Helminths igg ifa best. Instrumenti i kompleti reagensa za ELISA proizvedeni u Rusiji Kundelsky R.V., Ph.D.

Vodeći ruski proizvođači u segmentu kompleta reagensa za dijagnosticiranje infekcija: - Vector-Best CJSC, Novosibirsk; - NPO Diagnostic Systems LLC, Nižnji Novgorod; - JSC "Ekolab", Elektrogorsk MO. U području kompleta reagensa za dijagnostiku nezaraznih bolesti i fizioloških stanja: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC “Vector-Best”, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moskva. U segmentu reagensa za laboratorijsku dijagnostiku alergija: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC “Vector-Best”, Novosibirsk; - NPO Immunotex LLC, Stavropol. Proizvodnja laboratorijske opreme: - Picon LLC, Moskva

Procjena stupnja moguće supstitucije uvoza na temelju nomenklature testova Nomenklatura analita, jed. Odobreno za uporabu u Ruskoj Federaciji Proizvedeno u Ruskoj Federaciji Stupanj moguće supstitucije uvoza Markeri zaraznih bolesti % Markeri nezaraznih bolesti i pokazatelji fizioloških stanja % Markeri alergije % Ukupno: %

Procjena stupnja supstitucije uvoza na temelju tržišnog volumena proizvoda za tablet ELISA Tržišni segmentiTržišni volumen u Ruskoj Federaciji, milijuni rubalja. Obujam prodaje domaćih proizvođača, milijun rubalja. Udio supstitucije uvoza Markeri zaraznih bolesti % Markeri nezaraznih bolesti i pokazatelji fizioloških stanja % Alergijski markeri % Oprema50051 % Ukupno: %

Procjena stupnja supstitucije uvoza na temelju obujma tržišta za proizvode za imunokemijske metode općenito Tržišni segmentiOpseg tržišta u Ruskoj Federaciji, milijuni rubalja. Obujam prodaje domaćih proizvođača, milijun rubalja. Udio supstitucije uvoza Markeri zaraznih bolesti % Markeri nezaraznih bolesti i pokazatelji fizioloških stanja % Alergijski markeri % Oprema % Ukupno: %

Problemi domaćih proizvođača u industriji: ELISA metoda zastarijeva. Dolazi do postupne zamjene domaćih IF reagensa uvoznim kemiluminiscentnim; Postojeći sustav javne nabave potiče ili kupnju najjeftinije robe ili uvoznih proizvoda jedinstvenih karakteristika; Jedan od glavnih razloga nedovoljnog razvoja domaćih proizvođača automatike i lokalizacije proizvodnje uvoznih proizvoda je carinska administrativna barijera; Glavni problem novijeg doba je kolaps sustava državne registracije novih proizvoda u Republici Bjelorusiji. Dolazak novih proizvoda na tržište je praktički prestao, a prednost nad domaćim i dalje imaju oni strani proizvođači koji su prethodno upisali duge liste; Glavni razlog tehnološkog zaostajanja je nemogućnost dobivanja prava na proizvodnju proizvoda kompatibilnih sa suvremenom opremom; Nizak stupanj konsolidacije domaćih proizvođača i stalni međusobni ratovi cijena ne pružaju mogućnost razvoja naprednih proizvoda i ravnopravnog natjecanja s vodećim igračima, uključujući i inozemna tržišta.

Prijedlozi: U okviru FCC-a uvesti nenatjecateljski postupak javne nabave medicinskih proizvoda s naknadnom objavom stavki po stavkama. Određivanje limita financiranja na temelju prosječne tržišne cijene dat će određene prednosti domaćim proizvođačima, ograničiti potrošnju skupih uvoznih reagensa i učinkovitije kontrolirati korištenje proračunskih sredstava; Promicati okrupnjavanje i okrupnjavanje domaćih proizvođača kako bi se resursi koncentrirali na razvoj suvremenih proizvoda i izlazak na međunarodno tržište. Nekonkurentni postupak za državnu nabavu brzo će na tržištu ostaviti samo istinski konkurentna poduzeća; Dodijeliti državna sredstva za poticanje, na načelima javno-privatnog partnerstva, razvoja niza testova dovoljnih da osiguraju biološku sigurnost zemlje; Carinske povlastice trebale bi biti za komponente, a ne za gotove proizvode; Uskladiti sustav registracije s europskim, gdje se medicinski proizvodi s niskom razinom potencijalnog rizika registriraju na temelju izjave o sukladnosti.

