Az érelmeszesedés kísérleti modelljei. Módszer az érelmeszesedés modellezésére

1

Nyulakon (n=16) végzett kísérletekben a hiperlipidémia modelljét fejlesztették ki 10%-os Lipofundin emulzió intravénás beadásával 0,5 ml/kg dózisban 30 napon keresztül. A kísérleti modellt a kísérleti állatok vérében a triglicerid- és VLDL-szint 1,4-szeres, az LDL-szint 1,2-szeres növekedése, a HDL-tartalom 1,4-szeres csökkenése jellemezte. A kísérleti nyulak vérének lipidspektrumának változásával egyidejűleg a laktát és a C-reaktív fehérje szintjének 2,1-szeres, illetve 13,4-szeres növekedését mutatták ki.

hiperlipidémia

kísérleti modell

1. Kalinkin M.N., Volkov V.S., Zavarin V.V. Érelmeszesedés: patofiziológia, kezelés, primer prevenció. – Tver: RIC TGMA, 2009. – 215 p.: ill.

2. Kosarev V.V., Babanov S.A. A gyógyszeres terápia mellékhatásai: értékelés és előrejelzés // Sürgősségi gyógyászat. – 2010. – 6. szám [Elektronikus forrás]. URL: http://urgent.mif-ua.com/archive/issue-15105/article-15118/ (elérés dátuma: 2011.08.07.).

3. Kukharcsuk V.V. A diszlipidémia kezelése, mint az ateroszklerózis és szövődményei megelőzésének fontos tényezője // Szisztémás magas vérnyomás. – 2007. – 2. sz. – P. 35–43.

4. Nechaeva G.I., Tereshchenko Yu.V. Lipid rendellenességek megelőzése // Kezelőorvos. – 2010. – 2. szám [Elektronikus forrás]. URL: http://www.lvrach.ru/2010/07/15081579/ (Hozzáférés dátuma: 2011.08.07.).

Bevezetés

A szív- és érrendszeri patológia (koszorúér-betegség, agyi érrendszeri rendellenességek, a perifériás artériák elzáródása) Oroszországot hozta a világ iparosodott országai között az első helyre a munkaképes népesség megbetegedésének, halálozásának és rokkantságának előfordulása tekintetében. Oroszországban évente több mint 1 millió ember hal meg szív- és érrendszeri betegségekben, ezek fele ischaemiás szívbetegségben, további 40%-a pedig az agyi erek károsodásában. A GFOC 2009-es ajánlásai szerint a szív- és érrendszeri betegségek primer és másodlagos megelőzése a fő kockázati tényezők – alacsony fizikai aktivitás, dohányzás, magas vérnyomás, elhízás és lipid-rendellenességek – korrigálását célzó intézkedéseken alapul.

A lipidanyagcsere-zavarok az egyik legfontosabb kockázati tényező az érelmeszesedés kialakulásában. Számos klinikai és epidemiológiai tudományos vizsgálat meggyőzően kimutatta, hogy nemcsak a hiperkoleszterinémia, hanem bármely hiperlipidémia is hozzájárulhat az érelmeszesedés kialakulásához és továbbfejlődéséhez. Jelenleg a hiperlipidémia többféle típusa létezik. Például az általánosan elfogadott rendszerezésnek megfelelően a hiperlipidémiát 6 típusra osztják, beleértve a IIa és IIb altípusok azonosítását. A hiperlipidémia különböző típusai eltérő aterogén potenciállal rendelkeznek, a legnagyobb atherogén hatást a hiperlipidémia fejti ki, amelyet a teljes és a szabad koleszterin szintjének emelkedése jellemez.

Tekintettel arra, hogy korszerű gyógyszeres kezelési módszereket kell kidolgozni a diszlipidémia természetének figyelembevételével, olyan új modellek létrehozására van szükség, amelyek a legteljesebben megfelelnek a különböző típusú vérzsír-rendellenességeknek.

Az új lipidcsökkentő szerek hatékonyságának értékelése során a hiperlipidémia különféle kísérleti modelljeit alkalmazzák. Ezek között megkülönböztethetjük az érelmeszesedés koleszterin-, genetikai, peroxidmodelljét; modell A.N. Klimova et al. (1966, 1969), nyulak aortáján ateroszklerotikus plakkok képződésén alapul homológ szérum parenterális adagolásával kísérleti hiperkoleszterinémiás állatokból stb. Ezek a modellek számos előnnyel együtt jelentős hátrányokkal is járnak a modellreprodukció munkaintenzitásával és időtartamával kapcsolatban (a koleszterin modell 3-4 hónapon belül reprodukálódik). A kisméretű laboratóriumi állatokat (patkányok, tengerimalacok) alkalmazó kísérleti modellek hátránya, hogy nem lehet elegendő mennyiségű vért gyűjteni ahhoz, hogy hosszan tartó kiterjedt biokémiai vizsgálatokat lehessen végezni anélkül, hogy a kísérleti állatok károsodnának. Ebben a tekintetben a nyulak ígéretesebbek a kísérleti atherosclerosis lefolyásának tanulmányozására. A különböző fajokhoz tartozó kísérleti állatok vérének lipid- és lipoprotein-spektruma eltérő, ezért az új anyagok hipolipidémiás hatásának objektívebb megítéléséhez 2-3 fajból javasolt kísérleteket végezni.

Ennek a vizsgálatnak a célja az aterogén hiperlipidémia modelljének kidolgozása volt nyulakban.

Anyagok és metódusok

A kísérleteket mindkét nemből 16, 3,8±0,1 kg testtömegű, kitenyésztett nyúlon végeztük. A lipofundin 10%-os emulziójának (összetétele: szójababolaj - 50 g, közepes szénláncú trigliceridek - 50 g, tojássárgája-foszfatidok - 12 g, glicerin - 25 g, injekcióhoz való víz - 1000 ml) intravénás beadásával váltották ki a hiperlipidémiát. napi 0,5 ml/ttkg adag 30 napig.

A hiperlipidémia kialakulását a kísérleti állatok vérplazmájának lipoprotein-tartalmával követtük nyomon. A kísérlet során hetente biokémiai vizsgálatokat végeztünk, a fül széli vénájából 3-4 ml térfogatban vért vettünk.

A vérszérum lipidspektrumát (összkoleszterin, trigliceridek, HDL) a Biocon® (Németország) által gyártott reagensekkel vizsgálták. Az LDL, VLDL koncentrációját és az atherogenicitási együtthatót számítási módszerrel határoztuk meg.

LDL-koleszterin

VLDL koleszterin

Az atherogenitási együtthatót a következő képlettel számítottuk ki:

A laktátszintet enzimes módszerrel határoztuk meg a Biocon® (Németország) által gyártott reagensekkel.

A biokémiai vizsgálatokat (a lipidspektrum és a laktátszint elemzése) Flexor E (Vital Scientific, Hollandia) automata biokémiai analizátorral végeztük.

A C-reaktív fehérje koncentrációját enzim immunoassay-vel határoztuk meg a Hema LLC (Oroszország) által gyártott tesztrendszerek segítségével, 0,05 mg/l analitikai érzékenységgel. Az enzim immunoassay eredményeit Zenyth 1100 mikrolemezes multidetektorral (Anthos, Ausztria) vettük figyelembe.

Nyulak hiperlipidémiájának modellezésére a Lipofundint azon rendelkezésre álló információk alapján választották ki, hogy a parenterális táplálásra szánt zsíremulziók a vér lipidszintjének emelkedését okozhatják.

A kutatási eredmények statisztikai feldolgozása a szabványos MS Excel 2007 szoftvercsomag segítségével történt. Az 5%-os szignifikanciaszintű összehasonlító vizsgálat mintanagyságát a COMPARE 2 Version 2.57 WinPEPI 11.0 használatával számítottuk ki.

Eredmények és vita

A vizsgálat eredményeként kiderült, hogy 10%-os Lipofundin emulzió (0,5 ml/kg) intravénás beadásával 30 napon keresztül a kísérleti nyulakban súlyos diszlipoproteinémia alakult ki, amelyet a trigliceridek (LDL) szintjének emelkedése jellemez. és a VLDL és a HDL-tartalom csökkenése. A lipofundint kapott nyulak vérének összkoleszterin-tartalmában a teljes megfigyelési időszak alatt nem találtunk jelentős változást (1. táblázat).

1. táblázat – Nyulak vérplazmájának összkoleszterin-, triglicerid- és lipoprotein-tartalmának változása Lipofundin (0,5 ml/kg) intravénás adagolásával

	A vizsgált mutatók
	Összes koleszterin
	Trigliceridek

Megállapították, hogy a nyulak vérében a trigliceridek szintje a Lipofundin bevezetésével fokozatosan emelkedett, és 4 hetes megfigyelés után átlagosan 1,4-szeres volt (p<0,05) выше, чем у интактных животных. Содержание ЛПНП и ЛПОНП в крови подопытных животных возросло на 4-й неделе исследования соответственно в 1,2 (p<0,05) и 1,4 раза (p<0,05) по сравнению с исходным уровнем. Обращает на себя внимание тот факт, что уровень ЛПВП в крови подопытных кроликов снизился уже на 2-й неделе эксперимента и через 4 недели исследования был в среднем в 1,4 раза (p<0,05) ниже, чем у интактных животных.

Meg kell jegyezni, hogy a Lipofundin hatására kialakult súlyos diszlipoproteinémia atherogén jellegű volt, amit a kísérleti hiperlipidémiában szenvedő kísérleti állatok atherogenicitási együtthatójának átlagosan 1,8-szoros növekedése bizonyít (p)<0,05) по сравнению с интактными животными (таблица 2).

2. táblázat - Nyulak vérplazmájában az aterogén együttható, a laktát és a C-reaktív fehérje tartalom értékének változása Lipofundin (0,5 ml/kg) intravénás adagolásával

	Kutatható index
	Laktát, U/l
	C-reaktív fehérje, mg/l

* - a kontrollhoz képest (a Lipofundin beadása előtt) szignifikáns különbségek vannak.

A lipofundint kapó kísérleti nyulak vérének lipidspektrumának változásával egyidejűleg a laktát és a C-reaktív fehérje szintjének 2,1-szeres növekedését mutatták ki (p<0,05) и в 13,4 раза (p<0,05) по сравнению с их содержанием у интактных животных. Возрастание уровня молочной кислоты в крови кроликов с экспериментальной гиперлипидемией, вероятно, свидетельствует о развитии тканевой гипоксии. С-реактивный белок, получивший свое название из-за способности вступать в реакцию преципитации с С-полисахаридом пневмококков, стимулирует иммунные реакции, в т. ч. фагоцитоз, участвует во взаимодействии Т- и В-лимфоцитов, активирует классическую систему комплемента, является высокочувствительным и быстрым индикатором повреждения тканей при воспалении, некрозе, травме. Увеличение его содержания при экспериментальной гиперлипидемии, возможно, является отражением повреждения сосудистой стенки у подопытных животных.

Így kidolgoztunk egy kísérleti modellt az aterogén hiperlipidémia kimutatására nyulakban. A hiperlipidémia ezen modelljét a trigliceridek, az LDL és a VLDL emelkedett szintje jellemezte. Ismeretes, hogy a IIa, IIb és III altípushoz tartozó hiperlipidémiák rendelkeznek a legnagyobb aterogén hatással. A hiperlipidémia fenotípusos rendszerezésének megfelelően (D. Fredrekson, 1967) a kidolgozott modell a IIb típusnak felelt meg.

A nyulak hiperlipidémiájának ez a modellje az egyik leginkább aterogén modell, ami szintén megerősíti az aterogén együttható növekedését.

A kidolgozott modell alkalmas hatékony antiatherogén szerek keresésére, mivel az egyszerűség, a megbízhatóság és a végrehajtás gyorsasága jellemzi. Súlyos hiperlipidémia a Lipofundin adagolásának megkezdése után 1 hónapon belül alakul ki, míg a koleszterinterhelés alkalmazásával összefüggő nyulak hiperlipidémia egyéb kísérleti modelljeinek modellezése 3-4 hónapot igényel.

következtetéseket

1. Lipofundin (0,5 ml/ttkg) 30 napig tartó intravénás adásakor a kísérleti nyulakban a vér lipidspektrumában jelentős változások alakultak ki, amelyeket a trigliceridek és a VLDL szintjének 1,4-szeresére történő emelkedése jellemez.<0,05), ЛПНП в 1,2 раза (p<0,05), снижением содержания ЛПВП в 1,4 раза (p<0,05). Коэффициент атерогенности увеличился в среднем в 1,8 раза (p<0,05).
2. A nyulak hiperlipidémia kidolgozott modellje erősen aterogén, a hiperlipidémia fenotípusos rendszerezése szerint a IIb típusnak felel meg.

