Lewis ako je ovo. Enzimska imunološka dijagnostika ili ELISA analiza: što je to i koje bolesti otkriva? Snage i slabosti ove studije

(link na 3. članak u ovoj datoteci), koji omogućuje procjenu sposobnosti tijela da se odupre zaraznim bolestima i pokazuje fazu bolesti, enzimski imunoanaliza (ELISA) igra važnu ulogu. Provođenje ove studije omogućuje vam sveobuhvatnu procjenu aktivnosti zaštitne funkcije krvi i prepoznavanje stanja imunodeficijencije kod zaraznih patologija, kao i bolesti krvi, autoimunih procesa i hormonalnih problema.

Kako je moguće jednom analizom obuhvatiti toliko ciljeva i koje su indikacije za njezinu provedbu? Pokušajmo to shvatiti.

Što je krvni test koji se izvodi ELISA metodom?

Ovo je laboratorijski test koji vam omogućuje određivanje prisutnosti specifičnih protutijela (zaštitnih faktora krvi proteinske prirode) na određene antigene (patogene agense). Među antitijelima primarnu važnost imaju imunoglobulini koji mogu postojati u obliku imunokompleksa.

Imunoglobulini nastaju kao rezultat složenih ljudskih neurohumoralnih reakcija koje se javljaju kao odgovor na uvođenje stranih antigena. Svaka vrsta patogena proizvodi vlastita specifična protutijela. Djeluju tako što "vežu" antigen ili patološki mikroorganizam, tvoreći složeni spoj "antigen-antitijelo", nakon čega slijedi neutralizacija, enzimska liza, reakcije fagocitoze i uklanjanje iz tijela.

Bilješka:Upravo po prisutnosti određenih kompleksa ELISA metoda određuje vrstu uzročnika ili štetne tvari prisutne u pacijentu.

Osnovne principe funkcioniranja ljudskog imuniteta možete naučiti gledajući ovaj video pregled:

Što su imunoglobulini?

Otkriveno je i proučavano 5 glavnih klasa imunoglobulina - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. uloga ostatka još nije u potpunosti razjašnjena i nalazi se u znanstvenim istraživanjima.

Bilješka:U praktičnoj medicini najvažniji su imunoglobulini klasa A, M i G. Informativnost definicije temelji se na različitim vremenskim intervalima njihove pojave, maksimuma i nestanka.

Razmotrimo ovo pitanje detaljnije.

Glavni zadatak imunoglobulin A (IgA) sastoji se u zaštitnim funkcijama sluznice dišnog trakta, gastrointestinalnog trakta i mokraćnog sustava. U akutnom početku bolesti nemoguće ih je identificirati. Ovi zaštitni kompleksi pojavljuju se tek od 2. tjedna od početka bolesti, ponekad i kasnije. Glavnina imunoglobulina A koncentrirana je u tkivima sluznice. Otprilike oko 80%. Preostala antitijela cirkuliraju u krvi. Glavna funkcija je neutralizacija i uništavanje mikroorganizama. Nakon smirivanja akutnih manifestacija bolesti, količina ovih imunoglobulina počinje se smanjivati ​​i potpuno nestaje do 8 tjedana od početka bolesti. Ako se IgA otkrije kasnije, to ukazuje na kronični proces.

Glavni i prvi markeri akutne faze razvoja patologije su imunoglobulini klase M (IgM). Otkrivaju se do 5. dana od početka bolesti. Njihova prisutnost u krvi može se utvrditi unutar otprilike 6 tjedana. Zatim počinju brzo nestajati.

