Punkcija zgloba i analiza sinovijalne tečnosti. Opšti klinički pregled sinovijalne tečnosti Analiza sinovijalne tečnosti gde to uraditi

Citološki pregled sinovijalne tekućine (SF) je jednostavna analiza koja vam omogućava da saznate o upalnoj ili neupalnoj prirodi patologije za bilo koju bolest zglobova s ​​izljevom. U slučaju upale, analiza omogućava dijagnosticiranje grupe metaboličke artropatije, koju uglavnom predstavljaju giht i hondrokalcinoza, kada intraartikularni mikrokristali (MC) uzrokuju upalu. Za ove bolesti, SF testiranje omogućava brzu, tačnu i pouzdanu dijagnozu.

Citološke studije sinovijalne tekućine su jeftine, minimalno invazivne, brze i tehnički dostupne. U ovom slučaju, dva dijagnostička znaka su od posebnog značaja:

• Prisustvo velikog broja ćelija pravi je odraz upalne bolesti zglobova;
• Prisustvo ili odsustvo mikrokristalne artropatije omogućava vam da potvrdite ili isključite mikrokristalnu artropatiju u roku od nekoliko minuta i odredite njenu prirodu. Sinovijalna tečnost je obično prisutna u vrlo malim količinama u svakoj zglobnoj šupljini. Njegova uloga je dvostruka: djeluje kao lubrikant, smanjujući trenje između zglobnih površina tokom kretanja i osigurava ishranu hrskavičnog tkiva koje nema opskrbu krvlju.

Citološki pregled sinovijalne tekućine daje korisne informacije o patologiji odgovornoj za zglobni izljev.

• Osobine mikrokristala u SF - vrijedne informacije u metaboličkoj artropatiji
• 500, ali<1500, то считают процентное содержание отдельных типов лейкоцитов, обращая особое внимание на их необычные формы.">Celularnost i formula ćelijske populacije omogućavaju razlikovanje pet tipova SG (tabela 1). Ovaj znak je samo relativnog značaja, ali je vrijedan za kliničara.

Tabela 1 – Različiti tipovi GS prema citologiji

• Normalni SF je providan, bezbojan ili žućkast. Postaje neprozirniji sa povećanjem celularnosti.
• Viskoznost tečnosti je povezana sa sadržajem hijaluronske kiseline. Visok je u normalnom ili neinflamatornom SF. Viskoznost se lako može procijeniti natezanjem kapi rashladne tekućine između dva prsta zaštićena rukavicom ili kapicama za prste i mjerenjem dužine tako dobivenog konca. Kod svih upala, viskoznost tečnosti se smanjuje.
• Formiranje ugruška karakteristično je za patološku sinovijalnu tekućinu. Zaista, normalni SF ne sadrži fibrinogen i ne koagulira. Međutim, svaki patološki SF, posebno ako je upalni, sadrži fibrin i formira labav tromb, koji okružuje ćelijske elemente mrežicom. Stoga je veoma važno spriječiti zgrušavanje tekućine korištenjem antikoagulansa.

Tehnika citološkog pregleda sinovijalne tečnosti

1. Uzimanje SG

Za analizu je dovoljna bilo koja zapremina, jer je za ispitivanje potrebna samo zanemarljiva količina uzorka. U svježem stanju dovoljna je kap za analizu. SF se sakuplja u sterilnu plastičnu epruvetu. Citološki pregled sinovijalne tečnosti zahteva upotrebu antikoagulansa. Najbolji izbor je natrijum heparinat; Kalcijum oksalat i litijum heparin treba isključiti jer sadrže MK, koji polimorfonuklearne ćelije mogu fagocitirati. Iz istog razloga treba izbjegavati čestice poput talka ili škroba iz rukavica.

2. Citološki pregled svježe sinovijalne tekućine

Ovaj korak SG citologije treba obaviti što je prije moguće nakon uzimanja, bez odlaganja kapi (0,05 ml) uzorka koji se gleda ispod pokrovnog stakla. Centrifugiranje nije potrebno jer su niskoćelijski GC rijetko patološki. Identifikacija MV-a je teška i zahtijeva polarizacijski mikroskop, eventualno s kompenzatorom i rotirajućim stolom, što omogućava lakše uočavanje MV-a, posebno ako ih je malo. U nedostatku polarizacionog mikroskopa, analiza se može izvršiti sa veoma zatvorenim otvorom mikroskopa, kada se identifikuju elementi koji imaju indeks prelamanja različit od indeksa prelamanja ćelijskih komponenti. Ova studija može biti dopunjena određivanjem broja ćelija u Gorjajevljevoj komori, što je važno za određivanje prirode oštećenja zgloba (Tablica 2).

Glavna patološka stanja i tipovi GS

Nije upalno	Inflamatorno		Hemoragije
	Reumatoidni poliartritis	Bakterijske infekcije	Traume-frakture
	Mikrokristalni artritis	Tuberkuloza	Hemoragijski sindrom
Osteonekroza	Reiterov sindrom		Hemofilija
Osteochondritis dissecans	Psorijatični reumatizam		Villezonodularni sinovitis
Osteohondromatoza	Reumatizam kod upalnih bolesti crijeva		Hemangiom

Ako trenutno citološko ispitivanje uzorka sinovijalne tečnosti nije moguće, može se odgoditi do 24 sata, pod uslovom da se tečnost čuva na 4°C ili, još bolje, u zamrzivaču na -20°C. Također je moguće pripremiti bris i osušiti ga na zraku. K se može ispitati ili direktno, u polariziranom svjetlu, ili nakon May-Grunwald-Giams (MGG) bojenja.

3. Bojenje prema MGZ

Rezultati brojanja broja ćelija u svežem SF dopunjeni su prebrojavanjem pojedinačnih tipova ćelija nakon citocentrifugiranja, pripreme razmaza i bojenja na MG, što nam omogućava da razjasnimo prirodu ćelija prisutnih u SF.

rezultate

Citološki pregled sinovijalne tekućine je test koristan za kliničare, jer omogućava da se pregled fokusira na određenu patologiju od mnogih od kojih pacijent može patiti. Za metaboličke ili mikrokristalne lezije zglobova, takva analiza je ključna u pregledu (Tabela br. 3).

Tabela 3 - Citološki parametri tečnosti kod mikrokristalnog artritisa

Infektivni artritis

Citološkim pregledom sinovijalne tečnosti otkriva se veoma veliki broj ćelija sa prevlašću polinuklearnih ćelija, često modifikovanih. Ako se infekcija suzbija antibioticima, tada je broj PMN-a manji i dokaz o infekciji treba biti zasnovan na bakteriološkoj analizi SF ili na histološkom pregledu biopsije sinovije. Ako je SG bogat eozinofili, treba tražiti microfilariae.

Upalne reumatske bolesti

I ovdje je celularnost važna, a polimorfonuklearni leukociti (PMN) su najbrojniji. Ova grupa zglobnih patologija nema specifičan citološki profil koji odražava specifičan reumatizam. Ali SG su statistički više inflamatorni kod reumatoidnog i reaktivnog artritisa (Fissinger-Leroy-Reuter spondiloartritis) nego kod SLE poliartritisa, reumatskog pelviospondilitisa ili psorijatičnog artritisa.

Metabolički ili mikrokristalni artritis

Za ovu grupu bolesti citološki pregled sinovijalne tečnosti je opravdan i zanimljiv. Treba napomenuti da otkrivanje MK ne eliminiše infekciju, te da je bakteriološki pregled i dalje preporučljiv u svim slučajevima.

Giht

Giht je uvijek povezan s prisustvom bezbrojnih mikroorganizama u zglobnoj šupljini mononatrijum urat, vrlo karakterističan oblik i fizičke karakteristike. To su izdužene MK, igličastog oblika, dužine 5-20 mikrona, sa konusnim krajem koji probija ćelijske membrane. Tečnost je tipično vrlo upalna i bogata neutrofilima (Slika 1).

Vrlo mali kristali (1-2 mikrona) mogu se vidjeti u asimptomatskim izljevima između napada gihta. Sada su često vanćelijski. Natrijum uratna mokraćna kiselina je rastvorljiva u vodi, ne skladišti se i ne otkriva se u razmazima obojenim MGM-om.

Hondrokalcinoza zglobova

Ova patologija je uzrokovana prisustvom u hrskavici i/ili sinovijumu naslaga kalcijum pirofosfat dihidrata, koji u akutnom periodu izazivaju simptome ili pseudogihta ili upalnog reumatoidnog ili osteoartritisa. Ključ za dijagnozu – identifikacija karakterističnih MK u SF. MK je dugačak 5-10 mikrona, unutar leukocita, u obliku pravog ili kosog paralelepipeda. Njihov dvolom je manji od mokraćne kiseline. Ovi MC su slabo rastvorljivi u vodi i sačuvani su nakon bojenja pomoću MGR. Ponekad analiza svježe tekućine ili nakon bojenja tekućine dojke pokazuje koncentraciju urata i pirofosfata istovremeno. Ove mješovite lezije zglobova nisu isključive.