DROGE

PROCJENA NOVOG ELISA TEST SUSTAVA

"Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"

12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Savezna državna proračunska ustanova Državni znanstveni centar VB "Vektor" Rospotrebnadzora, selo Koltsovo, regija Novosibirsk;

2 Institut za kemijsku biologiju i temeljnu medicinu, Novosibirsk;

3 Državni zavod za standardizaciju i kontrolu medicinskih bioloških pripravaka nazvan po. LA. Tarasevichag Moskva

Prikazani su rezultati ispitivanja osjetljivosti, specifičnosti i ponovljivosti novog seta reagensa "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" razvijenog u JSC "Vector-Best" (Novosibirsk). Dobiveni podaci omogućuju nam predviđanje dijagnostičke pouzdanosti rezultata pri korištenju ovog testnog sustava za otkrivanje antigena rotavirusa skupine A u kliničkom materijalu.

Ključne riječi: ELISA test sustav, učinkovitost, rotavirus A

Rotavirusi skupine A (obitelj Reoviridae, rod Rotavirus) najčešći su uzročnici teških gastroenteritisa u male djece diljem svijeta. Često se razbole i odrasli s oslabljenim imunološkim sustavom. Rotavirusna infekcija (RVI) vrlo je zarazna bolest s više putova širenja. Izvor infekcije je osoba s manifestnim ili asimptomatskim oblikom bolesti, kao i nositelj virusa. Kod djece i odraslih RVI se može manifestirati u obliku sporadičnih slučajeva, lokalnih skupnih bolesti, izbijanja i široko je rasprostranjen. Fekalno-oralni mehanizam prijenosa ove infekcije ostvaruje se hranom (mlijeko i mliječni proizvodi, dječja hrana), vodom i kontaktno-kućanskim putem.

Postavljanje dijagnoze rotavirusnog gastroenteritisa na temelju kliničke slike, osobito kod sporadične incidencije, predstavlja određenu poteškoću, jer se simptomi karakteristični za ovu infekciju malo razlikuju od simptoma drugih akutnih crijevnih infekcija (AEI) različite etiologije. Diferencijalna dijagnoza u bolesnika s rotavirusnim gastroenteritisom provodi se kako s toksičnim infekcijama izazvanim hranom, tako i s drugim virusnim infekcijama (norovirusi, astrovirusi, adenovirusi, koronavirusi, enterovirusi Coxsackie i ECHO) i bakterijske (salmoneloza, dizenterija, kolera, jersinioza, oportunistički mikroorganizmi) etiologije. Nažalost, ne provode sve specijalizirane medicinske ustanove u Ruskoj Federaciji dijagnostiku rotavirusne infekcije.

Dijagnostičke metode za RVI usmjerene su na otkrivanje cijelih viriona, virusnog antigena ili virus-specifične RNA u fecesu. Obećavajući pristup izravnoj detekciji virusa u kliničkom materijalu iu okolišnim objektima je metoda lančane reakcije polimeraze (RT-PCR) s reverznom transkripcijom. Posljednjih godina stvoreni su testni sustavi koji se temelje na suvremenim znanstvenim dostignućima s kombinacijom različitih metoda za detekciju rotavirusa: multipleksna PCR s hibridizacijsko-fluorescentnom detekcijom proizvoda amplifikacije "po krajnjoj točki"; endpoint immuno-PCR (IPCR) s detekcijom u stvarnom vremenu; kvantitativni RT-PCR s detekcijom u stvarnom vremenu. Istraživački laboratoriji koriste elektronsku mikroskopiju za brzo identificiranje rotavirusa. Međutim, sve gore navedene metode su prilično radno intenzivne i zahtijevaju skupu opremu i visoko kvalificirano osoblje. Stoga se pri provođenju laboratorijske dijagnostike u bolničkim i izvanbolničkim uvjetima daje prednost metodama koje se temelje na detekciji virusnog antigena u izmetu pomoću enzimskog imunoanalize (ELISA) s mono- i poliponalnim protutijelima na rotaviruse. Ova je metoda dostupna za praktične laboratorije, jednostavna je za postavljanje i omogućuje vam brzo dobivanje rezultata.