Preostali imunološki odgovor karakterizira prisutnost u krvi imunoglobulini klase G (IgG). Pojava ovih čimbenika u krvi otkriva se otprilike mjesec dana nakon početka bolesti. U budućnosti se mogu odrediti više mjeseci, godina, pa čak i cijeli život, obavljajući zaštitnu funkciju protiv povratka (relapsa) bolesti, au nekim slučajevima onemogućujući sekundarni razvoj patologije. Ako se količina imunoglobulina G ponovno počne povećavati, tada se može posumnjati na ponovnu infekciju. Sličan zaključak može se izvući provođenjem dva ili tri uzorka uzeta u razmaku od 2 tjedna.

Imunoglobulin D (IgD) nalazi se na B-limfocitima, nalazi se u niskim koncentracijama u zdravih ljudi. Nakon 10 godina života dostiže svoje maksimalne vrijednosti. Količina imunoglobulina D raste tijekom trudnoće, u bolesnika sa sistemskim bolestima vezivnog tkiva i bolestima uzrokovanim stanjem imunodeficijencije.

Indikacije za primjenu imunoenzimskog testa krvi

Određivanje protutijela na prisutnost u tijelu patogenih mikroba koji uzrokuju:

• trihomonijaza;
• ureaplazmoza i

Postoji povećanje količine imunoglobulina i sa.

Dijagnostika se provodi kako bi se otkrilo:

• herpetične bolesti;
• skupine virusnog hepatitisa;
• Epstein-Barr virus;
• citomegoalovirus.

Pomoću ELISA-e možete odrediti prisutnost protutijela na 600 vrsta alergena, otkriti stanje imunodeficijencije, provesti sveobuhvatan pregled prije operacije transplantacije i provesti sveobuhvatnu analizu učinkovitosti liječenja.

ELISA je dodatna metoda za otkrivanje stanica raka.

Kako se provodi ELISA test krvi?

Za imunoenzimski test, u većini slučajeva, koristi se krv pacijenta; ponekad se prikupljaju staklasto tkivo, tekućina spinalnog kanala i amnionska tekućina.

Krv se izvlači kroz injekcijsku iglu u štrcaljku iz kubitalne vene. Studija se provodi na prazan želudac. Treba imati na umu da uzimanje određenih lijekova može utjecati na rezultat testa. Prije davanja krvi morate se suzdržati od pušenja i pijenja alkohola. Upotreba droga može iskriviti rezultate.

U slučaju negativnih vrijednosti imunoglobulina IgM, IgG, IgA, možemo govoriti o odsutnosti bolesti ili njenoj početnoj fazi, a negativan rezultat je također moguć uz potpuni oporavak nakon značajnog vremena.

Ako IgA i IgM nisu dokazani, a IgG je pozitivan, tada je najvjerojatnije riječ o formiranoj imunosti nakon zarazne bolesti, odnosno nakon cijepljenja.

U slučaju visokog titra IgM uz negativne vrijednosti IgG i IgA, može se zaključiti da se radi o akutnoj zaraznoj bolesti.

Istodobne pozitivne vrijednosti rezultata imunoglobulina - IgA, IgM, IgG karakteristične su za akutnu fazu relapsa postojeće kronične bolesti.

Za kroničnu infekciju koja je u fazi jenjavanja procesa (remisija), ELISA pokazuje negativne vrijednosti imunoglobulina M (IgM), dok će nalaz imunoglobulina G (IgG) i A (IgA) biti pozitivan.

Prednosti metode ispitivanja krvi enzimskim imunotestom

Glavne prednosti ELISA metode su:

• niska cijena analize;
• dijagnostička specifičnost, točnost;
• dinamička kontrola (ponavljanje analize za određivanje učinkovitosti liječenja i stadija bolesti);
• mogućnost provođenja masovnih pregleda u područjima infekcije;
• brzina dobivanja rezultata;
• relativna jednostavnost analize;
• mogućnost korištenja informacijske tehnologije u obradi;
• sigurnost i bezbolnost za pacijenta.

Postoje li neki nedostaci ELISA testa krvi?

Glavni negativni aspekt studije je mogućnost dobivanja lažno negativnih i lažno pozitivnih podataka. Uzrok nesporazuma mogu biti tehnički nedostaci ili uporaba lijekova koji mogu iskriviti sliku.