Bolesti zglobova i kalcijum fosfati

Neki pacijenti, koji često pate od kalcifikacije rotatorne manžete, mogu razviti destruktivnu artropatiju i znakove upale rotatorne manžete. Simptomi upale gastrointestinalnog trakta povezani su s prisustvom mokraćne kiseline, koji pripadaju različitim oblicima kalcijum fosfata. Najčešći je hidroksiapatit, ali se mogu naći i oktakalcijum fosfat i trikalcijum fosfat. Dužina ovih kristala je 0.l - 0.2 µm, nevidljivi su u optičkom mikroskopu.

Ostali mikrokristali

Kada se ispituje svježi SF, ponekad se identificiraju i drugi tipovi MK, koji uključuju:

• Kalcijum oksalat, koji se može uočiti kod pacijenata na hemodijalizi. Oni se formiraju

MK je ponekad piramidalnog, ponekad nepravilnog oblika ili štapića, što se može zamijeniti sa kalcijum pirofosfatom;

• MK holesterola su velike, pravougaone, ravne, često sa zakošenim uglom. Zapažaju se kod reumatoidnog artritisa ili burzitisa povezanog sa starenjem;
• Derivati ​​kortizona, koji se u terapijske svrhe ubrizgavaju u zglob, kristaliziraju se i MK može postojati nekoliko sedmica ili mjeseci. Mogu izazvati stvarne

mikrokristalni artritis. Njihov oblik je promjenjiv i svi su dvolomni;

• Charcot-Leiden MC su rijetki i mogu se uočiti u tekućini bogatoj eozinofilima. Njihov oblik je sličan igli kompasa, slabo lomljiv.

Zaključak

Citološki pregled zglobne tečnosti je vrijedan dijagnostički test, minimalno invazivan, brz, pristupačan, u kojem:

Obilje ćelija pravi je odraz upalne prirode bolesti zglobova,

Prisustvo ili odsustvo MK nam omogućava da potvrdimo ili isključimo, u roku od nekoliko minuta, mikrokristalnu artropatiju, a često i odredimo prirodu metaboličke artropatije.

Opšti klinički pregled (analiza) zglobne tečnosti obuhvata određivanje fizičko-hemijskih svojstava tečnosti i mikroskopski pregled ćelijskih elemenata.

Makroskopske karakteristike sinovijalne tečnosti (boja, stepen zamućenosti i viskoznost) se procenjuju u propuštenom svetlu. Viskoznost se procjenjuje po dužini mucinskog filamenta: dužina filamenta formiranog kapljicom iz šprica bi normalno trebala biti veća od 3 cm Kod upale viskoznost se smanjuje, a samim tim i dužina filamenta.

Manipulacija se izvodi tako da pacijent sjedi sa spuštenom rukom uz tijelo i leži na koljenu. Igla je ubačena s prednje strane, njen kraj je usmjeren blago prema dolje i bočno, prema korakoidnom nastavku lopatice; igla se kreće unazad, prema zglobnoj površini lopatice. Također je moguća punkcija ramenog zgloba kroz stražnji pristup.

Pacijent savija ruku u lakatnom zglobu pod uglom od 60°, zglob je u proniranom položaju. Tačka uboda igle nalazi se na bočnoj površini zgloba, između lateralnog epikondila humerusa i radijusa.

Zglob koljena i njegove periartikularne burze mogu se punktirati sa pacijentom u ležećem položaju, s ispruženim donjim ekstremitetom u zglobu koljena. Igla, obično prečnika 0,8 mm, ubacuje se sa bočne strane odmah ispod kaudalnog ruba patele. Alternativno, moguće je ubaciti iglu sa medijalne strane, takođe ispod kaudalne ivice patele.

Makroskopske karakteristike u mnogim slučajevima omogućavaju razlikovanje između neupalnih, upalnih i infektivnih izljeva. Osim toga, u zglobnoj tečnosti može biti krvi. Pojava izliva ukazuje na određenu bolest. Takozvani neupalni izljevi zapravo odgovaraju patološkim procesima koje karakterizira blaga do umjerena upala, kao što je osteoartritis.

Laboratorijske studije intraartikularne tečnosti uključuju brojanje ćelija i procenu njihovog kvalitativnog sastava, mikrobiološki pregled (ako se sumnja na infektivni proces), kao i mikroskopski pregled nativnog leka za identifikaciju različitih ćelija i kristala. Međutim, izbor određenog testa zavisi od sumnje na dijagnozu.

Referentni indikatori (normalni) sinovijalne tečnosti

Proučavanje sinovijalne tekućine igra važnu ulogu u razjašnjavanju prirode procesa u zahvaćenom zglobu.

Indikacije za punkciju zgloba: monoartritis nepoznate etiologije, nelagodnost u zahvaćenom zglobu (ako je dijagnoza utvrđena), potreba za praćenjem efikasnosti liječenja infektivnog artritisa, za diferencijalnu dijagnozu artritisa i artroze, budući da se bira Od toga zavisi program daljeg pregleda i lečenja pacijenta.

U slučaju bolesti zglobova potrebno je podvrgnuti sveobuhvatnom pregledu kako bi se utvrdio uzrok i priroda upalnog procesa. Jedan od najvažnijih testova je proučavanje sinovijalne tečnosti. Procedura uzimanja tekućine za analizu je neugodna, ali studija je najefikasniji način za postavljanje dijagnoze i neophodna je za izradu režima liječenja.

Jedan od najvažnijih testova je proučavanje sinovijalne tečnosti

Sinovijalna tečnost, koja se često naziva zglobna tečnost, deluje kao lubrikant između hrskavice. Zahvaljujući ovoj tvari, osigurava se apsorpcija udara, smanjujući snagu udara i opterećenje zglobova tijekom kretanja. Sinovijalna tečnost dodatno služi kao transport nutrijenata koji održavaju elastičnost tkiva hrskavice.

U slučaju bilo kakvih poremećaja u funkcionisanju zgloba i upalnih procesa, prve promene utiču na zglobnu tečnost. Pregledom sinovijalne tekućine moguće je brzo postaviti tačnu dijagnozu u početnim fazama razvoja zglobnih patologija.

Indikacije za analizu sinovijalne tečnosti:

• sindrom boli;
• poremećena motorička aktivnost zgloba;
• iznenadna hromost;
• jutarnja ukočenost zglobova.

Ispitivanje sinovijalne tekućine propisano je za reumatoidni artritis ili ako se sumnja na ovu bolest ili upalu zglobne kapsule. Ova studija je neophodna kako bi se isključila ili potvrdila bakterijska priroda upalnog procesa.

Izvodi se punkcija kako bi se uzela mala količina tečnosti za analizu. Postupak se provodi u dvije faze. Prvo se pacijent temeljito dezinficira na mjestu uboda i u ovo područje se ubrizgava anestetik kako bi se eliminirao bol. Koristi se samo lokalna anestezija. Zatim se u zglobnu šupljinu ubacuje posebna igla, šuplja iznutra, uz pomoć koje se ispumpava mala količina tekućine.

Trajanje cijelog postupka nije duže od 5 minuta. Tečnost uvučena u sterilnu špricu se odmah šalje u laboratoriju.

Punkcija se ne može izvesti samo ako je epiderma oko područja uboda igle inficirana. U slučaju pogoršanja kroničnih dermatoloških bolesti, postupak se odgađa do postizanja remisije. Punkcija sinovijalne membrane radi sakupljanja tečnosti iz zgloba ne radi se u opštem teškom stanju, koje je praćeno povišenom temperaturom ili intoksikacijom.

Punkcija se koristi istovremeno kao dijagnostička i terapijska metoda. Kada se tečnost prikupi iz zgloba, pritisak u sinovijumu se smanjuje, što trenutno eliminiše bol zbog upale. Također, pomoću punkcije mogu se primijeniti posebni lijekovi protiv bolova ili protuupalni lijekovi za ublažavanje simptoma artritisa.

Procjena sastava sinovijalne tekućine

Analiza sinovijalne tekućine pomaže u identifikaciji uzroka disfunkcije zglobova

Sinovijalna tečnost u zdravom zglobu je svetlo žuto, viskozno mazivo. Njegova količina može varirati od 1 do 4 ml. Prilikom analize sinovijalne tečnosti kolenskog zgloba, za ispitivanje se sakuplja oko 1 ml tečnosti.

Analiza uključuje:

• vizuelna procjena tečnosti i njenih fizičkih svojstava;
• određivanje hemijskog sastava;
• bojenje razmaza i provođenje mikroskopskog pregleda dobivenog preparata;
• bakterijska kultura tečnosti.

Kombinacija ovih faza omogućava sveobuhvatnu procjenu funkcije zgloba i identifikaciju svih mogućih poremećaja. Dešifrovanje citološkog pregleda sinovijalne tečnosti će nam omogućiti da bolje razumemo njen značaj i moguće poremećaje u njenom sastavu.

Vizuelna analiza tekućine: norma i patologija

Dešifriranje vizualne analize sinovijalne tekućine pomaže u identificiranju uzroka disfunkcije zglobova. Ovo je neophodno kako bi se utvrdila upalna ili neupalna priroda bolesti.