Svrha ovog rada je proučavanje dijagnostičke učinkovitosti novog seta reagensa "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" razvijenog u JSC "Vector-Best", Novosibirsk.

^Rujan-prosinac

Materijali i metode

Materijal istraživanja uključivao je uzorke izmeta male djece s dijagnozom akutne crijevne infekcije i bez kliničkih manifestacija crijevne infekcije, koja su bila podvrgnuta stacionarnom liječenju u odjelima crijevnih infekcija i respiratornih infekcija Dječje gradske kliničke bolnice br. 3 u Novosibirsku. Uzorci izmeta prikupljani su u jednokratne sterilne plastične posude u volumenu od 2-3 ml nakon prijema bolesnika na bolnički odjel i čuvani na -20 °C 15 dana. Dulje skladištenje materijala provedeno je na -70 °C.

U ovom radu korišten je panel od 104 uzorka fecesa, prethodno testiranih na prisutnost uzročnika ACI. Od njih:

30 uzoraka u kojima su ELISA i RT-PCR testom dokazani samo rotavirusi skupine A; genotipizacija RT-PCR metodom pokazala je da uzorci izmeta sadrže rotaviruse genotipa PG1 (18 uzoraka), PG2 (4 uzorka), PG3 (3 uzorka), PG4 (2 uzorka), PG4 (1 uzorak), PG9 (1 uzorak) , PG3 (1 uzorak);

14 uzoraka u kojima su RT-PCR detektirani samo norovirusi drugog genotipa, što je potvrđeno određivanjem nukleotidne sekvence 5" regije kapsidnog gena koji se nalazi na genomu norovirusa u regiji 5085-5485 h.;

15 uzoraka u kojima su RT-PCR-om identificirani samo astrovirusi, što je potvrđeno određivanjem nukleotidne sekvence 5" regije kapsidnog gena koji se nalazi na genomu astrovirusa u regiji 4526 - 4955 nt; 15 uzoraka u kojima su samo adenovirusi identificiran PCR-om;

30 uzoraka fecesa (kontrola) djece bez kliničkih manifestacija crijevne infekcije hospitalizirane na respiratornom odjelu bolnice; Preliminarna analiza nije identificirala gore navedene virusne patogene u tim uzorcima.

Testiranje uzoraka na prisutnost ili odsutnost rota-, noro-, astro- i adenovirusa provedeno je metodom RT-PCR korištenjem komercijalnih kitova registriranih u Ruskoj Federaciji “AmpliSens br. virus 1, 2 genotipovi - 306/322” , “AmpliSens Astrovirus -165”, “AmpliSens Adenovirus - 462”, “AmpliSens Rotavirus - 290” (proizveden od Središnjeg istraživačkog instituta za epidemiologiju, Ruska Federacija). Uzorci su pregledani u skladu s uputama za uporabu odgovarajućih setova reagensa tijekom isteka roka valjanosti. Uzorci pozitivni na rotavirus genotipizirani su pomoću RT-PCR. Određivanje prisutnosti ili odsutnosti rotavirusnog antigena također je provedeno ELISA testom pomoću komercijalnog IDEIA™ Rotavirus test sustava (DakoCytomation, UK) u skladu s uputama za kit.

Prilikom testiranja kompleta reagensa “Rota-virus-antigen-ELISA-BEST” svi gore navedeni uzorci (104) su šifrirani i testirani tri puta test kitom. Nakon završetka testiranja, uzorci su dešifrirani i rezultati su analizirani.

Rezultati i rasprava

Osjetljivost kompleta reagensa Rotavirus-antigen-ELISA-BEST procijenjena je brojem koincidencija pozitivnih rezultata (u%) uzoraka testiranja pomoću testiranog test sustava i referentnih lijekova. Istodobno je otkriveno da je korištenjem kompleta reagensa “Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” svih 30 uzoraka s potvrđenom prisutnošću rotavirusa A bilo pozitivno (Tablica 1). Posljedično, osjetljivost testnog seta reagensa u detekciji rotavirusa A bila je 100%. Valja napomenuti da je panel uključivao uzorke sa sedam različitih genotipova rotavirusa, a svi su uspješno detektirani “Rota virus rus - antigen - I FA-B EST” kompletom reagensa.

