Reacție fals pozitivă la testele serologice pentru sifilis. Test de sânge RW - Reacția Wasserman: ce fel de analiză este, cum se descifrează rezultatele, care este norma Cât de des se fac greșeli în analiza reacției Wasser

Reacții serologice fals pozitive pentru sifilis (FPR)- sunt reacții pozitive la persoanele care nu au fost niciodată bolnave și nu au sifilis la momentul examinării. Adică nu există infecție specifică în organism și nu a existat niciodată, iar reacțiile serologice dau un rezultat pozitiv.

Rezultatele fals pozitive sau nespecifice sunt rezultate pozitive ale reacțiilor serologice la sifilis la persoanele care nu suferă de o infecție sifilitică și nu au avut sifilis în trecut.

Test eronat pentru sifilis din motive tehnice

Erorile de decizie se pot datora erorilor tehnice și erorilor din timpul cercetării, precum și calității reactivilor. În ciuda numeroaselor avantaje ale instrumentelor de diagnosticare pentru RPGA, ELISA și RIF și a modificărilor lor utilizate pentru diagnosticarea sifilisului, în unele cazuri sunt observate rezultate nesigure ale testelor. Acest lucru se poate datora atât unui nivel insuficient de calificare și responsabilitate profesională a personalului (așa-numitele erori nebiologice sau tehnice), cât și caracteristicilor probelor testate (erori biologice).

Erorile non-biologice pot apărea în orice etapă a cercetării: pre-analitică, analitică și post-analitică, de ex. la colectarea, transportul, depozitarea biomaterialului, utilizarea ser chilos, încolțit, în timpul congelării și decongelării repetate a probelor de testat, precum și atunci când se utilizează diagnostice expirate etc. În special, nerespectarea condițiilor și perioadelor de depozitare a truselor de diagnostic determină o scădere a sensibilității reacției și primirea de rezultate fals negative.

Rezultatele fals pozitive pot fi cauzate de contaminarea serurilor pacienților seronegativi pentru Treponema pallidum cu urme de ser de la indivizi seropozitivi, care pot apărea în timpul preparării serurilor.

Există multe alte erori tehnice care duc la rezultate nesigure (fals negative și fals pozitive) și îndoielnice. Unele laboratoare nu efectuează controlul intern și extern al calității testelor pentru sifilis, ceea ce duce la erori de diagnostic și la incertitudine în rândul medicilor de laborator în ceea ce privește rezultatele analizelor.

Sursa erorilor la efectuarea testelor nespecifice poate fi eșecul utilizării serurilor de control, concentrația neuniformă a antigenului în experiment din cauza amestecării insuficiente înainte de utilizare, contaminarea probelor și a sticlei cu microorganisme, încălcarea termenilor și condițiilor de depozitare a reacției. componente și încălcarea tehnicilor de colectare a sângelui.

În sistemele moderne de testare, peptidele recombinante sau sintetice au fost utilizate ca antigene. Primul a devenit mai răspândit. Dar cu o purificare slabă, proteinele Escherichia coli intră în amestecul de antigene T. pallidum, ceea ce duce la serodiagnosticul fals al sifilisului la pacienții cu escherichioză sau la persoanele sănătoase al căror ser conține anticorpi la E. coli.

Într-o anumită măsură, erorile de diagnostic includ interpretarea incorectă a rezultatelor cercetării.

DZ acut și cronic

Pe lângă erorile tehnice la efectuarea testelor, factorii de decizie pot fi cauzați și de caracteristicile corpului. În mod convențional, factorii de decizie sunt împărțiți în picant (<6 месяцев) и cronic(se păstrează mai mult de 6 luni).

DM acut poate fi observată în timpul sarcinii și în timpul menstruației, după vaccinare, după un infarct miocardic recent și în multe boli infecțioase. Infecțiile în care poate apărea PPR sunt pneumonia pneumococică, scarlatina, endocardita infecțioasă, tuberculoza, lepră, limfogranulomul venerean, chancroid (chancroid), leptospiroza și alte spirochetoze, infecția HIV, mononucleoza infecțioasă, malaria, varicela, hepatita virală, oreionul, , boli respiratorii, gripă și dermatoze.

PD acute sunt instabile, negativitatea lor spontană apare în decurs de 4-6 luni.

DM cronic posibil cu boli autoimune, boli sistemice ale țesutului conjunctiv, cancer, patologia cronică a ficatului și tractului biliar, patologii cardiovasculare și endocrine, boli de sânge, boli pulmonare cronice, consumul de droguri injectabile etc. În majoritatea acestor afecțiuni, anticorpii anticardiolipin ai IgG și clasele IgM ("reagins").

