Ponction articulaire et analyse du liquide synovial. Examen clinique général du liquide synovial Analyse du liquide synovial où le faire

L'examen cytologique du liquide synovial (SF) est une analyse simple qui permet de connaître le caractère inflammatoire ou non de la pathologie pour toute maladie des articulations avec épanchement. En cas d'inflammation, l'analyse permet de diagnostiquer un groupe d'arthropathies métaboliques, représentées principalement par la goutte et la chondrocalcinose, lorsque des microcristaux intra-articulaires (MC) provoquent une inflammation. Pour ces affections, le test SF permet de poser un diagnostic rapide, précis et fiable.

Les études cytologiques du liquide synovial sont peu coûteuses, peu invasives, rapides et techniquement accessibles. Dans ce cas, deux signes diagnostiques sont particulièrement intéressants :

• La présence d’un grand nombre de cellules est le véritable reflet d’une maladie inflammatoire des articulations ;
• La présence ou l'absence d'arthropathie microcristalline permet de confirmer ou d'exclure en quelques minutes une arthropathie microcristalline et d'en déterminer la nature. Le liquide synovial est généralement présent en très petites quantités dans chaque cavité articulaire. Son rôle est double : il agit comme un lubrifiant, réduisant les frottements entre les surfaces articulaires lors des mouvements, et il nourrit le tissu cartilagineux, qui n'est pas approvisionné en sang.

L'examen cytologique du liquide synovial fournit des informations utiles sur la pathologie responsable de l'épanchement articulaire.

• Caractéristiques des microcristaux dans SF - informations précieuses sur l'arthropathie métabolique
• 500, mais<1500, то считают процентное содержание отдельных типов лейкоцитов, обращая особое внимание на их необычные формы.">La cellularité et la formule de la population cellulaire permettent de distinguer cinq types de SG (Tableau 1). Ce signe n’a qu’une importance relative, mais il est précieux pour le clinicien.

Tableau 1 – Différents types de GS selon la cytologie

• Le SF normal est transparent, incolore ou jaunâtre. Il devient plus opaque avec l'augmentation de la cellularité.
• La viscosité du fluide est liée à la teneur en acide hyaluronique. Il est riche en SF normal ou non inflammatoire. La viscosité peut être facilement évaluée en étirant une goutte de liquide de refroidissement entre deux doigts protégés par un gant ou des protège-doigts, et en mesurant la longueur du fil ainsi obtenu. Dans toutes les inflammations, la viscosité du liquide diminue.
• La formation d'un caillot est caractéristique du liquide synovial pathologique. En effet, le SF normal est exempt de fibrinogène et ne coagule pas. Cependant, tout SF pathologique, surtout s'il est inflammatoire, contient de la fibrine et forme un thrombus lâche, qui entoure les éléments cellulaires d'un maillage. Il est donc très important de prévenir la coagulation du liquide en utilisant des anticoagulants.

Technique d'examen cytologique du liquide synovial

1. Prendre du SG

N’importe quel volume est suffisant pour l’analyse, puisque le test ne nécessite qu’une quantité négligeable d’échantillon. A l'état frais, une goutte suffit pour l'analyse. Le SF est collecté dans un tube en plastique stérile. L'examen cytologique du liquide synovial nécessite l'utilisation d'un anticoagulant. Le meilleur choix est l’héparinate de sodium ; L'oxalate de calcium et l'héparine de lithium doivent être exclus car ils contiennent du MK, qui peut être phagocyté par les cellules polymorphonucléaires. Pour la même raison, les particules telles que le talc ou l’amidon provenant des gants doivent être évitées.

2. Examen cytologique du liquide synovial frais

Cette étape de cytologie SG doit être réalisée le plus tôt possible après le prélèvement, sans retarder une goutte (0,05 ml) de l'échantillon visualisé sous une lamelle. La centrifugation n’est pas nécessaire car les GC à faible cellule sont rarement pathologiques. L'identification des VM est difficile et nécessite un microscope polarisant, éventuellement doté d'un compensateur et d'une table rotative, qui permet de visualiser plus facilement les VM, surtout si elles sont peu nombreuses. En l'absence de microscope polarisant, l'analyse peut être effectuée avec l'ouverture du microscope très fermée, lorsque l'on identifie des éléments qui ont un indice de réfraction différent de l'indice de réfraction des composants cellulaires. Cette étude peut être complétée par la détermination du nombre de cellules dans la chambre de Goryaev, ce qui est important pour déterminer la nature des lésions articulaires (Tableau 2).

Principales conditions pathologiques et types de GS

Non inflammatoire	Inflammatoire		Hémorragies
	Polyarthrite rhumatoïde	Infections bactériennes	Fractures traumatiques
	Arthrite microcristalline	Tuberculose	Syndrome hémorragique
Ostéonécrose	syndrome de Reiter		Hémophilie
Ostéochondrite disséquante	Rhumatisme psoriasique		Synovite villezonodulaire
Ostéochondromatose	Rhumatisme dans les maladies inflammatoires de l'intestin		Hémangiome

Si l’examen cytologique immédiat d’un échantillon de liquide synovial n’est pas possible, il peut être retardé jusqu’à 24 heures, à condition que le liquide soit conservé à 4°C ou, mieux encore, au congélateur à -20°C. Il est également possible de préparer un frottis et de le sécher à l'air. K peut être examiné soit directement, en lumière polarisée, soit après coloration de May-Grunwald-Giams (MGG).

3. Coloration selon MGZ

Les résultats du comptage du nombre de cellules dans le SF frais sont complétés par le comptage des types de cellules individuelles après cytocentrifugation, préparation des frottis et coloration à la MG, ce qui nous permet de clarifier la nature des cellules présentes dans le SF.

résultats

L'examen cytologique du liquide synovial est un examen utile pour les cliniciens, car il permet de concentrer l'examen sur une pathologie spécifique parmi tant d'autres dont peut souffrir le patient. Pour les lésions articulaires métaboliques ou microcristallines, une telle analyse est essentielle dans l'examen (Tableau n°3).

Tableau 3 - Paramètres cytologiques du liquide dans l'arthrite microcristalline

Arthrite infectieuse

L'examen cytologique du liquide synovial révèle un très grand nombre de cellules avec une prédominance de cellules polynucléées, souvent modifiées. Si l'infection est supprimée par des antibiotiques, le nombre de PMN est alors moins nombreux et la preuve de l'infection doit être basée sur l'analyse bactériologique du SF ou sur l'examen histologique d'une biopsie de la synoviale. Si le SG est riche les éosinophiles, il faut chercher microfilaires.

Maladies rhumatismales inflammatoires

Là encore, la cellularité est importante et les leucocytes polymorphonucléaires (PMN) sont les plus nombreux. Ce groupe de pathologies articulaires ne présente pas de profil cytologique spécifique traduisant un rhumatisme spécifique. Mais les SG sont statistiquement plus inflammatoires dans la polyarthrite rhumatoïde et réactive (spondyloarthrite de Fissinger-Leroy-Reuter) que dans la polyarthrite LED, la pelviospondylarthrite rhumatismale ou le rhumatisme psoriasique.

Arthrite métabolique ou microcristalline

C'est pour ce groupe de maladies que l'examen cytologique du liquide synovial est raisonnable et intéressant. Il convient de noter que la détection de MK n’élimine pas l’infection et que l’examen bactériologique reste conseillé dans tous les cas.

Goutte

La goutte est toujours associée à la présence d'innombrables micro-organismes dans la cavité articulaire l'urate monosodique, une forme et des caractéristiques physiques très caractéristiques. Ce sont des MK allongés, en forme d'aiguille, de 5 à 20 microns de long, avec une extrémité conique qui perce les membranes cellulaires. Le liquide est généralement très inflammatoire et riche en neutrophiles (Figure 1).

De très petits cristaux (1 à 2 microns) peuvent être observés dans les épanchements asymptomatiques entre les poussées de goutte. Désormais, ils sont souvent extracellulaires. L'acide urique urate de sodium est soluble dans l'eau, n'est pas stocké et n'est pas détecté dans les frottis colorés à la MGM.

Chondrocalcinose des articulations

Cette pathologie est causée par la présence dans le cartilage et/ou la synoviale de dépôts de pyrophosphate de calcium dihydraté qui, dans la période aiguë, provoquent des symptômes soit de pseudogoutte, soit de rhumatoïde inflammatoire ou d'arthrose. Clé du diagnostic – identification des MK caractéristiques dans le SF. MK mesure 5 à 10 microns de long, à l'intérieur des leucocytes, sous la forme d'un parallélépipède droit ou oblique. Leur biréfringence est inférieure à celle de l'acide urique. Ces MC sont légèrement solubles dans l’eau et sont conservées après coloration au MGR. Parfois, l'analyse du liquide frais ou après coloration du liquide mammaire montre simultanément des concentrations d'urate et de pyrophosphate. Ces lésions articulaires mixtes ne sont pas exclusives.

