

5 pentru utilizarea acestor bacterii în producerea de medicamente.

Activitatea bacililor se manifestă împotriva unei game largi de microorganisme patogene și condiționat patogene. Datorită sintezei diferitelor enzime și a altor substanțe, acestea reglează și stimulează digestia și au efecte anti-alergenice și anti-toxice. La utilizarea bacililor, rezistența nespecifică a macroorganismului crește semnificativ. Aceste microorganisme sunt ușor de fabricat, stabile la raft și, cel mai important, ecologice.

Medicamentele terapeutice și profilactice pe bază de microbi vii nepatogeni, capabile să asigure, printr-o metodă naturală de administrare, efecte benefice asupra funcțiilor fiziologice și biochimice ale organismului gazdă prin optimizarea stării sale microbiologice, sunt în prezent clasificate drept medicamente probiotice.

Dintre bacili, tulpinile de cel mai mare interes sunt B. subtilis.În ceea ce privește cunoașterea proprietăților genetice și fiziologice, acestea ocupă locul al doilea după E coli. Despre mari oportunități B. subtilisîn biotehnologie este dovedită prin crearea unei bănci de date privind genetica moleculară a acestei tulpini - SubtiList, în care sunt introduse toate informațiile despre genomul bacterian.

Analiza rezultatelor cercetărilor științifice efectuate în țara noastră și în străinătate indică amploarea utilizării bacteriilor din genul Bacil pentru a obține produse din biomasa bacteriană sau metaboliții acestora. Metode cunoscute de cultivare a bacteriilor din gen Bacil stau la baza tehnologiei de producere a unui număr de preparate bacteriene și enzimatice. .

Pe baza bacteriilor vii din genul Bacillus, au fost create preparate probiotice care sunt inofensive pentru macroorganism, au o gamă largă de efecte terapeutice și profilactice și sunt sigure pentru mediu. Rezultatele privind utilizarea animalelor au o importantă semnificație științifică și practică.

noi culturi microbiene ale genului Bacil pentru tratamentul bolilor gastrointestinale la oameni și animale de fermă.

În prezent, medicamentele probiotice bine-cunoscute sunt utilizate pe scară largă în asistența medicală practică: bactisubtil, sporobacterin, biosporin, bactisporin, subalin, cereobiogen, enterogermin și altele.

Indicațiile pentru utilizare terapeutică și eficacitatea terapeutică a acestor medicamente sunt limitate de proprietățile tulpinilor utilizate pentru producerea lor. Spectrul activității antagoniste împotriva microorganismelor patogene și oportuniste care provoacă tulburări microecologice în diferite biotopuri ale corpului uman sau animal are o importanță decisivă. În plus, nu se poate ignora capacitatea bacililor de a produce substanțe biologic active (antibiotice polipeptidice, enzime etc.) și rezistența lor la antibiotice.

Diversitatea și rezistența la antibiotice emergente a microorganismelor implicate în dezvoltarea tulburărilor disbiotice, pe de o parte, precum și variabilitatea capacităților biosintetice în diferite tulpini B. subtilis, pe de altă parte, ele determină oportunitatea monitorizării constante a tulpinilor care au activitate probiotică vizată și/sau sunt producători de diferite substanțe biologic active.

Scopul lucrării:

Studiați proprietățile biologice ale tulpinilor izolate B. subtilisși evaluează posibilitatea utilizării lor pentru dezvoltarea unui probiotic spori original.

Obiectivele cercetării:

1. Studiază proprietățile morfologice, fiziologic-biochimice, antagoniste, adezive și alte proprietăți ale culturilor izolate B. subtilisîn experimente in vitro și selectați cea mai promițătoare tulpină pentru cercetări ulterioare.

Evaluați activitatea probiotică a tulpinii selectate B. subtilisîn experimente in vivo.

Selectați un mediu nutritiv care este optim pentru acumularea de biomasă a tulpinii studiate B. subtilis.

Determinați viabilitatea și activitatea antagonistă a tulpinii selectate B. subtilisîn timpul depozitării.

Comparați proprietățile tulpinii originale B. subtilisși culturi utilizate pentru producerea de preparate probiotice comerciale.

Noutate științifică.

Pe baza studiului proprietăților morfologice, fiziologic-biochimice, genetice și a altor proprietăți biologice ale tulpinilor izolate, a fost selectată o tulpină fără plasmide. B. subtilis 1719, manifestând antagonism față de microorganisme oportuniste și patogene din diferite grupe taxonomice, având activitate adezivă scăzută, rezistente la gentamicină, polimixină și eritromicină.

Abordările pentru crearea tehnologiei de producție, inclusiv studiul proprietăților de creștere ale tulpinii, au fost fundamentate experimental B. subtilis 1719 pe medii nutritive originale, condiții pentru stabilizarea viabilității și a activității antagoniste ca etape în obținerea unui nou medicament probiotic.

A fost depusă o cerere de invenție (nr. 2005111301 din 19 aprilie 2005): „Tulpina de bacterii Bacillus subtilis 1719 este un producător de biomasă activă antagonic împotriva agenților patogeni, precum și a enzimelor proteolitice, amilolitice și lipolitice.”

Semnificație practică.

Tulpina izolată și identificată B. subtilis 1719 depus în Colecția de Stat de Culturi GISC numită după. LA. Tarasevici sub nr. 277 și

Principalele dispoziții depuse pentru apărare:

Cele trei tulpini identificate de culturi bacteriene corespund speciilor din punct de vedere morfologic, fiziologic, biochimic și alte proprietăți. B. subtilis. Nu conțin plasmide, sunt active antagonic împotriva bacteriilor oportuniste și patogene din diferite grupe taxonomice și au un nivel scăzut sau mediu de aderență.

Încordare B.subtilis 1719 are proprietăți probiotice, manifestate în eliminarea microorganismelor oportuniste și patogene cu restabilirea cantitative și compoziție de calitate microfloră normală în disbioza experimentală și are, de asemenea, un efect imunomodulator asupra macroorganismului.

După caracteristicile tehnologice, tulpina B.subtilis 1719 poate fi recomandat ca candidat pentru crearea unui medicament probiotic original.

9 REVIZIA LITERATURĂ Capitolul 1. Antagonismul microbian stă la baza creării medicamentelor bioterapeutice pentru corectarea stărilor disbiotice

Macroorganismul si microflora sa sunt un singur sistem ecologic, care incepe sa se formeze din momentul nasterii si se afla intr-o stare de echilibru dinamic, fiind un mecanism natural de protectie impotriva influentelor patologice. Reprezentând o biocenoză deschisă, microflora tractului gastrointestinal include multe microbiocenoze locale care ocupă unul sau altul biotop în corpul uman sau animal. Biotopii tractului digestiv sunt localizați în direcția verticală (proximodistală) și orizontală. Pe lângă lumen, microflora intestinală în direcția orizontală poate fi localizată în două secțiuni ale membranei mucoase: în stratul de glicoproteine ​​mucoase, glicocalixul, format din glicoproteine ​​și glicolipide deasupra membranelor celulelor epiteliale.

Microfloră normală oameni sanatosi iar animalele sunt de obicei împărțite în indigene sau rezidente, caracteristice unei anumite specii și tranzitorii. În tractul digestiv au fost găsite aproximativ 500 de specii de microorganisme. Mai mult de 97% din numărul total de bacterii intestinale include anaerobi non-spori - Bifidobacterium, Bacteroides, Lactobacillus, Eubacterium, al carui continut ajunge la 10% CFU la 1 gram de fecale.Numarul de microorganisme anaerobe facultative (Escherichia coli, Enterococcus spp., Staphylococcus spp. etc.) de sute de ori mai jos.

Unul dintre aspectele importante ale funcției de protecție a bacteriilor din microflora normală este activitatea antagonistă împotriva microorganismelor patogene și condiționat patogene. Datorită activității biochimice a reprezentanților sistemului microecologic al tractului digestiv, care asigură producerea de substanțe cu activitate antagonistă pronunțată, microorganismele patogene care intră din exterior sunt eliminate rapid.

10 din intestine. Acest lucru previne dezvoltarea unui proces infecțios.

* Antagonismul bacterian poate fi realizat din cauza celulelor

contact, în urma căruia agenții antibacterieni sunt transferați de la tulpinile inhibitoare la tulpina țintă. În unele cazuri, rezistența la colonizare se realizează printr-o combinație a acțiunii antagoniste a anumitor reprezentanți ai microflorei normale și (sau) metaboliților acestora, precum și apariția unor anticorpi specifici.

Fuller R. și Lenzner A.A. cu coautor a dovedit rolul lactobacililor în menținerea echilibrului microbian datorită producerii de acid lactic și aderenței specifice la epiteliul colonului. Activitatea lor antagonistă împotriva bacteriilor patogene a fost demonstrată, în special Salmonella typhimurium.

Bifidobacteriile, producătoare de acizi acetic și lactic, previn proliferarea microflorei putrefactive și patogene, normalizează peri-

^ oțel și, de asemenea, promovează absorbția calciului, fierului, vitaminei D și

participă la procesele de formare a vitaminelor.

Vollaard E.J. et al. a observat că E. coli afectează dezvoltarea și starea sistemului imunitar local asociat cu membrana mucoasă și oferă protecție gazdei împotriva infecțiilor cauzate de microorganismele enteropatogene. Ia parte la descompunerea proteinelor și carbohidraților, transformările metabolice ale colesterolului, acizilor biliari, acizi grași.

U E coli au si proprietati carcinolitice. Karapetyan A.O.

J tulpini izolate de Escherichia coli și fecale

go enterococcus, care in vitro avea capacitatea de a provoca necroza celulelor canceroase. În același timp, bacterii izolate de la bolnavii de cancer

nu avea astfel de proprietăți. Acest microb sintetizează 8 vi-

tamine: B] 5 B 2, B 6, B12, K, acizi nicotinic și pantotenic, biotină. In afara de asta, E coli creează mediul anaerob necesar pentru anaerob strict

bov, absorbind Og difuzand din sistem circulator prin peretele intestinal în lumen. Observațiile asupra colonizării microbiene naturale a intestinelor nou-născuților și experimentele privind implantarea microbilor în intestinele animalelor gnotobiologice au descoperit că bacteriile anaerobe încep de obicei colonizarea numai după ce bacterii precum E coli.

Regulatori importanți ai creșterii bacteriene în intestin sunt diverse substanțe biologic active, exoenzime și bacteriocine, de exemplu colicine, microcine, lizozime etc. Majoritatea autorilor consideră că bacteriocinele diferă de antibioticele „clasice” într-un spectru mai îngust. acțiune antibacteriană, deoarece acestea inhibă în mod specific creșterea bacteriilor din aceeași specie sau din specii înrudite filogenetic. De exemplu, enterobacteriile patogene suprimă microflora normală și se răspândesc nestingherite în intestine. Este posibil ca colicinele din reprezentanții Escherichia coli, prin suprimarea creșterii microorganismelor, să joace rolul factorilor de rezistență naturală a macroorganismului.

De menționat că rezistența la colonizare este asigurată atât de reprezentanții microflorei anaerobe predominante, cât și de bacteriile aerobe facultative, a căror importanță a început să fie subestimată artificial în anii 70 ai secolului trecut. Proprietăți protectoare E coli sunt cauzate nu numai de antagonism la nivel metabolic (bifidobacterii, bacterii lactobacili), ci pot fi și indirecte prin intermediul macroorganismului. Cu toate acestea, relație intimă E coli odată cu acesta, asigurând „maturarea” epiteliului mucoasei intestinale și formarea așa-numitei imunități naturale, provoacă, de asemenea, un comportament mai „agresiv” al microbilor.

Microflora normală joacă un rol important de declanșare în mecanismul de formare a imunității și reacții de protecție specifice în dezvoltarea postnatală a macroorganismului.

Rolul microflorei în dezvoltarea răspunsului imun se datorează proprietăților sale imunomodulatoare universale, care includ imuno-

stimulare și imunosupresie, precum și importante proprietăți adjuvante și imunogene. Se știe că lipopolizaharidele bacteriene (LPS) au un efect imunoreglator asupra răspunsului imunitar Ig A și joacă rolul de adjuvanți. Microflora asigură dezvoltarea unui complex de reacții imunologice nespecifice și specifice, formând mecanisme de adaptare și de protecție.

Astfel, microflora tractului digestiv trebuie considerată ca un singur sistem microecologic, format în timpul evoluției, care îndeplinește și reglează numeroase funcții ale organismului gazdă, menținând rezistența la colonizare și menținând astfel homeostazia acestuia.

Cercetătorii francezi au respins opinia predominantă despre indiferența părții tranzitorii a microflorei normale, atât în ​​raport cu alte bacterii, cât și cu macroorganismul. Unele tulpini de Escherichia tranzitorie și bifidobacterii au redus semnificativ producția de toxine C.dificile V tract intestinal animale gnotobionte. Bacilul cereus- un microorganism aerob care formează spori izolat din sol a fost utilizat ca reprezentant al microflorei tranzitorii în medicamentul „Cereobiogen” (China) pentru tratamentul bolilor diareice la copii. Durata șederii sale în intestine este de 4 zile, dar în acest timp favorizează proliferarea florei bifide și dispariția aproape completă a simptomelor clinice ale bolii. Oamenii de știință indieni au descoperit că microbii cu un statut tranzitoriu, și nu doar reprezentanți ai microflorei rezidente, sunt capabili să producă vitamine și să detoxifice produsele toxice. Ei au identificat specii din gen Bacil din intestinul subțire al șobolanilor, capabil să distrugă neurotoxinele, hemaglutininele prezente în fasole. Reprezentanți ai genurilor Bacil șiKlebsiella sintetizează vitaminele B6, B2, B^, nicotinice și acid folic.

Diverse boli de natură infecțioasă și neinfecțioasă, precum și multe altele factori nefavorabili(schimbarea condițiilor climatice-

13 dragoste, expunere la radiații, erori în alimentație, deteriorarea stării fiziologice generale, tulburări somatice, utilizare medicamente, modificările în organism legate de vârstă etc.), care acționează direct sau indirect, au un impact negativ asupra sistemului microecologic complex al macroorganismului în favoarea activării microflorei condiționat patogene.

Disbioza- aceasta este orice modificare cantitativă sau calitativă a compoziției microflorei normale a unei persoane sau a unui animal, tipică pentru un anumit biotop, care rezultă din influența diverșilor factori de natură exogenă și endogenă, care implică manifestări clinice pronunțate din partea macroorganismul sau este o consecință a proceselor patologice care se dezvoltă în acesta. Factorii care conduc la tulburări ale microflorei, de ex. până la disbioză, sunt foarte numeroase. Aparent, acesta este motivul pentru care aproape 90% din populația țării noastre, într-o măsură sau alta, suferă de disbioză. Ele sunt de obicei asociate cu tulburări ale sistemului imunitar. Evident, modificările florei normale, starea stării imune și manifestarea bolii trebuie luate în considerare în unitate, iar rolul declanșatorului în fiecare caz specific poate aparține oricăreia dintre aceste componente ale triadei. În unele cazuri, disbioza dă impuls dezvoltării procesului patologic în mod direct, în alte cazuri apare prin dezvoltarea imunodeficienței, în altele provoacă aceste procese interdependente.

Cu toate acestea, în În ultima vreme Disbioza intestinală este din ce în ce mai mult considerată o consecință a tulburărilor imunologice emergente.