Reacțiile cronice fals pozitive pot rămâne pozitive pe tot parcursul vieții.

Reacțiile cronice fals pozitive pot fi manifestări preclinice ale bolilor grave. În neoplasmele maligne și bolile difuze ale țesutului conjunctiv, titrul LPR poate fi foarte mare.

Printre cauzele reacțiilor pozitive cronice se numără condițiile fiziologice (bătrânețea). Odată cu vârsta, numărul de PD crește; la femei sunt observate de 4,5 ori mai des decât la bărbați. În grupa de vârstă de 80 de ani, prevalența PD este de 10%.

Cauza DPR poate fi utilizarea frecventă a medicamentelor administrate intravenos, transfuzii și perfuzii frecvente.

Infecțiile cronice (tuberculoză, lepră, endocardită infecțioasă, malarie), mielomul pot provoca și PD.

Infecția cu alte specii de spirochete

Reacțiile fals pozitive ale testelor treponemale și non-treponemale pot fi observate în bolile infecțioase ai căror agenți patogeni sunt similari antigenic cu Treponema pallidum. Acestea sunt febra recurentă, leptospiroza, borrelioza transmisă de căpușe, treponematozele tropicale (vici, bejel, pinta), precum și procesele inflamatorii cauzate de treponeamele saprofite ale cavității bucale și ale organelor genitale.

Agenții cauzali ai treponematozelor endemice (yaw, pinta, bejel) sunt treponeamele care au antigene specifice genului asemănătoare cu cele ale T. pallidum. În acest sens, anticorpii formați împotriva lor sunt capabili să interacționeze încrucișat cu antigenul agentului cauzal al sifilisului.

Rusia nu este un teritoriu endemic pentru acest grup de boli. Aceste infecții apar mai ales în Africa, America Latină și Asia de Sud, iar cazurile de boală sunt rare în practica instituțiilor medicale.

Un pacient cu reacții serologice pozitive pentru sifilis care a sosit dintr-o țară cu treponematoze endemice trebuie examinat pentru sifilis și prescris tratament antisifilitic dacă nu a fost administrat anterior.

Reacție biologică fals pozitivă Wasserman

Începând cu 1938, și mai ales în timpul celui de-al Doilea Război Mondial, testele serologice de screening pentru sifilis au devenit larg răspândite în Statele Unite. Cercetătorii au comparat datele obținute și au constatat că o reacție pozitivă sau discutabilă a fost găsită la persoanele care nu prezentau semne clinice și epidemiologice de infecție sifilitică sau contacte cu sifilis. În plus, astfel de rezultate au apărut mult mai des decât se credea anterior. Rezultate pozitive ale testelor nontreponemice cu antigene lipidice sau cardiolipine (VDRL, în testele Kolmer, reacții Kahn) au fost găsite la pacienți cu diferite boli, dar fără semne de infecție sifilitică. Rezultate biologice fals pozitive au fost identificate la pacienții cu boli autoimune, inflamatorii și hematologice.

În literatura medicală în limba rusă, acest fenomen se numește „ reacție biologică fals pozitivă Wasserman„(B-LPRV), pentru că Aceste rezultate au fost observate în timpul celui mai comun test din acele vremuri - reacția Wasserman.

S-a dovedit că B-LPRV poate apărea în două forme principale - acută și cronică. În primul caz, la pacienții care au avut o altă infecție decât o infecție sifilitică, B-LPRV dispare în timpul procesului de recuperare, iar durata detectării sale nu depășește șase luni. În al doilea caz, B-LPRV poate persista în mod persistent timp de mulți ani în absența unui factor cauzal evident. La începutul anilor 50, s-a constatat că B-LPRV cronic este cel mai des detectat în bolile autoimune, în special LES, în care frecvența detectării sale ajunge la 30-44%

Teste fals pozitive nontreponemice (cardiolipină).

Antigenele lipidice ale T. pallidum formează o parte semnificativă a celulei, dar organismul poate conține și lipide cu aceeași structură - autoantigene formate ca urmare a distrugerii organelor și țesuturilor (în principal lipide ale membranelor mitocondriale).

