Puncția articulară și analiza lichidului sinovial. Examenul clinic general al lichidului sinovial Analiza lichidului sinovial unde se face

Examenul citologic al lichidului sinovial (SF) este o analiză simplă care vă permite să aflați despre natura inflamatorie sau neinflamatoare a patologiei pentru orice boală a articulațiilor cu efuziune. În cazul inflamației, analiza face posibilă diagnosticarea unui grup de artropatii metabolice, reprezentate în principal de gută și condrocalcinoză, când microcristalele intraarticulare (MC) provoacă inflamație. Pentru aceste afecțiuni, testarea SF face posibilă efectuarea unui diagnostic rapid, precis și fiabil.

Studiile citologice ale lichidului sinovial sunt ieftine, minim invazive, rapide și accesibile din punct de vedere tehnic. În acest caz, două semne de diagnostic sunt de interes deosebit:

• Prezența unui număr mare de celule este o reflectare adevărată a bolii inflamatorii articulare;
• Prezența sau absența artropatiei microcristaline vă permite să confirmați sau să excludeți artropatia microcristalină în câteva minute și să determinați natura acesteia. Lichidul sinovial este de obicei prezent în cantități foarte mici în fiecare cavitate articulară. Rolul său este dublu: acționează ca un lubrifiant, reducând frecarea dintre suprafețele articulare în timpul mișcării și oferă hrănire țesutului cartilajului, care nu are aport de sânge.

Examenul citologic al lichidului sinovial oferă informații utile despre patologia responsabilă de efuziunea articulară.

• Caracteristicile microcristalelor în SF - informații valoroase în artropatia metabolică
• 500, dar<1500, то считают процентное содержание отдельных типов лейкоцитов, обращая особое внимание на их необычные формы.">Celularitatea și formula populației celulare fac posibilă distingerea a cinci tipuri de SG (Tabelul 1). Acest semn este doar de importanță relativă, dar este valoros pentru clinician.

Tabelul 1 – Diferite tipuri de GS în funcție de citologie

• SF normal este transparent, incolor sau gălbui. Devine mai opac odată cu creșterea celularității.
• Vâscozitatea fluidului este legată de conținutul de acid hialuronic. Este bogat în SF normal sau neinflamator. Vâscozitatea poate fi apreciată cu ușurință prin întinderea unei picături de lichid de răcire între două degete protejate de o mănușă sau capace pentru degete și măsurarea lungimii firului astfel obținut. În toate inflamațiile, vâscozitatea lichidului scade.
• Formarea unui cheag este caracteristică lichidului sinovial patologic. Într-adevăr, SF normal este lipsit de fibrinogen și nu se coagulează. Cu toate acestea, orice SF patologic, mai ales dacă este inflamator, conține fibrină și formează un tromb liber, care înconjoară elementele celulare cu o plasă. Prin urmare, este foarte important să se prevină coagularea lichidului prin utilizarea anticoagulantelor.

Tehnica de examinare citologică a lichidului sinovial

1. Luând SG

Orice volum este suficient pentru analiză, deoarece testul necesită doar o cantitate neglijabilă de probă. În stare proaspătă, o picătură este suficientă pentru analiză. SF este colectat într-un tub steril de plastic. Examenul citologic al lichidului sinovial necesită utilizarea unui anticoagulant. Cea mai bună alegere este heparinat de sodiu; Oxalatul de calciu și heparina de litiu trebuie excluse deoarece conțin MK, care poate fi fagocitată de celulele polimorfonucleare. Din același motiv, particulele precum talcul sau amidonul din mănuși ar trebui evitate.

2. Examen citologic al lichidului sinovial proaspăt

Această etapă a citologiei SG trebuie efectuată cât mai curând posibil după colectare, fără a întârzia o picătură (0,05 ml) de probă vizualizată sub lamelă. Centrifugarea nu este necesară deoarece GC-urile cu celule scăzute sunt rareori patologice. Identificarea MV-urilor este dificilă și necesită un microscop polarizant, eventual cu un compensator și o masă rotativă, ceea ce permite MV-urilor să fie mai ușor de văzut, mai ales dacă sunt puține. În absența unui microscop polarizant, analiza poate fi efectuată cu deschiderea microscopului foarte închisă, atunci când sunt identificate elemente care au un indice de refracție diferit de indicele de refracție al componentelor celulare. Acest studiu poate fi completat prin determinarea numărului de celule din camera lui Goryaev, ceea ce este important pentru determinarea naturii leziunilor articulare (Tabelul 2).

Principalele stări patologice și tipuri de GS

Neinflamator	Inflamator		hemoragii
	Poliartrita reumatoidă	Infecții bacteriene	Traume-fracturi
	Artrita microcristalină	Tuberculoză	Sindromul hemoragic
Osteonecroza	sindromul Reiter		Hemofilie
Osteocondrita disecantă	Reumatism psoriazic		sinovita villezonodulară
Osteocondromatoza	Reumatismul în bolile inflamatorii intestinale		Hemangiom

Dacă examinarea citologică imediată a unei probe de lichid sinovial nu este posibilă, aceasta poate fi amânată până la 24 de ore, cu condiția ca lichidul să fie depozitat la 4°C sau, mai bine, într-un congelator la -20°C. De asemenea, este posibil să pregătiți un frotiu și să îl uscați la aer. K poate fi examinat fie direct, în lumină polarizată, fie după colorarea May-Grunwald-Giams (MGG).

3. Colorare conform MGZ

Rezultatele numărării numărului de celule din SF proaspăt sunt completate de numărarea tipurilor individuale de celule după citocentrifugare, pregătirea frotiului și colorarea pentru MG, ceea ce ne permite să clarificăm natura celulelor prezente în SF.

rezultate

Examenul citologic al lichidului sinovial este un test util pentru clinicieni, deoarece permite ca examinarea să se concentreze pe o anumită patologie dintre multele de care poate suferi pacientul. Pentru leziunile articulare metabolice sau microcristaline, o astfel de analiză este cheia în examinare (Tabelul nr. 3).

Tabelul 3 - Parametrii citologici ai lichidului în artrita microcristalină

Artrita infectioasa

Examenul citologic al lichidului sinovial relevă un număr foarte mare de celule cu predominanță de celule polinucleare, adesea modificate. Dacă infecția este suprimată de antibiotice, atunci numărul de PMN este mai puțin numeros și dovezile de infecție ar trebui să se bazeze pe analiza bacteriologică a SF sau pe examinarea histologică a unei biopsii a sinoviului. Dacă SG este bogat eozinofile, trebuie sa cauti microfilariile.

Boli reumatismale inflamatorii

Din nou, celularitatea este importantă, iar leucocitele polimorfonucleare (PMN) sunt cele mai numeroase. Acest grup de patologii articulare nu are un profil citologic specific care să reflecte reumatismul specific. Dar SG sunt statistic mai inflamatorii în artrita reumatoidă și reactivă (spondiloartrita Fissinger-Leroy-Reuter) decât în ​​poliartrita LES, pelviospondilita reumatică sau artrita psoriazică.

Artrita metabolică sau microcristalină

Pentru acest grup de boli, examinarea citologică a lichidului sinovial este rezonabilă și interesantă. Trebuie menționat că detectarea MK nu elimină infecția și că examinarea bacteriologică rămâne recomandabilă în toate cazurile.

Gută

Guta este întotdeauna asociată cu prezența a nenumărate microorganisme în cavitatea articulară urat monosodic, o formă foarte caracteristică și caracteristici fizice. Acestea sunt MK-uri alungite, în formă de ac, lungime de 5-20 microni, cu un capăt conic care străpunge membranele celulare. Lichidul este de obicei puternic inflamator și bogat în neutrofile (Figura 1).

Cristale foarte mici (1-2 microni) pot fi observate în revărsările asimptomatice între crizele de gută. Acum sunt adesea extracelulare. Acidul uric urat de sodiu este solubil în apă, nu este stocat și nu este detectat în frotiurile colorate cu MGM.

Condrocalcinoza articulațiilor

Această patologie este cauzată de prezența în cartilaj și/sau sinovial a depozitelor de pirofosfat de calciu dihidrat, care în perioada acută provoacă simptome fie de pseudogută, fie de reumatoidă inflamatorie sau de osteoartrită. Cheia diagnosticului – identificarea MK-urilor caracteristice în SF. MK are 5-10 microni lungime, în interiorul leucocitelor, sub formă de paralelipiped drept sau oblic. Birefringența lor este mai mică decât cea a acidului uric. Aceste MC sunt ușor solubile în apă și sunt conservate după colorare folosind MGR. Uneori, analiza lichidului proaspăt sau după colorarea lichidului mamar arată simultan concentrații de urat și pirofosfat. Aceste leziuni articulare mixte nu sunt exclusive.