Ellenőrzők:

• Mitrokhin N.M., a biológiai tudományok doktora, professzor, helyettes. Az OJSC "Összoroszországi Tudományos Központ a Biológiailag Aktív Anyagok Biztonságáért" igazgatója, Moszkva régió, Staraya Kupavna.
• Slyusar N.N., az orvostudományok doktora, professzor, az IP „N. N. Slyusar professzor laboratóriumának” igazgatója, Tver.

A munka beérkezett 2011.08.22

Bibliográfiai link

Demidova M.A., Volkova O.V., Egorova E.N., Savchuk I.A. ATHEROGÉN HIPERLIPIDÉMIA MODELLEZÉSE NYULBAN // A tudomány és az oktatás modern problémái. – 2011. – 3. sz.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=4689 (Hozzáférés dátuma: 2020.02.01.). Figyelmébe ajánljuk a Természettudományi Akadémia kiadója által kiadott folyóiratokat

Téma: Kísérleti érelmeszesedés

1. Bevezetés: Kísérleti érelmeszesedés

2. Táplálkozási zavarok miatt kialakuló érelváltozások

3. Elváltozások az aortában D-hipervitaminózissal

4. Az aorta nekrózisa és aneurizma patkányokban

5. Necrotizáló arteritis

6. Érrendszeri elváltozások a táplálékban lévő elégtelen fehérje miatt

7. Bizonyos vegyszerek segítségével nyert erek disztrófiás-szklerotikus elváltozásai

8. Aortitis, amelyet az érfal mechanikai termikus és fertőző károsodása okoz

Irodalom

BEVEZETÉS: KÍSÉRLETI ATEROSKLERÓZIS

Az emberi érelmeszesedéshez hasonló érelváltozások kísérleti reprodukcióját úgy érik el, hogy az állatokat koleszterinben gazdag vagy növényi olajban oldott tiszta koleszterinnel etetik. Az érelmeszesedés kísérleti modelljének kidolgozásában az orosz szerzők tanulmányainak volt a legnagyobb jelentősége.

1908-ban A.I. Ignatovsky volt az első, aki megállapította, hogy amikor a nyulakat állati táplálékkal etetik, az aortában olyan változások alakulnak ki, amelyek nagyon emlékeztetnek az emberi érelmeszesedésre. Ugyanebben az évben A.I. Ignatovsky és L.T. Mooro megalkotta az érelmeszesedés klasszikus modelljét, amely megmutatja, hogy ha a nyulakat 1 év 2-61/2 hónapig tojássárgájával etetik, az aorta atheromatosisa alakul ki, amely az intimától kezdve a tunica media felé költözik. Ezeket az adatokat L.M. Starokadomsky (1909) és N.V. Stukkeem (1910). N.V. Veselkin, S.S. Khalatov és N. P. Anichkov megállapította, hogy a sárgája fő aktív része a koleszterin (A. I. Moiseev, 1925). Ezt követően a tiszta OH-koleszterint a sárgájával együtt elkezdték használni az érelmeszesedés megelőzésére. I. Anichkov és S. S. Halatov, 1913).

Az aortában és a nagy erekben bekövetkező ateroszklerotikus elváltozások elérése érdekében a felnőtt nyulakat naponta 3-4 hónapig etetik napraforgóolajban oldott koleszterinnel. A koleszterint felmelegített napraforgóolajban feloldjuk úgy, hogy 5-10% -os oldatot kapjunk, amelyet 35-40 ° -ra melegítve a gyomorba juttatunk; Az állat minden nap 0,2-0,3 g koleszterint kap 1 kg súlyonként. Ha a koleszterin pontos adagolása nem szükséges, akkor zöldségekkel keverve adjuk. 1,5-2 héten belül az állatoknál hiperkoleszterinémia alakul ki, amely fokozatosan eléri a nagyon magas számot (akár 2000 mg%-ot a 150 mg-os normához képest). Az aortában N. N. Anichkov (1947) szerint a következő változások bontakoznak ki. Az ér belső felületén 3-4 héttel a kísérlet megkezdése után ovális alakú foltok és csíkok jelennek meg, kissé megemelkedett. Fokozatosan (60-70 napra) meglehetősen nagy plakkok képződnek, amelyek az ér lumenébe nyúlnak be. Elsősorban az aorta kezdeti részében jelennek meg a billentyűk felett és az ívben a nagy nyaki artériák szájánál; ezek a változások ezt követően az aorta mentén a caudalis irányban terjednek (14. ábra). A plakkok száma és mérete

növekszik, összeolvadnak egymással, és az aortafal folyamatos diffúz megvastagodásait képezik. Ugyanezek a plakkok képződnek a bal szív billentyűin, a koszorúér-, nyaki- és tüdőartériákban. A lipoidok lerakódását figyelik meg a lép központi artériáinak falában és a máj kis artériáiban.

T.A. Sinitsyna (1953) a szív koszorúereinek fő ágainak érelmeszesedésének kiküszöbölésére a nyulakat hosszú ideig tejben oldott tojássárgájával (0,2-0,4 g koleszterin) etette, és ezzel egyidejűleg 0,3 g-ot fecskendezett be. tiouracil. Minden nyúl 170-200 sárgáját kapott a kísérlet során. A korai stádiumban végzett mikroszkópos vizsgálat kimutatja a lipoidok diffúz felhalmozódását az aortafal intersticiális anyagában, különösen a belső rugalmas lamina és az endotélium között. Ezt követően nagy sejtek (poliblasztok és makrofágok) jelennek meg, amelyek lipid anyagokat halmoznak fel kettős törő cseppek formájában koleszterin szeterek formájában. Ugyanakkor azokon a helyeken, ahol a lipoidok lerakódnak, nagy mennyiségben képződnek elasztikus rostok, amelyek leválanak a belső rugalmas lamináról, és a lipoidokat tartalmazó sejtek között helyezkednek el. Hamarosan ezeken a helyeken először kollagén, majd kollagénrostok jelennek meg (N.N. Anichkov, 1947).

Az N. N. Anichkov vezetésével végzett tanulmányokban a fent leírt változások fordított fejlődési folyamatát is tanulmányozták. Ha az állatok koleszterinnel való etetése után 3-4 hónapig leállítják az adagolást, akkor a lipoidok fokozatos felszívódása következik be a plakkokból, ami nyulakban több mint két évig tart. A nagy lipidfelhalmozódás helyein rostos plakkok képződnek, középen lipidmaradványokkal és koleszterinkristályokkal. Pollack (1947) és Fistbrook (1950) azt mutatják, hogy az állatok súlyának növekedésével a kísérleti atherosclerosis súlyossága növekszik.

Hosszú ideig a nyulak maradtak az egyetlen állatfaj, amelyet kísérleti érelmeszesedést okoztak. Ez azzal magyarázható, hogy például a kutyáknál, ha még nagy mennyiségű koleszterint is etetnek, a vér koleszterinszintje kissé megemelkedik, és nem alakul ki érelmeszesedés. Steiner és munkatársai (1949) azonban kimutatták, hogy ha a kutyák koleszterinnel történő etetését kombinálják a pajzsmirigy működésének csökkenésével, jelentős hiperkoleszterinémia lép fel, és érelmeszesedés alakul ki. A kutyák 4 hónapon keresztül, naponta, növekvő mennyiségben kaptak tiouracilt táplálékkal: az első két hónapban 0,8 g-ot, a harmadik hónapban 1 g-ot, majd 1,2 g-ot, ugyanakkor a kutyák napi 10 g táplálékot kaptak. koleszterin, amelyet előzőleg éterben oldottak fel és étellel keverték össze; táplálékot adtak a kutyáknak, miután az éter elpárolgott. Kontrollkísérletek kimutatták, hogy a tiouracil vagy a koleszterin hosszú távú adagolása önmagában kutyáknak nem okoz sem jelentős hiperkoleszterinémiát (4-00 mg%, ha a norma 200 mg%), sem érelmeszesedést. Ugyanakkor, ha a kutyák egyidejűleg kapnak tiouracilt és koleszterint, súlyos hiperkoleszterinémia (akár 1200 mg%) és érelmeszesedés alakul ki.

A kutyák ateroszklerózisának topográfiája sokkal nagyobb mértékben hasonlít az emberi érelmeszesedésre, mint a nyulaknál: a legkifejezettebb változások a hasi aortában vannak, jelentős atherosclerosis figyelhető meg a szív koszorúereinek nagy ágaiban, a szívkoszorúerek jelentős szűkületével. az ér lumenében (15. ábra), sok plakk észlelhető az agy artériáiban. Huper (1946) naponta 50 ml változó viszkozitású (a plazma viszkozitásának 5-6-szorosa) hidroxil-cellulóz oldatot fecskendezett kutyáknak a jugularis vénába, és megfigyelte az atheromatosis kialakulását és az aorta tunica media degeneratív elváltozásait. A kísérleti érelmeszesedés súlyosságának értékelésekor figyelembe kell venni Lindsay és munkatársai (1952, 1955) utasításait, akik azt találták, hogy jelentős érelmeszesedés gyakran előfordul idős kutyákban és macskákban. A lipidlerakódások általában jelentéktelenek, koleszterint nem mutatnak ki bennük.

Bragdon és Boyle (1952) patkányokban érelmeszesedést idézett elő koleszterinnel táplált nyulak szérumából nyert lipoproteinek intravénás injekciójával. Ezeket a lipoproteineket izoláltuk, tisztítottuk és 30 ezer fordulat/perc sebességgel végzett centrifugálással betöményítettük, miközben a szérum sókoncentrációját 1063-ra emeltük. A sófelesleget ezután dialízissel eltávolítottuk. Patkányok napi ismételt injekcióival jelentős lipoidlerakódások jelennek meg az aorta falában és a nagy erekben. Chaikov, Lindsay, Lorenz (1948), Lindsay, Nichols és Chaikov (1.955) madarakban érelmeszesedést szenvedtek el oly módon, hogy időszakonként 1-2 tabletta dietil-stilbesztrolt adtak be a bőr alá (minden tabletta 12-25 mg hatóanyagot tartalmazott); a kísérlet 10 hónapig tartott.

A kialakuló atherosclerosis a topográfiai és morfogenezisben nem különbözött a koleszterintől. A szerzők szerint a madarak érelmeszesedését a szokásos módon - koleszterin etetésével - lehet elérni.

Az ateroszklerózis szaporodása majmokban gyakran kudarccal végződött (Kawamura, idézi Mann és munkatársai, 1953). Mann és munkatársai (1953) azonban az aorta, a nyaki verőér és a combcsont artériáinak kifejezett érelmeszesedését sikerült elérniük majmoknál, amikor 18-30 hónapig koleszterinben gazdag, de nem megfelelő mennyiségű metionint vagy cisztint tartalmazó táplálékkal etették őket. Napi 1 g metionin táplálékhoz adva megakadályozza az érelmeszesedés kialakulását. Korábban Rinehart és Greenberg (1949) érelmeszesedést szenvedett majmokban, amikor 6 hónapig magas koleszterin- és elégtelen piridoxintartalmú étrenden tartották őket.

A kísérleti érelmeszesedés kialakulása felgyorsítható, vagy éppen ellenkezőleg, lelassítható. Számos kutató az érelmeszesedés intenzívebb kialakulását figyelte meg, amikor az állatokat koleszterinnel etetik kísérleti magas vérnyomással kombinálva. Szóval, N.N. Anichkov (1914) kimutatta, hogy ha a hasi aorta lumenét V"-2/3-mal szűkítik, az érelmeszesedés kialakulása a napi 0,4 g koleszterint kapó nyulakban jelentősen felgyorsul. N.I. Anichkova szerint intenzívebb ateroszklerotikus elváltozásokat lehet elérni az állatokban koleszterin etetésével és napi intravénás injekcióval 1:1000 adrenalin oldattal 0,1-0,15 ml mennyiségben 22 napig. Wilens (1943) napi 1 g koleszterint adott a nyulaknak (hetente 6 napon), és 5 órára (szintén heti 6 alkalommal) függőleges helyzetbe állította őket, ami 30-40%-os vérnyomás-emelkedést eredményezett. A kísérlet 4-12 hétig tartott; Ezekben az állatokban az érelmeszesedés szignifikánsan kifejezettebb volt, mint a kontrolloknál (akik csak koleszterint kaptak, vagy függőleges helyzetbe állítottak).

V.S. Smolensky (1952) az érelmeszesedés intenzívebb kialakulását figyelte meg kísérleti magas vérnyomásban szenvedő nyulakban (hasi aorta beszűkülése; az egyik vese gumikapszulával betekerése, a másik eltávolítása).