Specifičnost test sustava procijenjena je brojem podudarnosti negativnih rezultata (u %) uzoraka testiranja testiranim test sustavom s onima koji su prošli preliminarne studije. Za procjenu specifičnosti korišteni panel uključivao je 30 uzoraka u kojima virusni uzročnici nisu identificirani, kao i 14 uzoraka u kojima su metodom RT-PCR detektirani samo norovirusi drugog genotipa, 15 uzoraka u kojima je metoda RT-PCR dokazana. otkriveni samo astrovirusi; 15 uzoraka u kojima su PCR-om dokazani samo adenovirusi. Utvrđeno je da u 69 od 74 negativna uzorka vrijednosti optičke gustoće pri detekciji Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST kompleta reagensa na prisutnost rotavirusa A nisu prelazile pozadinske vrijednosti, odnosno vrijednosti ​​​dobivenih kao rezultat mjerenja optičke gustoće u kontrolnim negativnim uzorcima. Dva uzorka koja su sadržavala astroviruse, jedan uzorak koji je sadržavao norovirus drugog genotipa, jedan uzorak koji je sadržavao adenovirus i dva uzorka u kojima nije otkriven niti jedan od gore navedenih virusnih patogena pokazala su pozitivna očitanja optičke gustoće. Treba napomenuti da su u uzorcima u kojima prethodno nije detektiran nijedan od virusnih uzročnika pozitivni signali zabilježeni samo u jednoj od ponovljenih studija (Tablica 2). Dakle, specifičnost kompleta reagensa Rotavirus-antigen-ELISA-BEST bila je 93,2%.

Tijekom ispitivanja procijenjena je ponovljivost rezultata dobivenih korištenjem testnog seta reagensa “Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” na kliničkom materijalu - svi su uzorci testirani tri puta u različitim eksperimentima kako bi se utvrdila varijacija rezultata. U gotovo svim slučajevima dobiveni su slični rezultati: testni sustav je jednako detektirao sve negativne i pozitivne uzorke. Izuzetak su bila dva uzorka u kojima niti jedan od virusnih patogena nije prethodno identificiran: u jednom od ponavljanja za oba uzorka, vrijednosti optičke gustoće premašile su OPcrit. Treba napomenuti da je višak bio neznatan (tablica 2). Dakle, ponovljivost rezultata bila je 98,8%.

Rezultati testova pokazali su da je testirani set reagensa "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" u svojoj dijagnostičkoj učinkovitosti - specifičnosti, osjetljivosti i ponovljivosti - usporediv s onima dostupnima u Ruskoj Federaciji za dijagnostiku.

kemijski testni sustavi, koji omogućuju predviđanje dijagnostičke pouzdanosti rezultata pri korištenju proučavanog skupa reagensa „Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST” za otkrivanje antigena rotavirusa skupine A u kliničkom materijalu.

Književnost

1. Bogomolov B.P. // “Zarazne bolesti: hitna dijagnostika, liječenje, prevencija.” - M., Novi Diamed. - 2007. (prikaz).

2. Vasiliev B.Ya., Vasilyeva R.I., Lobzin Yu.V.// “Akutne crijevne bolesti. Rotavirusi i rotavirusne infekcije.” - Sankt Peterburg, Lan. - 2000 (prikaz, stručni).

3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., et al.// “BIOpreparati”. - 2008. - broj 2. - str. 15 - 18 (prikaz, znanstveni).

4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. i drugi // JMEI - 2008 - br. 4. - Sa. 12 - 16 (izvorni znanstveni rad, znanstveni).

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S., et al. // “Pitanja virologije”. - 2003. - t. 48. - broj 6. - str. 1721.

6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // “Pitanja virologije”. - 2007. - t.52. -br. 3 - s. 19-23 (prikaz, ostalo).

7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A., et al.//

"Zarazne bolesti". - 2004. - vol. 2. - broj 4. - str. 85 -91 (prikaz, stručni).

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// “Therapeutic Archive”. - 2007. - t. 79. - broj 11. - str. 10-16 (prikaz, ostalo).

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // “Epidemiologija i zarazne bolesti”. -2004.-br.6.-str. 17-20 (prikaz, ostalo).

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Higijena i sanitacija. - 2007. - br. 1. - str. 56 -58 (prikaz, stručni).

11. Arcangeletti M. S., De Conto E., Pinardi F., i sur. // Acta Biomed. Ateneo. Parmens. - 2005. -V. 76(3). - Str. 165 -170.