Maladies articulaires et phosphates de calcium

Certains patients, souffrant souvent de calcifications de la coiffe des rotateurs, peuvent développer une arthropathie destructrice et des signes d'inflammation de la coiffe des rotateurs. Les symptômes d'inflammation du tractus gastro-intestinal sont associés à la présence d'acide urique, appartenant à diverses formes de phosphate de calcium. Le plus courant est l’hydroxyapatite, mais on peut également trouver du phosphate octacalcique et du phosphate tricalcique. La longueur de ces cristaux est de 0,1 à 0,2 µm, ils sont invisibles au microscope optique.

Autres microcristaux

Lors de l'examen de SF frais, d'autres types de MK sont parfois identifiés, notamment :

• Oxalate de calcium, qui peut être observé chez les patients hémodialysés. Elles forment

MK est tantôt pyramidal, tantôt de forme ou de bâtonnets irréguliers, qui peuvent être confondus avec du pyrophosphate de calcium ;

• Les MK de cholestérol sont grands, rectangulaires, plats, souvent avec un coin biseauté. Ils sont observés dans la polyarthrite rhumatoïde ou les bursites liées à l'âge ;
• Les dérivés de la cortisone, injectés dans l'articulation à des fins thérapeutiques, s'y cristallisent et la MK peut persister plusieurs semaines ou mois. Ils peuvent causer de réels

arthrite microcristalline. Leur forme est variable et ils sont tous biréfringents ;

• Les MC de Charcot-Leiden sont rares et peuvent être observées dans un liquide riche en éosinophiles. Leur forme s'apparente à celle d'une aiguille de boussole, faiblement biréfringente.

Conclusion

L'examen cytologique du liquide articulaire est un test diagnostique précieux, peu invasif, rapide et abordable, dans lequel :

L'abondance de cellules est le reflet fidèle de la nature inflammatoire des maladies articulaires,

La présence ou l'absence de MK permet de confirmer ou d'exclure, en quelques minutes, une arthropathie microcristalline, et souvent de déterminer la nature d'une arthropathie métabolique.

L'examen clinique général (analyse) du liquide articulaire comprend la détermination des propriétés physico-chimiques du liquide et l'examen microscopique des éléments cellulaires.

Les caractéristiques macroscopiques du liquide synovial (couleur, degré de turbidité et viscosité) sont évaluées en lumière transmise. La viscosité s'apprécie par la longueur du filament de mucine : la longueur du filament formé par une goutte libérée par une seringue doit normalement être supérieure à 3 cm. Avec l'inflammation, la viscosité diminue, et par conséquent la longueur du filament diminue.

La manipulation est réalisée avec le patient assis, le bras abaissé le long du corps et allongé sur le genou. L'aiguille est insérée par l'avant, son extrémité est dirigée légèrement vers le bas et latéralement, vers l'apophyse coracoïde de l'omoplate ; l'aiguille se déplace vers l'arrière, vers la surface articulaire de la scapula. Il est également possible de percer l’articulation de l’épaule par voie postérieure.

Le patient plie le bras au niveau de l'articulation du coude à un angle de 60°, le poignet est en position de pronation. Le point d'insertion de l'aiguille est situé sur la face latérale de l'articulation, entre l'épicondyle latéral de l'humérus et le radius.

L'articulation du genou et ses bourses périarticulaires peuvent être percées avec le patient en décubitus dorsal, le membre inférieur étant étendu au niveau de l'articulation du genou. Une aiguille, généralement de 0,8 mm de diamètre, est insérée par le côté latéral juste en dessous du bord caudal de la rotule. Comme alternative, il est possible d'insérer l'aiguille du côté médial, également sous le bord caudal de la rotule.

Les caractéristiques macroscopiques permettent dans de nombreux cas de distinguer les épanchements non inflammatoires, inflammatoires et infectieux. De plus, du sang peut être présent dans le liquide articulaire. L'apparition de l'épanchement suggère une certaine maladie. Les épanchements dits non inflammatoires correspondent en réalité à des processus pathologiques caractérisés par une inflammation légère à modérée, comme l'arthrose.

Les études en laboratoire du liquide intra-articulaire comprennent le comptage des cellules et l'évaluation de leur composition qualitative, un examen microbiologique (si un processus infectieux est suspecté), ainsi qu'un examen microscopique du médicament natif pour identifier diverses cellules et cristaux. Cependant, le choix d'un test particulier dépend du diagnostic suspecté.

Indicateurs de référence (normaux) du liquide synovial

L'étude du liquide synovial joue un rôle important dans la clarification de la nature du processus dans l'articulation touchée.

Indications de ponction articulaire : monoarthrite d'étiologie inconnue, gêne au niveau de l'articulation atteinte (si le diagnostic est établi), nécessité de surveiller l'efficacité du traitement de l'arthrite infectieuse, pour le diagnostic différentiel de l'arthrite et de l'arthrose, depuis le choix d'un le programme d'examen plus approfondi et de traitement du patient en dépend.

En cas de maladies articulaires, il est nécessaire de subir un examen complet pour identifier la cause et la nature du processus inflammatoire. L'un des tests les plus importants est l'étude du liquide synovial. La procédure de prélèvement de liquide pour analyse est désagréable, mais l'étude est le moyen le plus efficace de poser un diagnostic et est nécessaire à l'élaboration d'un schéma thérapeutique.

L'un des tests les plus importants est l'étude du liquide synovial

Le liquide synovial, souvent appelé liquide articulaire, agit comme un lubrifiant entre les cartilages. Grâce à cette substance, l'absorption des chocs est assurée, réduisant ainsi la force d'impact et la charge sur les articulations lors du mouvement. Le liquide synovial sert en outre à transporter les nutriments qui maintiennent l’élasticité du tissu cartilagineux.

En cas de troubles du fonctionnement des processus articulaires et inflammatoires, les premiers changements affectent le liquide articulaire. En examinant le liquide synovial, il est possible de poser rapidement un diagnostic précis dès les premiers stades du développement des pathologies articulaires.

Indications de l'analyse du liquide synovial :

• syndrome douloureux;
• activité motrice altérée de l'articulation;
• boiterie soudaine;
• raideur articulaire matinale.

Une étude du liquide synovial est prescrite en cas de polyarthrite rhumatoïde ou si cette maladie est suspectée, ou d'inflammation de la capsule articulaire. Cette étude est nécessaire pour exclure ou confirmer la nature bactérienne du processus inflammatoire.

Une ponction est réalisée pour prélever une petite quantité de liquide pour analyse. La procédure se déroule en deux étapes. Tout d’abord, le patient est soigneusement désinfecté au niveau du site de ponction et un anesthésique est injecté dans cette zone pour éliminer la douleur. Seule une anesthésie locale est utilisée. Ensuite, une aiguille spéciale, creuse à l'intérieur, est insérée dans la cavité articulaire, à l'aide de laquelle une petite quantité de liquide est pompée.

La durée de l'ensemble de la procédure ne dépasse pas 5 minutes. Le liquide prélevé dans une seringue stérile est immédiatement envoyé au laboratoire.

La ponction ne peut être réalisée que si l'épiderme autour de la zone d'insertion de l'aiguille est infecté. En cas d'exacerbation de maladies dermatologiques chroniques, l'intervention est reportée jusqu'à l'obtention d'une rémission. Une ponction de la membrane synoviale pour recueillir le liquide de l'articulation n'est pas effectuée dans un état général grave, accompagné de fièvre ou d'intoxication.

La ponction est utilisée simultanément comme méthode diagnostique et thérapeutique. Lorsque le liquide est collecté dans l’articulation, la pression dans la synoviale diminue, ce qui élimine instantanément la douleur due à l’inflammation. De plus, à l'aide d'une piqûre, des analgésiques spéciaux ou des anti-inflammatoires peuvent être administrés pour soulager les symptômes de l'arthrite.

Évaluation de la composition du liquide synovial

L'analyse du liquide synovial permet d'identifier la cause du dysfonctionnement articulaire

Le liquide synovial dans une articulation saine est un lubrifiant visqueux jaune clair. Sa quantité peut varier de 1 à 4 ml. Lors de l'analyse du liquide synovial de l'articulation du genou, environ 1 ml de liquide est collecté pour le test.

L'analyse comprend :

• évaluation visuelle du liquide et de ses propriétés physiques ;
• détermination de la composition chimique;
• coloration du frottis et réalisation d'un examen microscopique de la préparation obtenue ;
• culture bactérienne du liquide.

La combinaison de ces étapes permet une évaluation complète de la fonction articulaire et l'identification de tous les troubles possibles. Décrypter l’examen cytologique du liquide synovial permettra de mieux comprendre sa signification et les éventuelles perturbations de sa composition.

Analyse visuelle du fluide : norme et pathologie

Le décryptage d'une analyse visuelle du liquide synovial permet d'identifier la cause du dysfonctionnement articulaire. Ceci est nécessaire pour déterminer la nature inflammatoire ou non inflammatoire de la maladie.