Broj leukocita se određuje na 1 μl ispitivanog lijeka.

Kod osteoartritisa uočen je neupalni patološki proces u zglobnoj kapsuli. Ovaj rezultat analize je tipičan i za sistemski eritematozni lupus i artrozu koja se razvija u pozadini povreda.

Upala u zglobovima je karakteristična za reumatoidni i gihtni artritis. Ove bolesti su praćene ukočenošću zglobova ujutru, neposredno nakon spavanja, i jakim bolovima.

Septički upalni proces u zglobovima razvija se u pozadini infekcije tuberkulozom, gonorejom i drugim infekcijama. Naziva se i gnojna ili infektivna upala.

Hemijska analiza

Ćelijski elementi se procjenjuju hemijskom analizom

Hemijskom analizom sinovijalne tečnosti utvrđuje se prisustvo proteina, glukoze i mokraćne kiseline. U zdravim zglobovima nema proteinskih spojeva. Njihovo prisustvo ukazuje na artritis zbog gihta ili psorijaze. Količina proteina se procjenjuje popunjavanjem vidnog polja mikroskopa.

Glukoza u sinovijalnoj tečnosti ukazuje na komplikacije dijabetesa. Da bi se izbjegao lažno pozitivan rezultat, test se izvodi ujutro na prazan želudac. Svakako treba odbiti jesti najmanje 8 sati prije punkcije.

Kod teške upale, značajna količina glukoze se nalazi u zglobnoj tečnosti, koja je normalno prisutna u zglobovima u malim količinama.

Mokraćna kiselina se nalazi u sinovijalnoj tečnosti samo kod jedne bolesti – gihta. Budući da je gihtni artritis praćen specifičnim simptomima, određivanje nivoa mokraćne kiseline u zglobovima je pomoćna, ali ne i obavezna studija za ovu dijagnozu.

Mikroskopija

Svrha mikroskopske analize je prebrojavanje kristala i ćelijskih elemenata u sastavu materijala koji se proučava. Da biste to učinili, uzorak se stavlja pod mikroskop, boji se posebnim preparatom i pažljivo se ispituje. Procjena ćelijskih elemenata se vrši vizualno.

Obično tečnost ne sadrži kristale. Razlog njihovog formiranja zavisi od vrste kristalnih jedinjenja naznačenih u rezultatima analize. Kod gihta postoji velika količina natrijum urata. Prisustvo holesterola u zglobnoj tečnosti ukazuje na artritis bilo koje prirode; kalcifikacije se nalaze u teškim oblicima reumatoidnog artritisa.

Citološka analiza

Citološkom analizom procjenjuje se ukupan broj ćelija

Citologija je neophodan minimum prilikom pregleda zglobne tečnosti. Za prebrojavanje ćelija obično se koriste posebni preparati za bojenje i dodatna oprema, koja vam omogućava da precizno odredite vrstu i broj promijenjenih ćelija. Citološka analiza je jednostavnija, jer se broj ćelija procjenjuje vizualno, na osnovu volumena stakalca. Ova metoda vam omogućava samo da odredite prirodu bolesti prema broju leukocita. Povećanje broja ovih ćelija ukazuje na upalu.

Citološkom analizom procjenjuje se ukupan broj ćelija. U ovom slučaju, analiza nam omogućava da identificiramo upalne, neupalne i gnojne prirode bolesti. Drugim riječima, hemijska analiza i citološka analiza su praktično ista stvar, samo su rezultati hemijske analize detaljniji.

Bojanjem lijeka i stavljanjem u posebnu centrifugu moguće je identificirati kristale u tekućini. Ovo otkriva prisustvo igličastih i četverokutnih kristala.

Bolesti koje se mogu dijagnosticirati tokom proširenog citološkog pregleda obojenog uzorka:

• sve vrste artritisa;
• giht;
• artroza;
• naslage kalcijevih soli u zglobovima;
• gnojne i infektivne upale zglobova.

Citološki pregled se obavlja prilično jednostavno i brzo, što ga čini jednim od prvih načina za procjenu zdravlja zglobova.

Bakterijska kultura

Ako mikroskopska analiza i citologija otkriju septičku upalu, neophodna je dodatna bakterijska kultura zglobne tekućine. Ova analiza omogućava preciznu identifikaciju vrste uzročnika infektivne upale, na osnovu čega se može odabrati najefikasniji režim liječenja.

Da bi se izvršila analiza, zglobna tečnost se stavlja u poseban medij napunjen hranljivim rastvorom. U ovom okruženju svi patogeni mikroorganizmi brzo sazrijevaju i njihova populacija se povećava. Nekoliko dana kasnije, laboratorijski tehničar procjenjuje sastav tečnosti stavljanjem male količine "sazrelog" lijeka na staklo pod mikroskopom. Uzročnik bolesti bit će one bakterije ili gljivice čiji se broj povećao što je više moguće tokom boravka u hranljivom mediju.

Gnojna upala zglobova mora se liječiti antibioticima. Bakterijska kultura vam omogućava da identificirate vrstu patogena, na osnovu čega liječnik može odabrati učinkovitu antibakterijsku terapiju.

Osim toga, tokom studije, patogene bakterije se mogu analizirati na osjetljivost na antibiotike.

Proučavanje sinovijalne tekućine smještene u poseban hranljivi medij traje nekoliko dana, jer patogeni agensi sazrijevaju prilično sporo. Obično su rezultati gotovi za 3-7 dana, ali u nekim slučajevima može potrajati duže, do dvije sedmice.

Dodatni pregledi

Rendgenski snimci zglobova mogu isključiti oštećenje tkiva hrskavice.

Unatoč informativnoj prirodi analize, ispitivanje zglobne tekućine propisuje se tek nakon postavljanja preliminarne dijagnoze. Kod bolova u zglobovima i smanjene pokretljivosti pacijentu se prvenstveno savjetuje sljedeći pregled:

• analiza krvi;
• radiografija zglobova;
• MRI i ultrazvuk.

Potrebna je analiza krvi na reumatoidni faktor. Visok nivo ovog imunoglobulina ukazuje na autoimunu prirodu bolesti, koja je tipična za reumatoidni artritis.

U nekim slučajevima dolazi do upale u zglobu, ali se reumatoidni faktor ne povećava. Opći i biohemijski test krvi pomoći će da se točno utvrdi prisutnost upalnog procesa.

Rendgenski snimci zglobova mogu pomoći u isključivanju oštećenja hrskavičnog tkiva. MRI i ultrazvuk otkrivaju uključenost okolnih tkiva u upalni proces i pomažu u utvrđivanju prisutnosti kalcifikacija u zglobovima.

Kojem lekaru da se obratim nakon dobijanja rezultata testa?

U velikoj većini slučajeva primarnu dijagnozu provodi ljekar opće prakse ili porodični liječnik. Ovaj specijalista će pacijenta uputiti na standardne preglede - analizu krvi na reumatski faktor, rendgenski snimak zglobova, biohemijski test krvi za određivanje nivoa mokraćne kiseline.

Ako se potvrdi upalna priroda bolesti, liječnik će pacijenta uputiti reumatologu. Ovaj stručnjak će odabrati režim liječenja. Osim toga, reumatolog propisuje i specifične laboratorijske pretrage za bolesti zglobova za otkrivanje promjena u sastavu sinovijalne tekućine.

Ako nema upale, poremećaji zglobova mogu biti povezani s degeneracijom tkiva hrskavice ili ranijim ozljedama. U tom slučaju liječenje treba provesti ortopedski kirurg.

Moguće komplikacije punkcije

Rizici zavise od profesionalnosti doktora i preliminarnih pregleda

Pregled sinovijalne tečnosti zahteva punkciju zglobne kapsule. Sama procedura ima minimum kontraindikacija i ne zahtijeva nikakvu pripremu osim odbijanja jela 8 sati prije testa.

Prilikom izvođenja punkcije koriste se anestetici, preparati joda i antiseptici. Nakon uzimanja tečnosti, na mjesto uboda stavite pritisni zavoj, prethodno tretirajući kožu antiseptikom. Čvrsti zavoj treba nositi cijeli dan, a zatim ga zamijeniti opuštenim.

Unatoč prividnoj jednostavnosti, punkcija nije sigurna. U nekim slučajevima se javljaju sljedeće komplikacije:

• unutrašnja infekcija zgloba;
• krvarenje kada je krvni sud oštećen;
• oštećenje ligamenata i oštećenje pokretljivosti;
• bol zbog oštećenja nerava.

Infekcija zglobova je rijetka komplikacija. Rizik od infekcije se povećava s ponovljenom punkcijom sinovijalne membrane. Krvarenje zbog oštećenja krvnih žila zahtijeva dodatne mjere medicinskog osoblja, jer krv ulazi direktno u sinovij.

Teške komplikacije, zbog kojih se zdravlje pogoršava i pokretljivost zglobova je narušena, uočavaju se u izoliranim slučajevima. Rizici od komplikacija u velikoj mjeri zavise od profesionalnosti ljekara i preliminarnih pregleda.