Manifestările clinice ale disbiozei sunt diverse: tulburări dispeptice (constipație, diaree), tulburări metabolice, boli inflamatorii catarrale (gastrită, duodenită), boli purulent-inflamatorii și complicații de localizare diferită, ulcer peptic de stomac și duoden, hepatită, neoplasmă malignă. , alergii etc. .

Încercările de a utiliza numai medicamente antimicrobiene pentru prevenirea și tratamentul disbiozei s-au dovedit a fi ineficiente și, în unele cazuri, au agravat procesul început. Acest lucru determină oportunitatea utilizării terapiei corective, inclusiv probiotice, suplimente alimentare și remedii pe bază de plante pentru a restabili eubioza.

De la descoperirea capacității diferitelor culturi microbiene de a suprima creșterea altor microorganisme, în special a celor patogene, cei mai importanți oameni de știință natural au lucrat la această problemă. uz practic fenomene de antagonism microbian (L. Pasteur, I. I. Mechnikov, N. F. Gamaleya etc.). Ideea de fezabilitate a reglementării compoziției microflora intestinalăîn cazul încălcărilor sale, exprimate de I.I. Mechnikov, a condus la dezvoltarea unei noi direcții în medicină - terapia bacteriană, crearea de preparate biologice probiotice din bacterii vii, reprezentanți ai microflorei umane normale.

Termenul de „probiotice” a fost propus în 1974 de către Parker pentru a se referi la organisme și substanțe care asigură echilibrul microflorei intestinale. Au fost propuse mai multe criterii pentru selectarea tulpinilor de microorganisme ca preparate probiotice: apatogenitate, colorație Gram specifică, rezistență la acizi și oxidanți, colonizare și (sau) aderență la celulele tractului digestiv, eliberare de factori anti-coliformi, rezistență la bilă. , viabilitate și stabilitate.

Probioticele sunt folosite pentru corectarea tulburărilor microecologice în acute și boli cronice si disfunctii ale tractului gastro-intestinal, cu tulburari metabolice, dupa terapie antibacteriana, hormonala si radioterapie, in perioadele preoperatorii si postoperatorii, in conditii nefavorabile etc. . Efectul bioterapeutic al acestora poate fi asociat cu un efect antagonist direct asupra microbilor patogeni și oportuniști, ducând la scăderea numărului acestora, cu efect asupra metabolismului lor, sau cu stimularea sistemului imunitar.

Preparatele - probioticele, sunt realizate din bacterii vii active antagonic, care sunt reprezentative ale microflorei normale a intestinului uman: E. coli (colibacterin), bifidobacteria (bifidumbacterin, bifidumbacterin forte, bifilis), un amestec de E. coli si bifidobacteria (bificol). ), lactobacili (lactobacterin, acylact, acipol ). ÎN anul trecut Pentru tratamentul disbiozei, în practica medicală au fost introduse medicamente domestice bazate pe reprezentanți vii apatogeni activi antagonic ai genului. Bacil: sporobacterină, bactis-porină, biosporină.

Atunci când sunt luate per os, microorganismele care stau la baza probioticelor, dintre care majoritatea sunt și reprezentanți ai florei normale a tractului gastrointestinal, îl populează, ajutând la normalizarea biocenozei și, în consecință, la restabilirea funcțiilor digestive, metabolice și de protecție. Un mecanism similar de acțiune are loc cu alte metode de aplicare (de exemplu, vaginală).

Când luați probiotice, de regulă, acestea nu se dezvoltă reactii adverseși nu au contraindicații de utilizare.

Majoritatea probioticelor (bifidumbacterin, lactobacterin, acipol, acylact, bifiliz) pot fi folosite inca din primele zile de viata, inclusiv pentru bebelusii prematuri.

În prezent, la selectarea și caracterizarea culturilor de producție de microorganisme se iau în considerare următorii indicatori: spectrul și nivelul activității antagoniste, fabricabilitatea, i.e. capacitatea de acumulare rapidă a biomasei, rezistența la liofilizare, viabilitatea în timpul depozitării. Spectrul rezistenței lor la antibiotice este, de asemenea, important.

O atenție deosebită este acordată criteriilor de siguranță ale tulpinilor utilizate pentru sănătatea umană.

Pe baza combinației de proprietăți fiziologice și biochimice și factori ai activității biologice, cele mai promițătoare pentru crearea de probiotice din

microflora neindigenă s-a dovedit a fi bacili, în principal legate de B.subtilis, B.pumilus, B.polymyxa. Aceste specii, izolate stabil dintr-o varietate de biotopi, inclusiv din corpul și țesuturile animalelor cu sânge cald, insectelor și plantelor, nu au provocat modificări patologice la acestea din urmă.

Un interes deosebit este problema proprietăților biologice ale bacteriilor spori izolate din corpul uman sau animal, din punctul de vedere al înțelegerii mecanismelor efectului acestora asupra macroorganismului. În plus, această problemă este importantă pentru identificarea de noi rezerve pentru crearea unor medicamente terapeutice și profilactice eficiente, deoarece aproape jumătate dintre bacilii izolați prezintă proprietăți antagoniste față de diferite bacterii și ciuperci patogene și condiționate patogene, tulpinile prezentând cea mai mare activitate. Bacillus subtilis.

A fost stabilită capacitatea lor de a sintetiza antibiotice polipeptidice cu greutate moleculară mică.

O tulpină a fost propusă ca antagonist al Mycobacterium tuberculosis B. subtilisMZh-6, care le-a suprimat creșterea in vitro în 96,2% din cazuri. .

S-a descoperit că bacteriile din gen Bacil capabile să exercite un efect antagonist asupra bacteriilor de diferite tipuri Klebsiella(336 culturi). Diverse Tulpini B. subtilis a suprimat creșterea a 57-83% din culturi K. ozaenae, 50-100% culturi K. rinoscleromata, 64-95% - K. pneumoniae. Aproape toate tulpinile de bacterii din genul au fost testate Klebsiella s-a dovedit a fi sensibil la anumite culturi V. subtilis,în același timp, un număr semnificativ de Klebsiella au fost sensibile simultan la acțiunea mai multor culturi de Bacillus subtilis.

La studierea activității antagoniste a 150 de tulpini proaspăt izolate B. subtilis relativ K. rhinos cleromatisîn experimente in vivo și in vitro, antagonismul a fost detectat în 114 culturi în raport cu 5 tulpini testate K.rinoscleromata. Dintre tulpinile de bacili studiate, cele mai active au fost cele izolate din tractul gastrointestinal al animalelor de fermă.

17 Pe baza proprietăților biologice unice identificate ale bacteriilor din gen Bacil,În ultimele decenii, atenția cercetătorilor a fost atrasă asupra problemelor creării de medicamente bazate pe bacterii aerobe vii care formează spori și studierea efectului acestora asupra macroorganismului.

Idei moderne despre mecanismele de acțiune terapeutică și profilactică a probioticelor din bacterii din genul Bacillus

În stadiul actual, se poate considera stabilit că efectul terapeutic al probioticelor din spori este determinat de un complex de factori, inclusiv capacitatea de a produce bacteriocine care suprimă creșterea microorganismelor patogene și condiționat patogene, enzime foarte active (proteaze, ribonucleaze, transaminaze și altele), precum și substanțe care neutralizează toxinele bacteriene. Dovada inofensivității macroorganismului este oferită de datele experimentale că în câteva zile după administrarea parenterală, B.subtilis este eliminat din organism.

Un studiu al mecanismului efectului terapeutic și profilactic al medicamentelor probiotice asupra corpului uman și animal a arătat că bacilii sunt capabili să pătrundă din tractul gastrointestinal în sânge și de acolo în leziune, menținând viabilitatea. După administrarea orală, deja în primele minute, aproximativ 0,1% din numărul total de bacterii au pătruns în organele parenchimatoase prin mucoasele orofaringelui, esofagului și stomacului. Translocarea asimptomatică a microorganismelor a fost observată la 6-8 ore după o singură doză de medicament, ceea ce a determinat timpul de expunere a medicamentului la macroorganism. Conform electroforezei bidimensionale, în 0-10 minute după germinarea sporilor, tulpina B. subtilis 168 a sintetizat 65 de exoproteine, la 10-20 de minute - 210 proteine, iar în total în timpul creșterii celulelor vegetative a produs 260 de proteine.

Există o presupunere că fenomenul de translocare a microorganismelor în organele și țesuturile indivizilor sănătoși este un proces dinamic format evolutiv, care determină în mare parte participarea microflorei generale normale la formarea reacțiilor de protecție ale macroorganismului.

Ca urmare a translocării bacililor în sângele și organele animalelor cu sânge cald, nu apar modificări patologice. Acest proces ar trebui considerat ca una dintre verigile inițiale în mecanismul natural de stimulare a rezistenței nespecifice împotriva tuturor microorganismelor. În același timp, nu pot fi excluse posibile consecințe adverse pentru macroorganism în cazurile în care pătrunderea microorganismelor patogene are loc pe fondul unei slăbiri generale sau locale a mecanismelor de protecție.

Având în vedere conceptul de componentă exogenă a microflorei normale (care vine cu alimente, aer, apă) și translocarea asociată a bacililor în organe și sânge, fezabilitatea administrării orale a probioticelor s-a dezvoltat pe baza reprezentanților exogeni ai microflorei. este confirmat. .

Efectul antagonist al bacililor se realizează datorită producției de substanțe biologic active de natură diferită: antibiotice polipeptidice, lizozimă, enzime litice.

Activitatea enzimatică ridicată a bacililor are valoare pozitivă din punctul de vedere al îmbogățirii secrețiilor gastrice cu enzime suplimentare, inclusiv paradigestative. S-a arătat, de exemplu, că culturile incluse în Biosporin sau Bakterin-SL au prezentat activitate pectolitică pronunțată (0,1-0,2 unități/ml), au proprietăți celulolitice și au sintetizat un complex de enzime proteolitice. Activitatea proteolitică totală a corespuns la 4,2-5,7 unităţi/ml, activitatea amilazei a fost 11-15 unităţi/ml, lipază - 70-127 umol, acid oleic - 5-10 unităţi/ml. Lichidul de cultură al tulpinii B. subtilis a conținut următoarele activități enzimatice: 1,3-1,4 glucanază, 1,3-1,4 glucozidază, .

Folosind un model de pielonefrită la șoareci, s-a demonstrat că utilizarea Biosporinei a contribuit la o eliminare mai rapidă a S. aureus din rinichi, comparativ cu animalele martor, datorită stimulării macrofagelor. Datele obținute au sugerat că produsele biologice din bacili sunt promițătoare nu numai pentru corectarea microflorei tractului gastrointestinal, dar, eventual, și pentru tratamentul infecțiilor bacteriene localizate în afara tractului gastrointestinal.

Studiul proprietăților morfologice și fiziologico-biochimice ale tulpinilor

Pentru a acumula neutrofile peritoneale, animalelor li s-au injectat intraperitoneal 2 ml dintr-o soluție de cazeină 1%; După 4-5 ore, șoarecii au fost uciși prin translocarea vertebrelor cervicale utilizând premedicație cu eter conform regulilor de tratament uman al animalelor. Lichidul peritoneal a fost obținut prin spălarea cavității abdominale cu soluție Hanks cu heparină pentru a evita agregarea neutrofilelor. Din fluidul peritoneal obținut de la 5 șoareci dintr-un grup de animale s-a format un grup de celule. Studiul morfologic a arătat că 70-85% din conținutul celular erau neutrofile. Viabilitatea celulară a depășit 95%. Pool-ul de celule a fost centrifugat la 1500 rpm timp de 10 min. Apoi s-au adăugat 300 μl de ser bovin (ser bovin) și acid acetic 3%, iar numărul de neutrofile izolate a fost numărat într-o cameră Goryaev.

Metodologia de realizare a testului de reducere a tetrazoliului nitroblue (test NBT), spontan si stimulat in vitro. Metoda se bazează pe capacitatea neutrofilelor de a absorbi tetrazoliul nitroblue și de a-l reduce în granule albastre de diformazan insolubil (DF). Restaurarea NBT este asigurată de energia și produsele reacțiilor redox ale „exploziei metabolice” care însoțesc procesul de fagocitoză, precum și de o creștere a metabolismului neutrofilului activat. Există teste NBT spontane și induse. Rezultatele testelor spontane indică numărul de celule activate din probe. Rezultatele testului stimulat dau o idee despre capacitatea neutrofilelor A studiate de a se activa in vitro. Reacția a fost efectuată în plăci cu fund plat cu 96 de godeuri pentru studii imunologice. La analiza activității spontane, în godeu s-au adăugat următoarele: 50 μl dintr-o soluție NCT 0,4%, 50 μl dintr-un mediu de incubare (soluție IS-0,85% NaCl cu 20% ser din sânge de bovine) și 100 μl dintr-o suspensie celulară . Pentru a analiza activitatea indusă, în fiecare godeu s-au adăugat următoarele: 50 μl de soluție NCT, 50 μl de suspensie de stimulator (zimosan opsonizat (o/z) și neopsonizat (n/z) la un raport de 20 particule/ celulă) și 100 μl dintr-o suspensie celulară. Fiecare variantă de reacție a fost efectuată în 2 teste paralele. Controlul reactivului a fost efectuat prin înlocuirea suspensiei celulare cu un volum echivalent de IS. Placa a fost incubată timp de 20 de minute la 37°C. Pentru a opri reacția de reducere a NBT și de sedimentare a celulelor care conțin DF, placa a fost centrifugată timp de 10 minute la 500 g. Celulele depuse în godeuri au fost fixate cu alcool etilic 96% și spălate o dată cu o soluție de NaCI 0,85%. Distrugerea celulelor și dizolvarea DF format a fost realizată prin adăugarea a 130 μl de dimexid și 70 μl de KOH 2M în fiecare godeu, urmată de incubare timp de 20 de minute la 60°C. Conținutul godeurilor a căpătat o culoare turcoaz, a cărei intensitate depindea de cantitatea de DF extrasă. Rezultatele reacției au fost înregistrate pe un spectrofotometru pe baza diferenței de extincții la lungimile de undă de test (630 nm) și de referință (490 nm).

Rezultatele obţinute au fost evaluate prin nivelurile de activitate spontană a neutrofilelor (sNST), activitate indusă o/z a neutrofilelor (o/zNST), activitate indusă n/o a neutrofilelor (n/zNST). Rezultatele testului au fost exprimate în mOD (densitate optică). Rezervele de activitate funcțională ale celulelor au fost evaluate prin coeficienți de activare (KAo și KAn), gradul de discretitate a activității celulare la diverși stimuli a fost determinat de coeficientul de opsonizare (CO). (n=5).

Analiza chemiluminiscenței fagocitelor relevă formarea radicalilor reactivi de oxigen de către celule, inclusiv anionul superoxid, oxigenul singlet și radicalul hidroxil și participarea într-o anumită măsură a mieloperoxidazei fagocitelor, care este un indicator al intensității respirației celulare în timpul fagocitozei.

Procedura de analiză: s-au adăugat 200 µl de lxlO6 luminol în fiecare flacon pentru numărarea scintilației, apoi s-au adăugat 200 µl dintr-o suspensie de neutrofile astfel încât concentrația lor finală să fie de 0,5 x 106 per 1 ml. Cele 51 de flacoane au fost amestecate, plasate într-un contor și chemiluminiscența a fost măsurată la 37 C la intervale de 0,1 minute timp de 90-120 de minute. De obicei, la 45-60 de minute după începerea măsurării, aderența celulelor la sticlă s-a încheiat, iar intensitatea chemiluminiscenței s-a apropiat de nivelul inițial. În această perioadă, în aceleași sticle s-a adăugat o suspensie de zymosan (opsonizată și neopsonizată) de 20 μl (suspensia originală de 20 mg/ml după decongelare a fost diluată de 10 ori, iar această diluție a fost adăugată în sticlă). Apoi, chemiluminiscența a fost măsurată din nou, înregistrând numărul de impulsuri pe minut timp de 60 de minute. Apoi numărările au fost recalculate per 1 celulă și chemiluminiscența a fost exprimată în mod convențional în numărări/min/celulă. (n=5).