Boli articulare și fosfați de calciu

Unii pacienți, care suferă adesea de calcificare a coafei rotatorilor, pot dezvolta artropatie distructivă și semne de inflamație a coafei rotatorilor. Simptomele inflamației tractului gastrointestinal sunt asociate cu prezența acidului uric, aparţinând diferitelor forme de fosfat de calciu. Cea mai comună este hidroxiapatita, dar pot fi găsite și fosfat octacalcic și fosfat tricalcic. Lungimea acestor cristale este de 0.l - 0.2 µm, sunt invizibile la microscopul optic.

Alte microcristale

Când se examinează SF proaspăt, alte tipuri de MK sunt uneori identificate, care includ:

• Oxalat de calciu, care poate fi observat la pacienții aflați în hemodializă. Ele formează

MK este uneori piramidal, alteori neregulat ca formă sau tije, care poate fi confundat cu pirofosfat de calciu;

• Colesterol MK sunt mari, dreptunghiulare, plate, adesea cu un colț teșit. Se observă în artrita reumatoidă sau bursita legată de vârstă;
• Derivații de cortizon, care sunt injectați în articulație în scop terapeutic, cristalizează acolo și MK poate persista câteva săptămâni sau luni. Ele pot provoca reale

artrita microcristalină. Forma lor este variabilă și toate sunt birefringente;

• MC Charcot-Leiden sunt rare și pot fi observate în lichidul bogat în eozinofile. Forma lor este asemănătoare unui ac de busolă, slab birefringent.

Concluzie

Examenul citologic al lichidului articular este un test diagnostic valoros, minim invaziv, rapid, accesibil, în care:

Abundența celulelor este o reflectare fidelă a naturii inflamatorii a bolilor articulare,

Prezența sau absența MK ne permite să confirmăm sau să excludem, în câteva minute, artropatia microcristalină și adesea să determinăm natura artropatiei metabolice.

Examenul clinic general (analiza) fluidului articular include determinarea proprietăților fizico-chimice ale fluidului și examinarea microscopică a elementelor celulare.

Caracteristicile macroscopice ale lichidului sinovial (culoarea, gradul de turbiditate și vâscozitatea) sunt evaluate în lumină transmisă. Vâscozitatea este evaluată prin lungimea filamentului de mucină: lungimea filamentului format dintr-o picătură eliberată dintr-o seringă ar trebui să fie în mod normal mai mare de 3 cm Cu inflamație, vâscozitatea scade și, în consecință, lungimea filamentului scade.

Manipularea se efectuează cu pacientul stând cu brațul coborât de-a lungul corpului și întins pe genunchi. Acul se introduce din față, capătul său este îndreptat ușor în jos și lateral, spre procesul coracoid al scapulei; acul se deplasează posterior, spre suprafața articulară a scapulei. De asemenea, se poate perfora articulația umărului printr-un abord posterior.

Pacientul îndoaie brațul la articulația cotului la un unghi de 60°, încheietura mâinii este în poziție pronată. Punctul de introducere a acului este situat pe suprafața laterală a articulației, între epicondilul lateral al humerusului și radius.

Articulația genunchiului și bursele ei periarticulare pot fi perforate cu pacientul în decubit dorsal, cu membrul inferior extins la articulația genunchiului. Un ac, de obicei de 0,8 mm în diametru, este introdus din partea laterală chiar sub marginea caudală a rotulei. Ca alternativă, este posibil să se introducă acul din partea medială, tot sub marginea caudală a rotulei.

Caracteristicile macroscopice fac posibilă în multe cazuri să se facă distincția între efuziunile neinflamatorii, inflamatorii și infecțioase. În plus, poate exista sânge în lichidul articular. Apariția efuziunii sugerează o anumită boală. Așa-numitele revărsări neinflamatorii corespund de fapt proceselor patologice caracterizate prin inflamații ușoare până la moderate, cum ar fi osteoartrita.

Studiile de laborator ale fluidului intraarticular includ numărarea celulelor și evaluarea compoziției lor calitative, examinarea microbiologică (dacă se suspectează un proces infecțios), precum și examinarea microscopică a medicamentului nativ pentru a identifica diferite celule și cristale. Cu toate acestea, alegerea unui anumit test depinde de diagnosticul suspectat.

Indicatori de referință (normali) ai lichidului sinovial

Studiul lichidului sinovial joacă un rol important în clarificarea naturii procesului în articulația afectată.

Indicații pentru puncția articulară: monoartrita de etiologie necunoscută, disconfort în articulația afectată (dacă diagnosticul a fost stabilit), necesitatea monitorizării eficacității tratamentului pentru artrita infecțioasă, pentru diagnosticul diferențial al artritei și artrozei, de la alegerea unui programul pentru examinarea și tratamentul ulterioare al pacientului depinde de aceasta.

În cazul bolilor articulare, este necesar să se supună unei examinări cuprinzătoare pentru a identifica cauza și natura procesului inflamator. Unul dintre cele mai importante teste este studiul lichidului sinovial. Procedura de luare a lichidului pentru analiză este neplăcută, dar studiul este cea mai eficientă modalitate de a face un diagnostic și este necesar pentru elaborarea unui regim de tratament.

Unul dintre cele mai importante teste este studiul lichidului sinovial

Lichidul sinovial, numit adesea lichid articular, acționează ca un lubrifiant între cartilaj. Datorită acestei substanțe, se asigură absorbția șocurilor, reducând forța de impact și sarcina asupra articulațiilor în timpul mișcării. Lichidul sinovial servește în plus ca transport pentru nutrienți care mențin elasticitatea țesutului cartilajului.

În cazul oricăror tulburări în funcționarea articulației și a proceselor inflamatorii, primele modificări afectează lichidul articular. Prin examinarea lichidului sinovial, este posibil să se facă rapid un diagnostic precis în etapele inițiale ale dezvoltării patologiilor articulare.

Indicații pentru analiza lichidului sinovial:

• sindrom de durere;
• activitatea motrică afectată a articulației;
• șchiopătare bruscă;
• rigiditate articulară matinală.

Un studiu al lichidului sinovial este prescris pentru artrita reumatoidă sau dacă se suspectează această boală, sau inflamația capsulei articulare. Acest studiu este necesar pentru a exclude sau a confirma natura bacteriană a procesului inflamator.

Se efectuează o puncție pentru a lua o cantitate mică de lichid pentru analiză. Procedura se desfășoară în două etape. În primul rând, pacientul este dezinfectat temeinic la locul puncției și această zonă este injectată cu un anestezic pentru a elimina durerea. Se folosește doar anestezie locală. Apoi, un ac special, gol în interior, este introdus în cavitatea articulației, cu ajutorul căruia este pompată o cantitate mică de lichid.

Durata întregii proceduri nu este mai mare de 5 minute. Lichidul tras într-o seringă sterilă este trimis imediat la laborator.

Puncția nu poate fi efectuată numai dacă epiderma din jurul zonei de inserare a acului este infectată. În caz de exacerbare a bolilor dermatologice cronice, procedura se amână până la obținerea remisiunii. O puncție a membranei sinoviale pentru a colecta lichidul din articulație nu se face în stare generală severă, care este însoțită de febră sau intoxicație.

Puncția este utilizată simultan ca metodă diagnostică și terapeutică. Când lichidul este colectat din articulație, presiunea în sinoviala scade, ceea ce elimină instantaneu durerea din cauza inflamației. De asemenea, folosind o puncție, pot fi administrate analgezice speciale sau medicamente antiinflamatoare pentru ameliorarea simptomelor artritei.

Evaluarea compoziției lichidului sinovial

Analiza lichidului sinovial ajută la identificarea cauzei disfuncției articulare

Lichidul sinovial dintr-o articulație sănătoasă este un lubrifiant galben deschis, vâscos. Cantitatea sa poate varia de la 1 la 4 ml. În timpul analizei lichidului sinovial al articulației genunchiului, se colectează aproximativ 1 ml de lichid pentru testare.

Analiza include:

• evaluarea vizuală a lichidului și a proprietăților sale fizice;
• determinarea compoziției chimice;
• colorarea frotiului și efectuarea unei examinări microscopice a preparatului rezultat;
• cultura bacteriană a lichidului.

Combinația acestor etape permite o evaluare cuprinzătoare a funcției articulare și identificarea tuturor tulburărilor posibile. Descifrarea examenului citologic al lichidului sinovial ne va permite să înțelegem mai bine semnificația acestuia și posibilele tulburări în compoziția acestuia.

Analiza vizuală a fluidului: normă și patologie

Descifrarea unei analize vizuale a lichidului sinovial ajută la identificarea cauzei disfuncției articulare. Acest lucru este necesar pentru a determina natura inflamatorie sau neinflamatoare a bolii.