Infecția sifilitică este însoțită de formarea complexelor imune și de un răspuns autoimun la cardiolipină, fibronectină, colagen și creatinkinaza musculară. În testele non-treponemice, se folosește ca antigen o soluție de trei lipide înalt purificate (cardiolipină stabilizată cu lecitină și colesterol) în alcool etilic. Cardiolipina nu este o componentă specifică pentru T. pallidum și este, de asemenea, descrisă ca una dintre fosfolipidele biomembranelor umane. Prin urmare, anticorpii la acest antigen sunt înregistrați în ser în timpul aproape oricărei modificări a celulelor umane ca urmare a infecțiilor și în anumite condiții fiziologice și patologice.

Deoarece antigenul utilizat în reacțiile non-treponemice se găsește în alte țesuturi, testele pot da rezultate pozitive la indivizi fără infecție treponemică (1-2% în populația generală).

Cea mai frecventă cauză a testelor biologice fals pozitive non-treponemice este sindromul antifosfolipidic, un proces autoimun care apare în bolile țesutului conjunctiv (lupus eritematos sistemic, dermatomiozită, sclerodermie).

Atunci când se utilizează teste non-treponemale (RMT și modificările sale), rezultatele fals pozitive se pot datora prezenței în sânge a anticorpilor la factorul reumatoid, anticorpi cu reacție încrucișată în patologia autoimună („reactoare de creson”).

Alți factori pentru apariția rezultatelor fals pozitive sunt considerați a fi unele infecții bacteriene cronice (lepră etc.), boli de etiologie virală (mononucleoză infecțioasă) și boli sistemice ale țesutului conjunctiv.

Motivele pot include și vârsta înaintată (peste 70 de ani), sarcina, patologie somatică extinsă, tulburări ale metabolismului lipidic, stări de imunodeficiență de diverse etiologii, boli cronice sistemice ale inimii și plămânilor.

Alte cauze includ cancerul, tuberculoza, infectiile enterovirale, hepatita virala, boala Lyme, pneumonia, alcoolismul, dependenta de droguri, diabetul, vaccinarea, alte infectii (malaria, varicela, rujeola, endo- si miocardita), guta.

În aceste condiții, se observă dezvoltarea tulburărilor imunologice, ducând la producerea anormală de anticorpi care pot reacționa încrucișat cu antigenele treponemale.

Masa. Cauzele biologice ale reacțiilor fals pozitive în testele serologice nontreponemice.

Teste treponemice fals pozitive

Pentru a agrava problema, testele treponemale pot fi, de asemenea, fals pozitive. Cauzele pot fi boli autoimune, colagenoza, boala Lyme, sarcina, lepra, herpesul, malaria, mononucleoza infectioasa, tumorile, dependenta de droguri. În ultimii ani, imunoblotting, una dintre cele mai moderne metode de diagnosticare a sifilisului, a început să fie utilizat activ în străinătate pentru a diferenția DZ.

Persistența anticorpilor după un tratament de succes

Reacțiile specifice de diagnostic rămân pozitive mult timp chiar și după terapia completă. După tratamentul eficient al unei infecții sifilitice, la majoritatea pacienților, titrurile în teste non-treponemice scad de 4 ori la 6-12 luni după tratament. Cu toate acestea, cu inițierea tardivă a terapiei, titrurile chiar și în testele non-treponemice pot rămâne la același nivel, dar nu cresc niciodată.

Rezultate fals negative ale testelor

Diferite metode de diagnostic demonstrează sensibilitate și specificitate diferite în funcție de forma și stadiul sifilisului. Probabilitatea unui diagnostic eronat crește, mai ales în cazurile de curs latent, ascuns, combinat al bolii.

Reacții serologice fals-negative pentru sifilis pot fi observate în sifilisul secundar datorită fenomenului prozonă la testarea serului nediluat, precum și la examinarea persoanelor imunodeprimate, cum ar fi pacienții infectați cu HIV.

Rezultatele fals negative ale testelor serologice specifice (SSR) cauzate de factori biologici se pot datora competiției dintre IgM și IgG specifice pentru legarea de antigenul de pe suprafața eritrocitelor, precum și „fenomenului prozonă”. În acest ultim caz, aglutinarea nu are loc din cauza supraproducției de anticorpi la Treponema pallidum, deoarece fiecare receptor de antigen de pe eritrocite, din cauza excesului de anticorpi, este asociat cu o moleculă de aglutinină, care previne formarea unei „rețele”. Înlocuirea RPGA cu TPPA, adică Eritrocitele de pe particulele sintetice, aparent, vor elimina sau minimiza primirea rezultatelor fals negative.

