» »

Serološka pretraga krvi antigen c. Zašto se radi serološki test krvi?

02.07.2020

Predmet serologije - antigeni i antitijela

Serološko testiranje (SI) temelji se na sposobnosti antigena i antitijela da se međusobno vežu. SI vam omogućuje da točno identificirate prisutnost određenog virusa ili bakterije kod pacijenta, krvnu grupu i Rh, reaktivnost organizma na antibiotike, autoimune bolesti, hormonalne poremećaje, individualnu specifičnost proteina i odredite učinkovitost terapije.

Antigen i antitijelo slažu se poput ključanice i ključa; kad se sretnu, sigurno se povežu. Ova serološka reakcija omogućuje otkrivanje različitih vrsta protutijela ili antigena.

Sposobnost imunološkog sustava da proizvodi posebne tvari koje neutraliziraju štetne čestice poznata je znanstvenicima već duže vrijeme. No, reakciju antigen-antitijelo u laboratorijskim uvjetima bilo je moguće vidjeti tek krajem 19. stoljeća. Utvrđeno je da se kao rezultat stvaranja veziva kompleksi talože, stvarajući pahuljice ili zamućenje. Takve reakcije nazivaju se aglutinacija i precipitacija. U 20. stoljeću naglo se razvijala serologija, znanost o svojstvima seruma, te su otkrivene nove dijagnostičke metode temeljene na reakcijama antigen-antitijelo. Danas postoji mnogo načina detekcije imunoloških kompleksa, a SI su nezaobilazna karika u dijagnostici, liječenju i stvaranju novih lijekova i cjepiva.

Indikacije za analizu.

Serološki testovi imaju široku primjenu u opstetriciji

Serološke studije prate modernog čovjeka tijekom cijelog života. Prvi testovi za otkrivanje određenih antitijela provode se dok je beba još u maternici. Trudnica daje krv za različite testove kako bi se utvrdio mogući Rh konflikt ili infekcije koje mogu naškoditi trudnom fetusu. Kada se dijete rodi, podvrgava se serološkim testovima za dijagnosticiranje urođenih bolesti. Nakon toga, testovi se poduzimaju iz sljedećih razloga:

Preporučljivo je prestati uzimati lijekove dan prije testa

Budući da serološke pretrage obuhvaćaju širok raspon pretraga, u svakom konkretnom slučaju može biti potrebna određena priprema, ali postoje opća pravila za uzimanje serološke pretrage:

  • Dan prije testa trebali biste ograničiti masnu i prženu hranu u prehrani i isključiti alkohol.
  • Posljednji obrok trebao bi biti dovršen 10 - 12 sati prije analize.
  • Na dan darivanja krvi ne treba piti kavu, čaj ili druga pića. Možete piti čistu vodu u malim količinama.
  • Lijekovi su isključeni prije analize. Ako je nemoguće otkazati termin, morate liječniku dati potpuni popis lijekova, uključujući vitamine i oralne kontraceptive.
  • Sve druge studije ili medicinski postupci provode se nakon SI.
  • Preporuča se prestati pušiti 12 sati prije vađenja krvi.
  • Prethodnog dana treba izbjegavati fizički i emocionalni stres, a prije testa poželjno je sjediti u potpunom miru 15 minuta.
  • SI se propisuju ujutro i uzimaju natašte.

Metode provođenja seroloških istraživanja.

U serologiji se može koristiti veliki broj metoda

Sve metode određivanja kompleksa antigen-antitijelo (Ag-Ab) temelje se na korištenju poznatog Ag ili Ab u potrazi za nepoznatim. Ako je potrebno dokazati Ag, potrebni su dijagnostički imunološki serumi koji sadrže specifična Ab. Ako je svrha SI identificirati Abs, koriste se dijagnostikumi - suspenzije koje sadrže određene Ags.

Serološki testovi mogu odražavati kvalitativni ili kvantitativni rezultat. U kvalitativnoj studiji rezultat može biti negativan ili pozitivan, odnosno željeni element je ili pronađen ili ne. Kvantitativni rezultat izražava se kao numerička vrijednost ili sa znakovima “+” (obično od jedan do četiri).