Analiza ADN-ului plasmidic. Pe baza obiectivelor acestui studiu, a fost efectuată o procedură standard de purificare a ADN-ului plasmidic folosind liză alcalină. Biomasa (2 ml) a fost suspendată în 2 ml dintr-o soluţie cu următoarea compoziţie: 50 mM glucoză, 20 mM Tris-HCI; 10 mM EDTA; pH 8,0. S-au adăugat 20 μl de lizozimă (8 mg/ml), s-au amestecat și s-au incubat la +4 - + 8C timp de 20 de minute. După aceasta, s-au adăugat 4 ml de soluţie de liză (0,2 M NaOH, 1% SDS), s-au amestecat şi s-au continuat incubarea la aceeaşi temperatură timp de 5 minute. După ce a trecut timpul, s-au adăugat 3 ml de soluţie neutralizantă (3 M acetat de potasiu, pH 4,8), s-au amestecat uşor şi s-au incubat timp de 30 minute la +4 - +8C. Apoi, tubul a fost centrifugat (Backman J2-21, rotor JA-14) timp de 30 de minute la +4C la o viteză de 10.000 rpm. Supernatantul a fost colectat în eprubete și s-au adăugat 2,5 volume de etanol. Incubat la o temperatură de -70 C timp de 10-15 minute și centrifugat timp de 20 de minute la o temperatură de +4 C (rotor Backman J2-21, JA-20) la o turație de 10.000 rpm. Sedimentul a fost dizolvat în 600 μl de apă, transferat în tuburi de microcentrifugă, s-au adăugat 400 μl de acetat de Na 7,5 M și incubat la -20 C timp de 30 de minute. Apoi au fost centrifugate timp de 10 minute la viteza de 18000g la +4C. Precipitatul a fost spălat cu etanol 70% şi apoi uscat la aer. Medicamentul rezultat a fost dizolvat în 400 pl de tampon TE (10 mM Tris-HCI, 1 mM EDTA, pH 8,0) și supus extracției cu fenol-cloroform. S-a adăugat un volum egal de amestec fenol/cloroform (1:1) saturat cu soluţie tampon Tris-HCI, pH 8,0. Amestecul a fost agitat energic şi centrifugat timp de 6 minute la o viteză de 13000 g la temperatura camerei. Supernatantul a fost transferat în eprubete curate și s-a adăugat un volum egal de amestec de cloroform/alcool izoamilic (25:1). Tubul a fost agitat prin vortex și centrifugat la 16000 g și o temperatură de +4 C timp de 2 minute. Supernatantul a fost transferat în tuburi curate și ADN-ul a fost precipitat din soluție prin adăugarea a 2,5 volume de etanol și 1/10 volume de soluție de acetat de sodiu. Tubul a fost incubat la -70 C timp de 10-15 minute și apoi centrifugat timp de 10 minute la 16000 g și o temperatură de +4 C. Supernatantul a fost îndepărtat și precipitatul a fost spălat cu alcool 70% (adăugând și aruncând 200-500 μl). Sedimentul a fost uscat la aer și dizolvat în 200 μl dintr-o soluție apoasă de ribonuclează A cu o concentrație de 5-10 μg per ml și incubat timp de 40 de minute într-un termostat la o temperatură de +37 C. S-a repetat procedura de precipitare a ADN-ului. folosind etanol și acetat de sodiu. Sedimentul de ADN a fost dizolvat în 200 μl de tampon TE.

Studiul toxicității, toxicității, virulenței și activității probiotice a tulpinii B. subtilis 1719 în experimente in vivo

Producția industrială de medicamente pe bază de microorganisme vii patogene este direct legată de selecția și optimizarea mediului nutritiv pentru cultivare.

Alegerea optimă a ingredientelor în mediu contribuie la acumularea maximă de biomasă și la manifestarea proprietăților antagoniste ale tulpinilor, ceea ce servește ca indicator al productivității ridicate a procesului de cultivare.

Cu toate acestea, tulpinile probiotice au caracteristici trofice. Ele trebuie luate în considerare în sistemul „tulpină - mediu nutritiv”. Obținerea probioticelor eficiente pe bază de tulpini de B. subtilis rămâne o sarcină urgentă, pentru soluția căreia se poate folosi principiul adecvării formulării mediului nutritiv la proprietățile tulpinii. La studierea acestei probleme, cultivarea a fost efectuată pe medii de compoziție cunoscută și medii dezvoltate de noi pe bază de hidrolizat de făină de soia (SPAS-2, SPAS-4, SPAS-6) sau peptonă (VK-2).

La evaluarea proprietăților de creștere ale mediilor pe bază de făină de soia hidrolizată cu peptonă (SPAS-2, SPAS-4, SPAS-6) și mediu cu peptonă (VK-2), s-a efectuat o comparație a indicilor de cultură în raport cu mediul folosit pentru creșterea tulpinilor de B. subtilis - producători de substanțe biologic active (medii: Nr. 5, Nr. 9, KG - cartof-glicerină).

Deoarece proprietățile fiziologice ale culturii se puteau modifica în funcție de adăugarea diferitelor surse de carbohidrați, a fost recomandabil să se compare rezultatele cultivării B. subtilis 1719 pe medii cu compoziția originală și cu adăugarea de glucoză, maltoză, zaharoză și lactoză. ca sursă de carbohidrați.

Compararea nivelului densității optice (DO) și a vitezei de creștere a celulelor din lichidul de cultură pe parcursul a 18 ore de cultivare pe medii fără zaharuri (Fig. 6.1.) a arătat că mediile nr. 5, SPAS-6 și cartof- Mediul de glicerină a oferit o creștere a tulpinii cu DO egală cu 0,24±0,01 (u=0,03 h"1), 0,22±0,01 (1)=0,0334-1) și respectiv 0,3±0,01 (u = 0,025 h 1). Pe medii SPAS- 2, SPAS-4, nr. 9, valoarea maximă a OP a fost 0,42 + 0,03 (u = 0,067 h „1), 0,38 ± 0,02 (1 )=0,0541) și 0,58±0,03 (1)=0,037 h”1), respectiv, iar pe mediul VK-2 - 0,85+0,6 (\ =0,068 h"). Timpul până la atingerea concentrației maxime de biomasă pe aceste medii a variat de la 9±0,7 ore (SPAS-2) la 18±1,3 ore (KGG).

Randamentul maxim de biomasă (BY) a fost detectat pe mediul VK-2, cu o rată de creștere de 0,068 h"1, iar cea mai scăzută pe mediul SPAS-6 și o rată de creștere de 0,033 h"1. Adăugarea de glucoză în mediu ca sursă de carbohidrați (Fig. 6.2.) a determinat o creștere a concentrației de celule B. subtilis 1719 de aproape două ori, cu excepția mediilor nr. 5, nr. 9 și SPAS-6: pe mediu Nr. 9 s-a observat o scădere nesigură a valorii DO la 0,43 ±0,03 la aproape aceeași rată de creștere (0,035 h"1), iar pe SPAS-6 valoarea OP a rămas la același nivel. Cel mai mare randament de biomasă a fost detectat pe mediu VK-2, cu OP în valoare de 1,0±0, 09 (la 1)=0,066 h"1) până la 18 ore de creștere. Maltoza (Fig. 6.3.) s-a dovedit a fi carbohidratul optim în mediile nr. 9 și nr. 5. Valoarea OP a crescut pe mediu nr. 9 la 0,695±0,025 (i)=0,058 h"1) cu 12 ore, iar pe mediu nr. 5 - 0,51±0,045 (i=0,022 h"1) cu 18 ore. Pe SPAS mediu -4 și CG, randamentul de biomasă a scăzut față de utilizarea glucozei de la 0,8±0,06 (1)=0,063 h1) la 0,33±0,01 (1)=0,040 h1) și de la 0,62+0, 04 (D=0,03 h1) „1) la 0,38±0,03(u=0,025 h”1) respectiv. Creșterea culturii pe mediul VK-2 a avut tendința de a reduce randamentul de biomasă, ceea ce s-a reflectat într-o scădere a valorii OP de la 1,0±0,09 (1)=0,066 h1) la 0,55±0,25 (D=0,046 h"1). Lactoza adăugată în mediu (Fig. 6.4.) a asigurat creșterea B. subtilis 1719 la un nivel OD de la 0,21±0,04 la 0,5±0,03, cu excepția VK-2 - 0,83±0,05. Adăugarea de zaharoză în mediu (Fig. 6.5.) a contribuit la acumularea mare de biomasă numai pe mediul VK-2, iar OD a atins o valoare de 1,1 + 0,06 (u = 0,063 h"1) la 17 ore de cultivare. Fără adăugare suplimentară de carbohidrați, doar mediul VK-2 s-a dovedit a fi mediu optim pentru acumularea de biomasă. A oferit cea mai mare acumulare de celule bacteriene atunci când s-au adăugat glucoză, lactoză și zaharoză. Randamentul maxim de biomasă al B. subtilis 1719 a fost obținut pe mediu VK-2 cu adăugare de glucoză (OD - 1,0±0,09) la 18+0,15 ore de cultivare sau zaharoză (OD - 1,1+0,06) la 17+1,0 ore de cultivare . S-a stabilit că compoziția mediilor nutritive nu a avut niciun efect asupra proprietăților antagoniste ale tulpinii.

Studiul viabilității și activității antagoniste a tulpinii B.subtilis 1719 în timpul depozitării

Bacilii sunt capabili să secrete multe enzime în fluidul de cultură. Acestea servesc ca un important sit industrial pentru producerea de enzime proteolitice și amilolitice utilizate în producția de produse alimentare, detergenți și substanțe biomedicale. În ultimul deceniu, cu participarea lor, au fost obținute o serie de noi antibiotice, insecticide bacteriene și alte substanțe biologic active.

În ciuda faptului că B. subtilis are statut GRAS, există rapoarte izolate în literatură despre prezența factorilor de patogenitate la unele tulpini de B. subtilis. Se indică faptul că acesta nu este un semn permanent, deoarece dispare în timpul reînsămânțării. S-a sugerat că proprietățile patogene ale bacteriilor sunt legate de prezența plasmidelor. De exemplu, Le N. și Anagnostopoulos S. au izolat plasmide din 8 tulpini de B. subtilis de la 83 de subiecți examinați. ADN-ul plasmidic a fost determinat numai în celulele tulpinilor toxigenice ale B. subtilis și nu a fost găsit în celulele altor tulpini ale aceleiași specii care nu sunt toxigenice. Eliminarea plasmidelor din tulpinile toxigenice sub influența agenților eliminatori a condus la eliminarea proprietăților toxigenice ale filtratelor de cultură. Cu toate acestea, rolul genetic al plasmidelor nu a fost suficient studiat.

În studiile noastre, nu au fost găsite plasmide în preparatele izolate de ADN ale celor trei tulpini de B. subtilis studiate.

Autorii care au studiat efectul bacililor asupra organismului animalelor cu sânge cald au ajuns la concluzia că tulpinile de B. subtilis sunt complet inofensive pentru oameni și animale. Dovada inofensivității macroorganismului este oferită de datele experimentale că în câteva zile după administrarea parenterală, B.subtilis este eliminat din organism. Mecanismele efectului terapeutic al acestor culturi au fost studiate la animale. În prezent, se crede că efectul terapeutic al probioticelor din spori este determinat de un complex de factori, printre care: producția de bacteriocine de către culturile de B. subtilis, care suprimă creșterea microorganismelor patogene și condiționat patogene; sinteza de enzime foarte active: proteaze, ribonucleaze, transaminaze etc.; producerea de substanțe care neutralizează toxinele bacteriene.

Un studiu al proprietăților tulpinii selectate la șoareci a arătat că este avirulentă și nu are toxicitate sau toxicitate. Factorii de impact pozitiv al probioticelor asupra macroorganismului sunt: diverse produse sinteza microbiana: aminoacizi, antibiotice polipeptidice, enzime hidrolitice si o serie de alte substante biologic active de o importanta mai mica. Prin urmare, studiul și izolarea substanțelor de protecție produse de microorganismele din genul Bacillus și crearea de medicamente biomedicale pe baza acestora este o nevoie urgentă.

În tractul gastrointestinal, se manifestă un efect antagonist direct al bacililor, care este predominant selectiv în raport cu microorganismele patogene și condiționat patogene. În același timp, ele se caracterizează prin absența antagonismului față de reprezentanții microflorei normale.

În studiile noastre, în timpul corectării disbiozei experimentale induse de administrarea antibioticului doxiciclină, cultura de B. subtilis 1719 a contribuit la normalizarea compoziției și a numărului microflorei intestinale, precum și la eliminarea microorganismelor patogene condiționat în microflora parietala si luminala.

Din literatura de specialitate rezultă că tulpinile industriale din genul Bacillus au un indice scăzut de activitate adezivă la eritrocite și adezivitate slabă sau moderată la celulele epiteliale intestinale. Tulpinile B. subtilis 534 și ZN au mai multe adezine la receptorii enterocitelor, tulpina B. licheniformis - la colonocite, adică. Diferite tulpini par să aibă adezine la receptorii de pe diferite celule intestinale.

Activitatea lor are loc în lumenul intestinal și este îndreptată împotriva microorganismelor patogene, fără a exercita un efect antagonist asupra reprezentanților microflorei normale. La administrarea de probiotice din spori, se realizează posibilitatea restabilirii autoflorei în diferite loci intestinali, iar după 3-5 zile numărul de lactobacili, bifidobacteri, E. coli etc. crește, iar apoi se restabilește la niveluri normale.

Rezultatele studiilor noastre privind aderența microorganismelor pe enterocite fac mai probabil să se afirme că capacitatea de aderență a celulelor intestinale depinde de compoziția cantitativă și calitativă a microflorei normale. În condiții disbiotice, receptorii sunt deschiși pe suprafața enterocitelor, de care se atașează microorganismele patogene și patogene condiționat, iar când disbioza este corectată, intestinul este colonizat de microflora normală și de numărul de receptori de enterocite capabili să adere la suprafața sa de non- microorganismele indigene scade.

Se știe că microflora normală joacă un rol declanșator important în mecanismul de formare a imunității și reacții de protecție specifice în dezvoltarea postnatală a macroorganismului.

Această bacterie este unul dintre microbii care sunt foarte răspândiți în natură. Bacillus subtilis a fost descris în 1835. Microorganismul a primit acest nume de la faptul că inițial a fost izolat din fânul putrezit. În laborator, fânul a fost fiert în lichid într-un recipient etanș, apoi infuzat timp de două sau trei zile. După aceasta s-a format o colonie.Astfel a început un studiu detaliat al acestei bacterii comune.

Studiu

În știință există un astfel de termen - „organisme model”. Când reprezentanții naturii sunt selectați pentru studiul intens al proceselor, proprietăților și pentru efectuarea de experimente științifice. Un exemplu izbitor este papucul ciliat, care ne este bine cunoscut din lecțiile de biologie.