În ELISA, astfel de reacții pot fi explicate prin prezența unei faze seronegative în sifilisul primar, iar în sifilisul secundar - prin deficiența imunitară și prezența infecției cu HIV. Când primiți un rezultat negativ de la testele serologice pentru sifilis, trebuie să țineți cont de capacitatea Treponema pallidum de a pătrunde și de a se multiplica în diferite organe și țesuturi - căutarea agentului patogen în limfa (ganglionii limfatici) duce în unele cazuri la un rezultat fiabil. . De asemenea, este recomandabil să repeți analiza probelor care au dat un rezultat pozitiv. Testarea repetată a serului după 5-7 sau mai multe zile, de regulă, permite obținerea unor rezultate fiabile.

Materialele sunt publicate doar în scop informativ și nu reprezintă o rețetă pentru tratament! Vă recomandăm să consultați un medic hematolog la instituția dumneavoastră medicală!

În medicina modernă, diferite teste sunt utilizate pentru a diagnostica sifilisul, inclusiv reacția Wassermann. Și, deși metoda clasică nu este folosită astăzi, ea a stat la baza majorității schemelor utilizate pentru depistarea bolilor periculoase care sunt utilizate și astăzi.

Decodificarea rezultatelor

Rezultatele sunt descifrate după ce proba de testat a trecut de ultima fază a testului. Există două categorii de reacții:

• Negativ. Acest rezultat este cel mai precis și este reprezentat de hemoliză completă. Aceasta înseamnă că globulele roșii din sânge s-au dispersat în tot serul fără sedimente.
• Pozitiv. Hemoliza apare cu întârziere. Pentru un astfel de grup de rezultate, se disting mai multe grade, care sunt indicate de numărul corespunzător de plusuri. O reacție slabă pozitivă este o ușoară întârziere a hemolizei atunci când serul este colorat în roz sau roșu cu globule roșii, dar un sediment rămâne în partea de jos a tubului. Dacă rezultatul este clar pozitiv, masa de celule roșii din sânge se stabilește complet în partea de jos a tubului.

Rezultatele reacției Wasserman: a — întârzierea completă a hemolizei (+ + + +); b — întârziere pronunțată a hemolizei (+ ++); c — întârzierea parțială a hemolizei (++); d — ușoară întârziere a hemolizei (+); e — hemoliza completă „sânge lăcuit” (-). Reacția este pozitivă cu întârziere parțială, severă și completă a hemolizei, determinată de gradul de colorare a conținutului tuburilor de la roz deschis la roșu aprins. Celulele roșii nehemolizate formează ulterior un precipitat roșu.

Important: deoarece rezultatul studiului reacției clasice nu poate fi considerat de încredere din cauza multor abateri și factori de influență, în medicina modernă se utilizează testul de precipitare cu microreacție, dar numele analizei este fixat în aceeași versiune - RW.

Rezultate fals pozitive și cauzele acestora

Orice creștere a rezultatelor reacției indică prezența unor probleme de sănătate. În unele cazuri, o excepție pot fi modificările care apar în corpul unei femei în timpul sarcinii. Cu toate acestea, este necesar să se efectueze o serie de studii auxiliare pentru a exclude complet prezența bolilor periculoase, care pot afecta și dezvoltarea fătului sau pot fi transmise acestuia la nivel genetic.