Jedna od dijagnostičkih metoda je neizravna hemaglutinacija

Serološke metode istraživanja:

  • Aglutinacija. Vezanje Ab za Ag praćeno stvaranjem pahuljica ili sedimenta. Za dokazivanje protutijela u serumu koriste se izravne, neizravne, detaljne, indikativne reakcije.
  • Hemaglutinacija. Koriste se crvene krvne stanice s Ag ili Ab adsorbiranim na njima, koje se lijepe zajedno s odgovarajućim Ab i Ag. Nastali kompleksi ispadaju u obliku zupčastog sedimenta.
  • Taloženje. Formiranje Ag-At kompleksa praćeno taloženjem u obliku oblaka koji se naziva precipitat.
  • Koaglutinacija. Detekcija Ag pomoću Ab adsorbiranog na proteinu stanica stafilokoka.
  • Inhibicija hemaglutinacije. Antitijela imunološkog seruma potiskuju virusna antitijela, kao rezultat toga, virusi gube svoju sposobnost lijepljenja na crvena krvna zrnca.
  • Neizravna Coombsova reakcija. Određuje se abs prema površini Ag eritrocita.
  • Prstenasta oborina. Provodi se na bazi imunološkog seruma sa slojem topljivog Ag.
  • Dvostruka radijalna imunodifuzija. Reakcija se temelji na difuziji antiseruma i komponenti Ag u jažice agara ili agaroze.
  • Reakcija fiksacije komplementa. Veza između Ag i Ab praćena je adsorpcijom komplementa, a kao indikator koriste se ovčji eritrociti i Abs njima u hemolitičkom serumu.
  • Neutralizacija. Na temelju neutralizacije virusnog agensa protutijelima.
  • Reakcije temeljene na obilježavanju Abs i Ags fluorescentnim ili enzimskim sastavom - metode imunofluorescencije (RIF) i imunoenzimskog testa (ELISA).

Metoda imunofluorescencije.

"Sjaj" u mikroskopu tamnog polja

Ova se metoda temelji na upotrebi Abs obilježenih fluorescentnom tvari. Najčešće se kao oznaka koristi fluorescein izotiocijanat koji ima zeleni sjaj u ultraljubičastim zrakama. Rezultat analize procjenjuje se stupnjem svjetline sjaja. Može se koristiti ručna metoda određivanja fluorescentnim mikroskopom, optički mikroskop s fluorescentnim nastavkom, kao i automatska metoda citometrom s mikročipom, protočnim citometrom ili robotskim fluorescentnim mikroskopom.

RIF se provodi izravnim i neizravnim metodama. Izravna metoda znači izravno vezanje sorbiranog Ag na obilježeno Ab. Neizravna metoda uključuje korištenje neobilježenog Ab za vezanje na Ag, a zatim dodavanje obilježenog Ab, čime se izbjegavaju nespecifične reakcije.

Vezani imunosorbentni test.

Imunoenzimski test kao metoda serološke dijagnoze

ELISA se temelji na detekciji Ag-At kompleksa označavanjem jedne od komponenti. Kao oznaka koriste se različiti enzimi, koji kao rezultat enzimske reakcije stvaraju boju. Postoje različite ELISA metode, a mogu se podijeliti na homogene i heterogene metode.

Homogeno znači da se svi koraci reakcije odvijaju u otopini.

Heterogene metode uključuju odvajanje faza korištenjem čvrste podloge.

Homogeno-heterogene metode temelje se na činjenici da Ag-At kompleksi nastaju u otopini, a zatim se za razdvajanje koristi čvrsta faza.

Princip sendvič metode

Postoje mnoge varijacije ELISA metoda, od kojih su neke predstavljene u nastavku.

  1. Metoda sendviča. Imobiliziranom Ab dodaje se otopina s Ag, nakon formiranja kompleksa nosač se ispire od suvišnih komponenti i dodaje označeno Ab. Kao rezultat toga, Ags su stegnuti s imobiliziranim i označenim Abs, otuda i naziv metode.
  2. Nekompetitivni neizravni ELISA. Ispitni serum s Ab dodaje se imobiliziranom Ag. Kada se formiraju kompleksi, višak Abs se ispere i dodaju se označeni Abs koji se mogu vezati na imunološke komplekse pričvršćene na površine jažica.
  3. Kompetitivni izravni ELISA. Ispitni serum i konjugat koji sadrži označene Abs dodaju se imobiliziranim Ags. Nastaje nekoliko tipova Ag-Ab kompleksa: s obilježenim Abs i s neobilježenim Abs, koji se međusobno natječu za vezu s Ag.