Numărul de leucocite este determinat la 1 μl de medicament de testat.

În osteoartrita se observă un proces patologic neinflamator în capsula articulară. Acest rezultat al analizei este, de asemenea, tipic pentru lupusul eritematos sistemic și artroza care se dezvoltă pe fondul leziunilor.

Inflamația articulațiilor este caracteristică artritei reumatoide și gutoase. Aceste boli sunt însoțite de rigiditate la nivelul articulațiilor dimineața, imediat după somn, și dureri severe.

Un proces inflamator septic în articulații se dezvoltă pe fondul infecției cu tuberculoză, gonoree și alte infecții. Se mai numește și inflamație purulentă sau infecțioasă.

Analiza chimica

Elementele celulare sunt evaluate folosind analize chimice

Analiza chimică a lichidului sinovial determină prezența proteinelor, glucozei și acidului uric. În articulațiile sănătoase nu există compuși proteici. Prezența lor indică artrită datorată gutei sau psoriazisului. Cantitatea de proteine ​​este evaluată prin umplerea câmpului vizual al microscopului.

Glucoza din lichidul sinovial indică complicații ale diabetului. Pentru a evita un rezultat fals pozitiv, testul se efectuează dimineața pe stomacul gol. Cu siguranță ar trebui să refuzați să mâncați cu cel puțin 8 ore înainte de puncție.

În inflamația severă, o cantitate semnificativă de glucoză se găsește în lichidul articular, care este prezent în mod normal în articulații în cantități mici.

Acidul uric se găsește în lichidul sinovial doar într-o singură boală - guta. Deoarece artrita gutoasă este însoțită de simptome specifice, determinarea nivelului de acid uric în articulații este un studiu auxiliar, dar nu obligatoriu, pentru acest diagnostic.

Microscopie

Scopul analizei microscopice este de a număra cristalele și elementele celulare din compoziția materialului studiat. Pentru a face acest lucru, proba este plasată la microscop, colorată cu un preparat special și examinată cu atenție. Evaluarea elementelor celulare se realizează vizual.

În mod normal, lichidul nu conține cristale. Motivul formării lor depinde de tipul de compuși cristalini indicați în rezultatele analizei. Cu guta, există o cantitate mare de urat de sodiu. Prezența colesterolului în lichidul articular indică artrită de orice natură, calcificările se găsesc în formele severe de artrită reumatoidă.

Analiza citologică

Analiza citologică evaluează numărul total de celule

Citologia este un minim necesar la examinarea lichidului articular. Pentru a număra celulele, se folosesc de obicei preparate speciale de colorare și echipamente suplimentare, ceea ce vă permite să determinați cu exactitate tipul și numărul de celule modificate. Analiza citologică este mai simplă, deoarece numărul de celule este evaluat vizual, pe baza volumului de umplere a lamei. Această metodă vă permite să determinați numai natura bolii după numărul de leucocite. O creștere a numărului acestor celule indică inflamație.

Analiza citologică evaluează numărul total de celule. În acest caz, analiza ne permite să identificăm natura inflamatorie, neinflamatoare și purulentă a bolii. Cu alte cuvinte, analiza chimică și analiza citologică sunt practic același lucru, doar rezultatele analizei chimice sunt mai detaliate.

Prin colorarea medicamentului și plasarea acestuia într-o centrifugă specială, este posibil să se identifice cristale în lichid. Acest lucru dezvăluie prezența cristalelor în formă de ac și patrulatere.

Boli care pot fi diagnosticate în timpul unei examinări citologice extinse a unui specimen colorat:

• toate tipurile de artrită;
• gută;
• artroza;
• depozite de săruri de calciu în articulații;
• inflamație purulentă și infecțioasă a articulațiilor.

Examenul citologic se efectuează destul de simplu și rapid, ceea ce o face una dintre primele modalități de evaluare a sănătății articulațiilor.

Cultura bacteriană

Dacă analiza microscopică și citologia relevă o inflamație septică, este necesară o cultură bacteriană suplimentară a fluidului articular. Această analiză face posibilă identificarea cu precizie a tipului de agent cauzal al inflamației infecțioase, pe baza căruia poate fi selectat cel mai eficient regim de tratament.

Pentru a efectua analiza, fluidul articular este plasat într-un mediu special umplut cu o soluție nutritivă. În acest mediu, orice microorganisme patogene se maturizează rapid și populația lor crește. Câteva zile mai târziu, tehnicianul de laborator evaluează compoziția lichidului punând o cantitate mică de medicament „coapt” pe o lamă de sticlă sub microscop. Agentul cauzal al bolii va fi acele bacterii sau ciuperci, al căror număr a crescut cât mai mult posibil în timpul șederii lor în mediul nutritiv.

Inflamația purulentă a articulațiilor trebuie tratată cu antibiotice. Cultura bacteriană vă permite să identificați tipul de agent patogen, pe baza căruia medicul poate selecta o terapie antibacteriană eficientă.

În plus, în timpul studiului, bacteriile patogene pot fi analizate pentru sensibilitatea la antibiotice.

Studiul lichidului sinovial plasat într-un mediu nutritiv special durează câteva zile, deoarece agenții patogeni se maturizează destul de lent. De obicei, rezultatele sunt gata în 3-7 zile, dar în unele cazuri poate dura mai mult, până la două săptămâni.

Examene suplimentare

Razele X ale articulațiilor pot exclude deteriorarea țesutului cartilajului.

În ciuda caracterului informativ al analizei, examinarea lichidului articular este prescrisă numai după ce a fost pus un diagnostic preliminar. Pentru durerea articulațiilor și mobilitatea afectată, pacientul este sfătuit în primul rând să se supună următoarelor examinări:

• analize de sânge;
• radiografia articulațiilor;
• RMN și ecografie.

Este necesar un test de sânge pentru factorul reumatoid. Un nivel ridicat al acestei imunoglobuline indică natura autoimună a bolii, care este tipică pentru artrita reumatoidă.

În unele cazuri, inflamația apare în articulație, dar factorul reumatoid nu crește. Un test de sânge general și biochimic va ajuta la determinarea cu exactitate a prezenței unui proces inflamator.

Razele X ale articulațiilor pot exclude deteriorarea țesutului cartilajului. RMN-ul și ultrasunetele relevă implicarea țesuturilor din jur în procesul inflamator și ajută la determinarea prezenței calcificărilor în articulații.

Ce medic ar trebui să mă adresez după ce primesc rezultatele testelor?

În marea majoritate a cazurilor, diagnosticul primar este efectuat de către un medic generalist sau de familie. Acest specialist va trimite pacientul pentru examinări standard - un test de sânge pentru factorul reumatic, radiografie a articulațiilor și un test biochimic de sânge pentru a determina nivelul de acid uric.

Dacă natura inflamatorie a bolii este confirmată, medicul va trimite pacientul la un reumatolog. Acest specialist va selecta regimul de tratament. În plus, testele de laborator specifice pentru bolile articulare pentru a detecta modificări în compoziția lichidului sinovial sunt, de asemenea, prescrise de un reumatolog.

Dacă nu există inflamație, tulburările articulare pot fi asociate cu degenerarea țesutului cartilajului sau cu leziuni anterioare. În acest caz, tratamentul trebuie efectuat de un chirurg ortoped.

Posibile complicații ale puncției

Riscurile depind de profesionalismul medicului și de examinările preliminare

Examenul lichidului sinovial necesită puncția capsulei articulare. Procedura în sine are un minim de contraindicații și nu necesită nicio altă pregătire decât refuzul de a mânca cu 8 ore înainte de test.

Când se efectuează o puncție, se folosesc anestezice, preparate cu iod și antiseptice. După ce ați luat lichidul, aplicați un bandaj sub presiune pe locul puncției, după ce ați tratat în prealabil pielea cu un antiseptic. Un bandaj strâns trebuie purtat toată ziua și apoi înlocuit cu unul largi.

În ciuda simplității sale aparente, înțepătura nu este sigură. În unele cazuri, apar următoarele complicații:

• infecție internă a articulației;
• sângerare atunci când un vas este deteriorat;
• afectarea ligamentelor și afectarea mobilității;
• durere din cauza leziunilor nervoase.

Infecția articulară este o complicație rară. Riscul de infecție crește cu puncția repetată a membranei sinoviale. Sângerarea din cauza deteriorării vaselor de sânge necesită măsuri suplimentare din partea personalului medical, deoarece sângele intră direct în sinovială.

În cazuri izolate, se observă complicații severe, în urma cărora sănătatea se deteriorează și mobilitatea articulară este afectată. Riscurile de complicații depind în mare măsură de profesionalismul medicului și de examinările preliminare.

Tehnologie analitică standardizată pentru analiza clinică de laborator a lichidului sinovial.