În 2011, la a 12-a săptămână de sarcină, am făcut analize la ansamblul rezidențial din Kiev. Și apoi se dovedește că RV dă +. Fără să explic nimic, am fost trimis la dispensarul de piele de la locul meu de înregistrare (Kirovograd). În același timp, după ce am citit deja totul pe internet, merg cu intenția fermă să nu accept un curs de tratament cu antibiotice. Soțul meu este singurul bărbat și este 100% sănătos (imite un comision în fiecare an). Am ajuns la un medic adecvat, care a decis să mă examineze imediat și să nu mă trimită la spital. Am facut si un frotiu -, microreacție -, RV+, RIF -. În același timp, și soțul a fost examinat pe deplin - totul a fost negativ. Ea mi-a dat un certificat în care afirmă că acesta a fost un fel de reacție seropozitivă în timpul sarcinii. Și așa, în fiecare lună înainte de a naște, mergeam la ea pentru analize. Toate rezultatele mele s-au repetat, la fel ca prima dată (o dată, totuși, RV a dat ++). Nu vă spun prin ce am trecut în timpul acelei sarcini, când la Kiev nu au vrut să mă înregistreze, iar la locul meu de înregistrare s-au uitat la mine de parcă aș fi lepros. Dar in maternitate, dupa ce m-am uitat pe certificate, nimeni nu a intrebat nimic, iar eu am nascut ca toata lumea...
După ce am născut, nu am avut ocazia să reluez teste la tăbăcăria mea (am plecat imediat la Kiev). S-a convenit cu medicul ca la prima ocazie sa vin si sa iau totul din nou. Dar au trecut 2 ani. Eram sigur că totul va reveni la normal și testele vor deveni negative. Dar s-a întâmplat (am făcut teste în Kursk) că din nou RV dă ++. M-am intors in lacrimi pe internet si am gasit informatii ca chiar si in timpul alaptarii acest test poate da un rezultat fals pozitiv. Am terminat de alăptat (1 an 10 luni) cu o săptămână înainte de test. Și acum o săptămână am fost la Kirovograd. Am trecut de RV ++++, RIF și RPGA + (dar am spus că acest lucru a fost acceptat ca negativ). Nu știu ce să fac!!! Medicul a ordonat teste repetate, dacă rezultatele sunt din nou aceleași, va trebui să mergeți la Harkov (ei fac acolo un fel de analiză care va pune cu siguranță totul la locul său).
1. Care ar putea fi motivul pentru care rezultatele mele RT fluctuează atât de mult?
2. Cum se pot comporta aceste teste în viitoarele sarcini?
3. Aș fi putut cumva să mă îmbolnăvesc de sifilis (nici măcar nu știu cum aș fi putut să mă infectez) fără să observ nimic (nu am fost tratat deloc cu antibiotice!)? În același timp, totul este negativ pentru soțul meu.
4. Dacă chiar este sifilis, ce ar trebui să fac cu fiica mea - ar trebui să fie și ea examinată? Cel mai mult mă tem pentru sănătatea ei!

Test de sânge RW- Acesta este un test serologic pentru detectarea anticorpilor la Treponema pallidum. Metodologia de realizare a acestei cercetări a fost propusă de August von Wasserman la începutul secolului al XX-lea, de atunci analiza a fost numită după el - Reacția lui Wasserman(RW).

Treponema pallidum este agentul cauzal al sifilisului.

Sifilisul este o boală clasică. Se transmite în principal prin contact sexual. De asemenea, te poți infecta prin sânge. Există o posibilitate de infecție prin mijloace casnice, deoarece Treponema pallidum poate fi conținut în saliva neuscata și în alte secreții corporale.

În cursul bolii, se disting sifilisul primar, secundar și terțiar.

Sifilisul primar se caracterizează prin apariția unui ulcer specific (chancru) la locul infecției (aceasta poate fi organele genitale, mucoasa bucală sau rectală). Puțin mai târziu, ganglionii limfatici cei mai apropiați se măresc - inghinali când organele genitale sunt afectate sau submandibulari când este afectată mucoasa bucală. Ulcerul se vindecă de la sine la 3-6 săptămâni după apariție.

Simptomele sifilisului secundar sunt observate la 4-10 săptămâni de la debutul ulcerului. Aceasta este o erupție palidă pe tot corpul (inclusiv palmele și tălpi), stare generală de rău și (asemănătoare gripei). Ganglionii limfatici din tot corpul se măresc. Apoi simptomele dispar, revenind din când în când.

Sifilisul terțiar se caracterizează prin afectarea sistemului nervos, a oaselor și a organelor interne. Apare la mulți ani după infecție în absența unui tratament adecvat pentru boală.

Astfel, o persoană cu sifilis poate avea perioade lungi în care nu există simptome. Depinde mult de starea sistemului imunitar al organismului. Uneori, la contactul cu o infecție, boala nu se dezvoltă, dar persoana devine purtătoare a infecției (așa-numitul purtător asimptomatic).

În aceste situații, un test de sânge RW este singura modalitate de a detecta prezența agentului patogen sifilis în organism. Analiza permite, de asemenea, să se determine cât durează transportul sifilisului.

Când este necesar un test de sânge RW?

Testul de sânge RW este o procedură standard pentru a confirma absența agentului patogen sifilis în organism. Este necesar pentru toți a căror profesie implică contactul cu oameni sau alimente - medici, cosmetologi, coafor, bucătari etc. Un test de sânge RW este, de asemenea, una dintre procedurile obligatorii pentru. Se efectuează la înregistrare și în al treilea trimestru (la a 30-a săptămână).