Tegnap Davis és Friedman (1955) az érelmeszesedés kifejlődésének felgyorsulását figyelték meg állatokban, amikor koleszterint adtak nekik ismételt epinefrin injekcióval kombinálva. A nyulak naponta intravénás epinefrint kaptak 25 mg/1 testtömeg-kilogramm arányban. Ezt az adagot 3-4 nap elteltével 50 mg-ra emelték 1 kg súlyonként. Az injekciók 15-20 napig tartottak. Ugyanebben az időszakban az állatok 0,6-0,7 g koleszterint kaptak. A kísérleti állatok jelentősebb lipoid lerakódást mutattak az aortában, mint a csak koleszterint kapó kontrollnyulak.

Shmidtman (1932) kimutatta a szív fokozott funkcionális terhelésének jelentőségét a koszorúerek érelmeszesedésének kialakulásában. A patkányok napi 0,2 g koleszterint kaptak növényi olajban feloldva táplálékkal együtt. Ugyanakkor az állatokat mindennap futópadon kellett futni. A kísérlet 8 hónapig tartott. A kontroll patkányok koleszterint kaptak, de nem futottak a dobban. Kísérleti állatokban a szív körülbelül 2-szer nagyobb volt, mint a kontroll állatoké (főleg a bal kamra falának hipertrófiája miatt); Náluk a koszorúerek érelmeszesedése különösen kifejezett volt: helyenként az ér lumenét szinte teljesen lezárta az ateroszklerotikus plakk. Kísérleti és kontroll állatokban az aortában az atherosclerosis kialakulásának mértéke megközelítőleg azonos volt.

K.K. Maslova (1956) azt találta, hogy ha nyulakat koleszterinnel (0,2 mg naponta 115 napig) etetnek intravénás nikotinnal (0,2 ml, napi 1%-os oldat) kombinálva, az aorta falában sokkal nagyobb mértékben lerakódik a lipoid, mint olyan esetekben, amikor a nyulak csak koleszterint kapnak. K. K. Maslova ezt a jelenséget azzal magyarázza, hogy a nikotin által okozott dystrofikus vérerek változásai hozzájárulnak a lipoidok intenzívebb felhalmozódásához a falakban. Kelly, Taylor és Huss (1952), Prior és Hartmap (1956) azt mutatják, hogy az aortafal disztrófiás elváltozásainak (mechanikai károsodás, rövid távú fagyás) területein az atheroscleroticus változások különösen hangsúlyosak. Ugyanakkor a lipoidok lerakódása ezeken a helyeken késlelteti és torzítja a helyreállítási folyamatok lefolyását az érfalban.

Számos tanulmány kimutatta bizonyos anyagok késleltető hatását a kísérleti érelmeszesedés kialakulásában. Így, ha a nyulakat koleszterinnel etetik, és egyidejűleg pajzsmirigyet adnak nekik, az érelmeszesedés kialakulása sokkal lassabban megy végbe. V.V. Tatarsky és V.D. Zipperling (1950) azt találta, hogy a thyroidin elősegíti az ateromás plakkok gyorsabb visszafejlődését is. A nyulak naponta 0,5 g koleszterint (0,5%-os napraforgóolajos oldat) kaptak a gyomorba egy csövön keresztül. 3,5 hónapos koleszterinnel való táplálás után elkezdték használni a pajzsmirigyet: napi 0,2 g pajzsmirigyet vizes emulzió formájában a gyomorba szondán keresztül 1,5-3 hónapon keresztül. Ezeknél a nyulaknál a kontroll nyulakkal ellentétben (amelyek nem kaptak pajzsmirigy injekciót) a hiperkoleszterinémia meredekebb csökkenése és az ateromás plakkok kifejezettebb visszafejlődése volt megfigyelhető (kevesebb mennyiségű lipoid az aorta falában, főként a formában rakódott le). nagy cseppek). A kolin késlelteti az érelmeszesedés kialakulását is.

Steiner (1938) 3-4 hónapig hetente háromszor 1 g koleszterint adott a nyulaknak táplálékkal együtt. Ezenkívül az állatok napi 0,5 g kolint kaptak vizes formában

emulziók. Kiderült, hogy a choli jelentősen késlelteti az érelmeszesedés kialakulását. Kimutatták azt is, hogy a kolin hatására az ateromás plakkok gyorsabban visszafordulnak (nyulaknak kolin beadása 60 napig előzetes 110 napos koleszterin-etetés után). Taper adatait Bauman és Rush (1938), valamint Morrisop és Rosi (1948) erősítették meg. Horlick és Duff (1954) azt találta, hogy az atherosclerosis kialakulása jelentősen késik a heparin hatására. A nyulak napi 1 g koleszterint kaptak táplálékkal együtt 12 héten keresztül. Ezzel egyidejűleg az állatok intramuszkuláris injekciót kaptak napi 50 mg heparint. A kezelt nyulakban az érelmeszesedés szignifikánsan kevésbé volt kifejezett, mint a heparint nem kapott kontrollnyulaknál. Hasonló eredményeket értek el korábban Konstenides és munkatársai (1953). Stumpf és Wilens (1954), valamint Gordon, Kobernik és Gardner (1954) azt találták, hogy a kortizon késleltette az ateroszklerózis kialakulását koleszterinnel táplált nyulakban.

Duff és Mac Millap (1949) kimutatta, hogy az alloxán cukorbetegségben szenvedő nyulakban a kísérleti atherosclerosis kialakulása jelentősen késleltetett. A nyulakat intravénásan injektáltuk 5%-os vizes alloxip oldattal (200 mg/1 kg tömeg). 3-4 hét elteltével (amikor a cukorbetegség kialakult) az állatok 60-90 napig koleszterint kaptak (összesen 45-65 g koleszterint kaptak). Ezekben az állatokban a kontroll állatokhoz képest (diabétesz nélkül) az érelmeszesedés szignifikánsan kevésbé volt kifejezett. Egyes kutatók az érelmeszesedés kifejlődésének meredek lelassulását figyelték meg nyulakban, amelyek bár koleszterint kaptak, általános ultraibolya sugárzásnak voltak kitéve. Ezekben az állatokban a szérum koleszterin tartalma kismértékben emelkedett.

Egyes vitaminok jelentős hatással vannak az érelmeszesedés kialakulására. Kimutatták (A. L. Myasnikov, 1950; G. I. Leibman és E. M. Berkovsky, 1951), hogy az aszkorbinsav hatására az érelmeszesedés kialakulása késik. GI. Leibman és E.M. Berkovsky naponta 0,2 g koleszterint adott a nyulaknak 1 testtömegkilogrammonként 3 hónapon keresztül. Ugyanakkor az állatok naponta aszkorbinsavat kaptak (0,1 g/1 kg). Ezekben az állatokban az érelmeszesedés kevésbé volt kifejezett, mint azoknál, amelyek nem kaptak aszkorbinsavat. Azoknál a nyulaknál, amelyek koleszterint (3-4 hónapon keresztül naponta 0,2 g) D-vitaminnal kombinálva kapnak (napi 10 000 egység a kísérlet során), az ateroszklerózisos változások kialakulása felerősödik és felgyorsul (A.L. Myasnikov, 1950).

Brager (1945) szerint az E-vitamin elősegíti a kísérleti koleszterin-atherosclerosis intenzívebb kialakulását: a nyulak 12 héten keresztül hetente háromszor 1 g koleszterint kaptak; Ezzel egyidejűleg 100 mg E-vitamint intramuszkulárisan injekcióztak.Minden állatnál magasabb volt a hypercholesterinaemia és súlyosabb az érelmeszesedés, mint az E-vitamint nem kapó nyulaké.

TÁPLÁLKOZÁSI ZAVAROK ALATT KIALAKULÓ ERÉR LÁSIÓK. AZ AORTA VÁLTOZÁSAI HIPERVITAMINOSISSAL D

A nagy dózisú D-vitamin hatására az állatokban kifejezett változások alakulnak ki a belső szervekben és a nagy erekben. Kreitmayr és Hintzelman (1928) jelentős mészlerakódást figyeltek meg az aorta tunica közegében olyan macskákban, amelyek napi 28 mg besugárzott ergoszterolt kaptak táplálékkal egy hónapon keresztül (16. ábra). Dagaid (1930) patkányokon fedezte fel az aorta mediális zubbonyának nekrotikus elváltozásait, majd meszesedést, aki naponta 10 mg besugárzott ergoszterolt adott 1%-os olívaolajos oldatban. Meessen (1952) 5000 sd-t adott a nyulaknak három hétig, hogy az aorta mediális tunikájának nekrózisát kifejtse. Dg vitamin. Ilyen körülmények között csak mikroszkopikus változások következtek be. Gilman és Gilbert (1956) felfedezték az aorta középső tuskójának disztrófiáját olyan patkányokban, amelyek 5 napon keresztül 100 000 egységet kaptak. D-vitamin 1 testtömegkilogrammonként. Az érrendszeri károsodás intenzívebb volt azoknál az állatoknál, amelyek 40 mikrogramm tiroxint kaptak 21 napig a D-vitamin beadása előtt.

AZ AORTA NEKRÓZSAI ÉS ANEURIZMÁI PATKÁNYOKBAN

Ha a patkányokat hosszú ideig nagy mennyiségű borsót tartalmazó táplálékkal etetik, az aortafalban disztrófiás elváltozások alakulnak ki az aneurizma fokozatos kialakulásával. Bechhubur és Lalich (1952) fehér patkányokat etettek 50% őrölt vagy durva, feldolgozatlan borsót tartalmazó táplálékkal. Az étrendben a borsó mellett élesztő, kazein, olívaolaj, sókeverék és vitaminok is szerepeltek. Az állatok 27-101 napig diétáztak. 28 kísérleti patkányból 20-nál aorta aneurizma alakult ki az ívében. Egyes állatoknál az aneurizma megrepedt, és hatalmas vérömleny alakult ki. A szövettani vizsgálat az aorta mediális membránjának ödémáját, rugalmas rostok pusztulását és kisebb vérzéseket mutatott ki. Ezt követően a fal fibrózisa alakult ki az ér aneurizmális dilatációjával. Panseti és Beard (1952) hasonló kísérletekben 8 kísérleti patkányból 6-ban aneurizma kialakulását figyelték meg a mellkasi aortában. Ezzel együtt az állatokban kyphoscoliosis alakult ki, amely a csigolyatestek disztrófiás elváltozásaiból ered. Öt állat 5-9 hetes korban pusztult el aneurizmarepedés és masszív hemothorax következtében.

Walter és Wirtschaftsr (1956) fiatal patkányokat tartottak (születés után 21 naptól) 50% borsót tartalmazó étrenden; ezen kívül az étrendben szerepelt: kukorica, kazein, tejsópor, vitaminok. Mindezt összekeverve adták az állatoknak. Az utóbbiakat 6 héttel a kísérlet megkezdése után megölték. A fent idézett kísérletekkel ellentétben ezekben a kísérletekben nem csak az ív területén, hanem más részeken is megsérült a porta, beleértve a hasat is. Szövettanilag az erekben két párhuzamosan fejlődő folyamat következett be: egyrészt a rugalmas váz degenerációja és szétesése, másrészt fibrózis. Általában többszörös intramurális hematómát figyeltek meg. Jelentős változások történtek a szív tüdőartériájában és koszorúereiben is. Néhány patkány az aneurizma szakadása miatt pusztult el; ez utóbbiak számos esetben delamináló jellegűek voltak. Lulich (1956) kimutatta, hogy az aortában leírt változásokat a borsóban lévő P-amipopropiopitrit okozza.

NEKROTIKUS ARTERITIS

Holman (1943, 1946) kimutatta, hogy zsírban gazdag étrenden tartott kutyáknál a veseelégtelenség nekrotizáló arteritis kialakulásához vezet. Az állatok olyan táplálékot kaptak, amelyben 32 rész marhamáj, 25 rész nádcukor, 25 rész keményítőszem, 12 rész olaj, 6 rész halolaj volt; Ehhez a keverékhez kaolint, sókat és paradicsomlevet adtunk. A kísérlet 7-8 hétig tartott (az idő szükséges ahhoz, hogy veseelégtelenség esetén az érrendszeri elváltozások jelentkezzenek). A veseelégtelenséget többféleképpen sikerült elérni: kétoldali nefrektómia, 0,5%-os vizes urán-nitrát oldat szubkután injekciója 5 mg/1 kg állati tömeggel, vagy 1%-os vizes higany-klorid oldat intravénás injekciója. 3 mg/1 kg állattömeg. A kísérleti állatok 87%-ánál alakult ki nekrotizáló arteritis. Súlyos fali endocarditist figyeltek meg a szívben. Nekrotizáló arteritis csak akkor alakult ki, ha az állatokat zsírban gazdag táplálékkal etették veseelégtelenséggel kombinálva. Ezen tényezők mindegyike külön-külön nem okozott jelentős károkat az érfalakban.