Le nombre de leucocytes est déterminé pour 1 µl du médicament à tester.

Un processus pathologique non inflammatoire dans la capsule articulaire est observé dans l'arthrose. Ce résultat d'analyse est également typique du lupus érythémateux systémique et de l'arthrose qui se développe dans le contexte de blessures.

L'inflammation des articulations est caractéristique de la polyarthrite rhumatoïde et goutteuse. Ces maladies s'accompagnent de raideurs dans les articulations le matin, immédiatement après le sommeil, et de douleurs intenses.

Un processus inflammatoire septique dans les articulations se développe dans le contexte d'une infection par la tuberculose, la gonorrhée et d'autres infections. On l’appelle aussi inflammation purulente ou infectieuse.

Analyse chimique

Les éléments cellulaires sont évalués par analyse chimique

L'analyse chimique du liquide synovial détermine la présence de protéines, de glucose et d'acide urique. Dans les articulations saines, il n’y a pas de composés protéiques. Leur présence indique une arthrite due à la goutte ou au psoriasis. La quantité de protéines est évaluée en remplissant le champ de vision du microscope.

Le glucose dans le liquide synovial indique des complications du diabète. Pour éviter un résultat faussement positif, le test est effectué le matin à jeun. Il faut absolument refuser de manger au moins 8 heures avant la ponction.

En cas d'inflammation sévère, une quantité importante de glucose se trouve dans le liquide articulaire, qui est normalement présent dans les articulations en quantités infimes.

L'acide urique ne se trouve dans le liquide synovial que dans une seule maladie : la goutte. L'arthrite goutteuse s'accompagnant de symptômes spécifiques, la détermination du taux d'acide urique dans les articulations est une étude auxiliaire, mais non obligatoire, pour ce diagnostic.

Microscopie

Le but de l'analyse microscopique est de compter les cristaux et les éléments cellulaires entrant dans la composition du matériau étudié. Pour ce faire, l'échantillon est placé au microscope, coloré avec une préparation spéciale et soigneusement examiné. L'évaluation des éléments cellulaires est réalisée visuellement.

Normalement, le liquide ne contient pas de cristaux. La raison de leur formation dépend du type de composés cristallins indiqué dans les résultats de l'analyse. Avec la goutte, il y a une grande quantité d'urate de sodium. La présence de cholestérol dans le liquide articulaire indique une arthrite de toute nature ; des calcifications se retrouvent dans les formes sévères de polyarthrite rhumatoïde.

Analyse cytologique

L'analyse cytologique évalue le nombre total de cellules

La cytologie est un minimum nécessaire lors de l'examen du liquide articulaire. Pour compter les cellules, des préparations de coloration spéciales et des équipements supplémentaires sont généralement utilisés, ce qui vous permet de déterminer avec précision le type et le nombre de cellules modifiées. L'analyse cytologique est plus simple, puisque le nombre de cellules est évalué visuellement, en fonction du volume de la lame. Cette méthode permet uniquement de déterminer la nature de la maladie par le nombre de leucocytes. Une augmentation du nombre de ces cellules indique une inflammation.

L'analyse cytologique évalue le nombre total de cellules. Dans ce cas, l'analyse permet d'identifier le caractère inflammatoire, non inflammatoire et purulent de la maladie. En d’autres termes, l’analyse chimique et l’analyse cytologique sont pratiquement la même chose, seuls les résultats de l’analyse chimique sont plus détaillés.

En colorant le médicament et en le plaçant dans une centrifugeuse spéciale, il est possible d'identifier les cristaux dans le liquide. Cela révèle la présence de cristaux en forme d’aiguilles et quadrangulaires.

Maladies pouvant être diagnostiquées lors d'un examen cytologique approfondi d'un échantillon coloré :

• tous les types d'arthrite;
• goutte;
• arthrose;
• dépôts de sels de calcium dans les articulations ;
• inflammation purulente et infectieuse des articulations.

L'examen cytologique est réalisé de manière assez simple et rapide, ce qui en fait l'un des premiers moyens d'évaluer la santé des articulations.

Culture bactérienne

Si l’analyse microscopique et la cytologie révèlent une inflammation septique, une culture bactérienne supplémentaire du liquide articulaire est nécessaire. Cette analyse permet d'identifier avec précision le type d'agent causal de l'inflammation infectieuse, sur la base duquel le schéma thérapeutique le plus efficace peut être sélectionné.

Pour effectuer l'analyse, le liquide articulaire est placé dans un milieu spécial rempli d'une solution nutritive. Dans cet environnement, les micro-organismes pathogènes mûrissent rapidement et leur population augmente. Quelques jours plus tard, le technicien de laboratoire évalue la composition du liquide en plaçant une petite quantité du médicament « mûri » sur une lame de verre sous un microscope. L'agent causal de la maladie sera les bactéries ou les champignons dont le nombre a augmenté autant que possible au cours de leur séjour dans le milieu nutritif.

L'inflammation purulente des articulations doit être traitée avec des antibiotiques. La culture bactérienne vous permet d'identifier le type d'agent pathogène, sur la base duquel le médecin peut sélectionner un traitement antibactérien efficace.

De plus, au cours de l’étude, les bactéries pathogènes peuvent être analysées pour déterminer leur sensibilité aux antibiotiques.

L'étude du liquide synovial placé dans un milieu nutritif spécial prend plusieurs jours, car les agents pathogènes mûrissent assez lentement. Habituellement, les résultats sont prêts en 3 à 7 jours, mais dans certains cas, cela peut prendre plus de temps, jusqu'à deux semaines.

Examens complémentaires

Les radiographies des articulations peuvent exclure les dommages au tissu cartilagineux.

Malgré le caractère informatif de l'analyse, l'examen du liquide articulaire n'est prescrit qu'après avoir posé un diagnostic préliminaire. En cas de douleurs articulaires et de mobilité réduite, il est conseillé en priorité au patient de se soumettre aux examens suivants :

• analyse de sang;
• radiographie des articulations;
• IRM et échographie.

Un test sanguin pour le facteur rhumatoïde est nécessaire. Un niveau élevé de cette immunoglobuline indique la nature auto-immune de la maladie, typique de la polyarthrite rhumatoïde.

Dans certains cas, une inflammation se produit dans l'articulation, mais le facteur rhumatoïde n'augmente pas. Un test sanguin général et biochimique aidera à déterminer avec précision la présence d'un processus inflammatoire.

Les radiographies des articulations peuvent aider à exclure tout dommage au tissu cartilagineux. L'IRM et l'échographie révèlent l'implication des tissus environnants dans le processus inflammatoire et permettent de déterminer la présence de calcifications au niveau des articulations.

Quel médecin dois-je contacter après avoir reçu les résultats du test ?

Dans la grande majorité des cas, le diagnostic primaire est réalisé par un médecin généraliste ou un médecin de famille. Ce spécialiste orientera le patient vers des examens standards - un test sanguin pour le facteur rhumatismal, une radiographie des articulations et un test sanguin biochimique pour déterminer le niveau d'acide urique.

Si le caractère inflammatoire de la maladie est confirmé, le médecin orientera le patient vers un rhumatologue. Ce spécialiste sélectionnera le schéma thérapeutique. Par ailleurs, des tests de laboratoire spécifiques aux maladies articulaires permettant de détecter des modifications dans la composition du liquide synovial sont également prescrits par un rhumatologue.

En l’absence d’inflammation, les troubles articulaires peuvent être associés à une dégénérescence du tissu cartilagineux ou à des blessures antérieures. Dans ce cas, le traitement doit être effectué par un chirurgien orthopédiste.

Complications possibles de ponction

Les risques dépendent du professionnalisme du médecin et des examens préliminaires

L'examen du liquide synovial nécessite une ponction de la capsule articulaire. L'intervention elle-même présente un minimum de contre-indications et ne nécessite aucune préparation autre que le refus de manger 8 heures avant l'examen.

Lors d'une ponction, des anesthésiques, des préparations à base d'iode et des antiseptiques sont utilisés. Après avoir pris le liquide, appliquez un pansement compressif sur le site de ponction, après avoir préalablement traité la peau avec un antiseptique. Un bandage serré doit être porté toute la journée, puis remplacé par un bandage ample.

Malgré son apparente simplicité, la crevaison n’est pas sans danger. Dans certains cas, les complications suivantes surviennent :

• infection interne de l'articulation;
• saignement lorsqu'un vaisseau est endommagé;
• lésions ligamentaires et troubles de la mobilité ;
• douleur due à des lésions nerveuses.

L'infection articulaire est une complication rare. Le risque d'infection augmente avec les ponctions répétées de la membrane synoviale. Les saignements dus à des lésions des vaisseaux sanguins nécessitent des mesures supplémentaires de la part du personnel médical, car le sang pénètre directement dans la synoviale.