Bacillus subtilis este, de asemenea, un organism model. Datorită ei, formarea sporilor în bacili a fost studiată temeinic. Este un model pentru înțelegerea mecanismului flagelilor în bacterii și a jucat un rol în cercetarea geneticii moleculare.

Oamenii de știință au efectuat experimente privind cultivarea Bacillus Subtilis în condiții apropiate de imponderabilitate, studiind modificările genomului populației. Aceste microorganisme sunt, de asemenea, utilizate în studiile asupra influenței radiațiilor ultraviolete din spațiu și a abilităților de adaptare ale organismelor vii la acesta. Folosind exemplul lui Bacillus subtilis, ei studiază posibilitatea ca bacteriile să trăiască în condițiile altor planete din sistemul solar (azi se acordă din ce în ce mai multă atenție lui Marte).

Scurte caracteristici

Bacillus subtilis are o formă dreaptă și alungită, capete rotunjite, tocite, de obicei incolore. Diametrul mediu este de 0,6 microni, iar lungimea variază de la 3-8 microni. Cu acești parametri, Bacillus subtilis poate fi examinat perfect la microscop și chiar fotografiat folosind tehnologii moderne. Bacilul este mobil datorită flagelilor săi. Ele cresc de-a lungul suprafeței celulei, iar acest lucru se poate vedea în fotografii.

Habitat

Fânul de bacil este denumit în mod tradițional ca acesta ajunge apoi pe frunzele plantelor, fructele și legumele. Mai mult, se găsește în praful din aer și în mediul acvatic. Și este chiar un segment al microflorei intestinale atât la animale, cât și la oameni. Se dezvoltă la temperaturi de la +5 până la +45 grade Celsius (optim în jur de 30).

Băț de fân. Reproducere

Ca și alte bacterii, se reproduce prin diviziune celulară simplă (longitudinală). Noile organisme formate ca urmare a unei astfel de înjumătățiri rămân adesea legate între ele printr-un fir. Astfel de conexiuni sunt ușor de distins în fotografii.

Bacillus subtilis este clasificat ca un microorganism care formează spori. Acest lucru vă permite să supraviețuiți în cazul unor condiții de viață nefavorabile. Sporularea bacililor începe astfel: conținutul celulei capătă o structură granulară. Unele boabe, de obicei în partea centrală, încep să crească și se acoperă cu o coajă tare. În același timp, membrana celulei originale este distrusă. Procesul final se încheie cu extragerea unei dispute caracteristice în mediul extern. Oricare dintre celule după diviziune își păstrează capacitatea de a forma spori, dintre care majoritatea au forme rotunde sau ovale. Sunt destul de rezistente la factorii externi și la creșterea temperaturii - de exemplu, pot rezista la încălzire peste 100 de grade Celsius. Este caracteristic faptul că o bacterie care s-a dezvoltat dintr-un spor este imobilă, iar capacitatea de mișcare apare doar în generațiile ulterioare ale microorganismului.

Cum se hrănește Bacillus subtilis?

Această bacterie este clasificată ca saprofită; se hrănește cu materie organică moartă. Fiind heterotrof, Bacillus subtilis nu poate sintetiza din anorganici substanțele necesare pentru alimentația sa. Prin urmare, folosește materie organică care a fost produsă de alte organisme. Din el extrage carbonul necesar schimbului de energie.

În nutriție, sursa principală o reprezintă polizaharidele de origine vegetală (amidonul) și de origine animală (glicogenul). Procesul produce prin sinteză aminoacizi, vitamine, diverse enzime și antibiotice.

Interacțiunea cu alte microorganisme

Acest bacil este capabil să suprime dezvoltarea microbilor oportuniști și patogeni: salmonella și streptococ, stafilococ și alți „dăunători”. De exemplu, multe generații de prădători au dezvoltat un reflex de a consuma anumite tipuri de plante. Și această metodă nu numai că oferă organismului vitamine, dar ajută sporii Bacillus Subtilis să ajungă acolo, care pot distruge varietățile patogene de microfloră, crescând în același timp imunitatea.

Acest bacil poate servi și ca hrană pentru protozoare. De exemplu, începutul unui lanț trofic poate arăta astfel: bacili - ciliat-papuc - un anumit tip de moluște - pește - om.

Patogenitate

Conform diferitelor clasificări, acest bacil nu este patogen atât pentru oameni, cât și pentru animale. Este implicat în procesul de digerare a alimentelor, descompune proteinele și carbohidrații și luptă împotriva agenților patogeni ai intestinelor și pielii mamiferelor. Cercetătorii au descoperit că printre bacteriile care ajung, de exemplu, în rănile umane, Bacillus subtilis este întotdeauna prezent. Produce enzime care distrug țesutul mort, precum și antibiotice care inhibă microflora patogenă și au un efect ușor ca medicament antialergic. A fost dovedit de știință: această bacterie suprimă și dezvoltarea agenților infecțioși în timpul intervențiilor chirurgicale.

Dar, totuși, se remarcă și efectul negativ al acestui bacil: poate provoca alergii, exprimate într-o erupție pe corp; provoacă uneori intoxicații alimentare după consumul de alimente stricate de activitatea acestui microorganism; poate provoca infecții oculare severe la oameni.

Pământul este de obicei numit planeta oamenilor, deși, în mod corect, oamenii sunt doar o mică parte din locuitorii săi. De fapt, bila albastră ar trebui numită planeta bacteriilor, deoarece aceste microorganisme „nesemnificative” nu sunt doar cele mai numeroase, ci și cele mai omniprezente. Sunt prezenți literalmente peste tot - nu numai la suprafață, ci și în interiorul oricărei creaturi vii, inclusiv câinii.

Instinctul ca un câmp de luptă

Viața bacteriilor este extrem de interesantă și extrem de complexă - orice bacteriolog vă va spune acest lucru. Vă vom vorbi despre bacteriile care locuiesc în intestinele animalelor noastre de companie, deoarece sănătatea câinelui depinde în mare măsură de acestea. Gândește-te bine, intestinele animalului carnivor Canis familiaris din ordinul lupului sunt de cinci ori mai lungi decât corpul său.

Acesta nu este doar o trambulină uriașă pentru cele mai importante procese de viață, ci și un adevărat câmp de luptă. Aici există o luptă pentru sănătatea câinelui nostru, iar luptătorii sunt chiar „stăpânii planetei” - bacterii. Ca în orice război, există „ai noștri” și cei care li se opun. În intestine, aceste roluri sunt jucate de microflora benefică și patogenă.

Fiecare dintre ei se străduiește să ocupe cât mai mult spațiu, iar în funcție de cine reușește mai bine acest lucru, depinde sănătatea câinelui. Există mulți aliați de partea microflorei patogene. Acestea includ stresul, ecologia slabă, diverse boli și chiar medicamentele folosite pentru a le trata.

Dar microflora benefică este mult mai vulnerabilă; numărul luptătorilor săi este direct legat de faptul dacă câinele primește sau nu o cantitate suficientă de bacterii probiotice în dieta sa.

Bacillus subtilis este un luptător dur

Atingerea unui armistițiu de durată în intestine este dificilă, iar hrănirea hranei pentru câini îmbogățite cu probiotice devine o necesitate urgentă. Potrivit medicilor veterinari, cea mai bună dietă pentru un câine este hrana uscată de înaltă calitate. Singura problemă este că majoritatea probioticelor nu pot supraviețui procesului de preparare: sunt prea sensibile la influențele temperaturii.

Totuși, din fericire pentru noi, în armata incalculabilă a bacteriilor există și luptători persistenti. Permiteți-mi să vă prezint - Bacillus subtilis. Numele său complet sună solemn: o bacterie aerobă gram-pozitivă care formează spori sau pur și simplu - Bacillus subtilis. Senna - pentru că anterior Bacillus subtilis se obținea exclusiv din decocturi de fân, iar bacilul - pentru că așa arată bacteria la microscop.

Bacillus subtilis este larg răspândit în natură; în prezența oxigenului, formează spori, ceea ce îi permite să persistă în mediul extern pentru o perioadă lungă de timp. Bacteria trăiește în sol, supraviețuind, după cum se spune, în orice vreme. Această stabilitate incredibilă este una dintre principalele caracteristici ale bățului de fân.

Nu moare sub influența antibioticelor, chimicale, temperaturi ridicate, până la fierbere, nu se teme de îngheț. Fără a fi distrus, Bacillus subtilis trece prin mediul acid al stomacului în intestinul subțire, unde continuă să rămână rezistent la flavomicină, kanamicină, antibiotice tetracicline, penicilină și alte substanțe agresive pentru microorganisme.

Beneficiile bacilului de fân

Bacteria Bacillus subtilis diferă doar prin rezistență – remarcabilă este și activitatea biologică a Bacillus subtilis. Ca toate probioticele, secretă enzime digestive (amilaze, lipaze, proteaze) și concurează cu succes cu microorganismele patogene pentru „locul lor la soare”.

Și pe lângă aceasta, Bacillus subtilis în sine produce substanțe antibiotice care ucid acești agenți patogeni și are, de asemenea, un efect activ antitoxic și imunostimulator, inducând interferonul și favorizând sinteza imunoglobulinelor.

Preparatele pe bază de Bacillus subtilis sunt utilizate pe scară largă în medicina umană pentru prevenirea și tratamentul bolilor gastrointestinale, disbacteriozei, infectii pulmonare, suprimarea creșterii microorganismelor patogene și condiționat patogene (salmonella, E. coli, aeromonade, pseudomonade și altele).

Blitz alimente cu probiotice

Cum te poți asigura că acest „soldat universal” al lumii bacteriene ajunge în bolul câinelui tău în fiecare zi? Nimic nu poate fi mai simplu. Hrăniți-o cu mâncare Blitz - o dietă uscată care nu are analogi pe piața rusă, îmbogățită cu probioticul Bacillus subtilis și nu numai cu acesta, ci și cu bacteria la fel de utilă și stabilă Bacillus licheniformis.

Cu hrana Blitz, cainele tau nu numai ca va primi tot ce are nevoie in fiecare zi pentru o viata lunga viata activa nutrienți și microelemente, dar vor fi, de asemenea, protejate în mod fiabil. La urma urmei, cu astfel de luptători în intestine, „ai noștri” vor câștiga întotdeauna.

• Savustyanenko A.V.

Cuvinte cheie

Bacillus subtilis / probiotic / mecanisme de actiune

adnotare articol științific despre medicină și asistență medicală, autorul lucrării științifice - Savustyanenko A.V.

Bacteria B.subtilis este unul dintre cele mai probiotice probiotice studiate în ultimele decenii. Mecanismele acțiunii sale probiotice sunt asociate cu sinteza substanțelor antimicrobiene, întărirea imunității nespecifice și specifice, stimularea creșterii microflorei intestinale normale și a secreției. enzime digestive. B. subtilis secretă peptide sintetizate ribozomal, peptide non-ribozomal sintetizate și substanțe non-peptidice cu un spectru larg de activitate antimicrobiană care acoperă bacterii gram-pozitive, gram-negative, viruși și ciuperci. Rezistența la acești agenți antimicrobieni este rară. Întărirea imunității nespecifice este asociată cu activarea macrofagelor și eliberarea de citokine proinflamatorii din acestea, o creștere a funcției de barieră a mucoasei intestinale și eliberarea de vitamine și aminoacizi (inclusiv cei esențiali). Întărirea imunității specifice se manifestă prin activarea limfocitelor Ti B și eliberarea de imunoglobuline din acestea din urmă - IgG și IgA. B.subtilis stimulează creșterea microflorei intestinale normale, în special a bacteriilor din genurile Lactobacillus și Bifidobacterium. În plus, probioticul crește diversitatea microflorei intestinale. Probioticul eliberează în lumenul intestinal toate enzimele digestive principale: amilaze, lipaze, proteaze, pectinaze și celulaze. Pe lângă digerarea alimentelor, aceste enzime distrug factorii antinutriționali și substanțele alergene conținute în alimentele primite. Listată mecanisme de actiune justifică utilizarea B.subtilis ca parte a terapiei complexe pentru combaterea infecțiilor intestinale; prevenirea infecțiilor respiratorii în timpul sezonului rece; prevenirea diareei asociate cu antibiotice; pentru corectarea tulburărilor de digestie și promovarea alimentelor de diverse origini (erori în alimentație, modificări în alimentație, boli ale tractului gastro-intestinal, tulburări ale sistemului nervos autonom etc.). B. subtilis nu provoacă de obicei reacții adverse. Acest probiotic se caracterizează printr-un raport ridicat de eficacitate și siguranță.

subiecte asemănătoare lucrări științifice despre medicină și asistență medicală, autorul lucrării științifice - Savutyanenko A.V.,

• Eficacitatea pre- și probioticelor în corectarea microbiocenozei intestinale la pacienții după hemicolectomie

  2011 / Lee I. A., Silvestrova S. Yu.

• Rolul microbiotei intestinale în dezvoltarea obezității sub aspectul vârstei

  2015 / Shcherbakova M. Yu., Vlasova A. V., Rozhivanova T. A.

• Eficiența utilizării noilor suplimente de enzime probiotice în hrănirea vițeilor

  2012 / Nekrasov R.V., Anisova N.I., Ovchinnikov A.A., Meleshko N.A., Ushakova N.A.

• Biocenoza intestinală la pacienții cu cancer colorectal

  2012 / Starostina M. A., Afanasyeva Z. A., Gubaeva M. S., Ibragimova N. R., Sakmarova L. I.

• Disbioza intestinala SI CONSTIPATIA LA COPII

  2010 / Khavkin A. I.

Bacteria B.subtilis este una dintre cele mai probiotice probiotice studiate în ultimele decenii. Mecanismele acțiunii sale probiotice sunt asociate cu sinteza agenților antimicrobieni, creșterea imunității nespecifice și specifice, stimularea creșterii microflorei normale a intestinului și eliberarea enzimelor digestive. B.subtilis eliberează peptide sintetizate ribozomal, peptide non-ribozomal sintetizate și substanțe non-peptidice cu un spectru larg de activitate antimicrobiană care acoperă bacterii grampozitive, gram-negative, viruși și ciuperci. Rezistența la acești agenți antimicrobieni este rară. Creșterea imunității nespecifice este asociată cu activarea macrofagelor și eliberarea de citokine proinflamatorii din acestea, creșterea funcției de barieră a mucoasei intestinale, eliberarea de vitamine și aminoacizi (inclusiv cei esențiali). Creșterea imunității specifice se manifestă prin activarea limfocitelor B Tand și eliberarea din acestea din urmă a imunoglobulinelor - IgG și IgA. B.subtilis stimulează creșterea florei intestinale normale, în special a bacteriilor din genul Lactobacillus și Bifidobacterium. În plus, probioticul crește diversitatea microflorei intestinale. Probioticul secretă toate enzimele digestive majore în lumenul intestinal: amilaze, lipaze, proteaze, pectinaze și celulaze. Pe lângă digestie, aceste enzime distrug factorii antinutriționali și substanțele alergene conținute în alimente. Aceste mecanisme de acțiune fac rezonabilă utilizarea B. subtilis în terapia combinată pentru tratarea infecțiilor intestinale; prevenirea infecțiilor respiratorii în timpul sezonului rece; prevenirea diareei asociate cu antibiotice; pentru corectarea digestiei alimentelor și a tulburărilor de mișcare de diverse origini (erori în alimentație, modificări ale dietei, boli ale tractului gastro-intestinal, tulburări ale sistemului nervos autonom etc.). B.subtilis nu provoacă de obicei reacții adverse. Acest probiotic se caracterizează printr-un raport ridicat de eficacitate și siguranță.