1. Scopul studiului

Tehnologia „Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial” este efectuată pentru a diagnostica bolile articulare, precum și pentru a monitoriza evoluția bolii și eficacitatea tratamentului.

Studiul lichidului sinovial este de mare importanță atunci când:

Toți angajații trebuie să respecte instrucțiunile și regulile de siguranță prevăzute în fișele tehnice pentru dispozitivele electrice utilizate în tehnologie (fotometre, microscoape, centrifuge); personalul care lucrează cu reactivi trebuie să fie instruit în manipularea acestora, să folosească echipament individual de protecție și să respecte regulile de igienă personală.

Pentru prevenirea incendiilor este necesar să se respecte regulile de securitate la incendiu în conformitate cu reglementările în vigoare.

Astfel, este necesar să se respecte cu strictețe toate punctele instrucțiunilor de siguranță, siguranță la incendiu și siguranță biologică.

2.3 Condiții de realizare a tehnologiei de analiză clinică de laborator a lichidului sinovial și scop funcțional

Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial se efectuează în laboratoarele de diagnostic clinic ale instituțiilor medicale de specialitate ambulatoriu și internat (centre de reumatologie și artrologie).

Scopul funcțional al serviciului: efectuat în scopul diagnosticării bolilor articulare, monitorizării cursului și progresiei bolii și eficacității tratamentului.

2.4 Resurse materiale necesare implementării tehnologiei: instrumente, instrumente de măsură, echipamente de laborator

2.4.1. Microscop binocular cu imersie și iluminator încorporat.

2.4.2.Microscop polarizant.

2.4.3. Centrifugă de laborator (răcită: 5-8 oC).

Pentru prepararea sedimentului de lichid sinovial, trebuie utilizate centrifuge capabile de 1000 rpm. Când utilizați o centrifugă, trebuie să urmați cu strictețe instrucțiunile producătorului.

2.4.4. Contracalculator pentru calcularea formulei leucocitelor din sânge (pentru calcularea sinoviocitogramei).

2.4.5. Raft pentru eprubete.

2.4.6. Recipiente și cuve pentru colorarea și fixarea frotiurilor.

2.4.7. Dispozitiv pentru uscarea frotiurilor.

2.4.8. Produse din sticla (plastic).

2.4.8.1. Tuburi de centrifuga (10 ml).

Pentru studiul macroscopic al SF, este mai bine să folosiți tuburi transparente de sticlă. Pentru centrifugarea fluidului se folosesc tuburi de centrifuga din plastic, care trebuie sa aiba forma conica pentru a concentra sedimentul, sa fie gradate pentru a determina cantitatea de lichid sinovial obtinuta in timpul punctiei articulare si sa fie inchise cu capace pentru a reduce riscul de stropire. Tuburile trebuie să fie pure din punct de vedere chimic și etichetate pentru identificarea corectă a pacientului. Este posibilă utilizarea tuburilor cu vid.

2.4.8.2. Camera lui Goryaev.

2.4.8.3. Ochelari și lame de acoperire pentru microscopia preparatelor native.

Sticlă glisică (de preferință cu un câmp matat pentru marcare, dimensiune 26 x 76 x 1,1 mm) pentru microscopia unui specimen colorat.

O lamă de sticlă cu marginea lustruită (dimensiune 26 x 76 x 1,1 mm) sau o spatulă de plastic pentru pregătirea unui frotiu.

2.4.8.4. Pipete pentru transferul lichidului sinovial. În prezent, se folosesc pipete Pasteur din plastic cu un capăt trasat fin și un balon, concepute pentru a standardiza volumul picăturii de sediment și a reduce riscul de risc biologic asociat cu resuspendarea sau transferul lichidului sinovial. Acestea trebuie să fie uscate și curate chimic.

2.4.8.5 Tije de sticlă.

2.5 Reactivi

2.5.1 Soluții de fixative și coloranți și alți reactivi necesari pentru prepararea frotiurilor colorate (vezi GOST R Examinarea citologică a punctatului de măduvă osoasă);

2.5.2 soluție de acid acetic 5%;

2.5.3 EDTA (sare de dicotasiu sau disodic).

2.5.4. Soluție roșu alizarina 2%.

2.6 Alte consumabile

2.6.1. Manusi de cauciuc.

2.6.2. Dezinfectante.

3. Caracteristicile tehnicii de realizare a tehnologiei de studiere a lichidului sinovial

3.1 Obținerea probelor de lichid sinovial

Pentru a efectua corect etapa preanalitică, este necesar să se respecte cerințele standardului GOST R 53079.4-2008. .

Puncția articulară este efectuată de un clinician.

Regulile pentru depozitarea și transportul probelor de lichid sinovial sunt stabilite în

Anexa A.

În timpul puncției articulare, lichidul lichid este colectat în tuburi de centrifugă sterile (2-3 sau mai multe, în funcție de cantitatea de lichid fluid obținut) și transferat imediat la un laborator de diagnostic clinic. Unul dintre tuburi (sau mai multe, în funcție de numărul de tuburi primite) este trimis la laboratorul de microbiologie (departamentul) pentru studii microbiologice, iar restul sunt folosite pentru cercetarea clinică de laborator a SF (determinarea proprietăților fizico-chimice și examinarea microscopică a nativului). și preparate colorate cu azur-eozină cu calculul sinoviocitogramei, numărarea elementelor celulare în 1 μl (citoză), precum și efectuarea de studii biochimice și imunologice în supernatant după centrifugarea lichidului sedimentul este folosit pentru a căuta cristale în preparatul nativ folosind un microscop polarizant, precum și pentru a număra o sinoviocitogramă într-un frotiu colorat. EDTA), sunt disponibile tuburi speciale de vid cu K2EDTA care pot fi utilizate pentru colectarea fluidului.

Dacă există indicații adecvate (suspiciune de prezență a celulelor neoplazice), frotiul colorat este trimis la laboratorul de citologie.

3.2 Identificarea probei

În trimiterea pentru studiu trebuie incluse următoarele informații: numele și parafa pacientului, vârsta sau data nașterii, sexul, secția instituției medicale și secția (în spital), numărul de fișă medicală (numărul de identificare), diagnosticul, data și ora recoltării probei de lichid sinovial, ora predării probei la laborator. Toți indicatorii care trebuie determinați trebuie să fie enumerați. Dacă este necesar, indicați medicamentele administrate în articulația perforată.

Probele neetichetate sau incorect etichetate nu sunt potrivite pentru testare și trebuie notificate clinicianului care a comandat testul.

3.3 Acceptabilitatea eșantionului

Deoarece acuratețea rezultatelor studiului lichidului sinovial depinde în mare măsură de calitatea probei livrate, este necesar să se respecte cu strictețe regulile de depozitare și transport a lichidului sinovial (Anexa A).

După livrarea unei probe de lichid sinovial la laborator, angajatul laboratorului care primește materialul trebuie să verifice corectitudinea trimiterii pentru analiză, etichetarea sticlariei (codul sau prenumele pacientului și celelalte date trebuie să fie identice cu datele specificate în formular de trimitere) și înregistrați materialul primit.

Lichidul sinovial colectat într-o eprubetă cu K2 EDTA trebuie examinat în 30 de minute și atunci când este păstrat la frigider (temperatura 3-50C) - nu mai târziu de 24 de ore (numai pentru examinarea frotiurilor colorate).

Notă ─ Depozitarea pe termen lung a supernatantului SF este permisă la o temperatură de -70°C pentru studii biochimice și imunologice.

Întârzierea analizei și utilizarea refrigerației probelor sunt notate pe formularul de răspuns.

Înainte de testare, probele trebuie aduse la temperatura camerei.

3.4 Evaluarea macroscopică și studiul proprietăților fizico-chimice ale lichidului sinovial

3.4.1 Cantitatea de lichid sinovial variază în mod normal de la 0,2 la 2,0 ml (în funcție de dimensiunea articulației). Pentru diferite boli articulare, cantitatea de lichid poate ajunge la 100 ml sau mai mult.

3.4.2. Culoarea lichidului sinovial.

Culoarea normală a lichidului sinovial este galben deschis.

Notă ─Culoarea galben deschis sau galben a lichidului sinovial se observă în bolile degenerative ale articulațiilor; sângeroase – cu artrită traumatică; bolile inflamatorii ale articulatiilor (artrita reumatoida (AR), artrita reactiva (ReA), spondilita anchilozanta, artrita psoriazica) se caracterizeaza prin diferite nuante de galben si maro (galben deschis, galben, lamaie, maro deschis, maro, chihlimbar sau portocaliu) ; cu gută, se observă o culoare galben deschis, galben-verzui, alb-lăptos, galben-laptos, alb-roz a lichidului; pentru artrita pirofosfatică și condrocalcinoză - galbenă sau galben lăptos, pentru artrita septică - galben-cenușiu, galben-verzui sau sângeroasă.