Des complications graves, entraînant une détérioration de la santé et une altération de la mobilité articulaire, sont observées dans des cas isolés. Les risques de complications dépendent en grande partie du professionnalisme du médecin et des examens préliminaires.

Technologie analytique standardisée pour l’analyse en laboratoire clinique du liquide synovial.

1. But de l'étude

La technologie « Analyse en laboratoire clinique du liquide synovial » est réalisée pour diagnostiquer les maladies articulaires, ainsi que pour surveiller l'évolution de la maladie et l'efficacité du traitement.

L'étude du liquide synovial est d'une grande importance lorsque :

Tous les employés doivent suivre les instructions et les règles de sécurité énoncées dans les fiches techniques des appareils électriques utilisés dans la technologie (photomètres, microscopes, centrifugeuses) ; le personnel travaillant avec des réactifs doit être formé à leur manipulation, utiliser un équipement de protection individuelle et respecter les règles d'hygiène personnelle.

Pour prévenir les incendies, il est nécessaire de respecter les règles de sécurité incendie conformément à la réglementation en vigueur.

Ainsi, il est nécessaire de respecter scrupuleusement tous les points des consignes de sécurité, de sécurité incendie et de sécurité biologique.

2.3 Conditions d'exécution de la technologie pour l'analyse en laboratoire clinique du liquide synovial et objectif fonctionnel

L'analyse en laboratoire clinique du liquide synovial est réalisée dans les laboratoires de diagnostic clinique des établissements de soins spécialisés ambulatoires et hospitaliers (centres de rhumatologie et d'arthrologie).

Objectif fonctionnel de la prestation : réalisée dans le but de diagnostiquer les maladies articulaires, de suivre l'évolution et la progression de la maladie et l'efficacité du traitement.

2.4. Moyens matériels nécessaires à la mise en œuvre de la technologie : instruments, instruments de mesure, matériel de laboratoire

2.4.1. Microscope binoculaire à immersion et éclairage intégré.

2.4.2.Microscope polarisant.

2.4.3. Centrifugeuse de laboratoire (refroidie : 5-8 oC).

Des centrifugeuses capables de 1 000 tr/min doivent être utilisées pour préparer les sédiments de liquide synovial. Lorsque vous utilisez une centrifugeuse, vous devez suivre strictement les instructions du fabricant.

2.4.4. Compteur pour calculer la formule leucocytaire du sang (pour calculer le synoviocytogramme).

2.4.5. Porte-éprouvettes.

2.4.6. Récipients et cuvettes pour la coloration et la fixation des frottis.

2.4.7. Dispositif pour sécher les frottis.

2.4.8. Produits en verre (plastique).

2.4.8.1. Tubes à centrifuger (10 ml).

Pour l'étude macroscopique du SF, il est préférable d'utiliser des tubes en verre transparent. Pour centrifuger le liquide, on utilise des tubes à centrifuger en plastique, qui doivent avoir une forme conique pour concentrer les sédiments, être gradués pour déterminer la quantité de liquide synovial obtenue lors de la ponction articulaire et être fermés avec des couvercles pour réduire le risque d'éclaboussures. Les tubes doivent être chimiquement purs et étiquetés pour une identification correcte du patient. Il est possible d'utiliser des tubes à vide.

2.4.8.2. L'appareil photo de Goryaev.

2.4.8.3. Verres à lames et lamelles pour la microscopie de préparations natives.

Verre à lame (de préférence avec un champ dépoli pour le marquage, taille 26 x 76 x 1,1 mm) pour la microscopie d'un échantillon coloré.

Une lame de verre à bord poli (taille 26 x 76 x 1,1 mm) ou une spatule en plastique pour préparer un frottis.

2.4.8.4. Pipettes pour transférer le liquide synovial. Actuellement, on utilise des pipettes Pasteur en plastique avec une extrémité finement étirée et un ballon, conçues pour standardiser le volume de la gouttelette de sédiment et réduire le risque de risque biologique associé à la remise en suspension ou au transfert de liquide synovial. Ils doivent être secs et chimiquement propres.

2.4.8.5 Tiges de verre.

2.5 Réactifs

2.5.1 Solutions de fixateurs et de colorants et autres réactifs nécessaires à la préparation de frottis colorés (voir GOST R Examen cytologique de la moelle osseuse ponctuée) ;

2.5.2 solution d'acide acétique à 5 % ;

2.5.3 EDTA (sel dicotassique ou disodique).

2.5.4. Solution de rouge d'alizarine à 2%.

2.6 Autres consommables

2.6.1. Des gants en caoutchouc.

2.6.2. Désinfectants.

3. Caractéristiques de la technique de mise en œuvre de la technologie d'étude du liquide synovial

3.1 Obtention d'échantillons de liquide synovial

Pour réaliser correctement l'étape préanalytique, il est nécessaire de respecter les exigences de la norme GOST R 53079.4-2008. .

La ponction articulaire est réalisée par un clinicien.

Les règles de conservation et de transport des échantillons de liquide synovial sont définies dans

Annexe A.

Lors d'une ponction articulaire, le liquide liquide est collecté dans des tubes à centrifuger stériles (2 à 3 ou plus, selon la quantité de liquide liquide obtenu) et immédiatement transféré à un laboratoire de diagnostic clinique. Un des tubes (ou plusieurs, selon le nombre de tubes reçus) est envoyé au laboratoire (département) de microbiologie pour des études microbiologiques, et le reste est utilisé pour la recherche en laboratoire clinique de SF (détermination des propriétés physico-chimiques et examen microscopique des natifs et des préparations colorées à l'azur-éosine avec comptage synoviocytogramme, comptage des éléments cellulaires dans 1 µl (cytose), ainsi que réalisation d'études biochimiques et immunologiques. Des études biochimiques et immunologiques sont réalisées dans le surnageant après centrifugation du liquide, et le sédiment est utilisé pour rechercher des cristaux dans le médicament natif à l'aide d'un microscope polarisant, ainsi que pour compter un synoviocytogramme dans un frottis coloré. Pour compter les cellules, vous pouvez collecter du SF dans un tube à essai contenant un anticoagulant (sel disodique ou dipotassique de l'EDTA), des tubes à vide spéciaux avec K2EDTA sont disponibles et peuvent être utilisés pour collecter le SF.

S'il existe des indications appropriées (suspect de présence de cellules néoplasiques), le frottis coloré est envoyé au laboratoire de cytologie.

3.2 Identification de l'échantillon

Les informations suivantes doivent être incluses dans la demande d'étude : nom et initiales du patient, âge ou date de naissance, sexe, service de l'établissement médical et service (à l'hôpital), numéro de dossier médical (numéro d'identification), diagnostic, date et heure du prélèvement de l'échantillon de liquide synovial, heure de livraison de l'échantillon au laboratoire. Tous les indicateurs qui doivent être déterminés doivent être répertoriés. Si nécessaire, indiquez les médicaments administrés à l’articulation perforée.

Les échantillons non étiquetés ou mal étiquetés ne conviennent pas aux tests et doivent être signalés au clinicien qui a ordonné le test.

3.3 Acceptabilité de l'échantillon

L'exactitude des résultats de l'étude du liquide synovial dépendant en grande partie de la qualité de l'échantillon livré, il est nécessaire de suivre strictement les règles de conservation et de transport du liquide synovial (Annexe A).

Après avoir livré un échantillon de liquide synovial au laboratoire, l'employé du laboratoire recevant le matériel doit vérifier l'exactitude de la référence pour analyse, l'étiquetage de la verrerie (le code ou le nom du patient et les autres données doivent être identiques aux données spécifiées dans le formulaire de référence) et enregistrer le matériel reçu.

Le liquide synovial collecté dans un tube à essai avec K2 EDTA doit être examiné dans les 30 minutes et, lorsqu'il est conservé au réfrigérateur (température 3-50 °C), au plus tard 24 heures (uniquement pour l'examen des frottis colorés).

Remarque ─ Le stockage à long terme du surnageant SF est autorisé à une température de -70 °C pour les études biochimiques et immunologiques.

Les retards d’analyse et l’utilisation de la réfrigération des échantillons sont notés sur le formulaire de réponse.

Avant les tests, les échantillons doivent être ramenés à température ambiante.

3.4 Évaluation macroscopique et étude des propriétés physicochimiques du liquide synovial

3.4.1. La quantité de liquide synovial varie normalement de 0,2 à 2,0 ml (en fonction de la taille de l'articulation). Pour diverses maladies articulaires, la quantité de liquide peut atteindre 100 ml ou plus.

3.4.2. Couleur du liquide synovial.

La couleur normale du liquide synovial est jaune clair.

Remarque ─Une couleur jaune clair ou jaune du liquide synovial est observée dans les maladies dégénératives des articulations ; sanglant – avec arthrite traumatique; les maladies inflammatoires des articulations (polyarthrite rhumatoïde (PR), arthrite réactive (ReA), spondylarthrite ankylosante, rhumatisme psoriasique) se caractérisent par différentes nuances de jaune et de brun (jaune clair, jaune, citron, marron clair, marron, ambre ou orange) ; avec la goutte, on observe une couleur du liquide jaune clair, jaune verdâtre, blanc laiteux, jaune laiteux et blanc rosé; pour l'arthrite pyrophosphatée et la chondrocalcinose - jaune ou jaune laiteux, pour l'arthrite septique - jaune grisâtre, jaune verdâtre ou sanglante.