Textul lucrării științifice pe tema „Mecanisme de acțiune a probioticelor bazate pe Bacillus subtilis”

Pentru a ajuta un medic practicant

Pentru a ajuta practicantul

UDC 615.331:579.852.1

MECANISME DE ACȚIUNE A PROBIOTICELOR BAZATE PE BACILLUS SUBTILIS

Rezumat. Bacteria B.subtilis este unul dintre cele mai probiotice probiotice studiate în ultimele decenii. Mecanismele acțiunii sale probiotice sunt asociate cu sinteza substanțelor antimicrobiene, întărirea imunității nespecifice și specifice, stimularea creșterii microflorei intestinale normale și eliberarea enzimelor digestive. B. subtilis secretă peptide sintetizate ribozomal, peptide non-ribozomal sintetizate și substanțe non-peptidice cu un spectru larg de activitate antimicrobiană care acoperă bacterii gram-pozitive, gram-negative, viruși și ciuperci. Rezistența la aceste substanțe antimicrobiene apare rar. Întărirea imunității nespecifice este asociată cu activarea macrofagelor și eliberarea de citokine proinflamatorii din acestea, o creștere a funcției de barieră a mucoasei intestinale și eliberarea de vitamine și aminoacizi (inclusiv cei esențiali). Întărirea imunității specifice se manifestă prin activarea limfocitelor T și B și eliberarea de imunoglobuline din acestea din urmă - IgG și IgA. B.subtilis stimulează creșterea microflorei intestinale normale, în special a bacteriilor din genurile Lactobacillus și Bifidobacterium. În plus, probioticul crește diversitatea microflorei intestinale. Probioticul eliberează în lumenul intestinal toate enzimele digestive principale: amilaze, lipaze, proteaze, pectinaze și celulaze. Pe lângă digerarea alimentelor, aceste enzime distrug factorii antinutriționali și substanțele alergene conținute în alimentele primite. Mecanismele de acțiune enumerate justifică utilizarea B. subtilis ca parte a terapiei complexe pentru combaterea infecțiilor intestinale; prevenirea infecțiilor respiratorii în timpul sezonului rece; prevenirea diareei asociate cu antibiotice; pentru corectarea tulburărilor de digestie și promovarea alimentelor de diverse origini (erori în alimentație, modificări în alimentație, boli ale tractului gastro-intestinal, tulburări ale sistemului nervos autonom etc.). B. subtilis nu provoacă de obicei reacții adverse. Acest probiotic se caracterizează printr-un raport ridicat de eficacitate și siguranță.

Cuvinte cheie: Bacillus subtilis, probiotic, mecanisme de acțiune.

Probioticele sunt „microorganisme vii care, atunci când sunt administrate în cantități adecvate, au un efect pozitiv asupra sănătății gazdei”. În timp ce utilizarea unora dintre ele (Lactobacillus, Bifidobacterium) a primit multă atenție, altele au fost studiate mai recent și efectele lor terapeutice importante devin clare abia acum. Unul dintre probiotice este bacilul gram pozitiv Bacillus subtilis (B.subtilis).

Majoritatea bacteriilor din genul Bacillus (inclusiv B. subtilis) nu sunt periculoase pentru oameni și sunt larg distribuite în mediu. Se găsesc în sol, apă, aer și produse alimentare (grâu, alte cereale, produse de patiserie, produse din soia, carne integrală, lapte crud și pasteurizat). Ca urmare, ei intră constant în tractul gastrointestinal și tractul respirator, însămânțând aceste secțiuni. Numărul de bacili din intestin poate ajunge la 107 CFU/g, ceea ce este comparabil cu cel al Lactobacillus. În acest sens, un număr de cercetători consideră bacteriile din genul Bacillus ca una

a componentelor dominante ale microflorei intestinale normale.

În același timp, administrarea terapeutică a V. vilithv permite utilizarea acestui microorganism ca probiotic în patru moduri principale: 1) pentru protecție împotriva agenților patogeni intestinali; 2) de la agenți patogeni respiratori; 3) pentru a elimina disbioza în timpul terapiei cu antibiotice; 4) pentru a îmbunătăți digestia și promovarea alimentelor. O diagramă simplificată a activității probiotice a B. bilid în patologia tractului gastrointestinal este prezentată în Fig. 1.

Astfel, în activitatea științifică din ultimele decenii, s-au făcut progrese semnificative în elucidarea spectrului de activitate probiotică a V. vitilius, ceea ce face ca această bacterie să fie una dintre cele mai atractive probiotice de uz medical. În această revizuire, prezentăm date din studii experimentale și clinice relevante care oferă o impresie a potențialului terapeutic al V. vilisv.

substanțe antimicrobiene

Întărirea imunității nespecifice și specifice

Eliberarea a 1 enzime digestive

Figura 1. Diagrama simplificată a activității probiotice a B.subtIII în patologia tractului gastrointestinal (pe baza cifrelor din)

Supraviețuirea celulelor vegetative ale Blilithv în tractul gastrointestinal

Probioticele pe bază de Nalibili sunt de obicei luate pe cale orală fie sub formă de spori, fie de bacterii vii (celule vegetative). Supraviețuirea sporilor în tractul gastrointestinal este fără îndoială datorită rezistenței lor ridicate la diferiți factori fizico-chimici, în special la valorile extreme ale pH-ului. În același timp, a fost discutată întrebarea dacă bacteriile vii sunt capabile să pătrundă dincolo de stomac și să îndeplinească o funcție probiotică.

Situația a fost clarificată în timpul unui studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, la voluntari sănătoși (n = 81, vârsta 18-50 de ani). Tuturor subiecților li sa prescris administrarea orală de bacterii vii Blybium la o doză de 0,1 109; 1,0 109 sau 10 109 CFU/capsula/zi sau placebo timp de 4 săptămâni. La sfârșitul studiului, a fost calculat conținutul de bacterii vii din scaun. Cifrele obţinute au fost 1,1 ± 0,1 1c^10 UFC/g1 în grupul placebo şi 4,6 ± 0,1 UFC/g; 5,6 ± 0,1 k^10 CFU/g; 6,4 ± 0,1 CFU/g pentru trei doze crescătoare de Lylyshv. În consecință, a fost confirmată supraviețuirea celulelor vegetative de Halithv în timpul trecerii prin tractul gastrointestinal. Mai mult, efectul a fost dependent de doză și l-a depășit semnificativ pe cel al placebo (p< 0,0001) .

Similitudinea efectelor V.eulithv atunci când sunt luate sub formă de spori și celule vegetative

În literatura citată, majoritatea studiilor experimentale și clinice ale Daibilis au fost efectuate cu introducerea fie a sporilor acestor bacterii, fie a celulelor vegetative ale acestora. În acest sens, se pune întrebarea,

1 Unitățile formatoare de colonii (CFU) sunt numeric egale cu numărul de celule vegetative.

dacă efectele obţinute şi rezultatele terapeutice trebuie luate în considerare separat sau pot fi combinate.

În multe studii, care au studiat bacteriile din genul Bacillus, s-a demonstrat că, după ingestia orală a sporilor, se observă germinarea acestora în tractul gastrointestinal în celulele vegetative. Apoi se observă retransformarea în spori (resporularea). Aceste cicluri se repetă de mai multe ori. În cele din urmă, sporii cu materii fecale ajung în mediul extern. În mod similar, după ingestia orală a celulelor vegetative, se observă sporularea acestora în tractul gastrointestinal. Ciclurile de germinare și reporulare se repetă de mai multe ori înainte de a fi eliminate din gazdă.

Astfel, indiferent dacă probioticele B. subtilis sunt luate ca spori sau celule vegetative, ambele forme ale bacteriei vor fi prezente în corpul primitorului, iar efectele observate și efectul terapeutic vor fi probabil aceleași. Acest fapt necesită o confirmare suplimentară în studii speciale.

Mecanismele probiotice

activitatea lui B. subtilis

Sinteza substanțelor antimicrobiene

De regulă, infecțiile intestinale sunt cauzate de bacterii sau viruși și mai rar de protozoare. Conform ghidurilor actuale, antibioticele nu sunt necesare în majoritatea cazurilor. Trebuie menținută rehidratarea adecvată, iar diareea se va rezolva de la sine. Cu toate acestea, atât în ​​cazurile ușoare, cât și în cele severe de infecții intestinale, medicul poate decide să includă probiotice în terapie pentru a crește eficacitatea acesteia.

Una dintre cele mai promițătoare bacterii în acest sens este B. subtilis. Unicitatea bacteriei constă în faptul că 4-5% din genomul acesteia codifică sinteza diferitelor substanțe antimicrobiene. Potrivit recenziilor publicate, aproximativ 24 de astfel de substanțe au fost izolate din diferite tulpini de B. subtilis până în 2005 și 66 până în 2010, iar lista continuă să crească. Majoritatea substanțelor antimicrobiene sunt reprezentate de peptide sintetizate ribozomiale și non-ribozomale. Substanțele non-peptidice, cum ar fi polichetidele, aminozaharurile și fosfolipidele, se găsesc în cantități mai mici. Unele dintre substanțele antimicrobiene ale B.subtilis sunt date în tabel. 1. Este clar că activitatea multora dintre ele este îndreptată împotriva bacteriilor gram-pozitive. În plus, spectrul de acțiune acoperă bacterii gram-negative, viruși și ciuperci. În consecință, practic toți agenții patogeni care pot provoca infecții intestinale sunt acoperiți.

Un exemplu sunt rezultatele unui studiu al uneia dintre noile tulpini de B. subtilis VKPM B-16041 (DSM 24613). Activitate antagonistă mare a fost detectată împotriva St.aureus și C.albicans, medie sau scăzută - împotriva C.freundii, E.coli,

Tabelul 1. Unele substanțe antimicrobiene sintetizate și secretate de B. subtilis

Peptide sintetizate ribozomal Bacteriocine: - lantibiotice tip A - lantibiotice tip B Subtilin Ericin S Mersacidin Pentru 2 substante: formarea porilor in membrana citoplasmatica Inhibarea sintezei peretelui celular Bacteriile Gram-pozitive Bacteriile Gram-pozitive, inclusiv tulpinile de Stafilococcus rezistente la meticilină și tulpini rezistente la vancomicină de enterococi

Peptide sintetizate non-ribozomal Lipopeptide Surfactina Bacilizină Bacitracină Dizolvarea membranelor lipidice Inhibarea glucozaminei sintetizei implicată în sinteza nucleotidelor, aminoacizilor și coenzimelor, ceea ce duce la liza celulelor microbiene Inhibarea sintezei peretelui celular Virușii, Mycoccudidam aurephylo, Candidam albicilor - bacterii pozitive

Substanțe nepeptidice Dificicidin Tulburări ale sintezei proteinelor Bacteriile Gram-pozitive, bacteriile Gram-negative

K. pneumoniae, P. vulgaris, P. aeruginosa, Salmonella spp., Sh. sonnei, Sh. flexneri IIa.

Diferite tulpini de B.subtilis secretă seturi diferite de substanțe antimicrobiene. Cu toate acestea, în orice caz, gama de antagonism față de agenții patogeni intestinali acoperită este destul de largă. De exemplu, tulpina ATCC6633 de B. subtilis secretă subtilină, care este un antibiotic împotriva bacteriilor gram-pozitive. O altă tulpină, B. subtilis A1/3, nu secretă subtilină. Dar secretă antibioticul ericina S, care are același mecanism de acțiune și spectru de activitate ca și subtilina. Aceasta înseamnă că oricare dintre aceste tulpini este utilizată în producția de probiotic, spectrul bacteriilor gram-pozitive va fi acoperit.

Peptidele antimicrobiene secretate de B. subtilis oferă avantaje enorme față de antibioticele tradiționale. Faptul este că sunt aproape de peptidele antimicrobiene secretate în corpul uman și fac parte din imunitatea sa înnăscută. Substanțe similare au fost identificate într-o mare varietate de țesuturi și suprafețe epiteliale, inclusiv piele, ochi, urechi, cavitatea bucală, intestine, sistemul imunitar, nervos și urinar. Cele mai cunoscute dintre ele sunt defensina, lizozima, catelicidina, dermcidina, lectina, histatina etc. B.subtilis produce substanțe similare, astfel încât rezistența la acestea este rară și de obicei nu există efecte secundare. Lipsa rezistenței la peptidele antimicrobiene umane și B.subtilis este asociată cu faptul că acțiunea lor vizează adesea formarea porilor membranei, ducând la moartea bacteriilor. Activitatea antibioticelor tradiționale este mai concentrată pe enzimele metabolice ale bacteriilor, ceea ce facilitează formarea rezistenței.

Întărirea imunității nespecifice și specifice

V.tbshk sporește protecția împotriva agenților patogeni intestinali și respiratori prin stimularea imunității nespecifice și specifice. Imunitatea nespecifică este definită ca un sistem de apărare care funcționează în mod egal împotriva unei game largi de microorganisme. Imunitatea specifică funcționează pe principiul „cheie pentru blocare” - celule sau anticorpi speciali sunt produși pentru un anumit agent patogen. Imunitatea nespecifică este de obicei considerată ca prima fază a reacției de apărare a organismului, iar imunitatea specifică ca a doua fază.

Imunitatea nespecifică

Cele mai importante celule Macrofagele sunt implicate în imunitatea nespecifică. Ei fagocitează agentul patogen, digerându-l. În plus, antigenii patogeni sunt aliniați pe suprafața membranelor proprii ale corpului - așa-numita prezentare, care este necesară pentru a lansa a doua fază a reacției de apărare a organismului.

Numeroase studii au demonstrat că administrarea de HbnI determină activarea macrofagelor. În macrofagele activate, sinteza și eliberarea de citokine proinflamatorii este îmbunătățită: factor de necroză tumorală a, interferon-γ (N-7), interleukina (Sh-1p, Sh-6, Sh-8, Sh-10, Sh-). 12, proteina inflamatorie a macrofagelor- 2. Ca urmare, se dezvoltă un răspuns inflamator complex care vizează distrugerea agentului patogen.De exemplu, 1KK-y activează macrofagele și protejează celulele de infecția virală.Sh-6 stimulează proliferarea și diferențierea limfocitelor B. responsabil de sinteza anticorpilor.Sh-8 este un puternic mediator chimiotactic și paracrin pentru neutrofile.Infiltrare

neutrofilele activate joacă un rol important în menținerea inflamației și a stresului oxidativ. IL-12 reglează creșterea, activarea și diferențierea limfocitelor T.

Mecanismele prin care B. subtilis activează macrofagele continuă să fie studiate. Unul dintre studii a arătat că exopolizaharidele probiotice sunt responsabile pentru acest lucru.

Următoarea componentă importantă a imunității nespecifice este funcția de barieră a epiteliului. Țesuturile epiteliale sunt primele care întâmpină atacul agenților patogeni, iar evoluția bolii depinde în mare măsură de rezistența acestora.

Cercetătorii au descoperit că bacteriile comunică între ele în cadrul aceleiași specii și între specii diferite utilizând un grup special de substanțe numite molecule cu sens de cvorum. O astfel de moleculă, secretată de B. subtilis, se numește factor de competență și sporulare (CSF). Transferul LCR în celulele epiteliale intestinale activează căile de semnalizare critice necesare pentru supraviețuirea acestor celule. În primul rând, acestea sunt calea p38 MAP kinazei și calea protein kinazei B/AI. În plus, LCR induce sinteza proteinelor de șoc termic (Hsps), care împiedică dezvoltarea stresului oxidativ în celulele epiteliale. Ambele efecte - îmbunătățirea supraviețuirii celulelor epiteliale și reducerea stresului oxidativ din acestea - duc la creșterea funcției de barieră a mucoasei intestinale. Devine mai puțin vulnerabilă la agenții patogeni.