Standardizovana analitička tehnologija za kliničku laboratorijsku analizu sinovijalne tečnosti.

1. Svrha studije

Tehnologija „Klinička laboratorijska analiza sinovijalne tečnosti“ radi se za dijagnostiku bolesti zglobova, kao i za praćenje toka bolesti i efikasnosti lečenja.

Proučavanje sinovijalne tečnosti je od velike važnosti kada:

Svi zaposleni moraju poštovati uputstva i sigurnosna pravila navedena u tehničkim listovima za električne uređaje koji se koriste u tehnici (fotometri, mikroskopi, centrifuge); Osoblje koje radi s reagensima mora biti obučeno za rukovanje njima, korištenje lične zaštitne opreme i pridržavanje pravila lične higijene.

Za sprečavanje požara potrebno je pridržavati se pravila zaštite od požara u skladu sa važećim propisima.

Stoga je potrebno striktno pridržavati se svih tačaka uputa o sigurnosti, zaštiti od požara i biološkoj sigurnosti.

2.3 Uslovi za izvođenje tehnologije kliničke laboratorijske analize sinovijalne tečnosti i funkcionalne namene

Klinička laboratorijska analiza sinovijalne tečnosti obavlja se u kliničko-dijagnostičkim laboratorijama specijalizovanih ambulantnih i stacionarnih zdravstvenih ustanova (reumatološki i artrološki centri).

Funkcionalna namjena usluge: vrši se u svrhu dijagnosticiranja bolesti zglobova, praćenja toka i progresije bolesti i efikasnosti liječenja.

2.4 Materijalni resursi neophodni za implementaciju tehnologije: instrumenti, mjerni instrumenti, laboratorijska oprema

2.4.1. Binokularni mikroskop sa uranjanjem i ugrađenim iluminatorom.

2.4.2.Polarizacioni mikroskop.

2.4.3. Laboratorijska centrifuga (hlađena: 5-8 oC).

Za pripremu sedimenta sinovijalne tečnosti treba koristiti centrifuge od 1000 o/min. Kada koristite centrifugu, morate striktno slijediti upute proizvođača.

2.4.4. Brojač za izračunavanje leukocitne formule krvi (za izračunavanje sinoviocitograma).

2.4.5. Stalak za epruvete.

2.4.6. Kontejneri i kivete za bojenje i fiksiranje mrlja.

2.4.7. Uređaj za sušenje mrlja.

2.4.8. Stakleni (plastični) proizvodi.

2.4.8.1. Centrifugalne epruvete (10 ml).

Za makroskopsko proučavanje SF bolje je koristiti prozirne staklene cijevi. Za centrifugiranje tekućine koriste se plastične centrifugalne cijevi, koje moraju imati konusni oblik za koncentriranje sedimenta, biti graduirane kako bi se odredila količina sinovijalne tekućine dobivene prilikom punkcije zgloba i zatvorene poklopcima kako bi se smanjio rizik od prskanja. Epruvete moraju biti hemijski čiste i označene za tačnu identifikaciju pacijenta. Moguće je koristiti vakumske cijevi.

2.4.8.2. Gorjajevljeva kamera.

2.4.8.3. Stakalna stakla i pokrovni stakalci za mikroskopiju nativnih preparata.

Klizno staklo (po mogućnosti sa matiranim poljem za označavanje, veličine 26 x 76 x 1,1 mm) za mikroskopiranje obojenog uzorka.

Stakalna pločica sa uglačanim rubom (veličine 26 x 76 x 1,1 mm) ili plastična lopatica za pripremu razmaza.

2.4.8.4. Pipete za prijenos sinovijalne tekućine. Trenutno se koriste plastične Pasteurove pipete s fino izvučenim krajem i balonom, dizajnirane da standardiziraju volumen kapljice sedimenta i smanje rizik od biološke opasnosti povezane s resuspendiranjem ili prijenosom sinovijalne tekućine. Moraju biti suvi i hemijski čisti.

2.4.8.5 Staklene šipke.

2.5 Reagensi

2.5.1 Rastvori fiksativa i boja i drugih potrebnih reagensa za pripremu obojenih razmaza (videti GOST R Citološki pregled punktata koštane srži);

2.5.2 rastvor sirćetne kiseline 5%;

2.5.3 EDTA (dikotijum ili dinatrijum so).

2.5.4. Alizarin crveni rastvor 2%.

2.6 Drugi potrošni materijal

2.6.1. Gumene rukavice.

2.6.2. Sredstva za dezinfekciju.

3. Karakteristike tehnike izvođenja tehnologije za proučavanje sinovijalne tečnosti

3.1 Uzimanje uzoraka sinovijalne tečnosti

Za pravilno izvođenje preanalitičke faze potrebno je pridržavati se zahtjeva standarda GOST R 53079.4-2008. .

Punkciju zgloba izvodi kliničar.

Pravila za čuvanje i transport uzoraka sinovijalne tečnosti su navedena u

Dodatak A.

Prilikom punkcije zgloba tečnost se sakuplja u sterilne epruvete za centrifugiranje (2-3 ili više, u zavisnosti od količine dobijene tečnosti) i odmah se prenosi u kliničko-dijagnostičku laboratoriju. Jedna od epruveta (ili više, ovisno o broju primljenih epruveta) šalje se u mikrobiološku laboratoriju (odjel) na mikrobiološka ispitivanja, a ostale se koriste za kliničko laboratorijsko istraživanje SF (određivanje fizičko-hemijskih svojstava i mikroskopski pregled nativnih i azurno-eozinom obojeni preparati sa prebrojavanjem sinoviocitograma, brojanjem ćelijskih elemenata u 1 μl (citoza), kao i izvođenjem biohemijskih i imunoloških studija.Biohemijske i imunološke studije se rade u supernatantu nakon centrifugiranja tečnosti, a sediment se koristi se za traženje kristala u prirodnom lijeku pomoću polarizirajućeg mikroskopa, kao i za brojanje sinoviocitograma u obojenom razmazu. Za brojanje ćelija, možete prikupiti SF u epruveti koja sadrži antikoagulans (dinatrijum ili dikalijum so EDTA), Dostupne su posebne vakuumske cijevi sa K2EDTA koje se mogu koristiti za sakupljanje SF.

Ako postoje odgovarajuće indikacije (sumnja na prisustvo neoplastičnih ćelija), obojeni bris se šalje u citološki laboratorij.

3.2 Identifikacija uzorka

U uputu za studiju moraju biti navedeni sljedeći podaci: prezime i inicijali pacijenta, godine ili datum rođenja, pol, odjel zdravstvene ustanove i odjela (u bolnici), broj medicinske dokumentacije (matični broj), dijagnoza, datum i vrijeme uzimanja uzorka sinovijalne tekućine, vrijeme dostave uzorka u laboratoriju. Svi indikatori koje treba utvrditi moraju biti navedeni. Ako je potrebno, naznačiti lijekove koji se daju na probušeni zglob.

Neobilježeni ili pogrešno označeni uzorci nisu prikladni za testiranje i treba ih obavijestiti kliničara koji je naručio test.

3.3 Prihvatljivost uzorka

Budući da tačnost rezultata istraživanja sinovijalne tečnosti u velikoj meri zavisi od kvaliteta dostavljenog uzorka, potrebno je striktno poštovati pravila skladištenja i transporta sinovijalne tečnosti (Prilog A).

Nakon dostave uzorka sinovijalne tekućine u laboratoriju, laboratorijski radnik koji prima materijal mora provjeriti ispravnost uputnice za analizu, označavanje staklene posude (šifra ili prezime pacijenta i drugi podaci moraju biti identični podacima navedenim u dokumentu). uputnicu) i evidentirati primljeni materijal.

Sinovijalnu tečnost prikupljenu u epruveti sa K2 EDTA treba pregledati u roku od 30 minuta, a kada se čuva u frižideru (temperatura 3-50C) - najkasnije 24 sata (samo za ispitivanje obojenih razmaza).

Napomena ─ Dugotrajno skladištenje SF supernatanta je dozvoljeno na temperaturi od -70°C za biohemijske i imunološke studije.

Kašnjenje analize i korištenje hlađenja uzorka su zabilježeni na obrascu za odgovor.

Prije testiranja, uzorci se moraju dovesti na sobnu temperaturu.

3.4 Makroskopska procjena i proučavanje fizičko-hemijskih svojstava sinovijalne tekućine

3.4.1 Količina sinovijalne tečnosti normalno varira od 0,2 do 2,0 ml (u zavisnosti od veličine zgloba). Za različite bolesti zglobova, količina tekućine može doseći 100 ml ili više.

3.4.2. Boja sinovijalne tečnosti.

Normalna boja sinovijalne tečnosti je svetlo žuta.