ELISA se koristi za otkrivanje:

• (ascaris, pinworms);
• akutni i kronični oblici opisthorchiasis;
• trihinoza;
• prisutnost Giardia (kao dodatna analiza);
• oblici lišmanioze;
• amebijaza;
• Sadržaj toksoplazme;

Zaključno, valja istaknuti da je suvremena imunologija u stalnom razvoju, tražeći nove metode dijagnosticiranja i liječenja bolesti.

Stepanenko Vladimir, kirurg

Podaci iz Državnog registra medicinskih proizvoda:

Jedinstveni registarski broj

Registarski broj medicinskog proizvoda

FSR 2011/10506

Datum državne registracije medicinskog proizvoda

Naziv medicinskog proizvoda

Set reagensa "DS-ELISA-ANTI-LEWIS-UKUPNA ANTITIJELA" Enzimski imunosorbentni testni sustav za otkrivanje protutijela na uzročnika sifilisa prema TU 9398-182-05941003-2010
Set reagensa dostupan je u tri seta: - Set 1 je dizajniran za izvođenje 96 (jedna sklopiva ploča) određivanja, uključujući kontrolna, namijenjena i za ručno testiranje i za testiranje na ELISA analizatorima otvorenog tipa s mogućnošću frakcijske uporabe. - Set 2 dizajniran je za provođenje 192 (dvije sklopive ploče) određivanja, uključujući kontrole, namijenjen za ručno testiranje i za testiranje na ELISA analizatorima otvorenog tipa s mogućnošću frakcijske uporabe - Set 3 je dizajniran za provođenje 480 (pet sklopive tablete) određivanja, uključujući kontrolna, namijenjena je i za ručno postavljanje i za postavljanje na ELISA analizatore otvorenog tipa s mogućnošću frakcijske uporabe. Komplet sadrži sljedeće reagense: - Imunosorbent - sklopiva polistirenska tableta u čijim su jažicama apsorbirani rekombinantni antigeni - analozi proteina T. Pallidum: set 1 (1 tableta), set 2 (2 tablete), set 3 (5 tableta). tablete), - konjugat: set 1 (1 bočica 14,0 ml), set 2 (1 bočica 28,0 ml), set 3 (2 bočice po 28,0 ml), - K+ - uzorak pozitivne kontrole: set 1 (1 bočica 0,25 ml), set 2 (1 bočica 0,5 ml), set 3 (1 bočica 1,0 ml), - K- - kontrolni negativni uzorak: set 1 (1 bočica 0,25 ml), set 2 (1 bočica 0,5 ml), set 3 (1 bočica 1,0 ml), - PR - otopina za pranje: set 1 (1 bočica 50,0 ml), set 2 (1 bočica 50,0 ml). 120,0 ml), set 3 (2 boce od 120,0 ml), - Stop reagens: set 1 (1 boca od 25,0 ml), set 2 (1 boca od 50,0 ml), set 3 (2 boce od 50,0 ml), - TMB - otopina supstrata: set 1 (1 boca od 14,0 ml), set 2 (2 boce od 14,0 ml) , set 3 (5 bočica od 14,0 ml) ili - SB - puferska otopina supstrata: set 1 (1 fl. 25,0 ml), set 2 (1 fl. 25,0 ml), set 3 (2 bočice od 50,0 ml) ili - TMB - otopina koja sadrži 3,3",5,5"-tetrametilbenzidin: set 1 (1 bočica od 2,5 ml), set 2 (1 bočica od 2,5 ml), set 3 (2 bočice po 3,5 ml). Pribor: - zaštitne folije za ELISA ploče: set 1 (1 kom.), set 2 (2 kom.), set 3 (5 kom.), - jednokratni vrhovi: set 1 (16 kom.), set 2 (32 kom.) ..), set 3 (80 kom.), - plastične kupke za tekuće reagense: set 1 (2 kom.), set 2 (4 kom.), set 3 (10 kom.), - plastične vrećice sa Zip- Brava za zaključavanje: set 1 (1 komad), set 2 (2 komada), set 3 (3 komada). Komplet isporuke uključuje: set reagensa (može se dodatno opremiti priborom), upute za uporabu i putovnicu.