3.4.3. Transparence du liquide synovial.

Le liquide synovial normal est complètement transparent. La nébulosité est généralement causée par une augmentation du nombre d'éléments cellulaires, la présence de cristaux ou de micro-organismes.

Évaluation de la transparence.

Il existe 4 degrés de transparence : transparent, translucide, moyennement trouble et intensément trouble.

A noter – en cas de maladies dégénératives des articulations (arthrose), le liquide articulaire est transparent et translucide ; pour les maladies inflammatoires (PR, arthrite séronégative, goutte, arthrite à pyrophosphate) - translucide, modérément trouble ou intensément trouble ; pour l’arthrite septique – intensément trouble, épais.

3.4.4. Présence de sédiments.

Normalement, il n'y a pas de sédiments dans le liquide. Il n'apparaît qu'en pathologie et est généralement constitué de fragments de membranes cellulaires, de fils de fibrine, de fragments de tissus formés à la suite de la destruction du cartilage et de la membrane synoviale, ainsi que de cristaux.

Remarque ─ Dans les maladies dégénératives des articulations, on retrouve un dépôt amorphe d'amylose dans le SF. Dans les maladies inflammatoires des articulations, on trouve presque toujours des sédiments. Dans la SF des patients atteints de PR, particulièrement souvent chez les enfants atteints de PR juvénile, on peut observer un sédiment granuleux ressemblant à des grains de riz ou « corps de riz », formé de fragments microscopiques de synoviale nécrotique riche en fibrine. Un tel sédiment peut être un indicateur d'une activité inflammatoire élevée du processus.

3.4.5. Viscosité

La caractéristique la plus importante du SF, qui le distingue des autres fluides biologiques, est la présence d'acide hyaluronique, un polymère de haut poids moléculaire. C'est l'acide hyaluronique, à haute viscosité, qui assure principalement l'accomplissement des principales fonctions du fluide. Il existe une relation directe entre la teneur, le poids moléculaire de l'acide hyaluronique et la viscosité du fluide.

Méthodes de détermination de la viscosité.

Les caractéristiques quantitatives de la viscosité du fluide sont déterminées à l'aide d'un viscosimètre.

Dans les études de routine, la méthode des tiges de verre est généralement utilisée :

une tige de verre est descendue dans le fluide puis retirée. La viscosité s'apprécie par la longueur des filaments de mucine ; on distingue trois degrés de viscosité :

lorsque la longueur du fil est supérieure à 5 cm - la viscosité est élevée, jusqu'à 5 cm - moyenne, inférieure à 1 cm - faible.

Il est possible d'exprimer la viscosité en unités ponctuelles : 1 - élevée, 2 - moyenne, 3 - faible. Normalement, la viscosité du liquide de refroidissement est élevée.

L'intensité de la viscosité dépend de la concentration en cristaux, du degré de polymérisation de l'acide hyaluronique et de la température.

Remarque ─ L'utilisation de méthodes instrumentales utilisant divers viscosimètres nécessite (en plus de la disponibilité de l'appareil) un certain nombre d'opérations supplémentaires et, par conséquent, un investissement de temps important, sans apporter d'informations fondamentalement nouvelles par rapport aux tests de laboratoire accessibles.

4.4.6. Détermination de la densité d'un caillot de mucine dans le liquide synovial.

L'acide hyaluronique contenu dans SF existe dans un complexe avec des protéines appelées mucine. La détermination d'un caillot de mucine est d'une grande importance diagnostique dans les maladies inflammatoires. Le test de mucine dans le liquide synovial est bien corrélé à la viscosité.

Méthodes d'étude de la densité d'un caillot de mucine.

Le principe de la méthode : lorsque le SG est exposé à l'acide acétique, un caillot de mucine se forme.

Progression de la détermination :

Une goutte de SG est ajoutée dans un tube à essai contenant 3 ml d'une solution à 5 % d'acide acétique (CH3COOH). Agiter vigoureusement le contenu du tube à essai pendant 1 minute, un précipité se forme. Il existe 4 degrés de densité des sédiments : dense (le sédiment ressemble à une motte dense), modérément dense (apparition d'une structure ramifiée mais non désintégrée), modérément lâche et lâche - se désintègre plus ou moins en petites particules. La formation d'un caillot dense de mucine indique une teneur importante en mucine.

Normalement, les sédiments sont denses.

Remarque 1 ─ Dans l'arthropathie non inflammatoire, le caillot de mucine est généralement dense ou modérément dense. Dans les maladies inflammatoires des articulations, il est modérément lâche et lâche.

Note 2 ─ La détermination de la viscosité et de la densité du caillot de mucine est importante pour différencier la nature « non inflammatoire » et inflammatoire du processus dans l'articulation. Ces méthodes peuvent se contrôler mutuellement : les indicateurs d'une méthode correspondent strictement aux indicateurs de l'autre. Une viscosité élevée correspond à un caillot de mucine dense, moyennement dense, faiblement lâche et lâche.

3.5 Examen microscopique du liquide synovial

3.5.1. Exigences relatives à un échantillon de liquide synovial pour examen microscopique.

Avant de procéder à un examen microscopique, le médecin doit disposer d'informations sur le moment de l'obtention du liquide synovial et des résultats de l'évaluation des propriétés physico-chimiques.

Actuellement, des tubes à vide contenant un anticoagulant (K2EDTA), qui est également un conservateur des éléments cellulaires et n'altère pas leur morphologie, sont produits pour collecter des fluides biologiques.

Note 1─ Le liquide synovial stabilisé au K2EDTA ne peut pas être utilisé pour détecter les ragocytes.

Trois types d'examen microscopique sont réalisés :

comptage des cellules du liquide synovial natif dans la chambre de Goryaev (cytose), étude du médicament natif et du médicament coloré à l'azur-éosine avec calcul du synoviocytogramme.

3.5.2 Comptage du nombre d'éléments cellulaires dans 1 µl de liquide synovial dans la chambre de Goryaev (détermination de la cytose).

Avancement de la recherche :

L'étude est réalisée dans du liquide synovial natif ou stabilisé par K2EDTA.

Versez 0,4 ml de solution de NaCI isotonique ou hypotonique dans un tube à essai.

Filtrer la suspension et conserver au réfrigérateur dans un flacon en verre foncé. Immédiatement avant le test, filtrez la quantité requise de peinture à travers un filtre millipore.

Mélanger 20 µl de peinture avec un volume égal de liquide ou de sédiment obtenu après centrifugation. Il est préférable de préparer une préparation native et de la microscopier au microscope polarisant : les cristaux sont de forme ovoïde, de 2-3 microns de diamètre, de couleur rouge riche avec un halo rose.

Note 4 ─ Ces cristaux se retrouvent dans l'arthropathie à hydroxyapatite.

Des cristaux d'oxalate de calcium, de cholestérol, de lipides, de Charcot-Leyden, etc. peuvent également être retrouvés dans le liquide synovial.

Note 5 ─ Les cristaux d'oxalate de calcium (C2CaO4 · H2O) ont généralement une forme cubique mais peuvent former des cristaux incolores, brillants et hautement réfringents de différentes tailles, en forme d'octaèdres ou de rectangles, rappelant les enveloppes postales. Parfois, il existe des cristaux d'oxalate de calcium de forme arrondie et avec une interception ressemblant à un sablier, des poids de gymnastique ou des arcs (C2CaO4 2H2O). Ces cristaux peuvent être phagocytés par les leucocytes polymorphonucléaires (neutrophiles).

Note 6 ─ Les cristaux liquides de lipides sont présentés sur fond sombre sous la forme de croix de Malte noires, divisant chaque goutte de lipide en quatre segments blancs brillants. Les gouttes de graisse neutre n'ont pas d'effet de réfraction bidirectionnelle de la lumière.

Le cholestérol, les cristaux d'oxalate de sodium et les cristaux liquides lipidiques ne sont pas spécifiques à une maladie articulaire particulière et peuvent apparaître dans diverses arthropathies, reflétant des troubles métaboliques.

Remarque 7 ─ Des grumeaux amyloïdes peuvent être trouvés dans le SF. Ce sont des formations incolores de forme ronde, une structure en couches, rappelant un arbre coupé, avec un éclat caractéristique. Ils sont identifiés dans des préparations natives au grossissement x400, ainsi qu'en immersion au grossissement x1000. L'amyloïde peut être détectée dans le SF natif coloré au rouge Congo. La préparation résultante peut être visualisée à la fois sous un microscope optique et polarisant.

Les grumeaux amyloïdes se retrouvent dans les maladies accompagnées d'arthropathie amyloïde.