Un test RW poate fi prescris și atunci când apar simptome care fac să suspecteze posibilitatea infecției cu sifilis:

• erupții cutanate pe piele și mucoase de origine necunoscută;
• ganglioni limfatici măriți (în primul rând inghinali);
• ulcere pe membrana mucoasă și secreții din organele genitale.

Este recomandat să faceți un test RW dacă aveți contact sexual ocazional. Cu toate acestea, trebuie avut în vedere că analiza va fi orientativă doar la 5-6 săptămâni după actul sexual. Înainte de aceasta, analiza poate fi negativă chiar dacă apare infecția.

Cum să donezi sânge pentru RW?

Testul de sânge RW trebuie luat pe stomacul gol. Cu 12 ore înainte de test, nu trebuie să fumați, să beți alcool, să luați medicamente, să beți sucuri, ceai sau cafea. Nu poți bea decât apă.

Interpretarea rezultatelor testelor de sânge RW

Rezultatul testului de sânge RW poate fi:

• negativ. Aceasta înseamnă că nu au fost detectați anticorpi la agentul cauzal al sifilisului. În cele mai multe cazuri, un astfel de rezultat indică faptul că nu există Treponema pallidum în organism. Cu toate acestea, cu sifilisul primar și terțiar, pot exista cazuri de rezultate negative ale testelor. Prin urmare, pentru a fi sigur că nu sunteți purtător al bolii, testul trebuie făcut de mai multe ori.
• îndoielnic (marcat cu semnul „+”);
• slab pozitiv (“++”);
• puternic pozitiv (“+++”).

O reacție discutabilă și slab pozitivă este posibilă și în absența infecției cu sifilis. Astfel, la 1,5% dintre gravide este detectată o reacție eronată slab pozitivă. Un rezultat fals pozitiv RW poate fi observat după trecere, precum și în tuberculoză, cancer și hepatită virală.

Dacă există posibilitatea unui rezultat fals pozitiv, testul trebuie repetat.

Ce să faci dacă rezultatul RW este pozitiv?

Dacă se obține un rezultat pozitiv RW la analize repetate, prezența agentului patogen sifilis în organism este considerată confirmată. În acest caz, este necesar să începeți urgent tratamentul.

Sifilisul este foarte tratabil, mai ales în stadiile incipiente. Persistența agentului patogen în organism amenință tranziția bolii la stadiul activ și dezvoltarea manifestărilor de sifilis secundar și terțiar. Prezența Treponema pallidum în corpul unei femei însărcinate amenință nu numai sănătatea ei, ci și sănătatea copilului: infecția fătului, de regulă, duce la tulburări grave de dezvoltare. De asemenea, moartea este posibilă.

Testul Wassermann (RW) a fost folosit de peste 100 de ani și sa dovedit eficient în diagnosticarea precoce a sifilisului. Această metodă de testare a sângelui este destul de simplă, dar în același timp foarte fiabilă, ceea ce îi permite să fie utilizat pe scară largă în întreaga lume într-o formă îmbunătățită. Testele rapide moderne utilizate în mod activ diferă semnificativ de reacția Wasserman clasică, dar ele stabilesc principiul de bază al acestei tehnici, care le permite adesea să primească același nume.

Abordare bazată pe principii

În esență, reacția Wasserman este o analiză de laborator a serului de sânge menită să determine răspunsul imunologic al organismului la pătrunderea agentului patogen sifilis în acesta. Când este infectat cu sifilis, are loc un proces caracteristic. Treponema pallidum conține antigenul cardiolipin. Serul sanguin, datorită prezenței reaginelor, intră în așa-numita reacție de fixare a complementului (CFR) cu formarea unui complex specific cu acest antigen, adică. Anticorpii de treponemă se combină cu antigenul treponemic.

Principiul reacției Wasserman se bazează pe identificarea reacției specificate. Dacă o persoană este infectată cu sifilis, atunci în sângele său apar neapărat anticorpi împotriva Treponema pallidum, care este un răspuns fiziologic al sistemului imunitar. Pentru a provoca artificial o reacție specifică, un medicament care conține antigen treponemic (cardiolipină) este injectat în sânge. În același timp, este introdus un sistem hemolitic pentru a efectua reacția de hemoliză, iar complementul este utilizat pentru sorbția complexelor.