Napomena ─Svijetložuta ili žuta boja sinovijalne tekućine se uočava kod degenerativnih bolesti zglobova; krvavi - s traumatskim artritisom; upalne bolesti zglobova (reumatoidni artritis (RA), reaktivni artritis (ReA), ankilozantni spondilitis, psorijatični artritis) karakteriziraju različite nijanse žute i smeđe (svijetložute, žute, limunske, svijetlosmeđe, smeđe, jantarne ili narančaste) ; kod gihta uočava se svijetložuta, zelenkasto-žuta, mliječno-bijela, mliječno-žuta, ružičasto-bijela boja tekućine; za pirofosfatni artritis i hondrokalcinozu - žuta ili mliječno žuta, za septički artritis - sivkastožuta, zelenkastožuta ili krvava.

3.4.3. Transparentnost sinovijalne tečnosti.

Normalna sinovijalna tečnost je potpuno prozirna. Oblačnost je obično uzrokovana povećanjem broja ćelijskih elemenata, prisustvom kristala ili mikroorganizama.

Procjena transparentnosti.

Postoje 4 stepena transparentnosti: providan, providan, umereno oblačno i intenzivno oblačno.

Napomena – kod degenerativnih oboljenja zglobova (osteoartritis) zglobna tečnost je prozirna i prozirna; za upalne bolesti (RA, seronegativni artritis, giht, pirofosfatni artritis) - proziran, umjereno zamućen ili intenzivno zamućen; za septički artritis – intenzivno zamućena, gusta.

3.4.4. Prisustvo sedimenta.

Normalno, u tečnosti nema taloga. Pojavljuje se samo u patologiji i u pravilu se sastoji od fragmenata staničnih membrana, fibrinskih niti, fragmenata tkiva nastalih kao rezultat uništavanja hrskavice i sinovijalne membrane, kao i kristala.

Napomena ─ Kod degenerativnih bolesti zglobova, amorfni depozit amiloidoze nalazi se u SF. Kod upalnih bolesti zglobova gotovo uvijek se nalazi sediment. U SF oboljelih od RA, posebno često kod djece sa juvenilnim RA, može se uočiti granularni sediment koji podsjeća na zrna riže ili „pirinčana tijela“, formirana od mikroskopskih fragmenata nekrotične sinovije bogate fibrinom. Takav sediment može biti pokazatelj visoke upalne aktivnosti procesa.

3.4.5. Viskoznost

Najvažnija karakteristika SF, koja ga razlikuje od drugih bioloških tečnosti, je prisustvo hijaluronske kiseline, polimera visoke molekularne težine. To je hijaluronska kiselina, visokog viskoziteta, koja uglavnom osigurava obavljanje glavnih funkcija tečnosti. Postoji direktna veza između sadržaja, molekularne težine hijaluronske kiseline i viskoziteta tečnosti.

Metode za određivanje viskoznosti.

Kvantitativne karakteristike viskoziteta fluida određuju se pomoću viskozimetra.

U rutinskim studijama obično se koristi metoda staklene šipke:

staklena šipka se spušta u tečnost i zatim uklanja. Viskoznost se procjenjuje po dužini mucinskih filamenata; razlikuju se tri stepena viskoziteta:

kada je dužina konca iznad 5 cm - viskoznost je visoka, do 5 cm - srednja, manje od 1 cm - niska.

Viskoznost je moguće izraziti u tačkama: 1 - visoka, 2 - srednja, 3 - niska. Normalno, viskoznost rashladne tečnosti je visoka.

Intenzitet viskoznosti zavisi od koncentracije kristala, stepena polimerizacije hijaluronske kiseline i temperature.

Napomena ─ Upotreba instrumentalnih metoda pomoću različitih viskozimetara zahtijeva (pored dostupnosti uređaja) niz dodatnih operacija i, prema tome, značajno ulaganje vremena, bez pružanja bilo kakvih fundamentalno novih informacija u poređenju sa dostupnim laboratorijskim testovima.

4.4.6. Određivanje gustine mucinskog ugruška u sinovijalnoj tečnosti.

Hijaluronska kiselina u SF postoji u kompleksu sa proteinima poznatim kao mucin. Određivanje mucinskog ugruška je od velikog dijagnostičkog značaja kod upalnih bolesti. Test za mucin u sinovijalnoj tečnosti dobro korelira sa viskozitetom.

Metode za proučavanje gustine mucinskog ugruška.

Princip metode: kada je SG izložen sirćetnoj kiselini, formira se mucinski ugrušak.

Napredak utvrđivanja:

Kap SG se dodaje u epruvetu koja sadrži 3 ml 5% rastvora sirćetne kiseline (CH3COOH). Sadržaj epruvete snažno protresite 1 minut, stvara se talog. Postoje 4 stupnja gustoće sedimenta: gust (talog izgleda kao gusta gruda), umjereno gust (izgled razgranate, ali ne i dezintegrisane strukture), umjereno labav i labav - u većoj ili manjoj mjeri se raspada na sitne čestice. Formiranje gustog mucinskog ugruška ukazuje na značajan sadržaj mucina.

Obično je sediment gust.

Napomena 1 ─ Kod neinflamatorne artropatije, mucinski ugrušak je obično gust ili umjereno gust, a kod upalnih bolesti zglobova umjereno labav i labav.

Napomena 2 ─ Određivanje viskoziteta i gustine mucinskog ugruška je važno za razlikovanje „neupalne“ i upalne prirode procesa u zglobu. Ove metode mogu biti međusobno kontrolirajuće: indikatori jedne metode striktno odgovaraju indikatorima druge. Visoki viskozitet odgovara gustom, srednjem – umjereno gustom, niskom – umjereno labavom i labavom mucinskom ugrušku.

3.5 Mikroskopski pregled sinovijalne tečnosti

3.5.1 Zahtjevi za uzorak sinovijalne tekućine za mikroskopski pregled.

Prije provođenja mikroskopskog pregleda, liječnik mora imati informacije o vremenu uzimanja sinovijalne tekućine i rezultatima procjene fizičko-hemijskih svojstava.

Trenutno se proizvode vakumske cijevi koje sadrže antikoagulant (K2EDTA), koji je ujedno i konzervans za ćelijske elemente i ne utiče na njihovu morfologiju, za sakupljanje bioloških tekućina.

Napomena 1─ Sinovijalna tečnost stabilizovana sa K2EDTA ne može se koristiti za otkrivanje ragocita.

Izvode se tri vrste mikroskopskog pregleda:

brojanje ćelija u nativnoj sinovijalnoj tečnosti u Gorjajevskoj komori (citoza), proučavanje nativnog leka i leka obojenog azur-eozinom sa izračunavanjem sinoviocitograma.

3.5.2 Brojanje broja ćelijskih elemenata u 1 μl sinovijalne tečnosti u Gorjajevskoj komori (određivanje citoze).

Napredak istraživanja:

Studija se provodi u nativnoj ili K2EDTA stabiliziranoj sinovijalnoj tekućini.

Sipajte 0,4 ml izotonične ili hipotonične otopine NaCI u epruvetu.

Procijedite suspenziju i čuvajte u frižideru u tamnoj staklenoj boci. Neposredno prije testiranja, filtrirajte potrebnu količinu boje kroz milipore filter.

Pomiješajte 20 µl boje sa jednakom količinom tekućine ili sedimenta dobivenog nakon centrifugiranja. Bolje je pripremiti nativni preparat i mikroskopirati ga u polarizacionom mikroskopu: kristali su jajolikog oblika, 2-3 mikrona u prečniku, bogato crvene boje sa ružičastim oreolom.

Napomena 4 ─ Ovi kristali se nalaze u hidroksiapatitnoj artropatiji.

U sinovijalnoj tečnosti se mogu naći i kristali kalcijum oksalata, holesterola, lipida, Charcot-Leyden itd.

Napomena 5 ─ Kristali kalcijum oksalata (C2CaO4 · H2O) obično imaju kubni oblik, ali mogu formirati bezbojne, sjajne kristale koji se jako lome, različitih veličina u obliku oktaedara ili pravokutnika, koji podsjećaju na poštanske omotnice. Ponekad postoje kristali kalcijum oksalata zaobljenog oblika i s presjekom, nalik na pješčani sat, gimnastičke utege ili lukove (C2CaO4 2H2O). Ove kristale mogu fagocitirati polimorfonuklearni leukociti (neutrofili).

Napomena 6 ─ Tečni kristali lipida predstavljeni su na tamnom polju u obliku crnih malteških krstova, dijeleći svaku kap lipida na četiri bijela sjajna segmenta. Kapi neutralne masti nemaju efekat dvosmjernog prelamanja svjetlosti.

Kolesterol, kristali natrijevog oksalata i tečni kristali lipida nisu specifični za bilo koju određenu bolest zglobova i mogu se pojaviti u raznim artropatijama, odražavajući metaboličke poremećaje.

Napomena 7 ─ Amiloidne grudvice se mogu naći u SF. To su bezbojne formacije okruglog oblika, slojevite strukture, koje podsjećaju na posječeno drvo, karakterističnog sjaja. Identificiraju se u nativnim preparatima pri uvećanju x400, kao i pri uranjanju pri uvećanju x1000. Amiloid se može otkriti u nativnom SF obojenom Kongo crvenom bojom. Dobijeni preparat se može posmatrati i u svetlosnom i u polarizacionom mikroskopu.