Naziv organizacije podnositelja zahtjeva medicinskog proizvoda

Lokacija organizacije podnositelja zahtjeva za medicinski proizvod

Pravna adresa organizacije podnositeljice zahtjeva za medicinski proizvod

603014, Rusija, Nižnji Novgorod, ul. Kominterna, 47

Naziv proizvođača medicinskog proizvoda ili proizvođača medicinskog proizvoda

LLC "NPO "Dijagnostički sustavi"

Lokacija organizacije-proizvođača medicinskog proizvoda ili organizacije-proizvođača medicinskog proizvoda

603093, Rusija, Nižnji Novgorod, ul. Yablonevaya, 22, poštanski pretinac 69

Imunoenzimski test (ELISA) je laboratorijski test koji se temelji na specifičnosti i visokom stupnju selektivnosti imunološke reakcije “antigen-antitijelo”. Uobičajeno je razlikovati nekoliko desetaka varijacija ELISA. Najpopularniji je heterogeni imunotest na čvrstoj fazi ili ELISA (enzimski imunotest).

Riža. 1

Imunoenzimski test koristi se u dvije svrhe: ako je potrebno, za određivanje prisutnosti antigena uzročnika bilo koje infekcije ili (što se prakticira mnogo češće) za određivanje prisutnosti protutijela klase IgA, IgM, IgG na antigen uzročnika bolesti. Pomoću ELISA-e određuju se protutijela na gotovo sve spolno prenosive infekcije.

Načelo enzimskog imunološkog testa temelji se na imunološkoj reakciji antigena s protutijelima, kada, pričvršćivanjem enzimske oznake na protutijela, istraživač utvrđuje rezultate reakcije protutijelo-antigen, bilježeći pojavu ili promjenu razine enzimskih aktivnost.

Prva reakcija se promatra između pročišćenog antigena patogena (Ag) i ugrađenog Ig (Ab) fiksiranjem pločice imunologa na ravninu jažica.

Druga imunološka reakcija provodi se kako bi se identificirali nastali imunološki kompleksi. Ovdje se kao antigen koristi specifični vezani Ig, a koristi se konjugat s antitijelima protiv njega - Ig (Ab) na specifični ljudski Ig, koji je obilježen enzimom K (peroksidaza). Enzimsku reakciju koja se događa nakon toga katalizira enzimski dio molekule konjugata. Kao reakcijski supstrat koristi se bezbojna tvar koja se zove kromogen, a tijekom reakcije kromogen dobiva boju. Količina imunoglobulina u uzorku određena je intenzitetom bojenja jažice.

Po završetku reakcije provodi se fotometrija jažice, a rezultati se bilježe posebnim uređajem. Matematičkom obradom rezultata istraživanja utvrđuje se prisutnost i količina karakterističnih protutijela u uzorku.

Za serodijagnostiku koristi se polistirenska ploča s 96 jažica na čijim je bočnim površinama stanica antigen unaprijed adsorbiran. Kada se ispitni serum doda u jažice na ploči, antitijela koja su mu homologna se vežu za antigen. Enzimom obilježena antihumana antitijela (imunoglobulini) se zatim stavljaju u jažice. Ako testni serum sadrži detektabilna antitijela, ona će se pojaviti kao antigeni s kojima će označena antitijela reagirati. Kromogen (boja) dodan nakon ispiranja omogućit će bilježenje reakcije karakterističnim bojanjem stanica. Intenzitet ove boje bit će proporcionalan udjelu enzima, a time i količini antitijela.