3.4.3. Transparența lichidului sinovial.

Lichidul sinovial normal este complet transparent. Turul este cauzat de obicei de o creștere a numărului de elemente celulare, de prezența cristalelor sau a microorganismelor.

Evaluarea transparenței.

Există 4 grade de transparență: transparent, translucid, moderat tulbure și intens tulbure.

Notă – în cazul bolilor degenerative ale articulațiilor (osteoartrita), lichidul articular este transparent și translucid; pentru boli inflamatorii (AR, artrită seronegativă, gută, artrită pirofosfatică) - translucide, moderat tulbure sau intens tulbure; pentru artrita septică – intens tulbure, groasă.

3.4.4. Prezența sedimentului.

În mod normal, nu există sedimente în fluid. Apare numai în patologie și, de regulă, constă din fragmente de membrane celulare, fire de fibrină, fragmente de țesut formate ca urmare a distrugerii cartilajului și membranei sinoviale, precum și cristale.

Notă ─ În bolile degenerative ale articulațiilor, în SF se găsește un depozit amorf de amiloidoză. În bolile inflamatorii ale articulațiilor, sedimentul este aproape întotdeauna găsit. La SF a pacienților cu RA, mai ales la copiii cu RA juvenilă, se poate observa un sediment granular asemănător boabelor de orez sau „corpilor de orez”, format din fragmente microscopice de sinoviu necrotic bogat în fibrină. Un astfel de sediment poate fi un indicator al activității inflamatorii ridicate a procesului.

3.4.5. Viscozitate

Cea mai importantă caracteristică a SF, care îl deosebește de alte fluide biologice, este prezența acidului hialuronic, un polimer cu greutate moleculară mare. Este acidul hialuronic, având o vâscozitate ridicată, care asigură în principal îndeplinirea principalelor funcții ale fluidului. Există o relație directă între conținutul, greutatea moleculară a acidului hialuronic și vâscozitatea fluidului.

Metode de determinare a vâscozității.

Caracteristicile cantitative ale vâscozității fluidului sunt determinate cu ajutorul unui viscozimetru.

În studiile de rutină, metoda baghetei de sticlă este de obicei utilizată:

o tijă de sticlă este coborâtă în fluid și apoi îndepărtată. Vâscozitatea se evaluează prin lungimea filamentelor de mucină se disting trei grade de vâscozitate:

când lungimea firului este peste 5 cm - vâscozitatea este mare, până la 5 cm - medie, mai mică de 1 cm - scăzută.

Este posibilă exprimarea vâscozității în unități punctuale: 1 - mare, 2 - medie, 3 - scăzută. În mod normal, vâscozitatea lichidului de răcire este mare.

Intensitatea vâscozității depinde de concentrația cristalelor, de gradul de polimerizare a acidului hialuronic și de temperatură.

Notă ─ Utilizarea metodelor instrumentale care utilizează diferite viscozimetre necesită (pe lângă disponibilitatea dispozitivului) o serie de operații suplimentare și, prin urmare, o investiție semnificativă de timp, fără a furniza informații fundamental noi în comparație cu testele de laborator accesibile.

4.4.6. Determinarea densității unui cheag de mucină în lichidul sinovial.

Acidul hialuronic din SF există într-un complex cu proteine ​​cunoscut sub numele de mucină. Determinarea unui cheag de mucină este de mare importanță diagnostică în bolile inflamatorii. Testul pentru mucină în lichidul sinovial se corelează bine cu vâscozitatea.

Metode pentru studierea densității unui cheag de mucină.

Principiul metodei: atunci când SG este expus la acid acetic, se formează un cheag de mucină.

Progres de determinare:

O picătură de SG se adaugă într-o eprubetă care conține 3 ml de soluție 5% de acid acetic (CH3COOH). Agitați energic conținutul eprubetei timp de 1 minut, se formează un precipitat. Există 4 grade de densitate a sedimentelor: dens (sedimentul arată ca un bulgăre dens), moderat dens (aspectul unei structuri ramificate, dar nu dezintegrat), moderat liber și liber - într-o măsură mai mare sau mai mică se dezintegrează în particule mici. Formarea unui cheag dens de mucină indică un conținut semnificativ de mucină.

În mod normal, sedimentul este dens.

Nota 1 ─ În artropatia neinflamatoare, cheagul de mucină este de obicei dens sau moderat dens. În bolile inflamatorii ale articulațiilor, este moderat laxat.

Nota 2 ─ Determinarea vâscozității și a densității cheagului de mucină este importantă pentru diferențierea naturii „neinflamatorii” și inflamatorii a procesului în articulație. Aceste metode se pot controla reciproc: indicatorii unei metode corespund strict cu indicatorii celeilalte. Vâscozitatea ridicată corespunde unui cheag de mucină dens, mediu – moderat, scăzut – moderat slăbit și liber.

3.5 Examinarea microscopică a lichidului sinovial

3.5.1 Cerințe pentru o probă de lichid sinovial pentru examinarea microscopică.

Înainte de a efectua un examen microscopic, medicul trebuie să aibă informații despre momentul obținerii lichidului sinovial și rezultatele evaluării proprietăților fizico-chimice.

În prezent, pentru colectarea fluidelor biologice sunt produse tuburi vid care conțin un anticoagulant (K2EDTA), care este, de asemenea, un conservant pentru elementele celulare și nu afectează morfologia acestora.

Nota 1─ Lichidul sinovial stabilizat cu K2EDTA nu poate fi utilizat pentru detectarea ragocitelor.

Se efectuează trei tipuri de examinare microscopică:

numărarea celulelor în lichidul sinovial nativ în camera Goryaev (citoză), studiul medicamentului nativ și al medicamentului colorat cu azur-eozină cu calculul sinoviocitogramei.

3.5.2 Numărarea numărului de elemente celulare în 1 μl de lichid sinovial în camera Goryaev (determinarea citozei).

Progresul cercetării:

Studiul este efectuat în lichidul sinovial nativ sau stabilizat cu K2EDTA.

Se toarnă 0,4 ml de soluție izotonă sau hipotonă de NaCI într-o eprubetă.

Se filtrează suspensia și se păstrează la frigider într-o sticlă de sticlă închisă la culoare. Imediat înainte de testare, filtrați cantitatea necesară de vopsea printr-un filtru millipore.

Se amestecă 20 µl de vopsea cu un volum egal de fluid sau sediment obținut după centrifugare. Este mai bine să pregătiți un preparat nativ și să îl microscopați într-un microscop polarizant: cristalele sunt de formă ovoidă, cu diametrul de 2-3 microni, de culoare roșie bogată cu un halou roz.

Nota 4 ─ Aceste cristale se găsesc în artropatia cu hidroxiapatită.

În lichidul sinovial se găsesc și cristale de oxalat de calciu, colesterol, lipide, Charcot-Leyden etc.

Nota 5 ─ Cristalele de oxalat de calciu (C2CaO4 · H2O) au de obicei o formă cubică, dar pot forma cristale incolore, strălucitoare, foarte refractante, de diferite dimensiuni, sub formă de octaedre sau dreptunghiuri, care amintesc de plicurile poștale. Uneori există cristale de oxalat de calciu de formă rotunjită și cu o interceptare, asemănătoare cu o clepsidră, greutăți de gimnastică sau arcuri (C2CaO4 2H2O). Aceste cristale pot fi fagocitate de către leucocite polimorfonucleare (neutrofile).

Nota 6 ─ Cristalele lichide de lipide sunt prezentate pe un câmp întunecat sub formă de cruci negre malteze, împărțind fiecare picătură de lipide în patru segmente albe strălucitoare. Picăturile de grăsime neutră nu au efect de refracție bidirecțională a luminii.

Colesterolul, cristalele de oxalat de sodiu și cristalele lichide lipide nu sunt specifice unei anumite boli ale articulațiilor și pot apărea într-o varietate de artropatii, reflectând tulburări metabolice.

Nota 7 ─ Nodulii de amiloid se găsesc în SF. Acestea sunt formațiuni incolore de formă rotundă, o structură stratificată, care amintește de un copac tăiat, cu o strălucire caracteristică. Ele sunt identificate în preparate native la mărire x400, precum și cu imersie la mărire x1000. Amiloidul poate fi detectat în SF nativ colorat cu roșu Congo. Preparatul rezultat poate fi vizualizat atât la microscop luminos, cât și la un microscop polarizant.

Nodulii de amiloid se gasesc in bolile insotite de artropatia amiloida.

Cristale de hematoidină.