AZ ÉLELMISZERBEN TALÁLHATÓ ELÉGTELEN MENNYISÉGBŐL KERÜLŐ FEHÉRJE VÁLTOZÁSOK

Hanmap (1951) fehér egereknek a következő összetételű táplálékot adta (százalékban): szacharóz - 86,5, kazein - 4, sókeverék - 4, növényi olaj - 3, halolaj - 2, cisztin - 0,5; glükóz vízmentes keveréke - 0,25 (0,25 g ebből a keverékből 1 mg riboflavint tartalmazott), para-aminobezoesav - 0,1, inozit - 0,1. 100 g diétához 3 mg kalcium-pantotenátot, 1 mg nikotinsavat, 0,5 mg tiamin-hidrokloridot és 0,5 mg piridoxin-hidrokloridot adtunk. Az egerek 4-10 héten belül elpusztultak. Megfigyelték az aorta, a tüdőartéria, valamint a szív, a máj, a hasnyálmirigy, a tüdő és a lép ereinek károsodását. Korai stádiumban egy bazofil, homogén anyag jelent meg az erek intimában, enyhén kiálló plakkokat képezve az endotélium alatt: a mediális membrán fokális károsodása a rugalmas rostok pusztulásával járt. A folyamat az érelmeszesedés kialakulásával ért véget, mész lerakódásával a degenerált területeken.

EGYES VEGYI ANYAGOK ALKALMAZÁSÁVAL ELÉRT Disztrófiás-szklerózisos VÁLTOZÁSOK AZ EREKBEN

(adrenalin, nikotin, tiramin, diftéria toxin, nitrátok, nagy molekulatömegű fehérjék)

Josue (1903) kimutatta, hogy 16-20 intravénás adrenalin injekció után jelentős degeneratív elváltozások alakulnak ki nyulakban, főként az aorta középső zubbonyában, amelyek szklerózissal és esetenként aneurizma tágulattal végződnek. Ezt a megfigyelést később sok kutató megerősítette. Erb (1905) 2-3 naponta 0,1-0,3 mg adrenalint fecskendezett a fülvénába 1%-os oldatban; az injekciók több hétig, sőt hónapokig is folytatódtak. Rzhenkhovsky (1904) nyulaknak intravénásan injekciózott 3 csepp 1:1000 arányú adrenalinoldatot; Az injekciókat naponta adták, néha 2-3 napos időközönként 1,5-3 hónapon keresztül. Az adrenalin-szklerózis kialakulásához B. D. Ivanovsky (1937) naponta vagy minden második napon intravénásan fecskendezett nyulaknak 20 000 adrenalin I oldatot 1-2 ml mennyiségben. A nyulak legfeljebb 98 injekciót kaptak. A hosszan tartó adrenalin injekciók hatására az aortában és a nagy erekben természetesen szklerotikus elváltozások alakulnak ki. Elsősorban a középső héj érintett, ahol gócos nekrózis, majd fibrózis kialakulása és a nekrotikus területek meszesedése következik be.

Ziegler (1905) számos esetben megfigyelte az intima megvastagodását, amely néha jelentős. Előfordulhat az aorta aneurizmális megnagyobbodása. A szklerózisos és meszesedéses területek 16-20 injekció után makroszkóposan láthatóvá válnak. Jelentős szklerotikus elváltozások alakulnak ki a vese (Erb), csípő-, nyaki (Ziegler) artériákban és a nagy artériás törzsek viutororgan ágaiban is (B.D. Ivanovsky). B.D. Ivanovsky kimutatta, hogy az ismételt adrenalin-injekciók hatására jelentős változások következnek be a kis artériákban, sőt a kapillárisokban is. Utóbbiak fala megvastagodik, szklerotikussá válik, és a hajszálerek már nem szomszédosak, mint általában, közvetlenül a szervek parenchymalis elemeivel, hanem vékony kötőszöveti réteg választja el őket tőlük.

Walter (1950) az erekben bekövetkezett változásokat tanulmányozva nagy dózisú adrenalin intravénás adagolása során (3 naponta 8 ml 1:1000 oldat) kimutatta, hogy már 10 napon belül és még korábban többszörös vérzést figyeltek meg. a mellkasi aorta középső zubbonyában, valamint a szív, a gyomor, az epehólyag, a vesék és a vastagbél kis artériáiban. A tunica media fibrinoid nekrózisa és súlyos paparteritis perivaszkuláris celluláris reakcióval. A diabsziamin állatoknak történő előzetes beadása megakadályozza ezeknek a változásoknak a kialakulását.

Davis és Uster (1952) kimutatta, hogy az ep i e f r i a (25 mg/1 testtömegkilogramm) és a tiroxin (napi 0,15 mg/1 testtömeg-kilogramm szubkután adagolás) intravénás injekcióinak kombinációjával nyulaknak az aortában szklerotikus elváltozások lépnek fel. különösen kifejezett. Napi 500 mg aszkorbinsav szubkután injekcióval állatokba az érelmeszesedés kialakulása észrevehetően késik. A pajzsmirigy előzetes eltávolítása gátolja az epinefrin (adrenalin) okozta érelmeszesedés kialakulását. Huper (1944) disztrófiás elváltozásokat figyelt meg az aorta mediális tunikájában és a nagy erekben meszesedéssel és ciszták képződésével olyan kutyáknál, akiknél hisztamint észleltek az arcán. 15 mg/1 kg állati testtömeg (lásd: gyomorfekély, hisztamin).

Korábban Hooper és Lapsberg (1940) kimutatta, hogy kutyák mérgezése esetén er itol tetra-nitrát O"m (szájon át adva 32 hétig naponta, 0,00035 g-ról 0,064 g-ra növekvő dózisban) vagy nitrogénsav nátriummal (beadása: szájüregi több hétig, napi 0,4 g), kifejezett disztróf elváltozások fordulnak elő, elsősorban a tüdőartéria középső rétegében és annak ágaiban Jelentős mészlerakódások egyes esetekben éles szűkülethez vezetnek Huper (1944) megfigyelte a tüdő nekrózisának kialakulását. az aorta mediális tunikája, majd meszesedés és ciszták képződése kutyáknál, amelyeket hetente 5 alkalommal, növekvő mennyiségben (40-130 ml) metilcellulóz oldattal fecskendeztek a vénába. A kísérlet hat hónapig tartott. .

Az aortában a fent leírtakhoz hasonló elváltozások érhetők el állatokban ismételt nikotininjekcióval. A. 3. Kozdoba (1929) 76-250 napon keresztül naponta 1-2 ml nikotinoldatot fecskendezett nyulak fülvénájába (átlagos napi adag - 0,02-1,5 mg). Szívhipertrófiát és dystrophiás elváltozásokat figyeltek meg az artériában, aneurizmális dilatáció kíséretében. Minden állat mellékveséje jelentős mértékben megnövekedett. E. A. Zhebrovsky (1908) nyulakban fedezte fel az aorta mediális zubbonyának nekrózisát, ezt követően meszesedést és szklerózist, amelyeket naponta 6-8 órára dohányfüsttel teli tető alá helyezett. A kísérletek 2-6 hónapig folytatódtak. K. K. Maslova (1956) dystrophiás elváltozásokat észlelt az aorta falában, miután 0,2 ml 1%-os nikotinoldatot naponta intravénásan injekcióztak nyulaknak 115 napon keresztül. Bailey (1917) kifejezett disztrófiás elváltozásokat észlelt az aorta és a nagy artériák mediális tunikájában, nekrózissal és többszörös aneurizmával, napi 0,02-0,03 ml diftériatoxin intravénás injekciójával nyulakba 26 napon keresztül.

Duff, Hamilton és Morgan (1939) megfigyelték nyulakban nekrotizáló arteritis kialakulását ismételt tiramin-injekciók hatására (50-100 mg gyógyszer intravénás beadása 1%-os oldat formájában). A kísérlet 106 napig tartott. A nyulak többségénél az aortában, a nagy artériákban és a vesék, a szív és az agy arterioláiban voltak kifejezett elváltozások, és minden egyes esetben általában nem mindhárom szerv, hanem az egyik szerv erei érintettek. Az aortában a középső membrán nekrózisa fordult elő, gyakran meglehetősen jelentős; hasonló elváltozásokat találtak a vesék nagy ereiben. A szívben, a vesében és az agyban arteriolecrosist, majd a vaszkuláris lépés hialnózisát figyelték meg. Egyes nyulaknál az arteriolecrosis következtében hatalmas vérzés alakult ki az agyban.

AZ EREFAL MECHANIKAI HŐMÉGIS ÉS FERTŐZŐS SÉRÜLÉSE ÁLTAL SZEREZETT AORTITEK

Az aortafal gyulladásos és reparatív folyamatainak mintázatának tanulmányozása érdekében egyes kutatók az ér mechanikai sérülését használják. Prpor és Hartman (1956) a hasüreg kinyitása után levágta az aortát, és egy vastag, éles, íves végű tűvel megsérti a steicát. Baldwin, Taylor és Hess (1950) az aortafalat rövid ideig tartó alacsony hőmérséklet hatására károsították. Ehhez a hasi szakaszon szabaddá teszik az aortát, és egy keskeny csövet helyeznek a falra, amelybe szén-dioxidot fecskendeznek. Az aorta falát 10-60 másodpercig lefagyasztják. A fagyás utáni második hét végén a tunica media nekrózisa miatt aorta aneurizma alakul ki. Az esetek felében a sérült területek meszesedése következik be. Gyakran előfordul a csont és a porc metaplaetikus képződése. Az utóbbi legkorábban a sérülés utáni negyedik héten jelenik meg, a csont pedig 8 hét után. A. Soloviev (1929) az aorta és a nyaki artériák falát forró termikus kauterrel kauterizálta. Schlichter (1946) Ahhoz, hogy kutyákban aorta nekrózist okozzon, égette a falát egy égővel. A belső bélés kifejezett elváltozásai (vérzések, nekrózis) esetenként az ér megrepedését okozták. Ha ez nem történt meg, a fal szklerózisa, meszesedéssel, kis üregek kialakulásával alakult ki. N. Andrievich (1901) ezüst-nitrát oldattal kauterizálva megsebesítette az artériák falát; esetenként ezt követően az érintett szegmenst celloidinba tekerték, ami az érfalat irritálva a károsodást jelentősebbé tette.

Talquet (1902) az érfal gennyes gyulladását úgy érte el, hogy staphylococcus-tenyészetet juttatott a környező szövetekbe. Korábban Krok (1894) kimutatta, hogy gennyes arteritis akkor fordul elő, ha az állatnak intravénás mikroorganizmus-tenyészetet adnak be, ha az érfal először megsérül. F.M. Khaletskaya (1937) a fertőző aortitis kialakulásának dinamikáját tanulmányozta, amely a gyulladásos folyamatnak a mellhártyáról az aorta falára való átmenetének eredményeként alakul ki. Nyulak pleurális üregébe a 6. és 7. borda közé fistula csövet vezettünk. A lyuk 3-5 napig, néhány kísérletben három hónapig nyitva maradt. 3-5 nap múlva fibropurulens mellhártyagyulladás és pleurális empyema alakult ki. Gyakran megfigyelték a folyamat átmenetét az aorta falára. Ez utóbbinál kezdetben a középső héj elhalása következett be; hamarabb alakultak ki, mint a gyulladásos folyamat az aortába terjedve, és F.M. véleménye szerint. A Khaletskaya-t az intoxikáció miatti vazomotoros rendellenességek okozták (elsődleges disztrófia és a mediális membrán nekrózisa). Ha a gennyedés átterjedt az aortára, a külső, a középső és a belső membránok egymás után vettek részt a gyulladásos folyamatban, másodlagos nekrotikus elváltozások kialakulásával.

AZ UDMURT EGYETEM KÖZLÖNYE

BIOLÓGIA. FÖLDTUDOMÁNYOK

UDC 612.017.1

I.V. Mensikov, K.V. Fomina, L.V. Beduleva, V.G. Szergejev ATHEROSKLERÓZIS KÍSÉRLETI MODELLE PATKÁNYOKBAN,

A NATÍV EMBERI LIPOPROTEINEKKEL TÖRTÉNŐ IMUNIZÁLÁS OKOZTA

A patkányok natív humán LDL-lel történő immunizálása autoimmun reakció kialakulását idézi elő a natív LDL ellen, amihez dyslipoproteinemia, a perivascularis és epicardialis zsírszövet megnövekedett térfogata, valamint az aortafal ateroszklerotikus károsodása társul, ami alátámasztja azt a hipotézist, hogy autoimmun reakció a natív LDL ellen. ez a betegség kialakulásának oka. A natív LDL-lel végzett immunizálással előidézett patkányok ateroszklerózisa a humán érelmeszesedés megfelelő kísérleti modellje.