Mjerenjem optičke gustoće (OD) tekućine u stanici i usporedbom s uzorkom šablone izračunava se koncentracija antitijela po jedinici volumena. Najčešće se rezultat izračunava u OP jedinicama. Karakteristično je da je svaki testni sustav opremljen vlastitim indikatorima patologije i normalnosti, kao i indikatorima za bilježenje rezultata, što treba uzeti u obzir pri interpretaciji rezultata.

Moderna venerologija koristi tehnike enzimskog imunotestiranja za dijagnosticiranje sifilisa, virusnog hepatitisa i HIV infekcije. ELISA se također koristi za dijagnosticiranje citomegalovirusne i klamidijske infekcije, infekcije herpes podrijetla. Imunoenzimskim testom određuju se antitijela na razne zarazne bolesti, razina hormona, markeri raka, autoantitijela.

Poznato je da se određivanje prisutnosti i razine protutijela u krvi tijekom početne dijagnoze spolno prenosivih infekcija ne preporučuje. U ovom slučaju, okretanje tehnici enzimske imunološke analize bit će potpuno opravdano. ELISA je prilično sposobna prepoznati sifilis. Samo trebate zapamtiti da prisutnost antitijela u serumu ukazuje isključivo na kontakt tijela s patogenima u prošlosti ili sada.

Valeria 2018-08-22 16:01:18

MRI je slabo pozitivan, sifilis je liječen prije 8 mjeseci. Zašto bi to mogao biti slučaj?

Obratite se sifilidologu. Testovi za praćenje izlječenja sifilisa rade se u kompleksu (RPGA, imunoblot). A "tragovi" ove dijagnoze mogu biti prisutni u analizama dugi niz godina.

Sanya 2018-08-19 13:02:00

Ako je 1-40 pozitivan, a referenca negativna Prije sam bio bolestan i liječen, što to znači?

Menshchikova Galina Vladimirovna Dermatovenerolog, dermato-onkolog. Kandidat medicinskih znanosti. Liječnik prve kategorije. Više od 15 godina iskustva odgovara:

ELISA za koju infekciju? Molimo provjerite.

Irina 2018-07-25 12:39:58

Dobar dan Godine 2002. suprug i ja smo oboljeli od primarnog sifilisa. Trenutno sam trudna. Uzeli smo testove: RMP negativan, IgM negativan IgG negativan, IFA pozitivan, RPHA 4+. Liječnik kaže da je potrebno preventivno liječenje KVB-a u 20. tjednu, 6 injekcija dnevno tijekom 10 dana. Recite mi, molim vas, imam li indikacije za tako ozbiljno liječenje.

Bagaeva Madina Dermatovenerolog, član Moskovskog društva dermatovenerologa i kozmetologa nazvan po. A. I. Pospelova odgovara:

Ovo je vrlo delikatna točka, jer su tijekom trudnoće mogući lažno pozitivni testovi. Neophodna je konzultacija sa sifilidologom.

Kada je propisan test za uzimanje ELISA testa za sifilis. Laboratorijske dijagnostičke metode. Rezultati analize - kako odrediti normu i odstupanja. Troškovi enzimskog imunološkog testa.

U pravilu, svaki put kada odete u kliniku, liječnici propisuju razne testove. To im omogućuje da identificiraju infekcije i bolesti od kojih osoba boluje. ELISA ili tzv. enzimski imunološki test odličan je način za procjenu imunološkog sustava organizma i utvrđivanje infekcije i stadija bolesti prema prisutnosti protutijela.

Dakle, kome je propisan ovaj test i što je enzimski imunološki test? Liječnici propisuju ovaj test ako osoba pokazuje sljedeće bolesti:

• Osip na tijelu je alergijska reakcija.
• Virusi - herpes, citomegalovirus.
• Spolno prenosive bolesti - sifilis, trichomonas.
• Patologija povezana s rakom.
• neurosifilis.