Cristalele de hematoidină se formează în timpul descompunerii hemoglobinei în hematoame fără acces la oxigen. Acestea sunt diamante ușor alungite și/sau ace galben-aurii. Cristalele de hematoidină sunt clar vizibile atât în ​​preparatele native, cât și în preparatele colorate cu azur-eozină. Deoarece aceste cristale sunt de obicei destul de mici în SF, se recomandă microscopizarea preparatelor native sub imersie. La locul inflamației, aceste cristale pot fi fagocitate de macrofage sau situate pe suprafața elementelor celulare.

Nota 8 ─ În caz de leziune și sângerare intraarticulară, în cavitatea articulară se creează condiții în care se pot forma cristale de hematoidină.

Cristale Charcot-Leyden.

Cristalele Charcot-Leyden au forma unui ac de busolă sau a unui romb alungit ascuțit. De obicei, cristalele Charcot-Leyden sunt situate pe fondul detritusului sau în combinație cu un număr mare de eozinofile și se formează în timpul descompunerii eozinofilelor din granularitatea eozinofilă, aceste cristale pot fi găsite în SF la pacienții care suferă de sinovită alergică.

Cristale medicinale

Steroizi. Injecțiile intraarticulare cu medicamente steroizi duc la cristalizarea acestora în interiorul articulațiilor, unde pot persista până la 10 săptămâni. Detectarea acestor cristale în timpul examinării microscopice a preparatelor native și diferențierea incorectă ulterioară poate duce la concluzii eronate.

Elemente necelulare și necristaline din fluid.

Fragmente de cartilaj și ligamente deteriorate pot fi găsite în SF. Fragmentele de cartilaj din preparatul nativ pot fi recunoscute după strălucirea lor mătăsoasă caracteristică. Se găsesc și fragmente de cartilaj care conțin grupuri de condrocite și fragmente de menisc, care sunt reprezentate de fibre ondulate de colagen și, de asemenea, condrocite; fragmentele de ligamente sunt reprezentate de fibrile lungi și subțiri și fire paralele de colagen

Nota 9 ─ Apar cel mai des în SG după o leziune a articulației genunchiului.

Nota 10 ─ În ciuda sensibilității ridicate a metodei de microscopie de polarizare, sunt posibile erori grave la utilizarea acesteia, care apar de obicei din cauza rezoluției insuficient de ridicate a unui anumit microscop, prezența impurităților asemănătoare cristalelor străine și deteriorarea obiectului sau a capacului. sticlă Microscopistul trebuie să fie conștient de posibilitatea de interferență și să aibă o bună înțelegere a principiilor recunoașterii cristalelor.

3.5.5. Examinarea microscopică a preparatelor de lichid sinovial colorate cu azur-eozină (cu calculul sinoviocitogramei).

Pregătirea frotiurilor fluide și metodele de colorare a acestora (secțiunea 5.5.2).

Compoziția celulară a lichidului sinovial (sinoviocitograma).

Determinarea compoziției celulare a GS este cea mai importantă etapă a studiului său, ceea ce face posibilă clarificarea diagnosticului, determinarea gradului de activitate inflamatorie a procesului și prognosticul. Determinarea distribuției cantitative a celulelor (sinoviocitograma) este cel mai important indicator pentru diagnosticul diferențial al bolilor articulare. Calculul procentului de celule se efectuează în același mod ca și calculul formulei leucocitelor din sânge. (numărați 100 de celule într-un frotiu și calculați procentul fiecărui tip de celulă).

În mod normal, celulele de origine tisulară (sinoviocite și histiocite) predomină în SF – până la 65%. Limfocitele reprezintă aproximativ 30%, iar monocitele și neutrofilele - 1-2%.

Celulele sanguine din SF.

Neutrofile (leucocite polimorfonucleare).

Neutrofilele sunt de 1,5-2 ori mai mari decât un globule roșii în diametru (14-16 microni). Raportul dintre nucleu și citoplasmă este deplasat spre nucleu. Citoplasma este de culoare liliac, umplută cu granule mici, asemănătoare prafului, care au culoarea nucleului celular. Nucleii constau din 3-4 segmente, cu o diviziune clară în oxi- și bazicromatină. Cu distrofie, numărul de segmente în neutrofile crește brusc la 5-7 (hipersegmentare). În timpul apoptozei într-un neutrofil, fragmentele nucleare se contopesc în una sau două mase hipercromatice omogene, fără structură, de formă rotundă obișnuită.

În SF normal, numărul de neutrofile nu depășește 1-2%.

Nota 1 ─ În artrita reumatoidă, conținutul de neutrofile ajunge la 90%, iar numărul de limfocite scade la 10%. O imagine similară se observă în spondilita anchilozantă. În bolile inflamatorii și sângerările intra-articulare, neutrofilele reprezintă 60-80% din formula SF, iar în artropatia septică - mai mult de 95%.

Limfocite.

Acestea sunt celule de până la 12 microni în diametru. Raportul dintre citoplasmă și nucleu este deplasat către nucleu (9: 1). Nucleul are o structură aproximativ aglomerată;

În SF normal, numărul de limfocite variază de la 8 la 30%.

Nota 2 ─ În bolile inflamatorii predomină neutrofilele, iar în bolile degenerative predomină limfocitele. În bolile degenerative ale articulațiilor și artrita traumatică, conținutul de limfocite în SF ajunge la 85%. Limfocitele predomină în formulă și în sinovita toxico-alergică și forma sinovială a tuberculozei. În artrita de etiologie virală, de exemplu cauzată de virusul HTLV-1, apar limfocite atipice, al căror număr ajunge la 20%.

Monocite.

Nota 3 ─ Monocitele se găsesc în diferite artropatii articulare, inclusiv artrita virală și artrita monocitară, precum și deteriorarea protezelor implantare.

Pe lângă aceste celule, în SF (în patologie) pot fi găsite și alte celule sanguine în cantități mici: eozinofile, bazofile, plasmocite.

Nota 4 Eozinofilele sunt extrem de rare în SF și sunt identice cu eozinofilele din sângele periferic.

Nota 5: Bazofilele se găsesc în cantități mici în artrita inflamatorie, artropatia seronegativă și artropatia neinflamatoare asociată cu traumatisme.

Nota 6 ─ Celulele plasmatice se găsesc în SF în artropatia inflamatorie. Detectarea celulelor plasmatice este tipică, în special, pentru artrita reumatoidă, adică pentru un proces inflamator lent, pe termen lung.

Celulele tisulare din SF.

sinoviocite.

Aceste celule aparțin epiteliului aplatizat cu un singur strat care acoperă membranele sinoviale ale articulațiilor. Morfologia lor este identică cu celulele mezoteliale. Sinoviocitele sunt celule epiteliale cu un diametru de 18-25 microni, cu un raport nuclear/citoplasmatic diferit. Conțin nuclei localizați central sau excentric, de formă rotundă sau ovală, cu structură mic-buloasă sau buclă, înconjurate de o margine largă de citoplasmă bazofilă, uneori cu un „volan” de-a lungul periferiei. Citoplasma din zona perinucleara a unor sinoviocite contine granularitate fina. Sinoviocitele sunt respinse de pe suprafața membranei sinoviale a articulației și se găsesc în SF în timpul artropatiei. Celulele sinoviale pot conține 2 sau mai mulți nuclei (multinucleare).

Există trei tipuri de sinoviocite:

tip A – sinoviocite macrofage capabile de fagocitoză;

tip B – fibroblaste sinoviale capabile de sinteză și secreție de acid hialuronic;

tip AB – forme de tranziție ale celulelor care combină aceste două proprietăți.

Histiocite.

Macrofagele tisulare sunt celule de dimensiunea unui microni, cu un nucleu compact rotund sau monocitoid, înconjurate de citoplasmă cu granulație fină sau fără granulare.

Nota 7 ─ Histiocitele sunt întotdeauna prezente în SF în timpul proceselor inflamatorii.

Nota 8 ─ În SF se pot găsi celule multinucleate, care sunt sinoviocite sau plasmocite și au aceeași semnificație ca și variantele mononucleare ale acestor celule.

Nota 9 ─ Detectarea celulelor LE care conțin incluziuni de material nuclear omogenizat în citoplasmă din SF, spre deosebire de sângele periferic, nu este o indicație directă a LES. Cu toate acestea, combinația de celule LE cu un număr mare de limfocite în SF ne permite să bănuim că pacientul are LES.

Nota 10 ─ Celulele în mitoză.

Cifrele mitotice nu au valoare diagnostică. Sinoviocitele aflate în stare de diviziune confirmă procesul de proliferare a celulelor care căptușesc capsula articulară.

Celulele nediferențiate.

Celulele nediferențiate sunt notate în aproape toate sinoviogramele.