Kulcsszavak: atheroma, atherosclerosis, autoimmun reakciók, diszlipidémia, natív alacsony sűrűségű lipoproteinek, patkányok érelmeszesedésének kísérleti modellje, epicardialis zsír.

Bevezetés

Az érelmeszesedés a szív- és érrendszeri betegségek széles skálájának hátterében áll, és számos autoimmun és fertőző betegséghez kapcsolódik. Számos tanulmány ellenére a betegség etiológiája és patogenezise továbbra is ismeretlen. A legtöbb modern hipotézis a károsodott lipoprotein-anyagcsere és az ateroszklerotikus plakkok képződése közötti kapcsolat kulcsfontosságú tényén alapul. Azonban, hogy miért és hogyan történik a lipoprotein-anyagcsere megsértése, ami a betegség kialakulásához vezet, továbbra is az atherogenezis fő tisztázatlan kérdése. A szakirodalom számos külső és belső tényezőt tárgyal, amelyek a lipoprotein-anyagcsere megzavarásához vezetnek; ezeket az adatokat számos áttekintésben ismertetik. Napjaink egyik legvonzóbb hipotézise az atherosclerosis autoimmun természetére vonatkozó hipotézis, amely szerint a károsodott lipoprotein-anyagcsere oka a módosított (oxidált) alacsony sűrűségű lipoproteinek (mLDL) elleni autoimmun reakció kialakulása. Az így létrejövő autoantitestek és sLDL immunkomplexei effektor mechanizmusokat hoznak létre, amelyek gyulladáshoz vezetnek az érfalban. E hipotézis szerint az sLDL és az ellenük termelődő autoantitestek szintje összefüggésbe hozható az atherosclerosis kialakulásával. Egyértelmű kapcsolatot azonban nem találtak közöttük, és az atherosclerosisban szenvedő betegek és az egészséges emberek sLDL-ellenes autoantitesteinek szintjéről rendelkezésre álló adatok ellentmondásosak. Ezek a tények megkérdőjelezik az oLDL elleni autoimmun reakció gondolatát, mint az érelmeszesedés indukcióját és kialakulását. Ugyanakkor ismertek tények az nLDL elleni autoantitestek normális létezésére vonatkozóan, amelyek szintje érelmeszesedésben jelentősen megemelkedik. Korábban végzett vizsgálatok során azt találták, hogy az érelmeszesedésben szenvedő betegek (szívkoszorúér-betegségben szenvedők) vérében szignifikánsan magasabb volt az nLDL elleni antitestek szintje és alacsonyabb az sLDL elleni antitestek szintje, mint az egészségeseknél. Ezekre és más tényekre alapozva megfogalmaztuk azt a hipotézist, hogy a dyslipoproteinémia és az atherogenesis fő oka a natív, nem pedig az oxidált LDL-re adott autoimmun reakció kialakulása. Hipotézisünket alátámasztják azok a viszonylag friss kutatási eredmények is, amelyek arra utalnak, hogy az nLDL ApoB100 fehérje epitópjait felismerő autoimmun T-sejtek elősegítik az ateroszklerózis kialakulását, míg a natív LDL elleni T-sejtes válasz gátlása gátolja az érelmeszesedés kialakulását. Egy adott betegség kialakulásának etiológiai tényezőjének meghatározására irányuló hipotézis tesztelésének egyik legmeggyőzőbb módja az, hogy ez a tényező képes a betegség kialakulását kísérleti állatokban előidézni. Ezért a hipotézis tesztelése érdekében autoimmun reakciót indukáltunk nLDL-re patkányokban natív humán alacsony sűrűségű lipoproteinekkel (hnLDL) történő immunizálással. A hipotézisnek megfelelően az nLDL elleni autoimmun reakció kialakulása dyslipoproteinemia és vascularis atheroma kialakulásához kell, hogy vezessen, mint az atherosclerosis kialakulását emberben jellemző legjelentősebb jelek.

Anyagok és kutatási módszerek

A Wistar patkányokat natív humán LDL-lel (Sigma) immunizáltuk Freund inkomplett adjuvánsában (IF) (Sigma) egyszer intradermálisan, 200 μg dózisban. A kontroll állatokat NAF injekcióval injektáltuk. 13 héten keresztül hetente vettek vért szívpunkcióval. Az utolsó vérvétel 20 héttel az immunizálás után történt. A vérszérumban meghatározták a humán nLDL elleni antitestek szintjét, az összkoleszterin, az LDL koleszterin és a HDL koleszterin szintjét. Az nLDL elleni antitesteket V. N. Khlustov (1999) által leírt módszer szerint határoztuk meg. Az összkoleszterint enzimes módszerrel határoztuk meg a Cholesterol FS kit (Diacon-DS, Oroszország) segítségével. Az LDL- és HDL-koleszterint közvetlen homogén módszerrel határoztuk meg a kereskedelmi forgalomban lévő „LDL-koleszterin”, „HDL-koleszterin” (humán) kitekkel. Az adatokat a kísérleti és a kontroll állatok csoportja közötti átlagértékek különbségeként (A) mutattuk be. A különbségek szignifikanciájának meghatározására Mann-Whitney tesztet használtunk. 20 héttel az immunizálás után minden patkány intrakardiális perfúzión esett át Immunofix fixálóval. A szívet és az aorta egy részét lipidekre festették Sudan III-mal (módosítva: Holman, 1958). Az aorta másik részét szövettani vizsgálatnak vetettük alá, ennek érdekében az ereket paraffinba ágyaztuk. A 6 µm vastag metszeteket hematoxilin-eozinnal festettük.

Eredmények és megvitatása

Az nLDL elleni antitestek kinetikája, az LDL-koleszterin és a HDL-koleszterin szintjének változása a patkányok natív humán LDL-lel történő immunizálása által okozott immunválasz során. Annak a hipotézisnek a tesztelésére, hogy az atherogenezis oka a natív LDL elleni autoimmun reakció kifejlődése, kísérletet tettünk a natív LDL elleni autoimmun reakció kiváltására patkányokban. Kísérleti állatokban autoimmun betegségek indukálására jellemzően az autoantigénekhez hasonló heterológ antigénekkel történő immunizálást alkalmazzák. Általánosan elfogadott, hogy a heterológ antigénnel végzett immunizálás során az autoimmun reakció kialakulásának oka az antigén azon képessége, hogy az autoantigénnel keresztreakcióba lépő limfociták aktiválását idézze elő, vagy idiotípus-anti-idiotípusos kölcsönhatások révén aktiválja az autoreaktív limfocitákat. korábban autoimmun hemolitikus anémia és kollagén által kiváltott ízületi gyulladás kísérleti modelljeiben kimutatták patkányokon. Ezért a natív LDL elleni autoimmun reakció kiváltására patkányokban heterológ (humán) natív LDL-t használtunk.

Patkányok natív humán LDL-lel történő egyszeri immunizálása NAF-ban 200 μg dózisban a humán nLDL elleni antitestek szintjének növekedését okozta, ami az immunizálást követő 13 héten belül következett be (1. ábra). 20 hét után az antitestszintek magasak maradtak. A natív humán LDL elleni antitestek növekedése az immunválasz során lépcsőzetes volt, a natív humán LDL elleni antitestek szintjének minden újabb növekedése spontán volt, és gyorsabban érte el a maximumot, mint az előző. Az immunválasz kialakulásának ez az önfenntartó, önerősítő jellege jellemző a túlérzékenységi reakciók és az autoimmun reakciók kialakulására.

Az nLDL elleni antitestek szintjének növekedését immunizált patkányokban az LDL-koleszterinszint növekedése és a HDL-koleszterinszint csökkenése kísérte a kontroll állatokhoz képest (1. ábra). A lipoprotein metabolizmusban megfigyelt változások az ateroszklerózis kialakulásának általánosan elfogadott jelei az emberben.

A patkányok vérében az LDL koleszterin és a HDL koleszterin szintjének változása, valamint a natív humán LDL elleni antitestek szintjének változása lépcsőzetes természetű volt. Ugyanakkor az LDL- és HDL-koleszterinszint változása az antitest-növekedés új szakaszával elmélyül és kifejezettebbé válik (1. ábra). Az nLDL elleni antitestek kinetikájának, valamint az LDL és HDL koleszterin szintjének összehasonlítása az immunválasz során egyértelműen jelzi a kapcsolatukat. A dyslipoproteinémia kialakulása, a natív lipoproteinek elleni antitestek szintjének változása és a diszlipidémia közötti kapcsolat jelenléte az immunválasz során azt jelzi, hogy natív humán LDL-lel immunizált patkányokban autoimmun reakció alakul ki a natív patkány LDL-re.

Rizs. 1. A natív humán LDL elleni antitestek kinetikája, az LDL koleszterin és a HDL koleszterin szintjének változása natív LDL-lel immunizált patkányok vérében. Az eredményeket az nLDL-vel immunizált patkányok csoportja (n=8) és a kontrollpatkányok csoportja (n=8) közötti átlagok különbségeként mutatjuk be. * - szignifikáns különbségek a kontroll állatokhoz képest p< 0,05, критерий Манна-Уитни

Aorta atheroma kialakulása natív humán LDL-lel immunizált patkányokban. A kontroll patkányokban, amelyek egyetlen adag NAF-ot kaptak, nem észleltek változást az aorta szerkezetében. A patkány aorta intimája egyetlen endoteliális réteg formájában jelenik meg, amely szorosan szomszédos a belső rugalmas membránnal; az aorta közeg több réteg izomsejtekből és egy elasztin lamellákkal elválasztott extracelluláris kollagén mátrixból áll; Az aorta adventitiáját kötő- és zsírszövet képviseli (2a. ábra).

Kísérleti patkányok aortájának szövettani elemzése érelmeszesedésre jellemző elváltozásokat mutatott ki. Az aortafalban többféle elváltozás figyelhető meg, amelyek az ateroszklerotikus károsodás kialakulásának különböző szakaszainak tekinthetők. ábrán. A 2b. ábra az intima megvastagodását, a táptalaj dezorganizációját mutatja, az intimában, valamint a tápközeg és az adventitia között leukociták felhalmozódása látható, a rugalmas lamina nem látható, ami korai atheroscleroticus érkárosodást jelenthet. A 2c. ábra az aorta egy szakaszát mutatja, ahol az intima-media komplexum mélyebb zavarai vannak. Az intima teljes pusztulását, a duzzanatot és a közeg expozícióját észlelik. Így patkányok egyszeri immunizálása natív humán LDL-lel NAF-ben az aortafal károsodását okozza, ami jellemző az érelmeszesedésre.

Natív humán LDL-lel immunizált patkányok epikardiális és perivaszkuláris zsírszövetének térfogatának növekedése. Patkányok egyszeri immunizálása natív humán LDL-lel az epikardiális zsírtérfogat növekedését okozta (3. ábra). ábrán. A 3. ábrán látható, hogy a kontroll állat szívében szinte nincs epikardiális zsír, míg a kísérleti állatokban ennek jelentős térfogata figyelhető meg. Az epikardiális zsírtérfogat növekedése hnLDL-lel immunizált patkányokban 250±35%.

Rizs. 2. Hematoxilin-eozinnal festett aortafal: a - kontroll patkányok aortafala; b - nLDL-lel immunizált patkányok aortafala. Megfigyelhető az intima megvastagodása, a média dezorganizációja és a leukociták felhalmozódása az érfalban. A rugalmas lamina nincs meghatározva; c - aortafal nLDL-lel immunizált patkányokban. Az intima teljes lebomlásának, duzzanatának és a média expozíciójának területe. Vonalhossz = 1200 ct

Rizs. 3. Kontrollpatkányok (1) és humán nLDL-lel immunizált patkányok (2) szíve, Szudánnal festve. Sötét területek - epicardialis zsír

Kísérleti állatokban a perivaszkuláris zsírszövet térfogatának növekedését észlelték - a fehér zsírszövet zsírsejtek számát és méretét az adventitiában (4. a, b ábra). Fontos megjegyezni, hogy az aorta adventitia barna zsírszövetének zsírsejtjeiben a lipideloszlás jellege is megváltozott. A barna zsírszövet egyes zsírsejtjei kis lipidcseppeket tartalmaznak,

általában szétszóródtak a citoplazmában, nagyobbak lettek, összeolvadtak, és a sejtek közepén helyezkedtek el (4c., d. ábra). Feltételezhető, hogy a kísérleti körülmények között nem csak az aorta barna zsírszövet sejtjeinek száma növekedett, hanem azok fokozatos átalakulása fehér zsírszövet zsírsejtekké.