12.Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., et al. // Epidemiol. Zaraziti. - 2008. V. 136(3). - Str. 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. Metode. -2006. - V. 137 (2). - Str. 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., et al. //J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46 (2). - Str. 462 - 469.

15. Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., i sur. //Primjena Okolina. Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - Str. 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., i sur. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - Str. 1842 - 1843.

Procjena osjetljivosti i specifičnosti kompleta reagensa “Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”

stol 1

Br. Broj uzoraka Rezultati detekcije s referentnim lijekovima IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Rezultati detekcije s “Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” kompletom

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

Procjena specifičnosti kompleta reagensa “Rotavirus-antigen-ELISA-BEST>-

tablica 2

PCR AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotavirus-antigen-ELISA-BEST dd "Vector-Best"

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£rujan

prosinca 2009

AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0,150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

rotavirus-

OPCrit 0,250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"

OPCrit OPCrit 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO “BeKTop-EecT”

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

prosinca 2009

PCR AmpliSense

adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan negativan

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0,150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotavirus - antigen - ELISA-BEST JSC "Vector-Best"

OPCrit O P Krit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Broj definicija 96 (48 u duplikatima)
Format radne tablete: prugasta 12x8, razbijena na 1 rupu.
Osjetljivost: 1,5 U/ml.
Raspon mjerenja: 0-400 U/ml.
Volumen ispitnog uzorka nije veći od 25 µl.
Standardizacija uvjeta za provođenje enzimske reakcije s kromogenom u termostatskoj mućkalici na 37ºC.
Sadržaj seta:
1. Prugasta ploča 12 x 8 jažica, spremna za upotrebu - 1 kom.
2. Uzorci za kalibraciju spremni za upotrebu (0-400 U/ml) obojeni različitim stupnjevima intenziteta ovisno o koncentraciji - 6 boca.
3. Kontrolni uzorak - 1 bočica.
4. Jednokomponentni konjugat, spreman za upotrebu, ne zahtijeva razrjeđivanje - 1 bočica.
5. Otopina za razrjeđivanje seruma - 1 bočica.
6. Kromogeni supstrat, jednokomponentni - otopina tetrametilbesidina plus (TMB+), spreman za upotrebu, ne zahtijeva razrjeđivanje - 1 bočica.
7. Fosfatno puferirana fiziološka otopina s Tweenom - 2 boce.
8. Stop reagens, spreman za upotrebu - 1 bočica.
9. Film za brtvljenje tableta - 1 kom.
10. Šablon za izradu kalibracijskog grafikona - 1 kom.
11. Kupka reagensa - 2 kom.
12. Nastavci pipeta za 5-200 µl - 16 kom.
Tablet je pakiran u ziplock vrećicu od tikovine.
Stabilnost radne otopine FST-T je najmanje 5 dana na temperaturi od +2...8°C.
Čuvajte komplet na temperaturi od +2...8°C. Rok trajanja - 1 godina od datuma proizvodnje.
Registriran u Roszdravnadzoru.

Liječenje helmintijaze kod djece izuzetno je važno, jer posljedice toga mogu biti zaostajanje u fizičkom i mentalnom razvoju, patološki procesi u unutarnjim organima i sustavima, čak i smrt. Osim toga, invazije helmintima su vrlo zarazne, zbog čega se tako lako šire u predškolskim i školskim ustanovama. Na temelju toga jasno je koliko je važno pravovremeno liječenje helmintijaze kod djece.

Prvi znakovi helminti u djece

Gliste su oportunistički uzročnici ljudskog tijela, gliste kojima je čovjek krajnji domaćin. Osim toga, dob vlasnika ne igra nikakvu ulogu u ovom pitanju, različite vrste helmintijaze mogu se primijetiti i kod djece i kod odraslih pacijenata.

Koliko je opasna helmintijaza za dijete?

Kao što je ranije spomenuto, helminti kod djece mogu uzrokovati ozbiljne bolesti i patologije, zbog čega se mentalni i fizički razvoj usporava. Moguće komplikacije za svaku vrstu helmintijaze mogu biti potpuno različite, na primjer:

Stoga dječje helmintoze zahtijevaju još više pažnje, pravovremenu pomoć liječnika, dugotrajno promatranje stručnjaka i prevenciju.