Amiloidne kvržice se nalaze kod bolesti praćenih amiloidnom artropatijom.

Kristali hematoidina.

Kristali hematoidina nastaju prilikom razgradnje hemoglobina u hematomima bez pristupa kisiku. To su blago izduženi dijamanti i/ili zlatno-žute iglice. Kristali hematoidina su jasno vidljivi i u nativnim i u preparatima obojenim azurno-eozinom. Budući da su ovi kristali obično prilično mali u SF-u, preporučuje se mikroskopiranje prirodnih preparata pod uranjanjem. Na mjestu upale, ovi kristali mogu biti fagocitirani od strane makrofaga ili locirani na površini ćelijskih elemenata.

Napomena 8 ─ U slučaju povrede i intraartikularnog krvarenja u zglobnoj šupljini se stvaraju uslovi pod kojima se mogu formirati kristali hematoidina.

Charcot-Leyden kristali.

Charcot-Leyden kristali su u obliku igle kompasa ili oštro izduženog romba. Tipično, Charcot-Leyden kristali se nalaze na pozadini detritusa ili u kombinaciji sa velikim brojem eozinofila i nastaju prilikom razgradnje eozinofila iz eozinofilne granularnosti; ovi kristali se mogu naći u SF pacijenata koji boluju od alergijskog sinovitisa.

Medicinski kristali

Steroidi. Intraartikularne injekcije steroidnih lijekova dovode do njihove kristalizacije unutar zglobova, gdje mogu trajati do 10 sedmica. Detekcija ovih kristala tokom mikroskopskog pregleda nativnih preparata i naknadna pogrešna diferencijacija može dovesti do pogrešnih zaključaka.

Nećelijski i nekristalni elementi u tečnosti.

U SF se mogu naći fragmenti hrskavice i oštećeni ligamenti. Fragmenti hrskavice u nativnom preparatu mogu se prepoznati po karakterističnom svilenkastom sjaju. Pronađeni su i fragmenti hrskavice koji sadrže nakupine hondrocita i fragmente meniskusa, koji su predstavljeni valovitim kolagenim vlaknima i također hondrocitima; fragmenti ligamenata predstavljeni su dugim tankim fibrilima i paralelnim nitima kolagena

Napomena 9 ─ Javljaju se najčešće u SG nakon povrede kolenskog zgloba.

Napomena 10 ─ Uprkos visokoj osetljivosti metode polarizacione mikroskopije, moguće su ozbiljne greške pri njenoj upotrebi, koje obično nastaju usled nedovoljno visoke rezolucije određenog mikroskopa, prisustva stranih kristalnih nečistoća i oštećenja predmeta ili poklopca. staklo Mikroskopista mora biti svjestan mogućnosti smetnji i dobro razumjeti principe prepoznavanja kristala.

3.5.5. Mikroskopski pregled preparata sinovijalne tečnosti obojenih azur-eozinom (sa proračunom sinoviocitograma).

Priprema tečnih razmaza i metode njihovog bojenja (odjeljak 5.5.2).

Ćelijski sastav sinovijalne tečnosti (sinoviocitogram).

Određivanje ćelijskog sastava GS je najvažnija faza njegovog proučavanja, što omogućava razjašnjavanje dijagnoze, određivanje stupnja upalne aktivnosti procesa i prognoze. Određivanje kvantitativne distribucije ćelija (sinoviocitogram) je najvažniji indikator za diferencijalnu dijagnozu bolesti zglobova. Izračunavanje procenta ćelija vrši se na isti način kao i izračunavanje formule leukocita krvi. (izbrojite 100 ćelija u razmazu i izračunajte procenat svake vrste ćelija).

Normalno, ćelije tkivnog porijekla (sinoviociti i histiociti) dominiraju u SF – do 65%. Limfociti čine oko 30%, a monociti i neutrofili - 1-2%.

Krvne ćelije u SF.

Neutrofili (polimorfonuklearni leukociti).

Neutrofili su u prečniku 1,5-2 puta veći od crvenih krvnih zrnaca (14-16 mikrona). Odnos nukleusa i citoplazme je pomeren prema jezgru. Citoplazma je ljubičaste boje, ispunjena malim granulama nalik prahu koje imaju boju jezgra ćelije. Jezgra se sastoje od 3-4 segmenta, sa jasnom podjelom na oksi- i bazični hromatin. S distrofijom, broj segmenata u neutrofilima naglo se povećava na 5-7 (hipersegmentacija). Tokom apoptoze u neutrofilu, nuklearni fragmenti se stapaju u jednu ili dvije hiperhromatske homogene mase bez strukture pravilnog okruglog oblika.

U normalnom SF, broj neutrofila ne prelazi 1-2%.

Napomena 1 ─ Kod reumatoidnog artritisa sadržaj neutrofila dostiže 90%, a broj limfocita se smanjuje na 10%. Slična se slika uočava i kod ankilozirajućeg spondilitisa. Kod upalnih bolesti i intraartikularnog krvarenja neutrofili čine 60-80% formule SF, a kod septičke artropatije - više od 95%.

Limfociti.

To su ćelije prečnika do 12 mikrona. Odnos citoplazme i jezgra je pomeren prema jedru (9:1). Jezgro ima grubo zgrudanu strukturu; bazofilna citoplazma okružuje jezgro uskim rubom; ponekad je oko jezgra vidljiva zona čišćenja.

U normalnom SF, broj limfocita se kreće od 8 do 30%.

Napomena 2 ─ Kod upalnih bolesti preovlađuju neutrofili, a kod degenerativnih bolesti limfociti. Kod degenerativnih bolesti zglobova i traumatskog artritisa sadržaj limfocita u SF dostiže 85%. Limfociti prevladavaju u formuli i kod toksično-alergijskog sinovitisa i sinovijalnog oblika tuberkuloze. Kod artritisa virusne etiologije, na primjer uzrokovanih virusom HTLV-1, pojavljuju se atipični limfociti čiji broj doseže 20%.

Monociti.

Napomena 3 ─ Monociti se nalaze u različitim zglobnim artropatijama, uključujući virusni artritis i monocitni artritis, kao i u slučajevima oštećenja implantata.

Pored ovih ćelija, u SF (u patologiji) se u malim količinama mogu naći i druge krvne ćelije: eozinofili, bazofili, plazma ćelije.

Napomena 4 Eozinofili su izuzetno rijetki u SF i identični su eozinofilima periferne krvi.

Napomena 5: Bazofili se nalaze u malim količinama u inflamatornom artritisu, seronegativnoj artropatiji i neinflamatornoj artropatiji povezanoj sa traumom.

Napomena 6 ─ Plazma ćelije se nalaze u SF kod inflamatorne artropatije. Detekcija plazma ćelija je tipična, posebno, za reumatoidni artritis, odnosno za dugotrajan, trom upalni proces.

Ćelije tkiva u SF.

Sinoviociti.

Ove ćelije pripadaju jednoslojnom spljoštenom epitelu koji prekriva sinovijalne membrane zglobova. Njihova morfologija je identična mezotelnim ćelijama. Sinoviociti su epitelne ćelije prečnika 18-25 mikrona, sa različitim nuklearnim/citoplazmatskim odnosom. Sadrže centralno ili ekscentrično locirane jezgre okruglog ili ovalnog oblika, sitno zgrudane ili petljaste strukture, okružene širokim rubom bazofilne citoplazme, ponekad sa „naborom“ duž periferije. Citoplazma u perinuklearnoj zoni nekih sinoviocita sadrži finu granularnost. Sinoviociti se odbacuju sa površine sinovijalne membrane zgloba i nalaze se u SF tokom artropatije. Sinovijalne ćelije mogu sadržavati 2 ili više jezgara (multinuklearne).

Postoje tri vrste sinoviocita:

tip A – sinoviociti makrofaga sposobni za fagocitozu;

tip B – sinovijalni fibroblasti sposobni za sintezu i izlučivanje hijaluronske kiseline;

tip AB – prelazni oblici ćelija koji kombinuju ova dva svojstva.

Histiociti.

Tkivni makrofagi su ćelije mikronske veličine sa okruglim ili monocitoidnim kompaktnim jezgrom okruženim sitnozrnatom citoplazmom ili citoplazmom bez granula.

Napomena 7 ─ Histiociti su uvijek prisutni u SF tokom inflamatornih procesa.

Napomena 8 ─ U SF se mogu naći multinuklearne ćelije, koje su sinoviociti ili plazma ćelije i imaju isti značaj kao mononuklearne varijante ovih ćelija.

Napomena 9 ─ Detekcija LE ćelija koje sadrže inkluzije homogenizovanog nuklearnog materijala u citoplazmi u SF, za razliku od periferne krvi, nije direktna indikacija SLE. Međutim, kombinacija LE ćelija sa velikim brojem limfocita u SF omogućava nam da sumnjamo da pacijent ima SLE.

Napomena 10 ─ Ćelije u mitozi.

Mitotičke figure nemaju dijagnostičku vrijednost. Sinoviociti u stanju podjele potvrđuju proces proliferacije ćelija koje oblažu zglobnu kapsulu.