Koje infekcije može pomoći identificirati serološki test?

Serološka dijagnostika omogućuje identifikaciju patogena

SI omogućuju identificiranje određene bolesti ako postoji sumnja na nju, odnosno analiza se temelji na spoznaji koji točno element treba tražiti.

Ako pacijent ima određene simptome ili druge studije ukazuju na bolest, propisan je serološki test.

Serološki testovi koriste se za dijagnosticiranje sljedećih infekcija:

  • virus hepatitisa A, B, C, D, E;
  • sifilis;
  • herpes;
  • citomegalovirus;
  • rubeola;
  • ospice;
  • zaušnjaci;
  • Epstein-Barr;
  • Helicobacter;
  • klamidija;
  • mikoplazma;
  • toksoplazma;
  • Giardia;
  • helminti;
  • ureaplazma;
  • parvovirus;
  • virus vodenih kozica;
  • virus krpeljnog encefalitisa;
  • virus denge;
  • hripavac;
  • borelija;
  • legionela.

Serološkim testovima moguće je laboratorijski otkriti bilo kakve infekcije ako je dostupan antigen uzročnika infekcije.

Prednosti serološke metode istraživanja u dijagnostici infekcija.

Serološka dijagnostika - brzo i povoljno

  1. Visoka osjetljivost i specifičnost.
  2. Širok raspon detektabilnih infekcija.
  3. Rana dijagnoza infekcije.
  4. Mogućnost praćenja razvoja bolesti.
  5. Brzina i jednostavnost izvedbe.
  6. Mogućnost korištenja minimalne količine ispitnog materijala.
  7. Sigurnost istraživanja.

Serološke reakcije temelje se na sposobnosti antigena i protutijela za interakciju, tvoreći imunološke zaštitne komplekse u krvi tijekom bolesti. Krvna pretraga, stoga, po prirodi kemijske serološke reakcije pri dodavanju bilo antigena ili protutijela, pomaže u određivanju prisutnosti infekcije u tijelu.

Što je serološki test krvi?

Serološka pretraga krvi je metoda laboratorijskog ispitivanja krvi koja se koristi za dijagnosticiranje zaraznih bolesti i određivanje stupnja razvoja zaraznog procesa. Rezultati se temelje na različitim stupnjevima interakcije između antigena i protutijela, što pomaže u identificiranju serološke kemijske reakcije.

Serološki test krvi koristi se u sljedećim situacijama:

  • određivanje količine protutijela protiv zaraznih patogena u tijelu; s ovom analizom, antigen patogena se prvo dodaje krvnom serumu, a zatim se procjenjuje kemijska reakcija koja se javlja;
  • suprotna situacija je kada je infekcija određena sadržanim antigenima; zatim se u krv dodaju antitijela za identifikaciju antigena;
  • Ovaj test također se koristi za određivanje krvne grupe pacijenta.

Ako postoje abnormalnosti u procesu zgrušavanja krvi, posebice ako postoji hiperkoagulacija, to može dovesti do loših posljedica poput srčanog, moždanog udara ili tromboze.

Priprema za serološku pretragu krvi za dijagnosticiranje infekcija

Test krvi za serološke reakcije provodi se natašte. Za istraživanje se koristi krvni serum. Tijekom studije utvrđuje se interakcija antitijela i antigena.

Indikacije za serološke pretrage krvi za dijagnosticiranje infekcija

Ova metoda laboratorijskog istraživanja koristi se za određivanje zaraznih bolesti, kao što su:

  • giardijaza;
  • amebijaza;
  • toksoplazmoza;
  • cisticerkoza;
  • opisthorchiasis;
  • toksokarijaza;
  • trihinoza;
  • ehinokokoza.