Glavni simptomi kod djece

Simptomi helmintijaze kod djeteta mogu biti različiti, ovisno o vrsti crva:

1. Okrugli crvi odmah se manifestiraju alergijskom reakcijom, groznicom i mučninom kod djeteta. Prva pojavljivanja su obično svijetla, ali brzo nestaju. Nakon toga se mogu primijetiti sljedeći simptomi:

• kolike i disbakterioza i novorođenčad;
• kod beba mlađih od 1 godine, bolovi u području pupka, problemi sa stolicom, alergije i dijateza;
• starija djeca imaju problema sa spavanjem, nemirno ponašanje, noćne more;
• Djecu od 3-7 godina karakteriziraju mučnina, groznica, kašalj, bolovi u trbuhu i osip.

2. Enterobiasis, uzrokovan pinworms, očituje se s nejasnom kliničkom slikom. I tek nakon 1 mjeseca možete primijetiti sljedeće simptome:

• u novorođenčadi, upala, oticanje i crvenilo anusa, odbijanje jela, plač noću, nedostatak apetita;
• djeca mlađa od godinu dana imaju iste simptome, kao i jak svrbež anusa noću (od 23 sata do 1 ujutro), djevojčice pate od upale spolnih organa;
• u starije djece, bolovi u trbuhu u blizini pupka, poremećaj sna, svrbež u stražnjici.

3. Simptome toksokarijaze je teško prepoznati, osim niske tjelesne temperature i alergijskih reakcija (osip, koprivnjača, svrbež i oteklina). Nakon infekcije može se javiti kašalj koji kasnije uzrokuje upalu pluća ili bronhitis, osobito kod najmlađih bolesnika.

Trihineloza ima blage simptome u novorođenčadi, inače se uočavaju sljedeći znakovi:

• grozničavo stanje;
• oticanje lica;
• bol u mišićima;
• alergijske reakcije;
• Djeca od 5 godina i starija mogu imati povećane krajnike, slezenu, osip i upalu grla.

Najteže je dijagnosticirati simptome helmintijaze kod djece od 2 godine i mlađe, jer dijete ne može objasniti svoje ponašanje i stanje. Stoga je za sve atipične manifestacije i ponašanje djeteta bolje pokazati liječniku.

Što trebate učiniti prvo?

Crvi koji su pronađeni u djetetovom izmetu najvažniji su znak bolesti, nakon čega treba odmah potražiti pomoć liječnika. Nijedno liječenje helminta ne može biti uspješno bez odgovarajuće dijagnoze. Metode ispitivanja u ovom slučaju trebaju biti sveobuhvatne, uključujući sljedeće postupke:

• uzimanje strugotina iz anusa;
• pregled djetetove stolice;
• analiza krvi;
• biopsija mišića u rijetkim slučajevima kada se sumnja na trihinelozu;
• serološki test krvi;
• X-ray, ultrazvuk, tomografija;
• ELISA za otkrivanje antitijela u krvi.

Metode liječenja

Liječenje helmintijaze kod djece treba biti sveobuhvatno, dobro osmišljeno, propisano s točnim dozama i učestalošću uzimanja lijekova. To je zbog činjenice da se za anthelmintski učinak koriste lijekovi s toksičnim komponentama, što znači da iracionalna uporaba može dovesti do nuspojava. Osim toga, kod kuće je prikladno narodno liječenje ljekovitim biljkama.

Narodni lijekovi

Moderno liječenje narodnih lijekova za takve bolesti za djecu uključuje 4 učinkovite metode:

O bilo kojoj metodi kućnog liječenja potrebno je unaprijed razgovarati s liječnikom. Mora se zapamtiti da bilje i narodni lijekovi imaju kontraindikacije u obliku individualne netolerancije.

Liječenje lijekovima

• Za enterobiasis i ascariasis obično se koriste lijekovi kao što su Pyrantel i Mebendazole. Uzimanje Pirantela je prikladno u dozi od 10 mg tvari po kilogramu težine za pinworms i 5 mg / kg za okrugle crve. Mebendazol se uzima dva puta dnevno, 50 mg, za djecu od 2-3 godine tri dana za redom, dva puta dnevno, 100 mg tri dana za redom za djecu stariju od 3 godine, nakon 3 tjedna terapija se ponovljeno.
• Za toksokarijazu, mebendazol se propisuje u drugoj dozi - za djecu od 2 godine i više, 100 mg dva puta dnevno tijekom 14-10 dana.
• Trihineloza se liječi mebendazolom 5 mg po kilogramu težine, nakon čega se doza podijeli u tri doze dnevno. Tijek liječenja je 1 tjedan pod strogim nadzorom liječnika.