Rizs. 4. Perivaszkuláris zsírszövet: a - kontroll állatok aortájának zsírsejtek; b - nLDL-lel immunizált patkányok aortájának zsírsejtek; c, d - barna zsírszövet adipocitáinak átalakulása fehér zsírszövet zsírszövetekké az nLDL-lel immunizált patkányok aortájának adventitiában és periadventitiában. (1*, 2*, 3* - a zsírsejtek átalakulásának egymást követő szakaszai); 1 - média; 2 - adventitia; 3 - periadventitia. Vonalhossz (A, B, C) = 1400 ct, D - 420 ct

Az utóbbi időben nagy figyelmet fordítanak az epicardialis és perivascularis zsírszövet szerepére az atherosclerosis patogenezisében. Az epikardiális zsírszövet térfogatának növekedését ma a koszorúér-atherosclerosis markereként és fejlődésének prognosztikai mutatójaként tekintik. Az artériákat körülvevő perivaszkuláris zsírszövet szintén szerepet játszik az ateroszklerotikus plakkképződés helyi stimulációjában. In vitro és in vivo eredmények azt mutatták, hogy a perivaszkuláris zsírszövet proinflammatorikus tulajdonságokkal rendelkezik, és képes az érfalban ateroszklerotikus folyamatokat indukálni, ami alátámasztja azt a hipotézist, hogy az érfal károsodása az érfal külső oldaláról indukálódik. Ezért azt a károsodást, amelyet patkányokban az aorta belső falában azonosítottunk, a perivaszkuláris zsírszövet reakciója okozhatja patkányok humán nLDL-lel történő immunizálására.

Lényegében az érelmeszesedés új kísérleti modelljét kaptuk. Annak ellenére, hogy az érelmeszesedésnek számos kísérleti modellje ismert, ma még nincs megfelelő modell, amely az emberi érelmeszesedés minden stádiumát és jelét teljesen reprodukálná. Az általunk kifejlesztett, patkányok érelmeszesedésének kísérleti modellje, amelyet natív humán LDL-lel végzett immunizálással indukáltunk, reprodukálja a betegség fő metabolikus és patofiziológiai jeleit, és így megfelelő kísérleti modell az emberi atherosclerosisra. A kísérleti modell lehetőséget nyit az érelmeszesedés patogenezisében szerepet játszó folyamatok ok-okozati összefüggéseinek vizsgálatára; a természetes LDL-el szembeni természetes tolerancia megzavarásának mechanizmusai, ami érelmeszesedéshez vezet; az atherosclerosis fertőzésekkel és más autoimmun betegségekkel való összefüggései.

Így a patkányok natív humán LDL-lel történő immunizálása autoimmun reakció kialakulását idézi elő a natív LDL ellen, amihez dyslipoproteinemia, a perivascularis és epicardialis zsírszövet térfogatának növekedése, valamint az aortafal ateroszklerotikus károsodása társul, ami a hipotézis mellett szól. hogy autoimmun reakció a natív

Az LDL a betegség oka. A natív humán LDL-lel végzett immunizálással előidézett ateroszklerózis patkányokban a humán atherosclerosis megfelelő kísérleti modellje.

Köszönetnyilvánítás

A munkát az Orosz Föderáció Oktatási és Tudományos Minisztériumának állami megrendelése keretében végezték a „Az érelmeszesedés autoimmun mechanizmusai” témában. Az atherosclerosis új kísérleti modellje patkányokban” 4.5505.2011.

BIBLIOGRÁFIA

1. Masia M., Padilla S., Robledano C. et al. Az endothel funkció és a szubklinikai atherosclerosis értékelése a hepatitis C vírussal összefüggésben HIV-fertőzött betegeknél: keresztmetszeti vizsgálat // BMC Infect. Dis. 2011. évf. 11. 265. o.

2. Muhlestein J.B. A krónikus fertőzés és a koszorúér érelmeszesedés valóban beválik a hipotézis? // J. Am. Coll. Cardiol. 2011. évf. 58. P. 2007-2009.

3. Stassen F.R., Vainas T., Bruggeman C.A. Fertőzés és érelmeszesedés. Alternatív nézet egy elavult hipotézisről // Pharmacol. Ismétlés. 2008. évf. 60. P. 85-92.

4. Symmons D.P., Gabriel S.E. A CVD epidemiológiája reumás betegségekben, különös tekintettel az RA-ra és az SLE-re // Nat. Fordulat. Rheumatol. 2011. évf. 7. P. 399-408.

5. Galkina E., Ley K. Az atherosclerosis immun- és gyulladásos mechanizmusai // Annu Rev. Immunol. 2009. évf.

6. Libby P., Okamoto Y., Rocha V.Z. et al. Gyulladás érelmeszesedésben: átmenet az elméletből a gyakorlatba // Circ. J. 2010. évf. 74. P. 213-220.

7. Shah P.K. A fennmaradó kockázat és a nagy sűrűségű lipoprotein koleszterinszint: van összefüggés? // Rev. Cardiovasc. Med. 2011. évf. 12. P. 55-59.

8. Steinberg D. Az atherogenezis LDL módosításának hipotézise: frissítés // J. Lipid Res. 2009. évf. 50. P. 376-381.

9. Klimov A.N. Az atherogenezis autoimmun elmélete és a módosított lipoproteinek fogalma // Vestn. Akad. Med. Nauk SSSR. 1990. évf. 11. P. 30-36.

10. Klimov A.N., Nagornev V.A. Az atherogenezis koleszterinfogalmának alakulása Anitchkovtól napjainkig // Pediatr. Pathol Mol. Med. 2002. évf. 21. P. 307-320.

11. Virella G., Lopes-Virella M.F. Az atherogenesis és a humorális immunválasz a módosított lipoproteinekre // atherosclerosis. 2008. évf. 200. P. 239-246.

12. Gounopoulos P., Merki E., Hansen L.F. et al. Oxidált alacsony sűrűségű lipoprotein elleni antitestek: epidemiológiai vizsgálatok és lehetséges klinikai alkalmazások szív- és érrendszeri betegségekben // Minerva Cardioangiol. 2007. évf. 55. P. 821-837.

13. Mandal K., Jahangiri M., Xu Q. Az atherosclerosis autoimmun mechanizmusai // Handb. Exp. Pharmacol. 2005. évf. 170. P. 723-743.

14. Matsuura E., Kobayashi K., Inoue K. et al. Intravénás immunglobulin és atherosclerosis // Clin. Fordulat. Allergia Immunol. 2005. Vol 29. P. 311-319.

15. Weinbrenner T., Cladellas M., Covas M.I. et al. Magas oxidatív stressz stabil szívkoszorúér-betegségben szenvedő betegeknél // Ateroszklerózis. 2003. évf. 168. P. 99-106.

16. Khlustov V.N. Az alacsony sűrűségű lipoproteinek elleni autoantitestek kvantitatív meghatározása // Klinikai laboratóriumi diagnosztika. 1999. 4. szám P. 17-20.

17. Mensikov I. V., Makarova M. I., Bulatova N. I. és mások Autoimmun reakciók az atherosclerosis patogenezisében // Immunológia. 2010. 5. szám P. 242-246.

18. Hermansson A., Ketelhuth D., Strodthoff D. et al. A natív alacsony sűrűségű lipoproteinre adott T-sejt-válasz gátlása csökkenti az érelmeszesedést // J. Exp. Med. 2010. évf. 207. P. 1081-1093.

19. Rose N.R. Fertőzés, mimikák és autoimmun betegségek. J. Clin. Invest. 2001. évf. 107. R. 943-944.

20. Wucherpfennig K.W. Az autoimmunitás fertőző ágensek általi kiváltásának mechanizmusai // J. Clin. Invest. 2001. évf. 108. P. 1097-1104.

21. Menshikov I., Beduleva L. Bizonyítékok az idiotípusos hálózat szerepére az autoimmun hemolitikus anaemia indukciójában: elméleti és kísérleti vizsgálatok // Int. Immunol. 2008. évf. 20. P. 193-198.

22. Beduleva L., Menshikov I. Az idiotípus-anti-idiotípus kölcsönhatások szerepe a kollagén által kiváltott ízületi gyulladás indukciójában patkányokban // Immunobiology. 2010. évf. 215. P. 963-970.

23. Djaberi R., Schuijf J.D., van Werkhoven J.M. et al. Az epikardiális zsírszövet kapcsolata a koszorúér atherosclerosissal // Am. J. Cardiol. 2008. évf. 102. P. 1602-1607.

24. Verhagen S.N., Visseren F.L., Perivaszkuláris zsírszövet az atherosclerosis okaként // Atherosclerosis. 2011. évf. 214. P. 3-10.

25. Yorgun H., Canpolat U., Hazirolan T. et al. Az epikardiális zsírszövet vastagsága előrejelzi a leszálló mellkasi aorta ateroszklerózist, amelyet többdetektoros számítógépes tomográfia mutat // Int. J. Cardiovasc. Képalkotás. 2011.

26. Xiangdong L., Yuanwu L., Hua Z. et al. Állatmodellek az atherosclerosis kutatásához: áttekintés // Protein Cell. 2011. évf. 2. P. 189-201.

27. Russell J.C., Proctor S.D. A szív- és érrendszeri betegségek kisállatmodelljei: eszközök a metabolikus szindróma, a diszlipidémia és az atherosclerosis szerepének vizsgálatához // Cardiovasc. Pathol. 2006. 15. évf. P. 318-330.

28. Zaragoza C., Gomez-Guerrero C., Martin-Ventura J.L. et al. A szív- és érrendszeri betegségek állatmodellei // Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011. doi:10.1155/2011/497841.

Szerkesztőhöz érkezett 11.12.02

I. V. Mensikov, K. V. Fomina, L. V. Beduleva, V. G. Szergejev

Az érelmeszesedés új kísérleti egérmodellje humán natív, kis sűrűségű lipoproteinekkel végzett immunizálással

A patkányok natív humán LDL-lel történő immunizálása nLDL-ellenes autoimmun reakcióhoz vezet, amelyet az LDL-C-szint növekedése, a HDL-C-szint csökkenése, valamint a zsírszövet térfogatának epikardiális és perivaszkuláris növekedése kísér, valamint endothel destrukció és médiazavar . Az elért eredmények azt a hipotézist igazolják, hogy az nLDL-re adott autoimmun reakció az atherosclerosis oka. A heterológ nLDL által indukált ateroszklerózis egérmodellje reprodukálja a humán ateroszklerózis kulcsfontosságú metabolikus és patológiás jellemzőit, és alkalmas kísérleti modellje ennek a betegségnek.

Kulcsszavak: atheroma, atherosclerosis, autoimmunity, dyslipidaemia, epicardialis zsírszövet, natív alacsony sűrűségű lipoproteinek, patkány atherosclerosis modell.

Mensikov Igor Viktorovics,

Szövetségi Állami Költségvetési Szakmai Felsőoktatási Intézmény "Udmurt Állami Egyetem"

Email: [e-mail védett]

Fomina Ksenia Vladimirovna, mérnök

Szövetségi Állami Költségvetési Szakmai Felsőoktatási Intézmény "Udmurt Állami Egyetem"

426034, Oroszország, Izhevsk, st. Universitetskaya, 1 (1. épület)

Email: [e-mail védett]

Beduleva Lyubov Viktorovna,

A biológiai tudományok doktora, professzor

Szövetségi Állami Költségvetési Szakmai Felsőoktatási Intézmény "Udmurt Állami Egyetem"

426034, Oroszország, Izhevsk, st. Universitetskaya, 1 (1. épület)

Email: [e-mail védett]

Szergejev Valerij Georgijevics,

A biológiai tudományok doktora, professzor

Szövetségi Állami Költségvetési Szakmai Felsőoktatási Intézmény "Udmurt Állami Egyetem"

426034, Oroszország, Izhevsk, st. Universitetskaya, 1 (1. épület)

Email: [e-mail védett]

Mensikov I. V., a biológia doktora, az Udmurt Állami Egyetem professzora

426034, Oroszország, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail védett]

Fomina K.V., az Udmurt Állami Egyetem mérnöke

426034, Oroszország, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail védett]

Beduleva L.V., a biológia doktora, az Udmurt Állami Egyetem professzora

426034, Oroszország, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail védett]

Szergejev V.G., a biológia doktora, az Udmurt Állami Egyetem professzora

426034, Oroszország, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail védett]

A fogalom eredeti jelentése "érelmeszesedés", Marchand által 1904-ben javasolt, csak kétféle változás következett be: a zsíros anyagok pépes tömegek formájában felhalmozódása az artériák belső bélésében (a görög athere szóból – zabkása) és maga a szklerózis – a kötőszövet megvastagodása. az artéria fala (a görög scleras-ból - kemény). Az érelmeszesedés modern értelmezése sokkal tágabb, és magában foglalja ... „az artériák intimában bekövetkező változások különféle kombinációit, amelyek lipidek, összetett szénhidrátvegyületek, vérelemek és a benne keringő termékek fokális lerakódásában, az artériák képződésében nyilvánulnak meg. kötőszövet és kalcium lerakódás” (WHO meghatározás).