Nediferencirane ćelije.

Nediferencirane ćelije su zabilježene u gotovo svim sinoviogramima.

U tankim, dobro napravljenim razmazima tekućine, fiksiranim fiksativima ili fiksatorima za boje i obojenim azurno-eozinom, svi ćelijski elementi su podložni diferencijaciji. Samo u debelim razmazima pripremljenim neiskusnom rukom laboratorijskog asistenta od viskozne, hipercelularne i prethodno nerazrijeđene tekućine nalaze se ćelije koje se ne mogu razlikovati. To mogu biti bilo koji ćelijski elementi - i tkivo i krv. U takvim preparatima je gotovo nemoguće otkriti kristale i mikroorganizme.

4. Registracija rezultata analize sinovijalne tečnosti

Svaki zaposleni u laboratoriji mora koristiti iste formulare (listove s rezultatima testova) za prijavu svojih rezultata. Obrazac mora sadržavati naziv laboratorije i medicinske organizacije; informacije o pacijentu dovoljne za njegovu identifikaciju; naziv biološkog materijala i svi proučavani indikatori; datum prijema uzorka i, ako je potrebno, vrijeme prijema; rezultati istraživanja; referentni intervali; ime i potpis uposlenika koji je izvršio studiju. Postupak izdavanja rezultata mora biti određen uputstvima koje odobrava rukovodilac medicinske organizacije

5. Osiguranje kvaliteta tehnologije analize sinovijalne tekućine

5.1. Programi osiguranja kvaliteta

Programi osiguranja kvaliteta uključuju dosljedno praćenje svakog aspekta procedure kako bi se osiguralo da su dijagnostičke i nadzorne sposobnosti pacijenata dovoljno visoke. Programi osiguranja kvaliteta trebaju uključiti sve faze rada i uspostaviti veze između svih komponenti procesa (pacijent, laboratorij, kliničar). Kontrola je neophodna i u fazama prikupljanja uzoraka, skladištenja, isporuke, ručne obrade, registracije i izdavanja dokumenata. Također je potrebno pratiti tehničku osposobljenost osoblja i kontinuiranu kontinuiranu edukaciju. Za uspješnu provedbu svih kontrolnih aktivnosti potrebno je pridržavati se pravila propisanih standardom GOST R ISO 15189 -2006. .

5.2. Održavanje registracije kontrolnih aktivnosti

Registracija kontrole mora se vršiti na svim nivoima: predanalitičkom, analitičkom i postanalitičkom, za svaku fazu moraju se izraditi i dokumentovati pravila za provođenje svih postupaka.

Za kliničare treba izraditi obrazac zahtjeva za testiranje koji uključuje datum narudžbe i uzimanja uzorka, podatke o identifikaciji pacijenta, dijagnozu, upotrebu lijekova ili dijagnostičke procedure koje mogu utjecati na rezultate testa.

Tehnika prikupljanja uzoraka tečnosti treba biti standardizovana i detaljno opisana u odgovarajućim uputstvima za lekare i medicinske sestre na hirurškom odeljenju koji rade punkcije zglobova.

Uputstva za isporuku uzoraka moraju uključivati ​​uslove i vrijeme skladištenja uzorka i pravila za siguran transport.

Za laboratorijsko osoblje moraju biti definisani kriterijumi za prihvatanje i odbijanje uzoraka, zahtevi za registraciju uzoraka, obradu, obeležavanje i skladištenje uzoraka pre analize. Analitička faza se izvodi u skladu sa istraživačkim metodama. U postanalitičkoj fazi potrebno je razviti pravila za procjenu prihvatljivosti analitičkih rezultata, koja bi trebala uključivati ​​procjenu interferencije lijekova, poređenje rezultata sa referentnim intervalom i provjeru ispravnosti registracije. Obrazac za izdavanje rezultata mora biti odobren od strane ustanove i dogovoren sa medicinskim službama.

5.3. Upute za korištene laboratorijske metode ispitivanja

Metodologija za izvođenje laboratorijskih istraživanja mora biti dokumentovana i dostupna na radnom mjestu. Metodologija mora biti zasnovana na smjernicama ili drugim dokumentima odobrenim na propisan način. Trebalo bi da sadrži kriterijume za prihvatanje ili odbijanje SF uzoraka (dužina vremena skladištenja uzorka nakon sakupljanja i dovoljna količina SF za istraživanje se uzima u obzir); referentni intervali; način evidentiranja rezultata; mjere opreza koje se odnose na biološku opasnost materijala koji se ispituje; razlozi za dobijanje lažno pozitivnih i lažno negativnih rezultata.

5.4. Kontrola kvaliteta mikroskopskih studija.

Prilikom izrade zahtjeva za analitičku pouzdanost vizuelne metode, kao smjernicu treba koristiti rezultate ispitivanja uzoraka biomaterijala koje je izradio istraživač sa velikim iskustvom u vizuelnom pregledu slika, pravilnom otkrivanju i klasifikaciji proučavanih komponenti biomaterijala.

5.5. Kontinuirana edukacija specijalista

Da bi se osigurao kvalitet analize, kvalifikacije osoblja moraju odgovarati složenosti studije koja se izvodi. Svo laboratorijsko osoblje mora periodično (svakih pet godina) da prolazi obuku u ciklusima usavršavanja, koje sprovode medicinske obrazovne ustanove koje imaju odgovarajuću licencu. Svaki specijalista treba da se bavi samoobrazovanjem. Laboratorija mora imati na raspolaganju modernu literaturu za korištenje, uključujući periodiku o laboratorijskoj dijagnostici i atlase. Specijalisti laboratorije moraju učestvovati na konferencijama i seminarima.

6. Zahtjevi za raspored rada i odmora, ishrana i ograničenja pri pripremi bolesnika

Za osoblje koje vrši prikupljanje materijala potrebno je izraditi uputstva koja pored postupka prikupljanja sadrže i uslove za pripremu pacijenta. Posebno je važan uticaj lijekova, na primjer, ubrizgavanje steroidnih hormona u zglob koji može kristalizirati (Dodatak A.2).

7. Troškovi rada za izvođenje tehnologije kliničke laboratorijske analize sinovijalne tekućine

Tabela 1 - Troškovi rada u UET-u za izvođenje tehnologije „Klinička laboratorijska analiza sinovijalne tečnosti“

Servisni kod	Vrsta studija	Troškovi rada u UET-u
Specijalista sa srednjom stručnom spremom	Doktor kliničke laboratorijske dijagnostike, biolog
	Klinička laboratorijska analiza sinovijalne tečnosti
	Registracija (prethodna i konačna: primljeni materijal, podaci o putovnici pacijenta, rezultati istraživanja itd.), ručna ili na računaru.
	Procjena fizičkih svojstava fluida, mjerenje količine
	Određivanje viskoznosti fluida
	Određivanje stvaranja mucinskog ugruška
	Dobivanje SF sedimenta centrifugiranjem i pripremanje preparata iz sedimenta (za mikroskopsko ispitivanje).
	Brojanje ćelijskih elemenata tečnosti u Gorjajevskoj komori
	Mikroskopski pregled nativnog lijeka
	Mikroskopski pregled preparata obojenog azurno-eozinom sa izračunavanjem procenta ćelija.

DODATAK A

(informativno)

Sakupljanje uzoraka tečnosti, uslovi skladištenja i isporuke (predanalitička faza)

A.1 Uvod

Punkciju zgloba izvode kliničari.

Preanalitička faza se izvodi u medicinskom odjelu, a nakon isporuke biomaterijala u laboratoriju - u samoj laboratoriji. Kliničari pripremaju aplikacije za istraživanje. U prijavi se mora navesti puno ime i prezime pacijenta, spol, godine ili godina rođenja, način dobijanja biomaterijala, zglob koji se punkcija, vrijeme punkcije, broj epruveta punjenih SF, nativni i sa K2 EDTA . Klinička dijagnoza i lijekovi koji utiču na analizu moraju biti naznačeni. Nepostojanje dijagnoze ili uzimanja lijekova od strane pacijenta koji utiču na rezultate u redoslijedu mogu dovesti do pogrešne interpretacije dobijenih rezultata i greške u dijagnozi. Sestrinsko osoblje odjeljenja je odgovorno za pripremu pacijenta i hitnu dostavu epruveta sa SF u kliničko-dijagnostičku laboratoriju.

Nastavak preanalitičke faze u laboratoriji sastoji se od prijema i registracije pristiglog biomaterijala, skladištenja po potrebi do istraživanja, obrade i pripreme za istraživanje.

Priprema aplikacije za testove od strane kliničara je veoma važna tačka, jer tačnost dijagnoze u velikoj meri zavisi od pravilno popunjene prijave.

A.2 Priprema pacijenta

Priprema pacijenta za punkciju zgloba treba biti standardizovana.