Serološka analiza također je propisana u sljedećim situacijama:

  • s bolestima jetre;
  • za autoimune bolesti;
  • s proširenim venama;
  • za kardiovaskularne patologije;
  • s abnormalnostima u zgrušavanju krvi;
  • prilikom pregleda trudnica;
  • pregled prije i poslije operacije;
  • kako bi se utvrdilo koliko je učinkovito liječenje;
  • ponovno nakon završetka tijeka liječenja.

Ova analiza se uglavnom koristi u venerologiji i urologiji.

Serološki test krvi za dijagnosticiranje infekcija je normalan

Standardni rezultat analize za serološke reakcije je odsutnost protutijela na patogene, što ukazuje na odsutnost infekcija u tijelu. Međutim, to se u pravilu ne događa, jer već postoje razlozi za propisivanje ovog serološkog testa.

Uvijek se provodi dva puta kako bi se utvrdila dinamika bolesti, jer jedno određivanje interakcije protutijela ili antigena ne odražava obrazac infekcije. Indikator infekcije je povećanje broja veza između antitijela (imunoglobulina) i antigena u sljedećoj studiji.

Serološki nalaz krvi za dijagnosticiranje infekcija – povišen

Povećan broj antitijela i antigenskih kompleksa u tijelu ukazuje na prisutnost zarazne bolesti u organizmu. Kako se razina krvi povećava, provode se specifične kemijske reakcije koje pomažu odrediti bolest i njezin stadij.

Serološka pretraga krvi za dijagnosticiranje infekcija – smanjena

Rezultat se ne može smanjiti, jer je "nula" pokazatelj norme.

Što može utjecati na rezultat?

Prilikom uzimanja bilo koje analize, glavna stvar je slijediti pravila pripreme za to. I pobrinite se da se prikupljanje krvi odvija u sanitarnim uvjetima, tako da ništa strano ne uđe u krv koja se testira. I važno je uzeti test na prazan želudac. Prethodnog dana nemojte preopteretiti tijelo masnom hranom, alkoholom i slatkim pićima. Uklonite stres i tjelesnu aktivnost.

U kojim slučajevima se koristi serološki test krvi?

Serologija je znanost koja nam omogućuje kvalitativno proučavanje svojstava ljudskog krvnog seruma. Ovo je jedna od najvažnijih grana imunologije koja posebnu pozornost posvećuje interakciji antigena i protutijela.

Dvije su glavne vrste serološke reakcije prema načinu djelovanja:

  1. Ravno. Naziva se i dvokomponentnim. Ova vrsta uključuje reakcije aglutinacije, kao i reakcije pasivne hemaglutinacije.
  2. Neizravni, ili trokomponentni. Hemaglutinacija ili reakcija neutralizacije je inhibirana.


Trenutno se ova vrsta istraživanja aktivno koristi u sljedeće svrhe:

  1. Određivanje ljudske krvne grupe.
  2. Identifikacija broja protutijela koja su nastala kao posljedica pojave zaraznog patogena u ljudskom tijelu. U ovom slučaju potrebno je provesti sveobuhvatnu procjenu kemijske reakcije koja se pojavila zbog dodavanja posebnog antigena bolesti u serum.
  3. Određivanje zarazne bolesti antigenima, dok se za učinkovitu manifestaciju antigena krvi moraju dodati antitijela.

Ako se tijekom procesa zgrušavanja pojave bilo kakvi problemi, potrebno je odmah poduzeti odgovarajuće mjere. Inače, nedjelovanje može dovesti do srčanog udara, tromboze ili moždanog udara.

Glavne indikacije za provođenje serološke pretrage krvi

Danas se ova tehnika aktivno koristi za određivanje sljedećih bolesti:

  • amebijaza;
  • giardijaza;
  • opisthorchiasis;
  • sifilis;
  • toksokarijaza;
  • toksoplazmoza;
  • trihinoza;
  • cisticerkoza;
  • ehinokokoza.


Osim toga, takve se studije koriste u sljedećim slučajevima:

  • pregled trudnice;
  • otkrivanje bolesti kardiovaskularnog sustava;
  • pregledi koji su potrebni u venerologiji i urologiji;
  • studije jetre;
  • razni pregledi prije i poslije operacija;
  • određivanje patologija u procesu zgrušavanja krvi;
  • flebeurizam;
  • autoimune bolesti;
  • određivanje učinkovitog liječenja;
  • nakon završene odgovarajuće terapije.