A szklerotikus ereket (a leggyakoribb hely az aorta, a szív artériái, az agy, az alsó végtagok) fokozott sűrűség és törékenység jellemzi. Az elasztikus tulajdonságok csökkenése miatt nem tudják megfelelően megváltoztatni a lumenüket attól függően, hogy egy szerv vagy szövet vérellátást igényel.

Kezdetben a szklerotikusan megváltozott erek, és ennek következtében a szervek és szövetek funkcionális inferioritása csak akkor észlelhető, ha fokozott követelményeket támasztanak velük szemben, azaz a terhelés növekszik. Az ateroszklerotikus folyamat további előrehaladása a teljesítmény csökkenéséhez vezethet még nyugalomban is.

Az ateroszklerotikus folyamat erős mértékét általában az artériák lumenének szűkülése és akár teljes lezárása kíséri. A károsodott vérellátású szervek artériáinak lassú szklerózisa esetén atrófiás változások következnek be, a funkcionálisan aktív parenchyma kötőszövettel történő fokozatos helyettesítésével.

Az artéria lumenének gyors beszűkülése vagy teljes záródása (trombózis, thromboembolia vagy a plakkba történő vérzés esetén) a szervterület vérkeringési zavarával járó elhalásához, azaz szívinfarktushoz vezet. A szívinfarktus a szívkoszorúerek érelmeszesedésének leggyakoribb és legveszélyesebb szövődménye.

Kísérleti modellek. 1912-ben N. N. Anichkov és S. S. Khalatov egy módszert javasoltak nyulak érelmeszesedésének modellezésére úgy, hogy koleszterint juttatnak be a belsejébe (csövön keresztül vagy szokásos táplálékkal keverve). Kifejezett ateroszklerotikus elváltozások alakultak ki több hónap elteltével napi 0,5-0,1 g koleszterin/1 testtömegkilogramm használatával. Általában a vérszérum koleszterinszintjének emelkedése kísérte (a kezdeti szinthez képest 3-5-szöröse), ami az ateroszklerózis kialakulásában vezető patogenetikai szerep feltételezésének alapja volt. hiperkoleszterinémia. Ez a modell nem csak nyulakban, hanem csirkékben, galambokban, majmokban és sertéseknél is könnyen reprodukálható.

A koleszterinre rezisztens kutyákban és patkányokban az érelmeszesedés a koleszterin és a pajzsmirigy működését elnyomó metil-tiouracil együttes hatására reprodukálódik. Ez a két tényező (exogén és endogén) kombinációja elhúzódó és súlyos hiperkoleszterinémiához vezet (26 mmol/l - 100 mg%). A vaj és az epesók élelmiszerekhez való hozzáadása szintén hozzájárul az érelmeszesedés kialakulásához.

Csirkéknél (kakasoknál) az aorta kísérleti érelmeszesedése a dietil-stilbesztrol hosszú távú (4-5 hónapos) expozíciója után alakul ki. Ebben az esetben ateroszklerotikus változások jelennek meg az endogén hiperkoleszterinémia hátterében, amely az anyagcsere hormonális szabályozásának megsértése miatt következik be.

Etiológia. A megadott kísérleti példák, valamint a spontán humán atherosclerosis és epidemiológiájának megfigyelései arra utalnak, hogy ez a kóros folyamat számos tényező (környezeti, genetikai, táplálkozási) együttes hatásának eredményeként alakul ki. Minden egyes esetben ezek közül egy-egy előtérbe kerül. Vannak olyan tényezők, amelyek érelmeszesedést okoznak, és olyan tényezők, amelyek hozzájárulnak annak kialakulásához.

Tovább rizs. 19.12 az atherogenesis fő etiológiai tényezőinek (kockázati tényezőinek) listája szerepel. Némelyikük (öröklődés, nem, életkor) endogén. Hatásuk a születés pillanatától (nem, öröklődés) vagy a születés utáni ontogenezis egy bizonyos szakaszában (életkor) nyilvánul meg. Más tényezők exogének. Hatásukkal az emberi szervezet különböző életkorokban találkozik.

Az örökletes tényezők szerepe Az érelmeszesedés előfordulását igazolják az egyes családokban, valamint az egypetéjű ikrek körében tapasztalható magas szívkoszorúér-betegség előfordulási gyakoriságára vonatkozó statisztikai adatok. A hiperlipoproteinémia örökletes formáiról, a lipoproteinek sejtreceptorainak genetikai rendellenességeiről beszélünk.

Padló. 40-80 éves korukban a férfiak gyakrabban szenvednek atherosclerosisban és atherosclerotikus jellegű szívizominfarktusban, mint a nők (átlagosan 3-4 alkalommal). 70 év elteltével az érelmeszesedés előfordulása férfiak és nők körében megközelítőleg azonos. Ez azt jelzi, hogy az érelmeszesedés előfordulása a nők körében egy későbbi időszakban fordul elő. Ezek a különbségek egyrészt az alacsonyabb kezdeti koleszterinszinttel és annak tartalmával, főként a nem atherogén a-lipoproteinek a nők vérszérumának frakciójában, másrészt a koleszterin szklerózisellenes hatásával függnek össze. női nemi hormonok. Az ivarmirigyek működésének életkorból adódó vagy bármilyen más okból történő csökkenése (petefészkek eltávolítása, besugárzása) a szérum koleszterinszint emelkedését és az érelmeszesedés éles progresszióját okozza.

Feltételezhető, hogy az ösztrogének védőhatása nemcsak a vérszérum koleszterinszintjének szabályozására csökken, hanem az artériás falban zajló egyéb típusú, különösen oxidatív metabolizmusokra is. Az ösztrogéneknek ez a szklerotikus ellenes hatása főként a koszorúerekkel kapcsolatban nyilvánul meg.

Kor. Az ateroszklerotikus érelváltozások gyakoriságának és súlyosságának éles növekedése az életkor miatt, különösen 30 év után (lásd. rizs. 19.12), egyes kutatókban arra az elképzelésre adott okot, hogy az érelmeszesedés az életkor függvénye, és kizárólag biológiai probléma [Davydovsky I.V., 1966]. Ez magyarázza a pesszimista hozzáállást a probléma gyakorlati megoldásához a jövőben. A legtöbb kutató azonban azon a véleményen van, hogy az erek életkorral összefüggő és atherosclerotikus elváltozásai az érelmeszesedés különböző formái, különösen a fejlődésük későbbi szakaszaiban, de az erek életkorral összefüggő változásai hozzájárulnak a kialakulásához. Az életkor érelmeszesedést elősegítő hatása az érfal helyi szerkezeti, fizikokémiai és biokémiai változásaiban és általános anyagcserezavarokban (hiperlipémia, hiperlipoproteinémia, hiperkoleszterinémia) és annak szabályozásában nyilvánul meg.

Túlzott táplálkozás. N. N. Anichkov és S. S. Khalatov kísérleti tanulmányai felvetették az etiológiai szerep fontosságát a túlzott táplálkozás, különösen az étkezési zsírok túlzott bevitelének spontán atherosclerosisának előfordulásában. A magas életszínvonalú országok tapasztalatai meggyőzően igazolják, hogy minél több energiaszükségletet elégítenek ki az állati zsírok és koleszterintartalmú élelmiszerek révén, annál magasabb a vér koleszterinszintje és az érelmeszesedés előfordulása. Éppen ellenkezőleg, azokban az országokban, ahol az állati zsírok a napi étrend energiaértékének kis részét (kb. 10%) teszik ki, az érelmeszesedés előfordulása alacsony (Japán, Kína).

Az USA-ban kidolgozott program szerint ezekre a tényekre alapozva a zsírbevitel 2000-re az összes kalória 40%-áról 30%-ra való csökkentése 20-25%-kal csökkenti a szívinfarktus okozta halálozást.

Feszültség. Az érelmeszesedés előfordulási gyakorisága magasabb a „stresszes szakmákban”, azaz a hosszan tartó és súlyos idegfeszültséget igénylő szakmákban (orvosok, tanárok, oktatók, adminisztratív személyzet, pilóták stb.).

Általánosságban elmondható, hogy az érelmeszesedés incidenciája magasabb a városi lakosság körében, mint a vidéki lakosság körében. Ez azzal magyarázható, hogy egy nagyvárosban az ember gyakrabban van kitéve neurogén stresszhatásoknak. Kísérletek igazolják a neuropszichés stressz lehetséges szerepét az atherosclerosis kialakulásában. A magas zsírtartalmú étrend és az idegi feszültség kombinációja kedvezőtlennek tekintendő.

Fizikai inaktivitás. A 20. század második felében az emberre jellemző mozgásszegény életmód és a fizikai aktivitás meredek csökkenése (hipodinamika) az atherogenezis másik fontos tényezője. Ezt az álláspontot támasztja alá, hogy a fizikai dolgozók körében alacsonyabb az érelmeszesedés, és magasabb a szellemi munkát végzők körében; a koleszterinszint gyorsabb normalizálása a vérszérumban, miután túlzott bevitelét kívülről a fizikai aktivitás hatására.

A kísérlet során a nyulak artériáiban kifejezett ateroszklerotikus elváltozásokat tártak fel speciális ketrecbe helyezésük után, ami jelentősen csökkentette motoros aktivitásukat. A mozgásszegény életmód és a túlzott táplálkozás kombinációja különös aterogén veszélyt jelent.

Mámor. Az alkohol, a nikotin, a bakteriális eredetű mérgezés és a különböző vegyi anyagok (fluoridok, CO, H 2 S, ólom, benzol, higanyvegyületek) okozta mérgezés szintén hozzájárul az érelmeszesedés kialakulásához. A legtöbb vizsgált mérgezésnél nemcsak az érelmeszesedésre jellemző általános zsíranyagcsere-zavarok, hanem az artériás fal jellegzetes disztrófiás és infiltratív-proliferatív elváltozásai is megfigyelhetők.

Artériás magas vérnyomás Nyilvánvalóan nincs önálló jelentősége, mint kockázati tényező. Ezt bizonyítják azon országok (Japán, Kína) tapasztalatai, amelyek lakossága gyakran magas vérnyomásban, ritkán érelmeszesedésben szenved. A magas vérnyomás azonban egyre fontosabb szerepet játszik az érelmeszesedés kialakulásában.

tényező másokkal kombinálva, különösen, ha meghaladja a 160/90 Hgmm-t. Művészet. Így azonos koleszterinszint mellett a hipertóniával járó szívinfarktus előfordulása ötször magasabb, mint normál vérnyomás esetén. Egy olyan nyulakon végzett kísérletben, amelyek táplálékát koleszterinnel egészítették ki, az atheroscleroticus változások gyorsabban fejlődnek ki, és nagyobb mértékben érik el a magas vérnyomás hátterét.

Hormonális zavarok, anyagcsere-betegségek. Egyes esetekben az ateroszklerózis a korábbi hormonális rendellenességek (diabetes mellitus, myxedema, csökkent ivarmirigy-funkció) vagy anyagcsere-betegségek (köszvény, elhízás, xantomatosis, a hiperlipoproteinemia és hiperkoleszterinémia örökletes formái) hátterében fordul elő. A hormonális zavarok etiológiai szerepét az érelmeszesedés kialakulásában igazolják a fenti, e patológia állatokban az endokrin mirigyek befolyásolásával történő kísérleti reprodukciós kísérletei is.

Patogenezis. Az érelmeszesedés patogenezisére vonatkozó létező elméletek kettőre redukálhatók, alapvetően eltérő válaszaikban arra a kérdésre: mi az elsődleges és mi a másodlagos ateroszklerózisban, más szóval mi az oka és mi a következménye - a belső lipoidózis az artériák bélése vagy az utóbbiak degeneratív-proliferatív elváltozásai. Ezt a kérdést először R. Virchow (1856) vetette fel. Elsőként válaszolt rá, rámutatva, hogy „a folyamat minden körülmények között valószínűleg a kötőszöveti alapanyag bizonyos meglazulásával kezdődik, amelyből többnyire az artériák belső rétege áll”.