În cazul în care agentul cauzal al sifilisului a intrat deja în corpul uman, începe RSC, legând anticorpii din sânge cu antigenul introdus pentru a forma un complex specific. Această reacție consumă tot antigenul și complementul introdus. Dacă nu există anticorpi în sângele pacientului, atunci cardiolipina intră într-o reacție de hemoliză cu sistemul hemolitic, care îl neutralizează complet. Analizele de laborator relevă complexe anticorp-antigen, care sunt detectate vizual. Concentrația de complexe arată intensitatea formării lor și este estimată în mod convențional prin numărul de semne plus: de la (+) la (++++). Studiile RW pot fi efectuate pe ser sanguin sau lichid cefalorahidian.

Compoziția reacției

Pentru a asigura RW, în sângele persoanei studiate este introdus un amestec special, care conține 3 ingrediente principale: antigen, complement și sistem hemolitic. Principala reacție Wasserman este furnizată de un antigen, care este un antigen preparat artificial al agentului patogen. Se poate prepara in 2 variante: o cultura de Treponema pallidum tratata cu ultrasunete sau cardiolipin obtinut din inima bovina. A doua opțiune este cel mai des folosită, atunci când medicamentul este preparat prin purificarea temeinică a unui extract de lipide alcoolice obținut din țesutul muscular al unei inimi de bovine. Pentru a crește activitatea antigenului, se adaugă fosfolipide, lecitină și colesterol. Doza necesară de antigen este furnizată prin diluarea acesteia într-o soluție de clorură de sodiu.

Sistemul hemolitic combină serul hemolitic (hemolizina) și celulele roșii din sângele unei oaie. Serul se obține din sângele iepurilor și măgarilor, iar apoi este imunizat cu globule roșii de oaie. Globulele roșii sunt izolate din sângele unei oi la vârsta de 1-4 ani și sunt prelevate din vena jugulară. Complementul este preparat din serul sanguin obtinut din inima cobai. Pentru a efectua RW, ingredientele indicate sunt luate în cantități egale - 0,25 sau 0,5 ml.

Cum se face un test de sânge?

Sângele pacientului este luat pentru analiză pe stomacul gol sau la 7-8 ore după masă. Nu se pot preleva probe in urmatoarele circumstante: temperatura corporala crescuta, dupa o boala infectioasa recenta, in timpul menstruatiei la femei, cu 12-15 zile inainte de a naste la gravide, imediat dupa nastere, in 24 de ore de la consumul de alcool. Nou-născuții nu trebuie testați în primele 2 săptămâni de viață.

Sângele pentru cercetare este prelevat din vena ulnară într-un volum de aproximativ 9-10 ml cu respectarea tuturor regulilor antiseptice. La sugari, sângele este colectat făcând o incizie în călcâi cu un bisturiu special. Pentru a efectua reacția, proba trebuie primită în termen de 2 zile de la recoltarea sângelui și supusă depozitării la o temperatură care să nu depășească 3-4ºC.

Serul este preparat din sângele pacientului în următoarea ordine. Sângele este păstrat la o temperatură de 37ºC într-un termostat timp de 18-28 minute, iar cheagul de sânge rezultat este separat și trimis la o centrifugă, unde este procesat la o viteză de aproximativ 1000 rpm timp de 14-16 minute. După această procedură, deasupra cheagului apare ser de sânge limpede, care este luat pentru cercetări ulterioare. Dacă celulele roșii din sânge sunt detectate în ser, atunci se efectuează o centrifugare repetată pentru a le separa. Serul izolat final este supus inactivarii la 55-57ºC timp de 28-35 minute. Aceasta elimină complementul natural și normalizează starea globulinelor. Sângele complet pregătit este păstrat la frigider pentru cel mult 7 zile.

Determinarea reacției Wasserman a serului sanguin se efectuează în 3 eprubete: în toate eprubetele se toarnă ser diluat cu soluție de clorură de sodiu în raport de 1:5 și apoi se introduc 0,25 ml de antigen treponemic în prima eprubetă. , în a doua eprubetă se adaugă 0,25 ml de cardiolipină, iar în a treia (martor) - 0,25 ml soluție de clorură de sodiu. Apoi toate probele sunt injectate cu aceeași cantitate de complement. Trebuie remarcat faptul că componentele nu sunt amestecate în prealabil.