Dakle, uz pomoć serološkog testa ljudske krvi, mogu se pravodobno identificirati različite vrste složenih bolesti. To vam omogućuje da propisujete učinkovit plan liječenja.

Serološki test krvi: za i protiv

Svaka vrsta pregleda ima svoje prednosti i nedostatke koje vrijedi razmotriti.

Prednosti tehnike uključuju sljedeće aspekte:

  • pouzdanost rezultata;
  • pristupačna cijena;
  • rezultat je spreman u prilično kratkom vremenu - potreban je samo jedan dan za potpunu spremnost;
  • Metoda omogućuje praćenje kvalitete i učinkovitosti cjelokupnog tretmana.

Glavni nedostatak je što se određene bolesti ne mogu odmah otkriti, jer postoji razdoblje inkubacije.

Kako se pripremiti za test

Ova analiza se provodi isključivo na prazan želudac. Kako biste izbjegli razne pogreške i dobili najpouzdaniji rezultat, preporuča se pridržavati se sljedećih pravila:

  1. Za nekoliko dana, bolje je ukloniti previše masnu i začinjenu hranu iz prehrane.
  2. Pokušajte biti manje nervozni i zabrinuti.
  3. Smanjite konzumaciju hrane koja sadrži velike količine šećera.
  4. Ograničite fizičku aktivnost.
  5. Izbjegavajte alkoholna pića i nikotin.

Zahvaljujući gore navedenim pravilima, možete dobiti najpouzdaniji rezultat.

Dekodiranje

Ne-treponemski Treponemalni
RPR ispitivanje brzih reagina plazme koji imaju reakciju mikroprecipitacije FTA Reakcija imunofluorescencije (RIF)
RST reagin selekcijsko testiranje RW reakcija vezanja komplimenta
POVJERENJE određivanje rezultata pomoću toluidin crvenog i nezagrijanog seruma ELISA analiza za određivanje imunoloških enzima
USR određivanje aktivnosti reanina u plazmi TPHA reakcija hemaglutinacije (pasivna)
Western blot imunoblot metoda

Imunoblot metoda

Netreponemske reakcije procjenjuju se u laboratorijskim uvjetima. Ako je rezultat negativan, u stupac se stavlja crtica. Ako su pronađene dovoljno velike pahuljice, indikator će biti od +3 do +4. Ako su otkrivene pahuljice srednje veličine, rezultat će pokazati +1 i +2.

Važno je zapamtiti da se infekcija otkriva tek nakon jednog do dva mjeseca.

Treponemski testovi su točniji. Ali oznake su uglavnom iste.

Imajte na umu da su testovi individualni i da ih samo profesionalni laboratorijski tehničar može uistinu točno protumačiti. Ne biste se trebali baviti samoliječenjem, jer svoje zdravlje možete povjeriti samo specijaliziranim liječnicima.

Serologija je grana imunobiologije koja proučava odnos antigena i antitijela u serumu (serumu) krvi životinja i ljudi. Serološki test krvi je suvremena metoda analize koja se koristi za prepoznavanje zaraznih bolesti i poremećaja obrambenog sustava organizma. Serološka analiza omogućuje utvrđivanje uzroka bolesti. Koristeći serumske reakcije, utvrđuju, prethodno testiraju komponente na kompatibilnost i prate učinkovitost cjepiva. Zadaća serologije je razvoj i proizvodnja dijagnostičkih i terapijskih seruma.

U serologiji se koriste sljedeće reakcije:

  • lijepljenje (aglutinacija);
  • oborina (oborina);
  • uništenje (neutralizacija);
  • detekcija aktiviranih proteina (fiksacija komplementa);
  • korištenje obilježenih antigena ili .