Factorii imunității nespecifice includ, de asemenea, conținutul unui număr de substanțe metabolice care afectează rezistența generală a organismului la infecții.

S-a descoperit că B.subtilis sintetizează o serie de vitamine, în special tiamina (B1), piridoxina (B6) și menachinona (K2). Diferite tulpini de B. subtilis produc seturi diferite de aminoacizi, dintre care unii sunt esențiali, cum ar fi valina.

Imunitatea specifică

Imunitatea specifică este un sistem de apărare mai puternic, deoarece este vizată selectiv de un anumit agent patogen. Face distincția între imunitatea celulară și cea umorală. Imunitatea celulară este asigurată de limfocitele T, dirijandu-le lupta împotriva virușilor. Imunitatea umorală este asociată cu funcționarea limfocitelor B care secretă anticorpi (imunoglobuline). În acest caz, lupta este îndreptată împotriva bacteriilor.

Multe studii au confirmat capacitatea B. subtilis de a induce activarea și proliferarea limfocitelor T și B. Aceasta apare atât în ​​sângele periferic (ambele tipuri de celule), cât și în timus (limfocitele T) și splină (limfocitele B). S-a discutat mai sus că acest lucru devine posibil datorită eliberării de citokine din macrofage. În plus, a fost găsită o capacitate directă de stimulare a limfocitelor prin pereții celulari, peptidoglicani și acizii teicoici ai B. subtilis.

Figura 2. Probioticul B. subtilis a crescut semnificativ conținutul de IgA din saliva la pacienții vârstnici.

Notă: probioticul a fost luat în 4 doze a câte 10 zile, cu pauze de 18 zile între ele. Datele sunt prezentate la sfârșitul studiului (43) - după 4 luni.

Ш B.subtilis □ Placebo

și despre GO despre Q.L

Figura 3. Probioticul B. subtilis a crescut semnificativ conținutul de 1dA în scaunul pacienților vârstnici

Notă: probioticul a fost luat în 4 doze a câte 10 zile, cu pauze de 18 zile între ele. Datele sunt prezentate la începutul studiului (VI), la 10 zile după primul aport de probiotic (VI + 10 zile) și la sfârșitul studiului (43) - 4 luni mai târziu.

Consecința efectului asupra limfocitelor B este o creștere a conținutului de imunoglobuline (IgG și 1&L) în serul sanguin și 1&L pe suprafața mucoaselor. De exemplu, într-unul dintre studii, a fost găsită o creștere a conținutului de 1&L în scaun, care caracterizează imunitatea crescută împotriva infecțiilor intestinale, precum și în saliva, care este importantă pentru creșterea protecției împotriva infecțiilor respiratorii acute (Fig. 2, 3). După cum se știe, 1&L

este una dintre moleculele principale care protejează epiteliul de agenții patogeni care intră din exterior.

Stimularea creșterii microflorei intestinale normale

Microflora normală ocupă diferite părți ale tubului intestinal, de la cavitatea bucală până la intestinul gros. Există aproximativ 1014 astfel de bacterii în corpul uman, ceea ce reprezintă de 10 ori numărul de celule umane. Activitatea metabolică totală a bacteriilor o depășește pe cea a celulelor noastre.

Numărul de specii bacteriene care alcătuiesc microflora intestinală normală a fost determinat în două moduri. O metodă mai veche, bazată pe cultivarea bacteriilor din probe de scaun, a identificat peste 500 de specii. Metodele mai noi bazate pe analiza ADN-ului indică faptul că de fapt există peste 1000 de astfel de specii.Numărul a crescut datorită faptului că microflora normală conține bacterii care nu pot fi cultivate în mod obișnuit.

Principalele funcții ale microflorei intestinale normale sunt reduse la protecție împotriva colonizării și creșterii microbilor patogeni, stimularea imunității nespecifice și specifice și digestia componentelor alimentare. După cum se poate observa, aceste funcții coincid cu cele discutate în legătură cu probioticul B. subtilis în această recenzie.

Un dezechilibru al microflorei intestinale apare în cazul infecțiilor intestinale, deoarece bacteriile patogene suprimă competitiv activitatea bacteriilor normale. Am menționat mai sus infecțiile intestinale când luăm în considerare substanțele antimicrobiene izolate din B.subtilis. În plus, apare un dezechilibru în timpul unui curs de tratament cu antibiotice a bolilor terapeutice și chirurgicale. În acest caz, calea de administrare a antibioticului nu contează - poate fi orală sau parenterală. Incidența diareei asociate antibioticelor depinde de tipul de antibiotic utilizat și variază de la 2 la 25%, mai rar - până la 44%. Antibioticul suprimă activitatea vitală a microflorei normale, ceea ce duce la creșterea bacteriilor patogene.

Multe studii au demonstrat efectul pozitiv al B. subtilis asupra conținutului microflorei intestinale normale. Probioticul a crescut cantitatea de Lactobacillus și a scăzut conținutul de Escherichia coli în intestine și fecale, a crescut nivelul de Bifidobacterium și a scăzut Alistipes spp., Clostridium spp., Roseospira spp., Betaproteobacterium în fecale (Fig. 4). În consecință, introducerea B. subtilis a schimbat raportul microflorei intestinale către o creștere a numărului de bacterii normale și o scădere a tulpinilor patogene.

Mecanismele acestui fenomen continuă să fie studiate. Dovezile până în prezent sugerează două posibilități. Pe de o parte, B.subtilis datorită eliberării de substanțe antimicrobiene

Efect asupra conținutului de Lactobacillus

o sh nu (Este S

Figura 4. Probioticul B.subtilis la cea mai mare doză administrată a crescut semnificativ conținutul de Lactobacillus din fecalele purceilor

suprimă dezvoltarea microflorei patogene, care creează condiții pentru umplerea nișei eliberate cu bacterii normale. Acest mecanism este indirect indicat de rezultatele unui studiu în care purceilor li s-a administrat antibioticul sulfat de neomicină. Acest instrument caracterizat prin inhibarea creșterii Escherichia coli, dar nu afectează Lactobacillus. Ca urmare, administrarea antibioticului a dus la o scădere a conținutului de Escherichia coli în scaun, dar în același timp la o creștere a Lactobacillus. Acest fenomen este posibil numai dacă microflora intestinală normală începe să se dezvolte datorită suprimării bacteriilor patogene. Același lucru se întâmplă atunci când B. subtilis își eliberează substanțele antimicrobiene.

A doua posibilitate este legată de stimularea directă a microflorei intestinale normale de către B. subtilis, precum Lactobacillus și Bifidobacterium. Acest lucru este indicat de rezultatele experimentelor in vitro privind crearea de probiotice mixte care conțin B. subtilis și Lactobacillus. S-a constatat că viabilitatea lactobacililor în astfel de combinații a crescut semnificativ. Rezultatele unui studiu indică faptul că acest lucru se poate datora eliberării de catalază și subtilizină din B. subtilis.

O altă împrejurare descoperită este de interes. Unele studii au demonstrat că B. subtilis sporește diversitatea microflorei intestinale normale. Se crede că acest lucru are un efect pozitiv asupra sănătății gazdei. În special, B.subtilis a crescut diversitatea microflorei intestinale datorită bacteriilor precum Eubacterium coprostanoligenes, L.amylovorus, bacteria Lachnospiraceae, L.kitasatonis.

La un moment dat, întrebarea dacă probioticele ar putea dăuna organismului gazdei a fost destul de discutată, schimbând microflora obișnuită care a fost stabilită de ani de zile pentru bacteriile străine, introduse artificial din exterior. Cu toate acestea, s-a constatat mai târziu că orice probiotice luate în scopuri medicale nu rămân în tractul gastrointestinal nici după sfârșitul cursului.

tratamentele sunt complet eliminate din acesta. În ceea ce privește B.subtilis, este important să se țină cont de încă o circumstanță. Această bacterie, deși intră constant în canalul digestiv din sol, apă, aer și alimente, totuși nu o colonizează (spre deosebire de Lactobacillus și Bifidobacterium). B.subtilis este un fel de bacterie de tranzit, care se deplasează în mod constant în și din tubul digestiv. Prin urmare, B.subtilis nu poate să prindă rădăcini în intestine și să modifice compoziția stabilă a microflorei noastre.

Îmbunătățirea digestiei și mișcării alimentelor

Există un număr mare de boli și afecțiuni care duc la perturbarea digestiei și a mișcării alimentelor. Un exemplu ar putea fi erorile în alimentație, modificările dietei, bolile tractului gastro-intestinal (colecistita, pancreatită etc.), tulburările sistemului nervos autonom (care duc la tulburări funcționale) etc.

Un probiotic pe bază de B. subtilis poate îmbunătăți digestia și mișcarea secundară a alimentelor prin eliberarea enzimelor digestive. Studiile au descoperit că aceste bacterii sintetizează toate grupele de enzime necesare pentru descompunerea cu succes a alimentelor: amilaze, lipaze, proteaze, pectinaze și celulaze. Activitatea ridicată a acestor enzime este dovedită de faptul că B.subtilis este utilizat în industria alimentară pentru prelucrarea enzimatică a produselor fabricate.

Alimentele conțin substanțe numite factori antinutriționali. Au primit această denumire deoarece prezența lor reduce disponibilitatea uneia sau mai multor componente nutritive din alimentele consumate. S-a constatat că enzimele B.subtilis distrug factorii antinutriționali, reducându-le conținutul în alimente. Acest lucru se aplică în special fenolilor totali, taninurilor și cofeinei. Acest lucru crește disponibilitatea componentelor alimentare pentru organismul gazdă.

Mâncarea conține și substanțe care pot provoca reacții alergice la unele persoane sensibile. Cu toate acestea, enzimele B.subtilis sunt capabile să distrugă aceste substanțe, reducând potențialul alergenic al alimentelor. A fost realizat un studiu în care s-au găsit efecte probiotice similare pentru gliadină (care se găsește în grâu) și p-lactoglobulină (prezentă în laptele de vacă).

Exemple de studii clinice

În această secțiune, nu ne-am propus să oferim o revizuire exhaustivă a tuturor studiilor clinice disponibile asupra B. subtilis. Mai degrabă, a existat o dorință de a exemple clinice confirma funcționarea tuturor acelor mecanisme probiotice care au fost descrise mai sus.

Infecții intestinale. Studiul lui Gracheva et al. au fost incluși pacienții cu salmonella

Frecvența diareei asociate antibioticelor

o shno (H t S

30 25 20 15 10 5 0

Figura 5. Probioticul B. ulcerus a redus semnificativ incidența diareei la pacienții ambulatori care iau antibiotice pe cale orală și intravenoasă.

lez, toxiinfecții alimentare și dizenterie. Unul dintre grupurile selectate de pacienți a primit B.subtilis împreună cu un alt probiotic (număr total - 2.109 celule microbiene vii) de 2 ori pe zi timp de 4-10 zile. Conform rezultatelor studiului, a fost descoperit un efect terapeutic pronunțat al medicamentului, care a constat în normalizarea accelerată a scaunului, dispariția durerilor abdominale și reducerea disbiozei intestinale.

Diaree asociată cu antibiotice. Într-un studiu clinic randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, T.V. Horosheva și colab. Au fost incluși pacienții ambulatori cu vârsta > 45 de ani cărora li sa prescris unul sau mai multe antibiotice orale sau intravenoase timp de cel puțin 5 zile. Unul dintre grupurile de pacienți (n = 90) a primit probioticul B. subtilis (2109 celule microbiene vii) de 2 ori pe zi, începând cu 1 zi înainte de inițierea terapiei cu antibiotice și terminându-se la 7 zile după întreruperea antibioticelor. Ca urmare, s-a constatat că în grupul cu probiotice, diareea asociată cu antibiotice s-a dezvoltat la doar 7,8% (7/90) dintre pacienți, în timp ce în grupul placebo această cifră a fost de 25,6% (23/90) (p.< 0,001) (рис. 5). Пробиотик достоверно снижал частоту появления тошноты, рвоты, метеоризма и абдоминальной боли.

Întărirea digestiei și mișcării alimentelor. Într-un studiu al lui Y.P. Liu și colab. Au fost incluși pacienții vârstnici (74 ± 6 ani) și pacienții internați cu constipație funcțională. Unul dintre grupurile de tratament (n = 31) a primit celule microbiene vii de B. subtilis timp de 4 săptămâni. La sfârșitul studiului, s-a constatat că probioticul a fost eficient la 41,9% (13/31) dintre pacienți.

Infecție respiratorie. Această indicație poate părea oarecum neobișnuită, având în vedere că B. subtilis este un probiotic care funcționează în tractul gastrointestinal. Totuși, luând în considerare mecanismele acțiunii probiotice a bacteriei, am menționat că capacitatea sa de a influența agenții patogeni respiratori este asociată cu stimularea sistemului imunitar.

În 2015, Cochrane a publicat rezultatele unei revizuiri sistematice privind utilizarea probioticelor pentru prevenirea infecțiilor respiratorii acute (IRA). Autorii au concluzionat că probioticele au fost cu 47% mai eficiente decât placebo în reducerea episoadelor IRA. În plus, probioticele au redus durata IRA cu 1,89 zile. Probioticele pot reduce ușor frecvența utilizării antibioticelor și numărul de zile ratate de la școală. Efectele secundare ale probioticelor au fost minime; simptomele gastrointestinale au fost mai frecvente.

Siguranță

Siguranța B. subtilis a fost testată în trei domenii principale: pentru prezența genelor patogene, rezistența la antibiotice și acuratețea identificării microbiene.

Gene patogene. Prezența unor astfel de gene este periculoasă, deoarece duc la formarea de toxine și alte substanțe nocive care afectează negativ peretele intestinal și organismul în ansamblu. Autorii raportează că aceste gene nu au fost găsite în B. subtilis. Mai mult, cultivarea acestui probiotic in vitro cu celule epiteliale intestinale și administrarea lui in vivo la o mare varietate de specii de animale nu a condus la dezvoltarea de efecte dăunătoare sau efecte secundare.

Rezistență la antibiotic. Acest parametru este periculos deoarece dacă probioticul are gene care pot provoca rezistență la antibiotice, atunci acestea pot fi transferate în cele din urmă către bacterii patogene, care devin și rezistente la antibiotice. Vestea bună este că atunci când a fost testat în 3 studii, probioticul B. subtilis a fost sensibil (nerezistent) la toate antibioticele majore utilizate în medicină. Prin urmare, B. subtilis nu poate transmite rezistența la bacteriile patogene.

Acuratețea identificării microbiene. În 2003, a fost publicat un studiu care demonstrează că 7 probiotice comercializate ca conținând B. subtilis conțineau de fapt alte bacterii strâns înrudite. Cu toate acestea, microbiologii raportează că astăzi există toate condițiile pentru identificarea fiabilă a B.subtilis. Prin urmare, compoziția corectă a probioticului depinde de responsabilitatea producătorului care îl produce.

Trebuie amintit că, ca și alte probiotice, B.subtilis nu este prescris pacienților cu imunodeficiență severă (slăbirea organismului după infecții severe, radioterapie și chimioterapie, pacienți cu HIV/SIDA etc.) din cauza posibilității de generalizare a infectie si dezvoltarea sepsisului.