Cristaux d'hématoïdine.

Les cristaux d'hématoïdine se forment lors de la dégradation de l'hémoglobine dans les hématomes sans accès à l'oxygène. Ce sont des diamants légèrement allongés et/ou des aiguilles jaune doré. Les cristaux d'hématoïdine sont clairement visibles dans les préparations natives et colorées à l'azur-éosine. Étant donné que ces cristaux sont généralement assez petits dans le SF, il est recommandé de microscopier les préparations natives en immersion. Au site de l'inflammation, ces cristaux peuvent être phagocytés par les macrophages ou localisés à la surface des éléments cellulaires.

Remarque 8 ─ En cas de blessure et de saignement intra-articulaire, des conditions sont créées dans la cavité articulaire sous lesquelles des cristaux d'hématoïdine peuvent se former.

Cristaux de Charcot-Leyden.

Les cristaux de Charcot-Leyden ont la forme d'une aiguille de boussole ou d'un losange très allongé. Habituellement, les cristaux de Charcot-Leyden sont situés sur fond de détritus ou en combinaison avec un grand nombre d'éosinophiles et se forment lors de la dégradation des éosinophiles à partir de la granularité éosinophile ; ces cristaux peuvent être trouvés dans le SF de patients souffrant de synovite allergique.

Cristaux de médecine

Stéroïdes. Les injections intra-articulaires de stéroïdes entraînent leur cristallisation à l’intérieur des articulations, où ils peuvent persister jusqu’à 10 semaines. La détection de ces cristaux lors de l'examen microscopique de préparations natives et une différenciation incorrecte ultérieure peuvent conduire à des conclusions erronées.

Éléments non cellulaires et non cristallins dans le fluide.

Des fragments de cartilage et des ligaments endommagés peuvent être trouvés dans le SF. Les fragments de cartilage contenus dans la préparation native sont reconnaissables à leur éclat soyeux caractéristique. On trouve également des fragments de cartilage contenant des amas de chondrocytes et des fragments de ménisque, représentés par des fibres de collagène ondulées et également des chondrocytes ; les fragments de ligaments sont représentés par de longues fibrilles minces et des fils parallèles de collagène

Note 9 ─ Ils surviennent le plus souvent dans le SG après une blessure à l'articulation du genou.

Remarque 10 ─ Malgré la sensibilité élevée de la méthode de microscopie de polarisation, de graves erreurs sont possibles lors de son utilisation, qui surviennent généralement en raison de la résolution insuffisamment élevée d'un microscope particulier, de la présence d'impuretés étrangères ressemblant à des cristaux et de dommages à l'objet ou au couvercle. verre Le microscopiste doit être conscient de la possibilité d’interférence et avoir une bonne compréhension des principes de reconnaissance des cristaux.

3.5.5. Examen microscopique de préparations de liquide synovial colorées à l'azur-éosine (avec calcul du synoviocytogramme).

Préparation des frottis liquides et méthodes de coloration (section 5.5.2).

Composition cellulaire du liquide synovial (synoviocytogramme).

La détermination de la composition cellulaire du GS est l'étape la plus importante de son étude, qui permet de clarifier le diagnostic, de déterminer le degré d'activité inflammatoire du processus et le pronostic. La détermination de la répartition quantitative des cellules (synoviocytogramme) est l'indicateur le plus important pour le diagnostic différentiel des maladies articulaires. Le calcul du pourcentage de cellules s'effectue de la même manière que le calcul de la formule leucocytaire du sang. (comptez 100 cellules dans un frottis et calculez le pourcentage de chaque type de cellule).

Normalement, les cellules d'origine tissulaire (synoviocytes et histiocytes) prédominent dans le SF – jusqu'à 65 %. Les lymphocytes représentent environ 30 % et les monocytes et les neutrophiles 1 à 2 %.

Cellules sanguines dans le SF.

Neutrophiles (leucocytes polymorphonucléaires).

Les neutrophiles ont un diamètre 1,5 à 2 fois plus grand qu'un globule rouge (14 à 16 microns). Le rapport noyau/cytoplasme est déplacé vers le noyau. Le cytoplasme est de couleur lilas, rempli de petits granules ressemblant à de la poussière qui ont la couleur du noyau cellulaire. Les noyaux sont constitués de 3 à 4 segments, avec une division claire en oxy- et basichromatine. Avec la dystrophie, le nombre de segments des neutrophiles augmente fortement jusqu'à 5-7 (hypersegmentation). Lors de l'apoptose chez un neutrophile, les fragments nucléaires fusionnent en une ou deux masses hyperchromatiques homogènes et sans structure de forme ronde régulière.

Dans le SF normal, le nombre de neutrophiles ne dépasse pas 1 à 2 %.

Remarque 1 ─ Dans la polyarthrite rhumatoïde, la teneur en neutrophiles atteint 90 % et le nombre de lymphocytes diminue à 10 %. Une image similaire est observée dans la spondylarthrite ankylosante. Dans les maladies inflammatoires et les hémorragies intra-articulaires, les neutrophiles représentent 60 à 80 % de la formule SF et dans l'arthropathie septique, plus de 95 %.

Lymphocytes.

Ce sont des cellules jusqu'à 12 microns de diamètre. Le rapport cytoplasme/noyau est décalé vers le noyau (9 : 1). Le noyau a une structure grossièrement grumeleuse ; un cytoplasme basophile entoure le noyau avec un bord étroit ; parfois une zone claire est visible autour du noyau.

Dans le SF normal, le nombre de lymphocytes varie de 8 à 30 %.

Note 2 ─ Dans les maladies inflammatoires, les neutrophiles prédominent et dans les maladies dégénératives, les lymphocytes prédominent. Dans les maladies dégénératives des articulations et l'arthrite traumatique, la teneur en lymphocytes du SF atteint 85 %. Les lymphocytes prédominent également dans la formule dans les synovites allergiques toxiques et dans la forme synoviale de la tuberculose. Dans l'arthrite d'étiologie virale, provoquée par exemple par le virus HTLV-1, apparaissent des lymphocytes atypiques dont le nombre atteint 20 %.

Monocytes.

Note 3 ─ Les monocytes sont présents dans diverses arthropathies articulaires, notamment l'arthrite virale et l'arthrite monocytaire, ainsi que dans les dommages aux prothèses implantaires.

En plus de ces cellules, d'autres cellules sanguines peuvent être trouvées en petite quantité dans le SF (en pathologie) : éosinophiles, basophiles, plasmocytes.

Note 4 Les éosinophiles sont extrêmement rares dans la SF et sont identiques aux éosinophiles du sang périphérique.

Note 5 : Les basophiles se retrouvent en petites quantités dans l'arthrite inflammatoire, l'arthropathie séronégative et l'arthropathie non inflammatoire associée à un traumatisme.

Note 6 ─ Les plasmocytes sont retrouvés dans le SF dans l'arthropathie inflammatoire. La détection de plasmocytes est notamment typique de la polyarthrite rhumatoïde, c'est-à-dire d'un processus inflammatoire lent et prolongé.

Cellules tissulaires dans le SF.

Synoviocytes.

Ces cellules appartiennent à l’épithélium aplati monocouche qui recouvre les membranes synoviales des articulations. Leur morphologie est identique à celle des cellules mésothéliales. Les sinoviocytes sont des cellules épithéliales d'un diamètre de 18 à 25 microns, avec un rapport nucléaire/cytoplasmique différent. Ils contiennent des noyaux situés au centre ou de manière excentrique, de forme ronde ou ovale, de structure en petites touffes ou en boucle, entourés d'un large bord de cytoplasme basophile, parfois avec un « volant » le long de la périphérie. Le cytoplasme de la zone périnucléaire de certains synoviocytes contient une fine granularité. Les synoviocytes sont rejetés de la surface de la membrane synoviale de l'articulation et se retrouvent dans le SF lors de l'arthropathie. Les cellules synoviales peuvent contenir 2 noyaux ou plus (multinucléaires).

Il existe trois types de synoviocytes :

type A – synoviocytes macrophages capables de phagocytose ;

type B – fibroblastes synoviaux capables de synthèse et de sécrétion d'acide hyaluronique ;

type AB – formes transitionnelles de cellules qui combinent ces deux propriétés.

Histiocytes.

Les macrophages tissulaires sont des cellules de taille micrométrique avec un noyau compact rond ou monocytoïde entouré d'un cytoplasme à grains fins ou sans granules.

Note 7 ─ Les histiocytes sont toujours présents dans le SF lors des processus inflammatoires.

Note 8 ─ Dans le SF, on trouve des cellules multinucléées, qui sont des synoviocytes ou des plasmocytes et ont la même signification que les variantes mononucléées de ces cellules.

Note 9 ─ La détection de cellules LE contenant des inclusions de matière nucléaire homogénéisée dans le cytoplasme du SF, contrairement au sang périphérique, n'est pas une indication directe de LED. Cependant, la combinaison de cellules LE avec un grand nombre de lymphocytes dans le SF permet de suspecter que le patient est atteint de LED.