Vrste studija

Mnogi ljudi su zainteresirani za pitanje: serološki test krvi - što je to? Ovo je dijagnoza bolesti pomoću seroloških reakcija (seroreakcija), drugim riječima, proces interakcije antigena i antitijela. Postoje dvije vrste studija seruma ili dva načina dijagnosticiranja bolesti pomoću seroreakcije: U prvom slučaju se serumu dodaje antigen poznatog patogenog faktora i određuje se titar antitijela. To jest, stupanj spremnosti tijela da se bori protiv faktora koji uzrokuje bolest.

U drugom slučaju, antitijela se dodaju u serum za otkrivanje antigena patogenog faktora. To jest, je li patogeni čimbenik prodro u krv pacijenta. Serološki test krvi koristi se u slučajevima kada je potrebno provesti diferencijalnu dijagnozu bolesti. Tek kada se utvrdi uzrok patologije, liječnik će moći propisati odgovarajući tijek liječenja. Jer protiv svakog uzročnika postoje specifični lijekovi.

Ako je kod dijagnosticiranja bolesti cilj utvrditi kvantitativni i kvalitativni sastav protutijela i antigena, potrebna je ELISA. Pomoću ove analize određuje se razina koncentracije hormona, imunogenetskih kombinacija ili drugih biološki aktivnih komponenti krvnog seruma, amnionske tekućine, cerebrospinalne tekućine i plućne punkcije. Sve studije provode se in vitro, odnosno izvan tijela, u epruveti.

Poznato je da se kao odgovor na uvođenje stranih sredstava koja sadrže proteine ​​u tijelo mobiliziraju imunoglobulini. Neutralizacija stranih proteina događa se stvaranjem kemijskog spoja s tjelesnim antitijelima koja sadrže proteine. Detekcija takvih složenih spojeva i određivanje njihove količine zadatak je imunoenzimskog testa.

Antitijela su molekule proteina imunoglobulina. Raison d'être antitijela je neutralizacija patogenih antigena sintezom dvije biološki aktivne proteinske molekule u jednu inaktiviranu.

Medicinska znanost je otkrila pet vrsta serumskih imunoglobulina. Prilikom provođenja serološkog testa krvi prate se tri vrste. Najviše se traži kontrola imunoglobulina A. On se nalazi na površini sluznice i odgovoran je za blokiranje agensa stranog tijelu.

Uz molekularno-genetičke i bakteriološke metode istraživanja provodi se serološka analiza hripavca. Ovisi o stadiju bolesti.

Prednosti i nedostatci

Prednosti enzimskog imunološkog testa su dijagnoza patologija u ranim fazama, stalno praćenje razvoja bolesti i dinamika rezultata liječenja. Vrijeme čekanja na nalaz je kratko, pouzdanost visoka, cijena serološke analize niska, te nema potrebe za prethodnom pripremom pacijenta za zahvat.

Slaba točka imunoenzimskog testa je potreba za čestim kontrolama kako bi se izbjeglo dobivanje lažno negativnog rezultata.

Imunoenzimski test uspješno se koristi za različite etiologije, infekcije virusnog porijekla, genitalne infekcije i poremećaje organa unutarnjeg izlučivanja.

Dijagnostičke mjere pomoću metoda enzimskog imunološkog ispitivanja posebno su učinkovite u područjima nepovoljnim za pojedine infekcije, kada su potrebne odlučne mjere za suzbijanje epidemija.

Prednosti i nedostaci svojstveni su svim metodama istraživanja. Ali ELISA test krvi ima više jakih nego slabih strana.

Dekodiranje

Provode ga laboratorijski liječnici i svodi se na otkrivanje pozitivnog rezultata ili njegovog odsustva. Na primjer, kada se provodi reakcija taloženja, ili ima taloga ili ga nema. Rezultati testova pomažu kliničarima u postavljanju i razjašnjavanju dijagnoze bolesti, propisivanju liječenja i praćenju stanja bolesnika tijekom bolesti i procesa oporavka.

Serološke studije potvrđuju ili opovrgavaju preliminarnu dijagnozu na temelju simptoma. Ako se dijagnoza potvrdi, studije se ponavljaju kako bi se proučila dinamika titra protutijela, što omogućuje procjenu razvoja ili smanjenja bolesti.

Za zdravu osobu normalan je potpuni nedostatak antitijela. A ako se pronađu, potrebna su dodatna istraživanja.