O publicație a enumerat caracteristicile unui probiotic „bun”. Printre altele, autorii au inclus capacitatea bacteriilor de a oferi

un efect pozitiv asupra gazdei, de exemplu creșterea rezistenței la boli. Probioticul trebuie să fie nepatogen și non-toxic. Trebuie să poată supraviețui și să se dezvolte în interiorul tractului gastrointestinal - adică să fie rezistent la valori scăzute ale pH-ului și acizii organici. După cum rezultă din această revizuire, toate aceste proprietăți sunt inerente bacteriei probiotice B.subtilis.

Conform studiilor experimentale și clinice, există o serie de indicații atunci când este adecvată prescrierea unui probiotic pe bază de B.subtilis. În primul rând, aceasta este includerea unui probiotic în terapia complexă a infecțiilor intestinale, inclusiv diareea călătorilor, precum și utilizarea acestuia pentru prevenirea infecțiilor respiratorii în sezonul rece. Probioticul va fi util în timpul cursurilor de antibioticoterapie orală sau parenterală pentru prevenirea diareei asociate antibioticelor. Scopul acestor bacterii va fi important pentru tulburările de digestie și mișcarea alimentelor de diverse origini asociate cu erori în alimentație, modificări ale dietei, boli ale tractului gastrointestinal, tulburări ale sistemului nervos autonom etc.

Probioticele pe bază de B. subtilis se caracterizează printr-un raport ridicat de eficacitate și siguranță.

Bibliografie

1. FAO/WHO (2001) Sănătate și proprietăți nutriționale ale probioticelor din alimente, inclusiv laptele praf cu bacterii lactice vii. Organizația pentru Alimentație și Agricultură a Națiunilor Unite și Organizația Mondială a Sănătății Raport de consultare de experți/FAO/OMS. - 2001. - ftp://ftp.fao.org.

2. Sorokulova I. Modern Status and Perspectives of Bacillus Bacteria as Probiotics // J. Prob. Sănătate. - 2013. - Vol. 1, nr. 4. - Numb. de publ. 1000e106.

3. Olmos J., Paniagua-Michel J. Bacillus subtilis O potențială bacterie probiotică pentru a formula furaje funcționale pentru acvacultură // J. Microb. Biochim. Tehnol. - 2014. - Vol. 6, nr 7. - P. 361-365.

4. Evaluarea Bacillus subtilis R0179 privind viabilitatea gastrointestinală și bunăstarea generală: un studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo la adulți sănătoși/Hanifi A., Culpepper T., Mai V. et. al. // Beneficiu. Microbii. - 2015. - Vol. 6, nr 1. - P. 19-27.

5. Leser T.D., Knarreborg A., Worm J. Germination and outgrowth of Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis spores in the gastrointestinal tract of porcs // J. Appl. Microbiol. - 2008. - Vol. 104, nr 4. - P. 1025-1033.

6. Jadamus A., Vahjen W., Simon O. Growth behavior of a spore forming probiotic strain in the gastrointestinal tract of broiler pui și purcei // Arch. Tiernahr. - 2001. - Vol. 54, nr 1. - P. 1-17.

7. Soarta și diseminarea sporilor de Bacillus subtilis într-un model murin / Hoa T.T., Duc L.H., Isticato R. și colab. // Microbiologie aplicată și de mediu. - 2001. - Vol. 67, nr 9. - str. 38193823.

8. Ciclul de viață intestinal al Bacillus subtilis și al rudelor apropiate / Tam N.K.M., Uyen N.Q., Hong H.A. et al. // Jurnalul de bacteriologie. - 2006. - Vol. 188, nr 7. - P. 2692-2700.

9. Stein T. Antibioticele Bacillus subtilis: structuri, sinteze și funcții specifice // Mol. Microbiol. - 2005. - Vol. 56, nr 4. - p. 845-857.

10. Producția de metaboliți antimicrobieni de către Bacillus subtilis imobilizați în gel de poliacrilamidă/Awais M, Pervez, A., Yaqub Asim, Shah M.M. //Pakistan J. Zool. - 2010. - Vol. 42, nr 3. - P. 267-275.

11. Lelyak A.A., Shternshis M.V. Potențialul antagonist al tulpinilor siberiene de Bacillus spp. în legătură cu agenții patogeni ai bolilor animalelor și plantelor // Buletinul Universității de Stat din Tomsk. Biologie. - 2014. - Nr. 1. - P. 42-55.

12. Compuși antimicrobieni produși de Bacillus spp. and Applications in Food/ Baruzzi F., Quintieri L., Morea M., Caputo L. // Science against Microbial Pathogens: Communicating Current Research and Technological Advances (Vilas A.M., ed.). - Badajoz, Spania: Formatex, 2011. - P. 1102-1111.

13. Două peptide asemănătoare lantibioticelor provin din grupul de gene ericine a Bacillus subtilis A1/3 / Stein T., Borchert S., Conrad B. et al. // J. Bacteriol. - 2002. - Vol. 184, nr 6. - P. 1703-1711.

14. Wang G. Peptide și proteine ​​​​antimicrobiene umane // Farmaceutice. - 2014. - Vol. 7, nr 5. - p. 545-594.

15. Peptide antimicrobiene din genul Bacillus: o nouă eră pentru antibiotice / Sumi C.D., Yang B.W., Yeo I.C., Hahm Y.T. //Poate sa. J. Microbiol. - 2015. - Vol. 61, nr 2. - P. 93-103.

16. Efectele sporilor Bacillus subtilis B10 asupra viabilității și funcțiilor biologice ale macrofagelor murine/Huang Q., Xu X., Mao Y.L. et al. //Anim. Sci. J. - 2013. - Vol. 84, nr 3. - P. 247-252.

17. Efectele modulatoare ale Bacillus subtilis BS02 asupra viabilității și răspunsurilor imune ale macrofagelor murine RAW 264.7 / Huang Q., Li Y.L., Xu X. și colab. // Journal of Animal and Veterinary Advances. - 2012. - Vol. 11, nr. 11. - P. 1934-1938.

18. Efectele imunomodulatoare ale sporilor B4 de Bacillus subtilis (natto) asupra macrofagelor murine/Xu X, Huang Q., Mao Y. et al. // Microbiol. Imunol. - 2012. - Vol. 56, nr. 12. - P. 817-824.

19. Microbiile alimentate direct pe bază de Bacillus subtilis măresc funcția macrofagelor la puii de carne/Lee K.W., Li G., Lillehoj H.S. et al. //Rez. Veterinar. Sci. - 2011. - Vol. 91, nr 3. - P. e87-e91.

20. Protecția împotriva inflamației intestinale prin exopolizaharide bacteriene / Jones S.E., Paynich M.L., Kearns D.B., Knight K.L. // J. Immunol. - 2014. - Vol. 192, nr 10. - str. 48134820.

21. Molecula cu detecție a cvorumului Bacillus subtilis CSF contribuie la homeostazia intestinală prin OCTN2, un transportor membranar al celulei gazdă/ Fujiya M., Musch M.W., Nakagawa Y. și colab. // Microb gazdă celulară. - 2007. - Vol. 1, nr 4. - p. 299-308.

22. Zhang Y., Begley T.P. Clonarea, secvențierea și reglarea thiA, o genă de biosinteză a tiaminei din Bacillus subtilis // Gene. - 1997. - Vol. 198, nr.1-2. - P. 73-82.

23. Structura cristalină a tiamin-fosfat sintazei din Bacillus subtilis la rezoluție 1,25 A / Chiu H.J., Reddick J.J., Begley T.P., Ealick S.E. //Biochimie. - 1999. - Vol. 38, nr 20. - p. 6460-6470.

24. YaaD și yaaE sunt implicate în biosinteza vitaminei B6 în Bacillus subtilis / Sakai A., Kita M., Katsuragi T. și colab. // J. Biosci. Bioing. - 2002. - Vol. 93, nr 3. - P. 309-312.

25. Calea de formare a glicolaldehidei în Bacillus subtilis în raport cu biosinteza vitaminei B6/Sakai A., Katayama K., Katsuragi T., Tani Y // J. Biosci. Bioing. - 2001. - Vol. 91, nr 2. - p. 147152.

26. Investigarea 1-deoxi-D-xiluloz 5-fosfat sintetazei și transketolazei Bacillus subtilis în relație cu biosinteza vitaminei B6 / Sakai A., Kinoshita N., Kita M. și colab. // J. Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokio). - 2003. - Vol. 49, nr 1. - P. 73-75.

27. Ikeda H., Doi Y. A vitamina-K2-binding factor secreted from Bacillus subtilis // Eur. J. Biochim. - 1990. - Vol. 192, nr 1. -P. 219-224.

28. Structura și reactivitatea Bacillus subtilis MenD care catalizează primul pas angajat în biosinteza menachinonei / Dawson A., Chen M, Fyfe P.K. et al. // J. Mol. Biol. - 2010. - Vol. 401, nr 2. - p. 253-264.

29. Bentley R., Meganathan R. Biosinteza vitaminei K (menachinona) în bacterii // Recenzii microbiologice. - 1982. - Vol. 46, nr 3. - P. 241-280.

30. Aminoacizi extracelulari ai bacteriilor aerobe formatoare de spori / Smirnov V.V., Reznik S.R., Kudriavtsev V.A. et al. // Mikro-biologiia. - 1992. - Vol. 61, nr 5. - P. 865-872.

31. Chattopadhyay S.P., Banerjee A.K. Producerea valinei de către un Bacillus sp. // Z. Allg. microbiol. - 1978. - Vol. 18, nr 4. -P. 243-254.

32. Exprimarea markerilor de activare pe limfocite din sângele periferic după administrarea orală a sporilor de Bacillus subtilis / Caruso A., Flamminio G., Folghera S. et al. //Int. J. Immunofar-macol. - 1993. - Vol. 15, nr 2. - P. 87-92.

33. Activitatea imunostimulatoare a sporilor de Bacillus / Huang J.M., La Ragione R.M., Nunez A., Cutting S.M. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. - 2008. - Vol. 53, nr 2. - P. 195-203.

34. Sebastian A.P., Keerthi T.R. Efectul imunomodulator al tulpinii probiotice Bacillus subtilis MBTU PBBMI spori la șoareci Balb/C // Jurnalul Internațional de Inginerie și Cercetare Tehnică (IJETR). - 2014. - Vol. 2, nr 11. - P. 258-260.

35. R&S&nen L., Mustikkam&ki U.P., Arvilommi H. Răspunsul policlonal al limfocitelor umane la pereții celulari bacterieni, peptido-glicani și acizii teicoici // Imunologie. - 1982. - Vol. 46, nr 3. - P. 481-486.

36. Efectul Bacillus subtilis natto asupra performanței de creștere la rațele de Moscova / Sheng-Qiu T., Xiao-Ying D., Chun-Mei J. și colab. //Rev. Sutiene. Cienc. Avic. - 2013. - Vol. 15, nr 3. - p. 191197.

37. Evaluarea unui probiotic pe bază de Bacillus subtilis și endosporii săi în obținerea plămânilor sănătoși la porci / Ayala L., Bocourt R., Milian G. și colab. // Jurnalul Cuban de Științe Agricole. - 2012. - Vol. 46, nr 4. - P. 391-394.

38. Tulpina probiotică Bacillus subtilis CU1 stimulează sistemul imunitar al vârstnicilor în perioada obișnuită a bolii infecțioase: un studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo / Lefevre M., Racedo S.M., Ripert G. și colab. // Imun. Îmbătrânire. - 2015. - Vol. 12. - Numb. de publ. 24.

39. Eerola E., Ling W.H. Microflora intestinală // Encyclopedia of Life Support Systems (EOLSS); http://www.eolss.net.

40. Horosheva T. V., Vodyanoy V., Sorokulova I. Eficacitatea probioticelor Bacillus în prevenirea diareei asociate cu antibiotice: un studiu clinic randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo // JMM Case Reports. - 2014. - DOI: 10.1099/jmmcr.0.004036.

41. Jeong J.S., Kim I.H. Efectul sporilor de Bacillus subtilis C-3102 ca supliment alimentar probiotic asupra performanței de creștere, emisiei de gaze nocive și microflorei intestinale la puii de carne // Poult. Sci. - 2014. - Vol. 93, nr 12. - p. 3097-3103.

42. Screening-ul tulpinilor de Bacillus ca potențiale probiotice și confirmarea ulterioară a eficacității in vivo a Bacillus subtilis MA139 la porci/Guo X., Li D., Lu W. și colab. //Antonie Van Leeu-wenhoek. - 2006. - Vol. 90, nr 2. - P. 139-146.

43. Efectele Bacillus subtilis KN-42 asupra performanței de creștere, diareei și florei bacteriene fecale a purceilor înțărcați / Hu Y, Dun Y, Li S. și colab. // Asia-Australi J. Anim. Sci. - 2014. - Vol. 27, nr 8. - P. 1131-1140.

44. Efectele Bacillus subtilis KD1 asupra florei intestinale ale broilerului / Wu B.Q., Zhang T., Guo L.Q., Lin J.F. //Poult. Sci. - 2011. - Vol. 90, nr 11. - p. 2493-2499.

45. Efectul hrănirii cu Bacillus subtilis natto asupra fermentației intestinului posterior și microbiotei vacilor de lapte Holstein / Song D.J., Kang H.Y., Wang J.Q. et al. // Jurnalul Asia-Australazian de Științe Animale. - 2014. - Vol. 27, nr 4. - P. 495-502.

46. ​​​​Yang J.J., Niu C.C., Guo X.H. Modele de cultură mixtă pentru prezicerea interacțiunilor microbiene intestinale dintre Escheri-chia coli și Lactobacillus în prezența probioticului Bacillus subtilis//Benef. Microbii. - 2015. - Vol. 6, nr 6. - p. 871877.

47. Zhang Y.R., Xiong H.R., Guo X.H. Viabilitatea sporită a Lactobacillus reuteri pentru producția de probiotice în fermentația mixtă în stare solidă în prezența Bacillus subtilis // Folia Microbiol. (Praha). - 2014. - Vol. 59, nr 1. - P. 31-36.

48. Creșterea și viabilitatea îmbunătățite a lactobacililor în prezența Bacillus subtilis (natto), catalaza sau subtilizină / Hosoi T., Ametani A., Kiuchi K., Kaminogawa S. // Can. J. Microbiol. - 2000. - Vol. 46, nr 10. - p. 892-897.

49. Ajutând pacienții să facă alegeri informate despre probiotice: o nevoie de cercetare / Sharp R.R., Achkar J.-P., Brinich M.A., Farrell R.M. // Jurnalul american de gastroenterologie. - 2009. - Vol. 104, nr 4. - p. 809-813.

50. Crislip M. Probiotice // 2009; https://www.sciencebased-medicine.org.

51. Chan K.Y., Au K.S. Studii asupra producției de celulază de către un Bacillus subtilis//Antonie Van Leeuwenhoek. - 1987. - Vol. 53, nr 2. - P. 125-136.

52. Sharma A., Satyanarayana T. A-amilaze microbiene stabile în acid: Caracteristici, inginerie genetică și aplicații // Process Biochemistry. - 2013. - Vol. 48, nr 2. - p. 201211.

53. Guncheva M., Zhiryakova D. Proprietăți catalitice și potențiale aplicații ale lipazelor Bacillus // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. - 2011. - Vol. 68, nr 1. - P. 1-21.

54. Gupta R., Beg Q.K., Lorenz P. Proteazele alcaline bacteriene: abordări moleculare și aplicații industriale // Appl. Microbiol. Biotehnologia. - 2002. - Vol. 59, nr 1. - P. 15-32.