Note 10 ─ Cellules en mitose.

Les chiffres mitotiques n’ont aucune valeur diagnostique. Les synoviocytes en état de division confirment le processus de prolifération des cellules tapissant la capsule articulaire.

Cellules indifférenciées.

Des cellules indifférenciées sont notées dans presque tous les synoviogrammes.

Dans des frottis de liquide minces et bien réalisés, fixés avec des fixateurs ou des colorants-fixateurs et colorés à l'azur-éosine, tous les éléments cellulaires se prêtent à la différenciation. Ce n'est que dans des frottis épais préparés par la main inexpérimentée d'un assistant de laboratoire à partir d'un liquide visqueux, hypercellulaire et préalablement non dilué que l'on trouve des cellules indifférenciables. Il peut s'agir de n'importe quel élément cellulaire - à la fois des tissus et du sang. Il est presque impossible de détecter des cristaux et des micro-organismes dans de telles préparations.

4. Enregistrement des résultats de l'analyse du liquide synovial

Chaque employé du laboratoire doit utiliser les mêmes formulaires (fiches de résultats d'essais) pour déclarer ses résultats. Le formulaire doit contenir le nom du laboratoire et de l'organisme médical ; des informations sur le patient suffisantes pour l'identifier ; nom du matériel biologique et de tous les indicateurs étudiés ; la date de réception de l'échantillon et, le cas échéant, l'heure de réception ; Résultats de recherche; intervalles de référence ; nom et signature de l'employé qui a effectué l'étude. La procédure de délivrance des résultats doit être déterminée par des instructions approuvées par le chef de l'organisation médicale

5. Assurer la qualité de la technologie d’analyse du liquide synovial

5.1. Programmes d'assurance qualité

Les programmes d'assurance qualité incluent une surveillance cohérente de chaque aspect de la procédure pour garantir que les capacités de diagnostic et de surveillance des patients sont suffisamment élevées. Les programmes d'assurance qualité doivent inclure toutes les étapes du travail et établir des liens entre toutes les composantes du processus (patient, laboratoire, clinicien). Un contrôle est également nécessaire aux étapes de collecte des échantillons, de stockage, de livraison, de traitement manuel, d'enregistrement et de délivrance des documents. La compétence technique du personnel et la formation continue doivent également être contrôlées. Pour la mise en œuvre réussie de toutes les activités de contrôle, il est nécessaire de suivre les règles énoncées dans la norme GOST R ISO 15189 -2006. .

5.2. Maintenir l'enregistrement des activités de contrôle

L'enregistrement du contrôle doit être effectué à tous les niveaux : pré-analytique, analytique et post-analytique ; pour chaque étape, des règles d'exécution de toutes les procédures doivent être élaborées et documentées.

Un formulaire de demande de test doit être élaboré pour les cliniciens, comprenant la date de commande et de prélèvement des échantillons, les informations d'identification du patient, le diagnostic, l'utilisation des médicaments ou les procédures de diagnostic si celles-ci peuvent influencer les résultats du test.

La technique de prélèvement d'échantillons de liquide doit être standardisée et décrite en détail dans les instructions appropriées destinées aux médecins et infirmières du service de chirurgie qui effectuent des ponctions articulaires.

Les instructions de livraison des échantillons doivent inclure les conditions et le calendrier de stockage des échantillons ainsi que les règles de transport en toute sécurité.

Pour le personnel du laboratoire, les critères d'acceptation et de refus des échantillons, les exigences relatives à l'enregistrement des échantillons, au traitement, à l'étiquetage et au stockage des échantillons avant analyse doivent être définis. La phase analytique est réalisée conformément aux méthodes de recherche. Au stade post-analytique, il est nécessaire d'élaborer des règles pour évaluer l'acceptabilité des résultats analytiques, qui devraient inclure l'évaluation de l'interférence des médicaments, la comparaison des résultats avec l'intervalle de référence et la vérification de l'exactitude de l'enregistrement. Le formulaire de délivrance des résultats doit être agréé par l'établissement et convenu avec les services médicaux.

5.3. Instructions pour les méthodes de test en laboratoire utilisées

La méthodologie pour effectuer des recherches en laboratoire doit être documentée et disponible sur le lieu de travail. La méthodologie doit être basée sur des lignes directrices ou d'autres documents approuvés de la manière prescrite. Il doit inclure des critères d'acceptation ou de rejet des échantillons de SF (la durée de conservation de l'échantillon après le prélèvement et une quantité suffisante de SF pour l'étude sont prises en compte) ; intervalles de référence ; méthode d'enregistrement des résultats; précautions liées au risque biologique du matériau testé ; raisons pour lesquelles des résultats faussement positifs et faussement négatifs ont été obtenus.

5.4. Contrôle qualité des études microscopiques.

Lors de l'élaboration d'exigences relatives à la fiabilité analytique d'une méthode visuelle, les résultats de l'examen d'échantillons de biomatériaux produits par un chercheur possédant une vaste expérience dans l'examen visuel d'images, la détection correcte et la classification des composants étudiés des biomatériaux doivent être utilisés comme ligne directrice.

5.5. Formation continue de spécialistes

Pour garantir la qualité de l'analyse, les qualifications du personnel doivent correspondre à la complexité de l'étude réalisée. Tout le personnel du laboratoire doit périodiquement (tous les cinq ans) suivre une formation dans le cadre de cycles de perfectionnement, dispensés par des établissements d'enseignement médical disposant de la licence appropriée. Chaque spécialiste devrait s'auto-former. Le laboratoire doit disposer d'une documentation moderne, y compris des périodiques sur les diagnostics de laboratoire et des atlas. Les spécialistes de laboratoire doivent participer à des conférences et des séminaires.

6. Exigences relatives aux horaires de travail et de repos, au régime alimentaire et aux restrictions lors de la préparation du patient

Pour le personnel effectuant la collecte du matériel, des instructions doivent être élaborées qui contiennent, en plus de la procédure de collecte, les conditions de préparation du patient. L'influence des médicaments est particulièrement importante, par exemple l'injection d'hormones stéroïdes dans l'articulation, qui peuvent se cristalliser (Annexe A.2).

7. Coûts de main-d'œuvre pour la mise en œuvre de la technologie d'analyse en laboratoire clinique du liquide synovial

Tableau 1 - Coûts de main-d'œuvre en UET pour la mise en œuvre de la technologie « Analyse en laboratoire clinique du liquide synovial »

Code de service	Type d'étude	Coûts de main-d'œuvre dans l'UET
Spécialiste de l'enseignement secondaire	Médecin en diagnostic de laboratoire clinique, biologiste
	Analyse en laboratoire clinique du liquide synovial
	Inscription (préliminaire et définitive : matériel reçu, données du passeport patient, résultats de recherche, etc.), manuelle ou sur ordinateur.
	Évaluation des propriétés physiques du fluide, mesure de la quantité
	Détermination de la viscosité du fluide
	Détermination de la formation de caillot de mucine
	Obtention du sédiment SF par centrifugation et préparation de préparations à partir du sédiment (pour examen microscopique).
	Comptage des éléments cellulaires du fluide dans la chambre Goryaev
	Examen microscopique du médicament natif
	Examen microscopique d'une préparation colorée à l'azur-éosine avec calcul du pourcentage de cellules.

ANNEXE A

(informatif)

Collecte d'échantillons de fluides, conditions de stockage et de livraison (étape pré-analytique)

A.1 Introduction

La ponction articulaire est réalisée par des cliniciens.

L'étape préanalytique est réalisée au service médical et après livraison du biomatériau au laboratoire - dans le laboratoire lui-même. Les cliniciens préparent les demandes de recherche. La demande doit indiquer le nom complet, le sexe, l'âge ou l'année de naissance du patient, indiquer le mode d'obtention du biomatériau, l'articulation qui subit la ponction, l'heure de la ponction, le nombre de tubes remplis de SF, natif et de K2 EDTA. . Le diagnostic clinique et les médicaments affectant l'analyse doivent être indiqués. L'absence de diagnostic ou de médicaments pris par le patient affectant les résultats de la commande peut entraîner une mauvaise interprétation des résultats obtenus et une erreur de diagnostic. Le personnel infirmier du service est chargé de préparer le patient et de livrer en urgence des éprouvettes contenant du SF au laboratoire de diagnostic clinique.

La poursuite de l'étape préanalytique en laboratoire consiste à recevoir et enregistrer le biomatériau entrant, à le stocker, si nécessaire, jusqu'à la recherche, le traitement et la préparation à la recherche.

La préparation d'une demande de tests par les cliniciens est un point très important, car l'exactitude du diagnostic dépend en grande partie de la demande correctement complétée.

A.2 Préparation du patient

La préparation du patient à la ponction articulaire doit être standardisée.