Următoarea etapă este incubarea primară într-un termostat la o temperatură de 36-38ºC timp de 46-55 de minute. După tratamentul termic, se introduce compoziţia hemolitică (0,5 ml în fiecare tub) cu amestecare prin agitare. În continuare, incubația finală se efectuează în condiții similare până la finalizarea completă a operației de hemoliză. Prezența sau absența hemolizei este evaluată cu atenție. Rezultatele reacției sunt evaluate prin comparație cu probele martor. În acest scop, se folosesc 2 eprubete suplimentare: una conține sânge în care agentul cauzal al sifilisului a fost identificat în mod fiabil, iar cealaltă conține sângele unei persoane absolut sănătoase.

Examinarea lichidului cefalorahidian

Anticorpii pentru treponema pallidum pot fi localizați în lichidul cefalorahidian, așa că uneori se efectuează studii pentru reacția Wassermann pe mostre din acest fluid. Probele sunt examinate simultan în 3 variante: lichid cefalorahidian nediluat, diluat în raport de 1:2 cu o soluție de clorură de sodiu și diluat cu aceeași soluție în raport de 1:5. Reacția se desfășoară în mod similar cu studiul probelor de sânge, adică. cu antigen treponemic şi cardiolipină. Complementul se administrează după titruri speciale. Procedura pentru efectuarea reacției și evaluarea studiului lichidului cefalorahidian nu diferă de studiul asupra serului sanguin.

Cum sunt evaluate rezultatele

Rezultatul normal sau negativ al reacției Wasserman (fără infecție cu sifilis) este considerat a fi apariția unei reacții de hemoliză. În acest caz, nu există anticorpi împotriva agentului patogen sifilitic în sânge, iar toate antigenele introduse sunt neutralizate de sistemul hemolitic.

Un rezultat pozitiv, adică prezenţa contaminării se apreciază prin analiză comparativă cu probele martor. Severitatea bolii sau stadiul acesteia este indicată de numărul de semne plus:

• (+) sau (1+): ușoară întârziere a hemolizei;
• (++) sau (2+): reacție slab pozitivă sau întârziere parțială a hemolizei;
• (+++) sau (3+): reacție pozitivă sau întârziere semnificativă a hemolizei;
• (++++) sau (4+): reacție puternic pozitivă sau absența completă a hemolizei.

În plus, există o reacție dubioasă, indicată ca (+/-). Această reacție necesită re-verificare și clarificare. La evaluarea reacției Wasserman, trebuie luat în considerare următorul fapt: 4-6% dintre oamenii sănătoși au un rezultat fals pozitiv, iar persoanele infectate (până la 25%) pot avea un rezultat fals negativ în 14-18 zile. după infectarea cu Treponema pallidum. Rezultatele fals negative se schimbă pe măsură ce boala progresează: după 4-6 săptămâni de boală, până la 26% dintre rezultate devin pozitive, iar la 8-9 săptămâni aproape toate dau o reacție pozitivă.

Un rezultat negativ în perioada latentă a celei de-a doua faze a sifilisului nu indică întotdeauna absența bolii. Când sifilisul reapare, reacția devine pozitivă. După un curs de tratament, un rezultat negativ indică doar o tendință favorabilă, dar necesită o re-verificare. O altă problemă în evaluarea eficacității tratamentului este apariția unui sindrom, așa-numitul sifilis serorezistent, când după tratament reacția Wasserman dă în continuare un rezultat negativ.

În majoritatea cazurilor, reacția Wasserman dezvăluie destul de clar infecția cu sifilis, cu toate acestea, în unele cazuri, o reacție negativă nu garantează absența infecției, la fel cum poate apărea un rezultat pozitiv în absența sifilisului.

În special, o reacție fals pozitivă poate apărea în următoarele cazuri:

Un rezultat fals poate apărea chiar dacă mâncați alimente grase imediat înainte de test.

Rezultatele reacției Wasserman nu pot fi privite ca adevărul suprem. Mai degrabă, ele oferă un impuls pentru examinări suplimentare. În aceste scopuri, în prezent sunt utilizate diverse teste treponemale. Metodele moderne de diagnosticare rapidă a sifilisului includ analogi îmbunătățiți ai reacției Wasserman: testul RPR, care este completat de teste treponemale RPGA.

Reacția Wasserman a jucat un rol imens în dezvoltarea diagnosticării sifilisului în stadiile incipiente. Cu toate acestea, rezultatele sale nu evaluează întotdeauna în mod clar prezența bolii și, prin urmare, sunt utilizate în prezent metode mai avansate, al căror principiu de funcționare este preluat din reacția Wasserman clasică. Studiile de acest tip continuă să fie utilizate în principal pentru a monitoriza procesul de tratament, dar pot fi folosite și pentru a detecta sifilisul.