Steroidi ubrizgani u zglobnu kapsulu mogu se kristalizirati i ometati dijagnozu patološkog procesa ili dovesti do pogrešne dijagnoze, stoga intraartikularnu primjenu steroida treba prekinuti najmanje 5-7 dana prije punkcije zgloba. Ako se injekcije steroida u zglobnu kapsulu ne mogu zaustaviti unaprijed, kliničar treba da zabilježi primjenu ovih lijekova u studijskoj aplikaciji. U prijavi se pored podataka o putovnici pacijenta mora navesti koji zglob je punktiran, broj popunjenih SF epruveta, vrijeme punkcije, te obavezno navesti kliničku dijagnozu, barem na nivou dijagnostičke pretpostavka.

A.3 Skladištenje i isporuka.

Za obavljanje opće analize, tekućina se obično dostavlja u laboratorij odmah nakon punkcije. Provodi se istraživanje nativnog preparata pripremljenog od nestabilizovanog SF radi otkrivanja ragocita i kristala, kao i određivanja citoze. Ispitivanje obojenog razmaza može se obaviti čuvanjem epruvete sa SF, stabilizovanom K2 EDTA, u frižideru na temperaturi od +3- +50C tokom 24 sata.

Dugotrajno skladištenje SF je dozvoljeno na temperaturi od -70°C, ovi uzorci se koriste za biohemijske i imunološke studije.

Napomena ─ Trenutno se specijalne vakuumske cijevi i kontejneri za jednokratnu upotrebu za sakupljanje bioloških tekućina zapremine 100 ml proizvode od nelomljivog materijala bez reagensa, sa K2EDTA ili drugim reagensima.

Bibliografija

1.Zaharova sinovijalna tečnost. U knjizi: Reumatologija. Nacionalne smjernice. Ed. Akademik Ruske akademije medicinskih nauka i akademik Ruske akademije medicinskih nauka. M., „GEOTAR-Media”, 2008, str. 62-66.

2. Uputstvo o mjerama za sprječavanje širenja zaraznih bolesti pri radu u kliničko-dijagnostičkim laboratorijama zdravstvenih ustanova, Moskva, 1991.

3. Pravila za sakupljanje, skladištenje i odlaganje otpada iz zdravstvenih ustanova. SanPiN 2.1.1.728-99., Moskva, 1999.

4. GOST R ISO 52095 -2:2003) Sigurnosni zahtjevi.

5. GOST R 53079.4-2008 Medicinske laboratorijske tehnologije. Osiguravanje kvaliteta kliničkih laboratorijskih pretraga. Dio 4 Pravila za provođenje preanalitičke faze kliničkih laboratorijskih istraživanja.

6. GOST R ISO 15189 -2006 Medicinske laboratorije. Posebni zahtjevi za kvalitetu i kompetentnost.

Projekat standardizovane tehnologije pripremili su:

, (VMA po imenu I.M. Sechenov), (Istraživački institut za reumatologiju Ruske akademije medicinskih nauka), (RMAPO), (Ruski naučno-istraživački centar nazvan po Ruskoj akademiji medicinskih nauka), (poliklinika br. 000, Moskva) .

4292 0

Sinovijalna tečnost ima izuzetnu ulogu u funkcionisanju zglobova i tetiva. Njegovo stvaranje se stalno događa iz plazma tvari i produkata stanica integumentarnog epitela sinovijalnih formacija. Količina SF u različitim zglobovima je različita.

Kod zdrave osobe tečnost je svetlo žute boje, prozirna je, veoma viskozna i sterilna. Do 1/3 njegovog sastava čine proteini, u njemu nema fibrina, ali postoji glukuronska kiselina u obliku kompleksa sa proteinima (mucin). Normalni SF sadrži ćelije sinovijalnog epitela i leukocite, od kojih broj limfocita dostiže 75%, malo neutrofila - 0-25%, sinoviocita - 0-12%.

Nastala zglobna patologija dovodi do gotovo trenutne reakcije sinovijalne membrane, što značajno mijenja sastav tekućine. Za neke vrste patologije mogu se identificirati vrlo karakteristična odstupanja, što se koristi kao važan diferencijalno dijagnostički kriterij. SF se može dobiti za vizuelni i laboratorijski pregled samo punkcijom zgloba ili sinovijalne formacije i artroskopijom.

Nakon prijema tečnost se procenjuje na osnovu količine, boje, prozirnosti, gustine mucinskog ugruška, viskoziteta i ukupne citoze. Po potrebi se vrši pretraga kristala u polarizovanom svetlu, bakterioskopija sa bojenjem po Gramu i mikrobiološka kultura.

Fizička svojstva SF u normalnim uslovima i kod glavnih reumatoidnih procesa prikazana su u tabeli. jedanaest.

Tabela 11. Fizička svojstva sinovijalne tečnosti (Nasonova V.A., Bunchuk N.V., 1997.)

Tabela sažetka nije bez interesa. 12, koji su koristile naše kolege u prošlosti (Astapenko M.G., Pikhlak E.T., 1966).

Tabela 12. Vizuelni i laboratorijski znaci GS kod raznih bolesti

Normalna količina tekućine u različitim sinovijalnim formacijama kreće se od 0,1 ml do 4 ml. Najveći volumen (2-4 ml) dostiže zglob koljena. U većini bolesti zglobova praćenih sinovitisom, količina tekućine se povećava i može doseći nekoliko desetina mililitara.

Sadržaj sinovijalne formacije može biti krv, koja se uočava prilikom ozljede, kao i gnoj.

Boja zglobne tečnosti u normalnim uslovima i kod neinflamatornih bolesti zglobova je svetložuta, boje slame. Kod upalnih bolesti može biti limunasta, ćilibarna, zelenkasta, siva, smeđa, mliječno žuta, bijela, ružičasta.

Transparentnost. Normalni SF je providan; kod neupalnih bolesti može biti providan ili proziran; kod upalnih bolesti može biti umjereno ili intenzivno zamućen.

Viskoznost. Može se odrediti vizualno prema viskoznosti pri sipanju iz štrcaljke u epruvetu ili po dužini mucinske niti na stakalcu. Da biste to učinili, 1-2 kapi puictata se nanose na staklo i povuku u stranu staklenom šipkom. Postoje 3 stepena viskoziteta: niska, kada je dužina konca 1 cm, srednja - do 5 cm, visoka - dužina konca je veća od 5 cm Normalna tečnost ima visoku viskoznost. Viskoznost tečnosti je određena koncentracijom i stepenom polimerizacije hijaluronske kiseline koja se u njoj nalazi. Viskoznost se smanjuje tijekom upalnih procesa zbog smanjenja koncentracije u tekućini i depolimerizacije hijaluronske kiseline.

Mucin test. Kada se sirćetna kiselina doda normalnoj tečnosti, formira se mucinski ugrušak ili sediment. Ako postoji upalna bolest, ugrušak će biti manje veličine, labav ili umjereno labav.

Krv pomiješana. Krv u SF nastaje pri traumatskim povredama zgloba i drugih sinovijalnih formacija, pri ozljedama zgloba kod pacijenata sa hemofilijom, kod vrlo akutnog artritisa bilo kojeg porijekla i kod pigmentiranog villisonodularnog sinovitisa. Dodavanje krvi u SF iz oštećene sinovije iglom za ubijanje je rijetko i samo kada se manipulacije izvode grubo.

Citoza. Ukupan broj ćelija u SF se broji u komori za brojanje. Stanični sastav u normalnom SF predstavljen je ćelijama integumentarnog sloja sinovijalne membrane i leukocitima. Normalno, broj leukocita može biti u rasponu od 200-600 po mm3. Sa blagom upalom dostiže 2000 po mm3, sa teškom upalom - od 2000 do 75 000 po mm3, sa septičkim artritisom - više od 100 000 po mm3. Normalno, limfociti preovlađuju u SF; neutrofili ne prelaze 25%.

To se dešava i kod neupalnih procesa. Sa sinovitisom, broj polimorfonuklearnih neutrofila naglo raste (do 90%).

Ragociti. Ovi ćelijski elementi su odsutni u normalnom SF. Kod upalnih bolesti i seronegativnog spondiloartritisa njihov broj iznosi 2-15% od ukupnog broja ćelija, a kod reumatoidnog artritisa može biti i do 40% i više, što zavisi od jačine lokalne upalne aktivnosti.

Ukupni proteini. Normalno, SF sadrži 15-20 g/l proteina. Kod neupalnog artritisa njegova količina se povećava na 22-37 g/l, kod inflamatornog artritisa do 35-48 g/l, a kod reumatoidnog artritisa i kristalnog sinovitisa može biti i do 70 g/l.

Reumatoidni faktor i C-reaktivni protein. Normalno, RF nije sadržan u SG, a količina SRV nije veća od 0,001 g/l. Kod neupalnih bolesti zglobova i seronegativnog spondiloartritisa, RF se ne otkriva ili se detektuje u titru od 1/20-1/40; kod seronegativnog artritisa njegov titar prelazi 1/40. Upalne bolesti zglobova praćene su povećanjem CRP-a od 0,01 do 0,06 g/l ili više.

Kristali. Oni se ispituju pomoću polarizacione mikroskopije. Pouzdano su identificirani samo kristali urata i kalcijum pirofosfata.

I.A. Reutsky, V.F. Marinin, A.V. Glotov