Prevencija helmintijaza

• pranje ruku odmah nakon kontakta sa životinjama, nakon izlaska vani i u pješčaniku, odlaska na WC i prije jela;
• jesti samo čistu hranu;
• pravilno provedena toplinska obrada mesnih i ribljih proizvoda;
• pijenje prokuhane vode;
• održavanje osobne higijene i sanitarnih uvjeta;
• redovita dehelmintizacija kućnih ljubimaca;
• provođenje preventivne dehelmintizacije kod djece od 2 godine i starije.

Test krvi na toksokaru

Značajke ljudske infekcije toksokarozom

Nositelji zaraze su psi, rjeđe mačke. Jajašca toxocara šire se izmetom pasa lutalica. Kada se jednom nađu na tlu, u vodi ili zadrže na krznu životinje, na različite načine se unose u zdravo tijelo.

Reakcija na upad stranca

Iz medicinske statistike poznato je da su odrasli manje vjerojatno da će se zaraziti toksokarijazom, osim ako je njihovo zanimanje rizično. Djeca imaju mnogo veću vjerojatnost da će dobiti infekciju.

Najčešći simptomi toksokarijaze:

• Groznica bez znakova bilo kakve bolesti.
• Povećanje temperature.
• Povećanje i slabljenje boli u glavi ili trbuhu.
• Pojava kožnog osipa koji se ne može eliminirati.
• Natečenost lica.
• Povećanje razine eozinofila u krvi, otkriveno tijekom opće analize.

Za postavljanje točne dijagnoze propisan je imunološki test za toksokaru. Prisutnost proteinskih spojeva u krvi koji nose genetsku informaciju helminta (antigeni) izaziva imunološki sustav da proizvodi antitijela klase igg. Ovo je prvi znak infekcije toksokarijazom.

Preliminarna dijagnoza

Početna faza povijesti bolesti pacijenta je skupna. Prije slanja pacijenta na analizu krvi za toksokarijazu, potrebno je proučiti pozadinu bolesti i obaviti preliminarni pregled.

Primarna dijagnoza:

• Proučavanje otegotnih okolnosti koje bi mogle izazvati infekciju - specifičan rad sa životinjama ili prisutnost kućnog ljubimca, radovi na iskopu u potencijalno opasnom području, igranje djece u prostorima za šetnju pasa.
• Fizikalni pregled bolesnika. Pregled kože na potkožnu invaziju Toxocara, kapaka i očnih jabučica, palpacija.
• Propisivanje kompletnog testa krvi. Tijekom infekcije toksokarijazom karakterističan je značajan porast nekih pokazatelja - eozinofili (70–80%), limfociti, ESR. Dok razina hemoglobina primjetno pada.
• Uzimanje uzoraka jetre. S teškom invazijom utječe na opterećenje jetre, što se očituje jakim skokom bilirubina.

Konvencionalnim testovima (krv, koprogram, bris) nemoguće je dobiti izravnu potvrdu infestacije toksokarom. Duodenalno ispitivanje je također neinformativno, jer je teško zbog migracijske prirode ličinki.

Nakon primitka rezultata preliminarnog pregleda koji ukazuje na moguću infekciju toksokarijazom i diferencira navodnu dijagnozu od bolesti sa sličnim simptomima, pacijentu se propisuje ELISA test za toksokarijazu.

Vezani imunosorbentni test

Glavni cilj ove studije je potvrditi prisutnost Toxocara u ljudskom tijelu. Antitijela na ove helminte nalaze se u krvnoj plazmi, pa se uzima iz vene.

Testiranje na toksokaru zahtijeva određenu pripremu:

• Nemojte jesti masnu ili tešku hranu dan prije zahvata.
• Nemojte piti slatka, gazirana ili alkoholna pića tijekom dana prije posjeta laboratoriju.
• Uzmite uzorke natašte.
• Nemojte uzimati lijekove prethodni dan i dan za koji je zakazana pretraga.