55. Khan M., Nakkeeran E., Umesh-Kumar S. Potențiala aplicare a pectinazei în dezvoltarea alimentelor funcționale // Annu. Rev. Științe alimentare Tehnol. - 2013. - Vol. 4. - P. 21-34.

56. Tratamentele biologice afectează compoziția chimică a pulpei de cafea/ Ulloa Rojas J.B., Verreth J.A., Amato S., Huisman E.A. // Bioresour. Tehnol. - 2003. - Vol. 89, nr 3. - P. 267-274.

57. Identificarea bacteriilor proteolitice din alimentele fermentate tradiționale thailandeze și potențialele lor reducătoare alergene / Phrom-raksa P., Nagano H., Boonmars T., Kamboonruang C. // J. Food Sci. - 2008. - Vol. 73, nr 4. - P. M189-M195.

58. Pokhilenko V.D., Perelygin V.V. Probiotice bazate pe bacterii formatoare de spori și siguranța acestora // Siguranța chimică și biologică. - 2007. - Nr. 2-3. - P. 32-33.

59. Liu Y.P., Liu X., Dong L. Lactulose plus Bacillus subtilis binar viu în tratamentul bătrânilor cu constipație funcțională // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. - 2012. - Vol. 92, nr 42. - p. 29612964.

60. Hao Q., Dong B.R., Wu T. Probiotice pentru prevenirea infecțiilor acute ale tractului respirator superior // Cochrane Database of Systematic Reviews. - 2015. - Nr. 2. - Art. Nr.: CD006895.

61. Cartwright P. Bacillus subtilis-Identificare și siguranță // Știri probiotice. - 2009. - Nr 2. - www.protexin.com.

62. Avizul Comitetului științific cu privire la o solicitare din partea EFSA referitoare la o abordare generică a evaluării siguranței de către EFSA a microorganismelor utilizate în alimente/hrana pentru animale și producția de alimente/aditivi pentru hrana animalelor // Jurnalul EFSA. - 2005. - Vol. 3, nr 6. - DOI: 10.2903/j.efsa.2005.226.

63. Sanders M.E., Morelli L., Tompkins T.A. Formatori de spori ca probiotice umane: Bacil, SporoLactobacillus și BreviBacillus // Recenzii cuprinzătoare în știința alimentară și siguranța alimentelor. - 2003. - Vol. 2, nr 3. - P. 101-110.

64. Chitra N. Bacteremia asociată cu utilizarea probioticelor în medicină și stomatologie // International Journal of Innovative Research in Science, Engineering and Technology. - 2013. - Vol. 2, nr 12. - p. 7322-7325.

65. Fuller R. Probiotice la om și animale // J. Appl. Bacteriol. - 1989. - Vol. 66, nr 5. - P. 365-378.

Întocmit de Ph.D. A.V. Savustyanenko ■

Savustyanenko A.V.

MEHASHMI DM PROBUTIYUV PE OCHOBi BACILLUS SUBTILIS

Rezumat. Bacteria este unul dintre cei mai promițători promițători, printre restul de zece mii. Mehashzmi 11 probyutichno! dc pov "yazash 1z prin sinteza protimrobnyh re-chovins, poslennyam nespecific 1 specific 1mush-tetu, stimularea creșterii în mod normal! microflora intestinului și apariția fermenpv pe bază de plante. B. subtilis vidshiae peptide sintetizate ribozomal, peptide non-ribosomal sintetizate 1 non-peptide 1z gamă largă de produse -teamzrobno!activitate, scho hoplyuye gram-pozitive, gram-negative bacterp, v1rusi 1 gribi.Rezistența la cikh protimshrobnyh discursuri vinikae rschko. Posilennya ne-

imunitate specifică la pov "yazan cu activarea macrofapv i vivshnennyam 1z le pro-aprindere cytoishv, pshvishchennyam bar"erno! funcționalitatea este mohorâtă! membrane la intestine, vidshennyam vggamshv i amchoacizi (inclusiv non-de căprioară). Întărirea imunității specifice se manifestă prin activarea restului de imunoglobuline T-i B-lsh-focytsh și vivshnennyam - IgG și IgA. B.subtilis este stimulat normal! microflora intestinală, bacterii zokrema genul 1b Lactobacillus și Bifidobacterium. În plus, probytik are o mare varietate de microfloră intestinală. Probutik este prezent în tractul intestinal și se bazează pe următoarele enzime: amshazy, lshazy, protează, pectină-

zi i celulază. În plus față de digestie, enzimele qi vor ruina aHraxap40Bi factori i alergensh vorbire, sho mistatsya într-o viață confortabilă.Rearanjați-vă mecanismele de amorsare a stagnării B.subtilis la depozit într-o manieră cuprinzătoare!terapie pentru combaterea defectelor intestinale;-ki de infectii respiratorii la frig E timpul soartei; se socializeaza prevenirea anti-feselor”! diarei; pentru corectare porushen

supragătirea și uscarea grăsimilor de diverse origini (erori în alimentație, aport alimentar, afecțiuni ale tractului intestinal, afectarea vegetativ! sistemul nervos).ioticele nu este tipică eficiență ridicată a siguranței.

Cuvinte cheie: Bacillus subtilis, probytik, mecanisme de dp.

Savustyanenko A.V.

MECANISME DE ACȚIUNE A PROBIOTICELOR BAZATE PE BACILLUS SUBTILIS

Rezumat. Bacteria B.subtilis este unul dintre cele mai probiotice probiotice studiate în ultimele decenii. Mecanismele acțiunii sale probiotice sunt asociate cu sinteza agenților antimicrobieni, creșterea imunității nespecifice și specifice, stimularea creșterii microflorei normale a intestinului și eliberarea enzimelor digestive. B.subtilis eliberează peptide sintetizate ribozomal, peptide non-ribozomal sintetizate și substanțe non-peptidice cu un spectru larg de activitate antimicrobiană care acoperă bacterii grampozitive, gram-negative, viruși și ciuperci. Rezistența la acești agenți antimicrobieni este rară. Creșterea imunității nespecifice este asociată cu activarea macrofagelor și eliberarea de citokine proinflamatorii din acestea, creșterea funcției de barieră a mucoasei intestinale, eliberarea de vitamine și aminoacizi (inclusiv cei esențiali). Creșterea imunității specifice se manifestă prin activarea limfocitelor T și B și eliberarea din acestea din urmă a imunoglobulinelor - IgG și IgA. B.subtilis stimul-

întârzie creșterea florei intestinale normale, în special a bacteriilor din genul Lactobacillus și Bifidobacterium. În plus, probioticul crește diversitatea microflorei intestinale. Probioticul secretă toate enzimele digestive majore în lumenul intestinal: amilaze, lipaze, proteaze, pectinaze și celulaze. Pe lângă digestie, aceste enzime distrug factorii antinutriționali și substanțele alergene conținute în alimente. Aceste mecanisme de acțiune fac rezonabilă utilizarea B. subtilis în terapia combinată pentru tratarea infecțiilor intestinale; prevenirea infecțiilor respiratorii în timpul sezonului rece; prevenirea diareei asociate cu antibiotice; pentru corectarea digestiei alimentelor și a tulburărilor de mișcare de diverse origini (erori în alimentație, modificări ale dietei, boli ale tractului gastro-intestinal, tulburări ale sistemului nervos autonom etc.). B.subtilis nu provoacă de obicei reacții adverse. Acest probiotic se caracterizează printr-un raport ridicat de eficacitate și siguranță.

Cuvinte cheie: Bacillus subtilis, probiotic, mecanisme de acțiune.

Bacillus subtilis este unul dintre reprezentanții speciilor aerobe, Gram-pozitive. Datorită faptului că extractul de fân este folosit pentru a obține culturi de îmbogățire ale acestui microorganism, al doilea nume al bacilului este Bacillus subtilis. a fost introdus pentru prima dată de celebrul naturalist german Christian Gottfried Ehrenberg în 1835, dar în interpretarea sa acest microorganism a fost numit Vibrio subtilis. Și și-a primit numele modern Bacillus subtilis deja în 1872. Astăzi este unul dintre cei mai faimoși și mai bine studiati reprezentanți ai genului de bacili.

Proprietăți biologice

Bacilul se caracterizează prin forma unei tije drepte, care are o structură transparentă. Grosimea aproximativă a Bacillus subtilis este de 0,7 micrometri. Și în lungime, un astfel de bacil poate ajunge de la doi până la opt micrometri.

Bacillus subtilis, ca și alți bacili, se reproduc prin diviziune. În unele cazuri, după ce a avut loc diviziunea transversală, bacteriile continuă să rămână conectate în filamente subțiri.

Printre cele mai importante proprietăți biochimice inerente Bacillus subtilis, trebuie evidențiată capacitatea de a acidifica mediul, precum și de a produce antibiotice. Datorită acestor proprietăți, Bacillus subtilis, membru al genului Bacillus, este capabil să reducă impactul diferitelor microorganisme oportuniste și patogene. Bacillus subtilis este un antagonist pentru:

• ciuperci de drojdie;
• salmonela;
• protea;
• streptococi;
• stafilococi.

Alte proprietăți caracteristice ale bacilului includ:

• sinteza vitaminelor, aminoacizilor și factorilor imunoactivi;
• producția activă de enzime capabile să îndepărteze produsele de degradare a țesutului putrefactiv.

Bacteria Bacillus subtilis se caracterizează prin flagelație peritrică, precum și o locație centrală a sporilor de formă ovală și o dimensiune care nu depășește dimensiunea celulei. În ceea ce privește coloniile de Bacillus, acestea sunt albe sau roz, au marginea ondulată, precum și o structură uscată și catifelată, acoperită cu mici riduri.

Bacili în creștere

Pentru a fi eficiente, pot fi necesare mai multe tipuri de medii:

• mediu lichid, și anume bulion cu extract de carne;
• mediu solid - agar cu extract de carne;
• , obtinut sintetic;
• medii care conțin reziduuri vegetale.

Conceptul de agar peptonă de carne înseamnă de obicei agar universal, care poate avea fie o textură densă, fie semi-lichidă. Acest mediu conține componente precum apa din carne, sare de masă, precum și agar zdrobit și spălat bine. Pentru a-l steriliza într-o autoclavă, este necesară o temperatură de cel puțin 120 ºC, iar acest proces ar trebui să dureze aproximativ douăzeci până la treizeci de minute. După ce sterilizarea este completă, mediul finit se va răci în mod natural, dobândind o textură mai densă.

Dezvoltarea cea mai favorabilă a Bacillus subtilis este garantată la temperaturi ale aerului de la +5 la +45 ºC.

Periculos sau nu?

Există mai multe opinii cu privire la patogenitatea Bacilului. Astfel, în conformitate cu normele și reglementările sanitare în vigoare oficial pe teritoriul Federației Ruse, Bacillus subtilis aparține genului de bacterii oportuniste.

Jpg" alt="Fătă care se uită printr-un microscop" width="300" height="188" srcset="" data-srcset="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/07/Vyjavlenie-bakterij-300x188..jpg 640w" sizes="(max-width: 300px) 100vw, 300px"> Однако Большая Советская Энциклопедия, а также авторитетные зарубежные источники твердо настаивают на безопасности Бациллюса субтилис, утверждая, что данный микроорганизм является абсолютно не патогенным. В результате научных исследований была доказана безопасность данных бактерий из рода бацилл как для людей, так и для животных. Таким образом, Управление по контролю качества лекарственных и продовольственных средств в Соединенных Штатах Америки справедливо присвоило Bacillus subtilis статус абсолютно безопасных организмов.!}

Cu toate acestea, în ciuda acestui fapt, prezența fânului Bacillus într-o varietate de conserve, în special pește, carne și legume, nu este permisă în niciun caz. Trebuie avut în vedere întotdeauna că, dacă din anumite motive rămân spori în conserve care și-au păstrat viabilitatea, aceasta înseamnă că atunci când acest produs este depozitat la temperaturi care depășesc +20 ºC, proliferarea agenților patogeni va fi inevitabilă. Prin urmare, pentru a proteja conservele de conținutul de Bacillus, este necesar să urmați cu atenție toate tehnologiile și standardele pentru prepararea produselor de acest tip. De regulă, prezența Bacillus subtilis în alimentele conservate este indicată de prezența unui înveliș cenușiu caracteristic. În plus, apar anumite modificări nefavorabile cu mirosul și consistența conservelor.

Aplicație în medicină și în alte domenii

Data-lazy-type="image" data-src="https://probakteri.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus3-300x236.jpg" alt="baktisubtil" width="300" height="236" srcset="" data-srcset="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus3-300x236..jpg 382w" sizes="(max-width: 300px) 100vw, 300px"> Благодаря биохимическим свойствам достаточно широко распространено применение Бациллюса в производстве медицинских препаратов. Так, Bacillus subtilis из рода бацилл, согласно фармакологическому указателю, принадлежит к таким категориям, как:!}

• Antidiareice.
• Alți imunomodulatori.

Funcția principală a unor astfel de medicamente este de a regla activitatea normală a florei intestinale și echilibrul acesteia. Ca urmare a mentinerii lui la nivel normal Orice manifestări de disbacterioză sunt complet eliminate.

Preparatele cu bacil sunt prescrise pentru afecțiuni precum:

• disbioza intestinală, care are o natură și o origine diferită;
• infecții intestinale acute, răspândite la copii;
• vaginoza bacteriană;
• perioada postoperatorie cu complicatii purulent-septice.

Preparatele de Bacillus subtilis își păstrează în mod ideal toate proprietățile benefice dacă sunt respectate regulile de depozitare. Temperatura optimă a aerului în acest caz este de 25 ºC. În plus, este foarte important să acordați atenție datei de expirare indicate pe ambalaj. Medicamentul Bacillus subtilis are forma unei suspensii medicinale, prezentată în sticle de 2, 5 și 10 mililitri.

Trebuie amintit că utilizarea acestei bacterii din genul Bacillus are și anumite contraindicații. În principal, aceasta este o sensibilitate crescută la componentele constitutive ale medicamentelor.

Cele mai populare medicamente create folosind Bacillus ca ingredient activ includ:

Data-lazy-type="image" data-src="https://probakteri.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus1.jpg" alt="biosporin" width="300" height="185">!}

Caracteristicile bacteriei thuringiensis

O altă bacterie Gram-pozitivă aparținând genului Bacillus thuringiensis are capacitatea de a forma incluziuni în timpul sporulării care au o structură asemănătoare cristalului. Contine delta-endotoxine - substante apartinand categoriei proteinelor entomocide. Forma unui astfel de „cristal” poate fi diferită - cubică, bipiramidală sau rotundă. Proprietățile speciale ale acestei bacterii fac posibilă utilizarea acesteia în domeniul protecției biologice a plantelor.

Proprietăți și caracteristici importante ale Bacillus subtilis

Bacilul se caracterizează prin proprietăți speciale care îi permit să fie utilizat pe scară largă în domeniul medical. Principalele tipuri de bacili includ:

• răspândit în fauna sălbatică;
• siguranță și inofensivă atât pentru oameni, cât și pentru animale;
• activitate enzimatică ridicată pentru reglarea și stimularea optimă a sistemului digestiv;
• rezistență excelentă la enzimele digestive și litice;
• siguranta mediului si rezistenta la o gama larga de temperaturi.

Jpg" alt="fân de bacil" width="300" height="225" srcset="" data-srcset="https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus4-300x225..jpg 285w, https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/08/bacilljus4.jpg 640w" sizes="(max-width: 300px) 100vw, 300px"> !}