Azóta megindult a német patológusiskola és más országokban élő követőinek ötlete, miszerint az érelmeszesedés során kezdetben disztrófiás változások alakulnak ki az artéria falának belső bélésében, és a lipidek és kalciumsók lerakódása. másodlagos jelenség. Ennek a koncepciónak az az előnye, hogy képes megmagyarázni a spontán és kísérleti érelmeszesedés kialakulását mind a koleszterin-anyagcsere kifejezett zavarai esetén, mind azok hiányában. E koncepció szerzői elsődleges szerepet tulajdonítanak az artériás falnak, vagyis annak a szubsztrátnak, amely közvetlenül részt vesz a kóros folyamatban. „Az érelmeszesedés nemcsak és nem is annyira az általános anyagcsere-elváltozások tükre (laborban ezek akár megfoghatatlanok is lehetnek), hanem sokkal inkább az érfal szubsztrátjának saját szerkezeti, fizikai és kémiai átalakulásának származéka... Az atherosclerosishoz vezető elsődleges tényező pontosan magában az artériás falban, annak szerkezetében és enzimrendszerében rejlik" [Davydovsky I.V., 1966].

Ezekkel a nézetekkel ellentétben N. N. Anichkov és S. S. Khalatov kísérletei óta, elsősorban a hazai és amerikai szerzők kutatásának köszönhetően, kialakult az általános anyagcserezavarok atherosclerosisának kialakulásában játszott szerep fogalma a szervezetben, amelyet hiperkoleszterinémia, hipertónia kísér. - és dyslipoproteinémia, sikeresen kidolgozták. Ebből a szempontból az atherosclerosis a lipidek, különösen a koleszterin elsődleges, diffúz beszivárgásának következménye az artériák változatlan belső bélésében. Az érfal további elváltozásai (nyálkahártya ödéma jelenségei, a szubendoteliális réteg rostos szerkezeteinek és sejtelemeinek disztrófiás változásai, produktív változások) a benne lévő lipidek miatt alakulnak ki, azaz másodlagosak.

Kezdetben a vérben a lipidek, különösen a koleszterin szintjének növelésében a vezető szerepet a táplálkozási tényezőnek (túlzott táplálkozás) tulajdonították, amely nevet adott az érelmeszesedés előfordulásának megfelelő elméletének - táplálkozási. Hamarosan azonban kiegészíteni kellett, mert nyilvánvalóvá vált, hogy nem minden érelmeszesedés hozható összefüggésbe a táplálkozási hiperkoleszterinémiával. Alapján kombinációs elmélet N. N. Anichkova, az érelmeszesedés kialakulásában a táplálkozási faktoron kívül a lipidanyagcsere endogén rendellenességei és szabályozása, az érfalra gyakorolt ​​mechanikai hatások, a vérnyomás változásai, főként annak emelkedése, valamint az artériás fal disztrófiás változásai önmagukban is fontosak. Az atherogenesis okainak és mechanizmusainak ebben a kombinációjában néhány (táplálkozási és/vagy endogén hiperkoleszterinémia) kezdeti tényező szerepet játszik. Mások vagy megnövekedett koleszterinellátást biztosítanak az érfalban, vagy csökkentik onnan a nyirokereken keresztül történő kiválasztását.

A vérben a koleszterint chilomikronok (a plazmában nem oldódó finom részecskék) és lipoproteinek - trigliceridek, koleszterin-észterek (mag), foszfolipidek, koleszterin és specifikus fehérjék (apoproteinek: APO A, B, C, E) szupramolekuláris heterogén komplexei tartalmazzák. , felületi réteget képez. Vannak bizonyos különbségek a lipoproteinek között a méretben, a mag-héj arányban, a minőségi összetételben és az atherogenitásban.

A vérplazma lipoproteinek négy fő frakcióját azonosították a sűrűségtől és az elektroforetikus mobilitástól függően.

Figyelemre méltó a nagy sűrűségű lipoproteinek (HDL - α-lipoproteinek) frakciójának magas fehérje- és alacsony lipidtartalma, és fordítva, a chilomikronok, a nagyon alacsony sűrűségű lipoproteinek (VLDL) frakcióinak alacsony fehérje- és magas lipidtartalma. - pre-β-lipoproteinek ) és alacsony sűrűségű lipoproteinek (LDL - β-lipoproteinek).

Így a vérplazma lipoproteinekjei az élelmiszerekből szintetizált és nyert koleszterint és triglicerideket juttatják felhasználásuk és tárolásuk helyére.

A HDL antiatherogén hatást fejt ki a koleszterinnek a sejtekből, köztük az erekből a májba való fordított transzportja révén, majd epesavak formájában kiválasztódik a szervezetből. A lipoproteinek fennmaradó frakciói (különösen az LDL) aterogén hatásúak, ami a koleszterin túlzott felhalmozódását okozza az érfalban.

BAN BEN asztal 5 A primer (genetikailag meghatározott) és másodlagos (szerzett) hiperlipoproteinémia osztályozása az aterogén hatás különböző fokú súlyosságával történik. A táblázatból kitűnik, hogy az erek ateromás elváltozásainak kialakulásában a fő szerepet az LDL és a VLDL, ezek fokozott vérkoncentrációja és a vaszkuláris intimába való túlzott bejutása játssza.

Az LDL és VLDL túlzott transzportja az érfalba endothel károsodást okoz.

I. Goldstein és M. Brown amerikai kutatók koncepciója szerint az LDL és a VLDL specifikus receptorokkal (APO B, E-glikoprotein receptorok) való kölcsönhatás révén jutnak be a sejtekbe, majd endocitikusan befogják és lizoszómákkal fuzionálják. Ebben az esetben az LDL fehérjékre és koleszterin-észterekre bomlik. A fehérjék szabad aminosavakká bomlanak, amelyek elhagyják a sejtet. A koleszterin-észterek hidrolízisen mennek keresztül, így szabad koleszterin keletkezik, amely a lizoszómákból bejut a citoplazmába, és ezt követően különféle célokra (membránképzés, szteroid hormonok szintézise stb.) hasznosítják. Fontos, hogy ez a koleszterin gátolja annak endogén forrásból történő szintézisét, feleslegben „tartalékokat” képez koleszterin-észterek és zsírsavak formájában, de ami a legfontosabb, egy visszacsatolási mechanizmus révén gátolja az aterogén lipoproteinek új receptorainak szintézisét, ill. további bejutásuk a sejtbe. Az LP transzport szabályozott receptor-mediált mechanizmusa mellett, amely biztosítja a sejtek belső koleszterinszükségletét, az interendoteliális transzport, valamint az úgynevezett szabályozatlan endocitózis, amely transzcelluláris, beleértve az LDL és VLDL transzendoteliális vezikuláris transzportját. ezt követő exocitózis (az artériák intimájába az endotéliumból, makrofágokból, simaizomsejtekből).

A megfogalmazott elképzeléseket figyelembe véve Az atherosclerosis kezdeti szakaszának mechanizmusa, amelyet a lipidek túlzott felhalmozódása jellemez az artériák intimében, a következők okozhatják:

1. Az LDL receptor által közvetített endocitózisának genetikai anomáliája (receptorok hiánya - kevesebb, mint a norma 2% -a, számuk csökkenése - a norma 2 - 30% -a). Az ilyen hibák jelenlétét családi hiperkoleszterinémiában (II A típusú hiperbetalipoproteinémia) találták homo- és heterozigótákban. Az LDL-receptorok örökletes hibájával rendelkező nyulakat (Watanabe) tenyésztettek ki.

2. A receptor által közvetített endocitózis túlterhelése alimentáris hiperkoleszterinémiában. Mindkét esetben erősen megnövekszik a gyógyszerrészecskék szabályozatlan endocitotikus felvétele az endothel sejtek, a makrofágok és az érfal simaizomsejtjei által a súlyos hiperkoleszterinémia következtében.

3. A hiperplázia, magas vérnyomás és gyulladásos elváltozások miatti atherogén lipoproteinek eltávolításának lassítása az érfalból a nyirokrendszeren keresztül.

Jelentős további pont a lipoproteinek különböző átalakulásai (módosulásai) a vérben és az érfalban. Arról beszélünk, hogy hiperkoleszterinémia esetén LP-IgG autoimmun komplexek képződnek a vérben, LP oldható és oldhatatlan komplexei glikozaminoglikánokkal, fibronektinnel, kollagénnel és elasztinnal az érfalban (A. N. Klimov, V. A. Nagornev).

A natív gyógyszerekkel összehasonlítva a módosított gyógyszerek intimasejtek, elsősorban a makrofágok (koleszterin-szabályozatlan receptorokon keresztül) általi felvétele meredeken megnövekszik. Ez az oka annak, hogy a makrofágok úgynevezett habsejtekké alakulnak át, amelyek a morfológiai alapot képezik. lipidfoltos szakaszokés további fejlődéssel - atherom. A vér makrofágjainak intimába való vándorlását az LP és az interleukin-1 hatására kialakuló monocita kemotaktikus faktor biztosítja, amely magukból a monocitákból szabadul fel.

A végső szakaszban kialakulnak rostos plakkok a simaizomsejtek, fibroblasztok és makrofágok válaszaként a vérlemezkék, endothelsejtek és simaizomsejtek növekedési faktorai által stimulált károsodásokra, valamint a bonyolult elváltozások stádiumában. meszesedés, trombusképződés satöbbi. ( rizs. 19.13).

Az érelmeszesedés patogenezisének fenti koncepcióinak megvannak a maga erősségei és gyengeségei. A szervezet általános anyagcserezavarai és az artériás fal primer lipoidózisa koncepciójának legértékesebb előnye egy kísérleti koleszterinmodell jelenléte. Az érfalban bekövetkező lokális változások elsődleges jelentőségének koncepciója annak ellenére, hogy több mint 100 éve fogalmazódott meg, még nem rendelkezik meggyőző kísérleti modellel.

Amint az a fentiekből látható, általában kiegészíthetik egymást.

1912-ben N. N. Anichkov és S. S. Khalatov egy módszert javasoltak nyulak érelmeszesedésének modellezésére úgy, hogy koleszterint juttatnak be a belsejébe (csövön keresztül vagy szokásos táplálékkal keverve). Kifejezett ateroszklerotikus elváltozások alakultak ki több hónap elteltével napi 0,5-0,1 g koleszterin/1 testtömegkilogramm használatával.

Általában a vérszérum koleszterinszintjének növekedésével jártak együtt (a kezdeti szinthez képest 3-5-ször), ami az atherosclerosis-hiperkoleszterinémia kialakulásában vezető patogenetikai szerep feltételezésének alapja volt. Ez a modell nem csak nyulakban, hanem csirkékben, galambokban, majmokban és sertéseknél is könnyen reprodukálható.

A koleszterinre rezisztens kutyákban és patkányokban az érelmeszesedés a koleszterin és a pajzsmirigy működését elnyomó metil-tiouracil együttes hatására reprodukálódik. Ez a két tényező (exogén és endogén) kombinációja elhúzódó és súlyos hiperkoleszterinémiához vezet (26 mmol/l - 100 mg%). A vaj és az epesók élelmiszerekhez való hozzáadása szintén hozzájárul az érelmeszesedés kialakulásához.

Csirkéknél (kakasoknál) az aorta kísérleti érelmeszesedése a dietil-stilbesztrol hosszú távú (4-5 hónapos) expozíciója után alakul ki. Ebben az esetben ateroszklerotikus változások jelennek meg az endogén hiperkoleszterinémia hátterében, amely az anyagcsere hormonális szabályozásának megsértése miatt következik be.

Bővebben a Kísérleti modellek témáról:

1. 4.2. A „spontán” rosszindulatú daganatok oxigén-peroxid modelljének alapelvei
2. A szív deszimpatizációja a késői klinikai stádiumú Parkinson-kór modelljében
3. Kísérleti modellek. Akut (diffúz) glomerulonephritis.
4. A neuropátiás fájdalom modellje tumorsejtek csontstruktúrákba való befecskendezésekor
5. 3. fejezet A KEMORADIÁTOROS SZÁJNYÁK-NYÁKOLÁS PATHGENESISÉBEN VONATKOZÓ FŐ KAPCSOLATOK KÍSÉRLETI ÉRTÉKELÉSE KIS LABORATÓRIUMI ÁLLATOKON MODELLEZVE