Les stéroïdes injectés dans la capsule articulaire peuvent cristalliser et interférer avec le diagnostic du processus pathologique ou conduire à un diagnostic incorrect. Par conséquent, l'administration intra-articulaire de stéroïdes doit être interrompue au moins 5 à 7 jours avant la ponction articulaire. Si les injections de stéroïdes dans la capsule articulaire ne peuvent pas être arrêtées à l'avance, le clinicien doit noter l'administration de ces médicaments dans la demande d'étude. Dans la demande, en plus des données du passeport du patient, il faut noter quelle articulation a été percée, le nombre de tubes SF remplis, l'heure de la ponction, et veiller à indiquer le diagnostic clinique, au moins au niveau d'un diagnostic. hypothèse.

A.3 Stockage et livraison.

Pour effectuer une analyse générale, le liquide est généralement livré au laboratoire immédiatement après la ponction. Une étude d'une préparation native préparée à partir de SF non stabilisé est réalisée pour détecter les ragocytes et les cristaux, ainsi que pour déterminer la cytose. L'examen d'un frottis coloré peut être effectué en conservant un tube à essai avec SF, stabilisé par K2 EDTA, au réfrigérateur à une température de +3- +50C pendant 24 heures.

Le stockage à long terme du SF est autorisé à une température de -70°C ; ces échantillons sont utilisés pour des études biochimiques et immunologiques.

Remarque ─ Actuellement, des tubes à vide spéciaux et des récipients jetables pour collecter des fluides biologiques d'un volume de 100 ml sont produits à partir d'un matériau incassable sans réactifs, avec du K2EDTA ou d'autres réactifs.

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3. Règles de collecte, de stockage et d'élimination des déchets des établissements médicaux. SanPiN 2.1.1.728-99., Moscou, 1999.

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5. GOST R 53079.4-2008 Technologies de laboratoire médical. Assurer la qualité des tests de laboratoire clinique. Partie 4 Règles de conduite de la phase préanalytique de la recherche en laboratoire clinique.

6. GOST R ISO 15189 -2006 Laboratoires médicaux. Exigences particulières en matière de qualité et de compétence.

Le projet technologique standardisé a été préparé par :

, (MMA du nom de I.M. Sechenov), (Institut de recherche en rhumatologie de l'Académie russe des sciences médicales), (RMAPO), (Centre de recherche scientifique russe du nom de l'Académie russe des sciences médicales), (polyclinique n° 000, Moscou) .

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Le liquide synovial joue un rôle exceptionnel dans le fonctionnement des articulations et des tendons. Sa formation se produit constamment à partir de substances plasmatiques et de produits des cellules de l'épithélium tégumentaire des formations synoviales. La quantité de SF dans différentes articulations est différente.

Chez une personne en bonne santé, le liquide a une couleur jaune clair, il est transparent, très visqueux et stérile. Jusqu'à 1/3 de sa composition est constituée de protéines, elle ne contient pas de fibrine, mais contient de l'acide glucuronique sous la forme d'un complexe avec des protéines (mucine). Le SF normal contient des cellules épithéliales synoviales et des leucocytes, dont le nombre de lymphocytes atteint 75 %, quelques neutrophiles - 0 à 25 %, des synoviocytes - 0 à 12 %.

La pathologie articulaire émergente entraîne une réaction quasi instantanée de la membrane synoviale, qui modifie considérablement la composition du liquide. Pour certains types de pathologies, des écarts très caractéristiques peuvent être identifiés, qui constituent un critère de diagnostic différentiel important. Le SF peut être obtenu pour un examen visuel et en laboratoire uniquement par ponction d'une formation articulaire ou synoviale et arthroscopie.

Après réception, le liquide en vrac est évalué en fonction de la quantité, de la couleur, de la transparence, de la densité du caillot de mucine, de la viscosité et de la cytose globale. Si nécessaire, une recherche de cristaux en lumière polarisée, une bactérioscopie avec coloration de Gram et une culture microbiologique sont réalisées.

Les propriétés physiques du SF dans des conditions normales et dans les principaux processus rhumatoïdes sont présentées dans le tableau. onze.

Tableau 11. Propriétés physiques du liquide synovial (Nasonova V.A., Bunchuk N.V., 1997)

Le tableau récapitulatif n’est pas sans intérêt. 12, qui a été utilisé par nos collègues dans le passé (Astapenko M.G., Pikhlak E.T., 1966).

Tableau 12. Signes visuels et biologiques de GS dans diverses maladies

La quantité normale de liquide dans diverses formations synoviales varie de 0,1 ml à 4 ml. Le plus grand volume (2 à 4 ml) atteint l'articulation du genou. Dans la plupart des maladies articulaires accompagnées de synovite, la quantité de liquide augmente et peut atteindre plusieurs dizaines de millilitres.

Le contenu de la formation synoviale peut être du sang, observé lors d'une blessure, ainsi que du pus.

La couleur du liquide articulaire dans des conditions normales et en cas de maladies articulaires non inflammatoires est jaune clair, couleur paille. Dans les maladies inflammatoires, il peut être citronné, ambre, verdâtre, gris, brun, jaune laiteux, blanc, rose.

Transparence. Le SF normal est transparent ; dans les maladies non inflammatoires, il peut également être transparent ou translucide ; dans les maladies inflammatoires, il peut être modérément ou intensément trouble.

Viscosité. Elle peut être déterminée visuellement par la viscosité lors du versement d'une seringue dans un tube à essai ou par la longueur du fil de mucine sur une lame de verre. Pour ce faire, 1 à 2 gouttes de puictat sont appliquées sur le verre et tirées sur le côté avec une tige de verre. Il existe 3 degrés de viscosité : faible lorsque la longueur du fil est de 1 cm, moyenne - jusqu'à 5 cm, élevée - la longueur du fil est supérieure à 5 cm.Le fluide normal a une viscosité élevée. La viscosité du fluide est déterminée par la concentration et le degré de polymérisation de l'acide hyaluronique qu'il contient. La viscosité diminue au cours des processus inflammatoires en raison d'une diminution de la concentration dans le liquide et de la dépolymérisation de l'acide hyaluronique.

Test de mucine. Lorsque de l'acide acétique est ajouté au liquide normal, un caillot ou un sédiment de mucine se forme. En cas de maladie inflammatoire, le caillot sera plus petit, lâche ou modérément lâche.

Sang mélangé. Le sang dans le SF apparaît lors de lésions traumatiques de l'articulation et d'autres formations synoviales, lors de lésions articulaires chez les patients hémophiles, lors d'arthrite très aiguë de toute origine et lors de synovite villisonodulaire pigmentée. Le mélange de sang dans le SF provenant d'une synoviale endommagée avec une aiguille de ponction est rare et seulement lorsque les manipulations sont effectuées grossièrement.

Cytose. Le nombre total de cellules du SF est compté dans une chambre de comptage. La composition cellulaire du SF normal est représentée par les cellules de la couche tégumentaire de la membrane synoviale et les leucocytes. Normalement, le nombre de leucocytes peut être compris entre 200 et 600 par mm3. Avec une inflammation légère, elle atteint 2 000 par mm3, avec une inflammation sévère - de 2 000 à 75 000 par mm3, avec une arthrite septique - plus de 100 000 par mm3. Normalement, les lymphocytes prédominent dans le SF ; les neutrophiles n'excèdent pas 25 %.

Cela se produit également avec les processus non inflammatoires. Avec la synovite, le nombre de neutrophiles polymorphonucléaires augmente fortement (jusqu'à 90 %).

Ragocytes. Ces éléments cellulaires sont absents dans le SF normal. Dans les maladies inflammatoires et la spondylarthrite séronégative, leur nombre représente 2 à 15 % du nombre total de cellules, et dans la polyarthrite rhumatoïde, ils peuvent atteindre 40 % ou plus, en fonction de la gravité de l'activité inflammatoire locale.

Protéines totales. Normalement, le SF contient 15 à 20 g/l de protéines. Dans l'arthrite non inflammatoire, sa quantité augmente jusqu'à 22-37 g/l, dans l'arthrite inflammatoire - jusqu'à 35-48 g/l, et dans la polyarthrite rhumatoïde et la synovite cristalline, elle peut atteindre 70 g/l.

Facteur rhumatoïde et protéine C-réactive. Normalement, le RF n'est pas contenu dans le SG et la quantité de SRV ne dépasse pas 0,001 g/l. Dans les maladies articulaires non inflammatoires et la spondylarthrite séronégative, la RF n'est pas détectée ou est détectée à un titre de 1/20 à 1/40 ; dans l'arthrite séronégative, son titre dépasse 1/40. Les maladies inflammatoires des articulations s'accompagnent d'une augmentation de la CRP de 0,01 à 0,06 g/l ou plus.

Cristaux. Ils sont examinés en microscopie de polarisation. Seuls les cristaux d'urate et de pyrophosphate de calcium sont identifiés de manière fiable.

I.A. Reutsky, V.F. Marinin, A.V. Glotov