Potrebno je uzeti u obzir da na ovu vrlo informativnu metodu identifikacije invazije mogu utjecati određene okolnosti. Lažno pozitivan rezultat može se pojaviti ako pacijent ima:

• Onkološke bolesti.
• Tuberkuloza pluća.
• Teške patologije jetre.
• Autoimuni sindrom.
• Antifosfolipidni sindrom.
• Trudnoća.

U tom slučaju neće biti moguće dobiti 100% potvrdnu analizu, jer u gore navedenim okolnostima obrambeni sustav proizvodi i imunoglobuline (antitijela). Potrebno je provesti dodatnu dijagnostiku i razlikovati toksokarijazu od navedenih čimbenika.

Koncentracija imunoglobulina (titar) klase IgG dostiže najveću moguću vrijednost 2-3 mjeseca nakon početka invazije. Što je infekcija teža, to je ovaj pokazatelj veći.

ELISA rezultati

Za postavljanje dijagnoze pažljivo se proučava enzimski imunološki test, a dobiveni rezultati uspoređuju se s referentnim vrijednostima. Titar protutijela od 1:100 s indeksom pozitivnosti manjim od 0,9 smatra se normalnim.

Brojčane vrijednosti titara

Dobiveni rezultati mogu biti negativni, pozitivni, slabo pozitivni ili upitni. Broj titara AT ovisi o težini invazije i prije koliko se vremena dogodila.

Transkript analize:

• AT titar do 1:100 – nalaz je negativan. U tijelu pacijenta nisu pronađene ličinke Toxocara.
• AT titar do 1:400 je slabo pozitivan rezultat. Pacijent ima slabu invaziju ili razvija očni oblik toksokarijaze. U nekim slučajevima indikator ukazuje na nedavnu infekciju.
• AT titar do 1:600 ​​​​– rezultat je pozitivan. Osoba pati od kliničkog oblika helmintijaze, koja, ako se otkrije, zahtijeva hitno liječenje.
• AT titar do 1:800 – nalaz je pozitivan. Govori o teškoj invaziji progresivne prirode i velikoj vjerojatnosti razvoja patološkog procesa unutarnjih organa.

Uz rijetke iznimke, ELISA studije otkrivaju napredni oblik invazije s primjesama helmintijaze drugog podrijetla. U tom slučaju ukupna antitijela mogu biti veća od 1:800.

Stopa pozitivnosti

Kada se koristi enzimski imunološki test za toksokarijazu s titrom od 1: 400 - 1: 600 za razlikovanje invazije od nuspojava, dobiveni pokazatelji uspoređuju se s referentnom vrijednošću. Razlika između tih brojeva obično se naziva indeks ili koeficijent pozitivnosti.

Obično je u ELISA obrascu jedan pokazatelj nasuprot drugom. Prvo je norma, drugo može značiti:

• Do 0,9 – rezultat je negativan. Ličinke Toxocara nisu pronađene.
• 0,9-1,1 - rezultat je sumnjiv. U tom slučaju propisana je ponovljena dijagnostika.
• 1.1-2.2 – rezultat je blago pozitivan. Osoba je nositelj sa slabom invazijom.
• 2.2-4.2 – rezultat je pozitivan. Toksokarijaza umjerene težine razvija se dosta dugo.
• Više od 4,4 - rezultat ukazuje na vrhunac helmintske invazije ili nedavnu helmintiju.

CP s rezultatom 4,4 i otkrivenim povećanjem eozinofilije za 10% može ukazivati ​​na razvoj očnog oblika toksokarijaze i prisutnost protutijela na unakrsnu invaziju, ukupno na toksokarijazu.

Imunološka reakcija i optička gustoća protutijela (stopa pozitivnosti) ovise o stupnju infekcije toksokarama i njihovoj lokaciji. Najniži titar i pokazatelji CP samo nam omogućuju pretpostaviti odsutnost helminta, ali ne i potvrditi to.

Prikazane informacije ne mogu poslužiti kao izvor za samodijagnozu ili samoliječenje. Rezultati ELISA-e u kombinaciji s preliminarnim pregledom mogu samo reći stručnjaku o prisutnosti problema. U laboratoriju Invitro dijagnostika krvi provodi se s visokom točnošću, rezultat analize popraćen je komentarima stručnjaka o stopi pozitivnosti. To značajno pomaže liječniku u postavljanju točnije dijagnoze.