În pete subțiri, bine făcute de fluid, fixate cu fixative sau coloranți-fixative și colorate cu azur-eozină, toate elementele celulare sunt susceptibile de diferențiere. Numai în frotiurile groase pregătite de mâna neexperimentată a unui asistent de laborator din lichid vâscos, hipercelular și nediluat anterior se găsesc celule care nu pot fi diferențiate. Acestea pot fi orice elemente celulare - atât țesut, cât și sânge. Este aproape imposibil să se detecteze cristale și microorganisme în astfel de preparate.

4. Înregistrarea rezultatelor analizei lichidului sinovial

Fiecare angajat al laboratorului trebuie să folosească aceleași formulare (fișe de rezultate ale testelor) pentru a-și raporta rezultatele. Formularul trebuie să conțină numele laboratorului și al organizației medicale; informații despre pacient suficiente pentru a-l identifica; denumirea materialului biologic și toți parametrii studiați; data primirii probei și, dacă este necesar, ora primirii; rezultatele cercetării; intervale de referință; numele si semnatura angajatului care a efectuat studiul. Procedura de eliberare a rezultatelor trebuie stabilită prin instrucțiuni aprobate de șeful organizației medicale

5. Asigurarea calității tehnologiei de analiză a lichidului sinovial

5.1. Programe de asigurare a calității

Programele de asigurare a calității includ monitorizarea consecventă a fiecărui aspect al procedurii pentru a se asigura că capabilitățile de diagnosticare și monitorizare ale pacientului sunt suficient de ridicate. Programele de asigurare a calității ar trebui să includă toate etapele de lucru și să stabilească legături între toate componentele procesului (pacient, laborator, clinician). Controlul este, de asemenea, necesar în etapele de colectare a probelor, depozitare, livrare, prelucrare manuală, înregistrare și eliberare a documentelor. De asemenea, trebuie monitorizate competența tehnică a personalului și formarea continuă continuă. Pentru implementarea cu succes a tuturor activităților de control, este necesar să se respecte regulile stabilite în standardul GOST R ISO 15189 -2006. .

5.2. Mentinerea inregistrarii activitatilor de control

Înregistrarea controlului trebuie efectuată la toate nivelurile: pre-analitic, analitic și post-analitic pentru fiecare etapă, trebuie elaborate și documentate reguli de desfășurare a tuturor procedurilor;

Ar trebui dezvoltat un formular de cerere de testare pentru clinicieni, care să includă data comenzii și colectarea probei, informații de identificare a pacientului, diagnostic, utilizarea medicamentelor sau proceduri de diagnosticare care pot afecta rezultatele testului.

Tehnica de recoltare a probelor de fluide ar trebui să fie standardizată și descrisă în detaliu în instrucțiunile adecvate pentru medicii și asistentele din secția de chirurgie care efectuează puncția articulară.

Instrucțiunile de livrare a probei trebuie să includă condițiile și momentul depozitării probei și regulile pentru transportul în siguranță.

Pentru personalul de laborator, trebuie definite criteriile de acceptare și refuzare a probelor, cerințele pentru înregistrarea probelor, prelucrarea, etichetarea și depozitarea probelor înainte de analiză. Etapa analitică se desfășoară în conformitate cu metodele de cercetare. În etapa post-analitică, este necesar să se elaboreze reguli pentru evaluarea acceptabilității rezultatelor analitice, care ar trebui să includă evaluarea interferenței medicamentelor, compararea rezultatelor cu intervalul de referință și verificarea corectitudinii înregistrării. Formularul de eliberare a rezultatelor trebuie să fie aprobat de instituție și convenit cu secțiile medicale.

5.3. Instrucțiuni pentru metodele de testare de laborator utilizate

Metodologia de efectuare a cercetărilor de laborator trebuie să fie documentată și să fie disponibilă la locul de muncă. Metodologia trebuie să se bazeze pe linii directoare sau alte documente aprobate în modul prescris. Ar trebui să includă criterii de acceptare sau respingere a probelor de SF (se ia în considerare perioada de timp în care proba este păstrată după colectare și o cantitate suficientă de SF pentru studiu); intervale de referință; metoda de înregistrare a rezultatelor; precauții legate de pericolul biologic al materialului testat; motive pentru obținerea rezultatelor fals pozitive și fals negative.

5.4. Controlul calității studiilor microscopice.

La elaborarea cerințelor pentru fiabilitatea analitică a unei metode vizuale, rezultatele examinării probelor de biomateriale produse de un cercetător cu experiență vastă în examinarea vizuală a imaginilor, detectarea corectă și clasificarea componentelor studiate ale biomaterialelor ar trebui să fie utilizate ca ghid.

5.5. Formarea continuă a specialiștilor

Pentru a asigura calitatea analizei, calificările personalului trebuie să corespundă complexității studiului efectuat. Tot personalul de laborator trebuie să se supună periodic (la fiecare cinci ani) pregătire în cicluri de perfecţionare, care sunt conduse de instituţiile de învăţământ medical care deţin licenţa corespunzătoare. Fiecare specialist ar trebui să se angajeze în auto-educare. Laboratorul trebuie să aibă la dispoziție literatură modernă pentru utilizare, inclusiv periodice despre diagnostice de laborator și atlasuri. Specialiștii de laborator trebuie să participe la conferințe și seminarii.

6. Cerințe pentru programul de muncă și odihnă, regim alimentar și restricții la pregătirea pacientului

Pentru personalul care efectuează colectarea materialelor trebuie elaborate instrucțiuni care să cuprindă, pe lângă procedura de colectare, condițiile de pregătire a pacientului. Influența medicamentelor este deosebit de importantă, de exemplu, injectarea de hormoni steroizi în articulație, care se poate cristaliza (Anexa A.2).

7. Costuri cu forța de muncă pentru realizarea tehnologiei de analiză clinică de laborator a lichidului sinovial

Tabel 1 - Costuri cu forța de muncă în UET pentru realizarea tehnologiei „Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial”

Cod de serviciu	Tip de studiu	Costurile cu forța de muncă în UET
Specialist cu studii medii	medic diagnostic laborator clinic, biolog
	Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial
	Înregistrare (preliminar și final: material primit, date pașaport pacient, rezultate cercetări etc.), manual sau pe computer.
	Evaluarea proprietăților fizice ale fluidului, măsurarea cantității
	Determinarea vâscozității fluidului
	Determinarea formării cheagurilor de mucină
	Obținerea sedimentului SF prin centrifugare și pregătirea preparatelor din sediment (pentru examinare microscopică).
	Numărarea elementelor celulare ale fluidului din camera Goryaev
	Examinarea microscopică a medicamentului nativ
	Examinarea microscopică a unui preparat colorat cu azur-eozină cu calculul procentului de celule.

ANEXA A

(informativ)

Colectarea probelor de fluide, condițiile de depozitare și livrare (etapa pre-analitică)

A.1 Introducere

Puncția articulară este efectuată de medici.

Etapa preanalitică se desfășoară în departamentul medical și după livrarea biomaterialului la laborator - în laboratorul propriu-zis. Clinicienii pregătesc aplicații de cercetare. Cererea trebuie să indice numele complet al pacientului, sexul, vârsta sau anul nașterii, să indice metoda de obținere a biomaterialului, articulația care este supusă puncției, momentul puncției, numărul de tuburi umplute cu SF, nativ și cu K2 EDTA. . Trebuie indicate diagnosticul clinic și medicamentele care afectează analiza. Absența unui diagnostic sau a medicamentelor luate de pacient care afectează rezultatele în ordine poate duce la interpretarea incorectă a rezultatelor obținute și la o eroare de diagnostic. Personalul de asistenta al sectiei este responsabil de pregatirea pacientului si livrarea urgenta a eprubetelor cu SF la laboratorul de diagnostic clinic.

Continuarea etapei preanalitice în laborator constă în primirea și înregistrarea biomaterialului intrat, depozitarea acestuia, dacă este cazul, până la cercetare, prelucrare și pregătire pentru cercetare.

Pregătirea unei cereri pentru teste de către clinicieni este un punct foarte important, deoarece corectitudinea diagnosticului depinde în mare măsură de cererea completată corect.

A.2 Pregătirea pacientului

Pregătirea pacientului pentru puncția articulară ar trebui să fie standardizată.

Steroizii injectați în capsula articulară se pot cristaliza și interfera cu diagnosticul procesului patologic sau pot duce la un diagnostic incorect, prin urmare administrarea intraarticulară de steroizi trebuie întreruptă cu cel puțin 5-7 zile înainte de puncția articulară. Dacă injecțiile de steroizi în capsula articulară nu pot fi oprite în avans, medicul trebuie să noteze administrarea acestor medicamente în cererea de studiu. În aplicație, pe lângă datele pașaportului pacientului, trebuie menționat ce articulație a fost perforată, numărul de tuburi SF umplute, momentul puncției și asigurați-vă că indicați diagnosticul clinic, cel puțin la nivelul unui diagnostic. presupunere.