Uz navedene bolesti, propisana je analiza za određivanje razine hormona u krvi. Na temelju rezultata procjenjuje se kvaliteta terapije. Vjerojatno svaka osoba zna što je sifilis, ali nema pojma o njegovim razmjerima i koliko zaraženih ljudi hoda oko nas.

Trenutno je sifilis najčešća bolest. Ovo je treponoma koja utječe na ljudsko tijelo. Kao rezultat toga, zahvaćeni su svi unutarnji organi pacijenta.

Ovo je vrlo opasna infekcija, a često se događa da se dugo ne manifestira. Stoga čovjek može dugo vremena biti kliconoša i širitelj, a da ne zna da je bolestan.

Laboratorijska dijagnostička metoda

Medicina ne stoji mirno, moderni testovi postali su značajno drugačiji od starih metoda proučavanja tijela. Iako su svoju ulogu odradili savršeno, ponekad su na rezultate morali čekati tjednima i mjesecima. To naravno nije bilo korisno za zaraženu osobu. Što čeka rezultat?Bolesna osoba je to sama iskusila.

Klasični testovi - otkrivanje sifilisa pomoću Wassermanove metode, Kahnove metode - počeli su gubiti svoje pozicije i zamijenjeni su testovima kao što je ELISA.

Ovo je najsuvremenija metoda otkrivanja infekcije kod ljudi. Rezultat se dešifrira pomoću računala. To vam omogućuje točnije određivanje pozitivnog ili negativnog rezultata.

Pročitajte i na temu

Što je SPI? Simptomi, liječenje

Tijekom dekodiranja, traže se antitijela na određene bolesti. I kao rezultat analize, bilo je moguće identificirati infekciju kada je rezultat bio pozitivan. Korištenje ELISA testa za otkrivanje sifilisa podrazumijeva upotrebu imunoglobulina u tri klase:

• G, M, A – za dijagnozu su najvažniji.
• Oni se proizvode u zaraženoj osobi strogo u određenom slijedu.
• Brzo se utvrđuje stadij infekcije.

Rezultati ELISA testa - normalna i pozitivna analiza

Ako govori o ELISA testu za sifilis, onda je u ovom slučaju teško reći što je normalno ili abnormalno. Rezultat je obično ili negativan ili pozitivan. Osim toga, postoje titri koji određuju količinu antitijela u krvi.

Postoje mnoge suptilnosti prilikom dešifriranja analize; ako pokaže pozitivan rezultat, analiza će se ipak morati ponoviti nekoliko puta kako bi se isključila metoda lažno pozitivne reakcije.

Kao što je već napisano, postoji mnogo suptilnosti prilikom dešifriranja analize, a samo liječnik može odrediti rezultat. Navedimo primjere u tablici koji se rezultati mogu prikazati za enzimski imunološki test:

Nemojte očajavati ako analiza pokaže pozitivan rezultat. U pravilu se provode dodatne analize i pretrage na razne načine kako bi se postavila točnija dijagnoza.

Troškovi enzimskog imunološkog testa

U pravilu, trošak ove analize izravno ovisi o samoj analizi i otkrivanju određene infekcije. Određivanje markera za infekciju različitih vrsta košta od 200 do 350 rubalja. I takva analiza se provodi u roku od dva dana.

ELISA je najpopularnija i najmodernija metoda dijagnosticiranja tijela. Metoda se pokazala učinkovitom u otkrivanju infekcije i određivanju točnog razdoblja infekcije.

S obzirom na cjenovnu politiku, možemo reći da je analiza dostupna svima s bilo kojim budžetom. Omogućuje liječniku da dobije potpunu sliku infekcije osobe. Iskazao se na djelu i nije razočarao liječnike. U isto vrijeme, nakon što je primio analizu, liječnik je mogao brzo reagirati, pravodobno propisati liječenje.