A.3 Depozitare și livrare.

Pentru a efectua o analiză generală, lichidul este de obicei livrat la laborator imediat după puncție. Un studiu al unui preparat nativ preparat din SF nestabilizat este efectuat pentru a detecta ragocite și cristale, precum și pentru a determina citoza. Examinarea unui frotiu colorat poate fi efectuată prin păstrarea unei eprubete cu SF stabilizat cu K2 EDTA în frigider la o temperatură de +3- +50C timp de 24 de ore.

Depozitarea pe termen lung a SF este permisă la o temperatură de -70°C aceste probe sunt utilizate pentru studii biochimice și imunologice.

Notă ─ În prezent, tuburile de vid speciale și recipientele de unică folosință pentru colectarea fluidelor biologice cu un volum de 100 ml sunt produse din material indestructibil fără reactivi, cu K2EDTA sau alți reactivi.

Bibliografie

1.Zakharova lichid sinovial. În cartea: Reumatologie. Orientări naționale. Ed. Academician al Academiei Ruse de Științe Medicale și Academician al Academiei Ruse de Științe Medicale. M., „GEOTAR-Media”, 2008, p. 62-66.

2. Instrucțiuni privind măsurile de prevenire a răspândirii bolilor infecțioase atunci când se lucrează în laboratoarele de diagnostic clinic ale instituțiilor medicale, Moscova, 1991.

3. Reguli pentru colectarea, depozitarea și eliminarea deșeurilor din instituțiile medicale. SanPiN 2.1.1.728-99., Moscova, 1999.

4. GOST R ISO 52095 -2:2003) Cerințe de siguranță.

5. GOST R 53079.4-2008 Tehnologii de laborator medical. Asigurarea calitatii testelor clinice de laborator. Partea 4 Reguli pentru desfășurarea etapei preanalitice a cercetării clinice de laborator.

6. GOST R ISO 15189 -2006 Laboratoare medicale. Cerințe speciale de calitate și competență.

Proiectul de tehnologie standardizată a fost pregătit de:

, (MMA numit după I.M. Sechenov), (Institutul de Cercetare de Reumatologie al Academiei Ruse de Științe Medicale), (RMAPO), (Centrul de Cercetare Științifică Rusă numit după Academia Rusă de Științe Medicale), (policlinica nr. 000, Moscova) .

4292 0

Lichidul sinovial joacă un rol excepțional în funcționarea articulațiilor și a tendoanelor. Formarea sa are loc constant din substanțele plasmatice și produșii celulelor epiteliului tegumentar al formațiunilor sinoviale. Cantitatea de SF în diferite articulații este diferită.

La o persoană sănătoasă, lichidul are o culoare galben deschis, este transparent, foarte vâscos și steril. Până la 1/3 din compoziția sa sunt proteine, nu există fibrină, dar există acid glucuronic sub formă de complex cu proteine ​​(mucină). SF normal conține celule epiteliale sinoviale și leucocite, dintre care numărul de limfocite ajunge la 75%, puține neutrofile - 0-25%, sinoviocite - 0-12%.

Patologia articulară emergentă duce la o reacție aproape instantanee a membranei sinoviale, care modifică semnificativ compoziția lichidului. Pentru unele tipuri de patologie pot fi identificate abateri foarte caracteristice, care este folosit ca un criteriu important de diagnostic diferenţial. SF poate fi obținut pentru examinare vizuală și de laborator numai prin puncția unei formațiuni articulare sau sinoviale și artroscopie.

După primire, lichidul în vrac este evaluat în funcție de cantitate, culoare, transparență, densitatea cheagului de mucină, vâscozitate și citoză globală. Dacă este necesar, se efectuează o căutare a cristalelor în lumină polarizată, bacterioscopie cu colorație Gram și cultură microbiologică.

Proprietățile fizice ale SF în condiții normale și în principalele procese reumatoide sunt prezentate în tabel. unsprezece.

Tabelul 11. Proprietățile fizice ale lichidului sinovial (Nasonova V.A., Bunchuk N.V., 1997)

Tabelul rezumativ nu este lipsit de interes. 12, care a fost folosit de colegii noștri în trecut (Astapenko M.G., Pihlak E.T., 1966).

Tabelul 12. Semne vizuale și de laborator ale GS în diferite boli

Cantitatea normală de lichid în diferite formațiuni sinoviale variază de la 0,1 ml la 4 ml. Cel mai mare volum (2-4 ml) ajunge la articulația genunchiului. În majoritatea bolilor articulare însoțite de sinovită, cantitatea de lichid crește și poate ajunge la câteva zeci de mililitri.

Conținutul formațiunii sinoviale poate fi sânge, care se observă în timpul vătămării, precum și puroi.

Culoarea lichidului articular in conditii normale si in cazurile de afectiuni articulare neinflamatorii este galben deschis, de culoare pai. În bolile inflamatorii, poate fi lămâie, chihlimbar, verzui, gri, maro, galben lăptos, alb, roz.

Transparenţă. SF normal este transparent în bolile neinflamatorii poate fi și transparent sau translucid în bolile inflamatorii poate fi moderat sau intens tulbure.

Viscozitate. Poate fi determinat vizual prin vâscozitate la turnarea dintr-o seringă într-o eprubetă sau după lungimea firului de mucină pe o lamă de sticlă. Pentru a face acest lucru, se aplică 1-2 picături de puictat pe sticlă și se trag în lateral cu o tijă de sticlă. Există 3 grade de vâscozitate: scăzută, când lungimea firului este de 1 cm, medie - până la 5 cm, înaltă - lungimea firului este mai mare de 5 cm Fluidul normal are o vâscozitate ridicată. Vâscozitatea fluidului este determinată de concentrația și gradul de polimerizare a acidului hialuronic conținut în acesta. Vâscozitatea scade în timpul proceselor inflamatorii datorită scăderii concentrației în lichid și depolimerizării acidului hialuronic.

Testul mucinei. Când acidul acetic este adăugat la lichidul normal, se formează un cheag de mucină sau un sediment. Dacă există o boală inflamatorie, cheagul va fi de dimensiuni mai mici, slăbit sau moderat.

Amestec de sânge. Sângele în SF apare în timpul leziunilor traumatice ale articulației și ale altor formațiuni sinoviale, în timpul leziunilor articulare la pacienții cu hemofilie, în timpul artritei foarte acute de orice origine și în timpul sinovitei vilizonodulare pigmentate. Amestecul de sânge în SF dintr-un sinovial deteriorat cu un ac de perforare este rar și numai atunci când manipulările sunt efectuate aproximativ.

Citoza. Numărul total de celule din SF este numărat într-o cameră de numărare. Compoziția celulară în SF normal este reprezentată de celulele stratului tegumentar al membranei sinoviale și leucocite. În mod normal, numărul de leucocite poate fi în intervalul 200-600 per mm3. Cu inflamație ușoară ajunge la 2000 pe mm3, cu inflamație severă - de la 2000 la 75.000 pe mm3, cu artrită septică - mai mult de 100.000 pe mm3. În mod normal, limfocitele predomină în SF, cu neutrofile nu mai mult de 25%.

Acest lucru se întâmplă și cu procesele neinflamatorii. Cu sinovita, numărul de neutrofile polimorfonucleare crește brusc (până la 90%).

Ragocite. Aceste elemente celulare sunt absente în SF normal. În bolile inflamatorii și spondiloartrita seronegativă, numărul lor este de 2-15% din numărul total de celule, iar în poliartrita reumatoidă pot fi până la 40% sau mai mult, ceea ce depinde de severitatea activității inflamatorii locale.

Proteine ​​totale. În mod normal, SF conține 15-20 g/l de proteine. La artrita neinflamatoare, cantitatea acesteia crește la 22-37 g/l, la artrita inflamatorie - până la 35-48 g/l, iar la poliartrita reumatoidă și sinovita cristalină poate ajunge până la 70 g/l.

Factorul reumatoid și proteina C reactivă. În mod normal, RF nu este conținut în SG, iar cantitatea de SRV nu este mai mare de 0,001 g/l. În bolile articulare neinflamatorii și spondiloartrita seronegativă, RF nu este detectată sau este detectată într-un titru de 1/20-1/40 în artrita seronegativă, titrul său depășește 1/40; Bolile inflamatorii ale articulațiilor sunt însoțite de o creștere a CRP de la 0,01 la 0,06 g/l sau mai mult.

Cristale. Ele sunt examinate folosind microscopia de polarizare. Numai cristalele de urat și pirofosfat de calciu sunt identificate în mod fiabil.

IN ABSENTA. Reutsky, V.F. Marinin, A.V. Glotov