Helminții igg dacă cel mai bine. Instrumente și truse de reactivi pentru ELISA produse în Rusia Kundelsky R.V., Ph.D.

Producători ruși de top pe segmentul truselor de reactivi pentru diagnosticarea infecțiilor: - Vector-Best CJSC, Novosibirsk; - NPO Diagnostic Systems LLC, Nijni Novgorod; - SA „Ekolab”, Elektrogorsk MO. În domeniul truselor de reactivi pentru diagnosticarea bolilor neinfecțioase și a afecțiunilor fiziologice: - Alkor-Bio LLC, Sankt Petersburg; - CJSC „Vector-Best”, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moscova. Pe segmentul de reactivi pentru diagnosticul de laborator al alergiilor: - Alkor-Bio LLC, Sankt Petersburg; - CJSC „Vector-Best”, Novosibirsk; - NPO Immunotex LLC, Stavropol. Productie de echipamente de laborator: - Picon LLC, Moscova

Evaluarea gradului de posibilă substituire a importurilor pe baza nomenclatorului de teste Nomenclatorul analiților, unități. Aprobat pentru utilizare în Federația Rusă Produs în Federația RusăGrad de posibilă substituție de import Markeri ai bolilor infecțioase % Markeri ai bolilor neinfecțioase și indicatori ai stărilor fiziologice % Markeri alergici % Total: %

Evaluarea gradului de substituire a importurilor pe baza volumului pieței de produse pentru tablete ELISA Segmente de piațăVolumul pieței în Federația Rusă, milioane de ruble. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, milioane de ruble. Ponderea substituirii importurilor Markeri boli infecțioase % Markeri boli netransmisibile și indicatori ai stărilor fiziologice % Markeri alergii % Echipamente50051% Total: %

Evaluarea gradului de substituire a importurilor pe baza volumului pieței produselor pentru metode imunochimice în general Segmente de piațăVolumul pieței în Federația Rusă, milioane de ruble. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, milioane de ruble. Ponderea substituirii importurilor Markeri ai bolilor infecțioase % Markeri ai bolilor netransmisibile și indicatori ai stărilor fiziologice % Markeri alergii % Echipamente % Total: %

Probleme ale producătorilor autohtoni din industrie: Metoda ELISA devine depășită. Există o înlocuire treptată a reactivilor IF autohtoni cu cei chemiluminiscenți importați; Sistemul de achiziții publice existent stimulează fie achiziționarea celor mai ieftine mărfuri, fie produse importate cu caracteristici unice; Unul dintre principalele motive pentru dezvoltarea insuficientă a producătorilor autohtoni de echipamente automate și localizarea producției de produse importate este bariera administrativă vamală; Principala problemă a timpurilor recente este prăbușirea sistemului de înregistrare de stat a noilor produse în Republica Belarus. Admiterea de noi produse pe piață practic a încetat și acei producători străini care au înregistrat anterior liste lungi continuă să aibă un avantaj față de cei autohtoni; Principalul motiv al decalajului tehnologic este incapacitatea de a obține dreptul de a produce produse compatibile cu echipamente moderne; Gradul scăzut de consolidare a producătorilor autohtoni și războaiele constante ale prețurilor între ei nu oferă posibilitatea de a dezvolta produse avansate și de a concura cu jucători de top în condiții egale, inclusiv pe piețele externe.

Propuneri: În cadrul FCC, introduceți o procedură neconcurențială pentru achizițiile publice de produse medicale, cu publicarea ulterioară poziție cu articol. Stabilirea limitelor de finanțare pe baza prețului mediu de piață va oferi anumite avantaje producătorilor autohtoni, va limita consumul de reactivi scumpi importați și va controla mai eficient utilizarea fondurilor bugetare; Promovați consolidarea și consolidarea producătorilor autohtoni pentru a concentra resursele pe dezvoltarea de produse moderne și pentru a intra pe piața internațională. Procedura neconcurențială pentru achizițiile publice va lăsa rapid doar întreprinderile cu adevărat competitive pe piață; Alocarea de fonduri guvernamentale pentru a stimula, pe principiile parteneriatului public-privat, dezvoltarea unei game de teste suficiente pentru a asigura siguranța biologică a țării; Beneficiile vamale ar trebui să fie pentru componente, nu pentru produsele finite; Armonizarea sistemului de înregistrare cu cel european, unde dispozitivele medicale cu un nivel de risc potențial scăzut sunt înregistrate pe baza unei declarații de conformitate.

DROGURI

EVALUAREA NOULUI SISTEM DE TESTARE ELISA

„Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”

12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Instituția bugetară de stat federală Centrul științific de stat VB „Vector” din Rospotrebnadzor, satul Koltsovo, regiunea Novosibirsk;

2 Institutul de Biologie Chimică și Medicină Fundamentală, Novosibirsk;

3 Institutul de Stat pentru Standardizarea și Controlul Preparatelor Medicale Biologice numit după. LA. Tarasevichag Moscova

Sunt prezentate rezultatele testelor de sensibilitate, specificitate și reproductibilitate a unui nou set de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” dezvoltat la JSC „Vector-Best” (Novosibirsk). Datele obținute ne permit să prezicăm fiabilitatea diagnostică a rezultatelor atunci când folosim acest sistem de testare pentru a detecta antigenul rotavirus de grup A în materialul clinic.

Cuvinte cheie: sistem de testare ELISA, eficiență, rotavirus A

Rotavirusurile din grupa A (familia Reoviridae, genul Rotavirus) sunt cea mai frecventă cauză a gastroenteritei severe la copiii mici din întreaga lume. Adulții cu sistemul imunitar slăbit se îmbolnăvesc adesea. Infecția cu rotavirus (RVI) este o boală foarte contagioasă, cu mai multe căi de răspândire. Sursa de infecție este o persoană cu o formă manifestă sau asimptomatică a bolii, precum și un purtător de virus. În rândul copiilor și adulților, RVI se poate manifesta sub formă de cazuri sporadice, boli de grup local, focare și este larg răspândită. Mecanismul fecal-oral de transmitere a acestei infecții se realizează prin alimente (lapte și produse lactate, alimente pentru copii), apă și căi de contact-gospodărie.

Punerea unui diagnostic de gastroenterită cu rotavirus pe baza tabloului clinic, în special cu incidență sporadică, este o anumită dificultate, deoarece simptomele caracteristice acestei infecții diferă puțin de simptomele altor infecții intestinale acute (IAE) de diverse etiologii. Diagnosticul diferențial la pacienții cu gastroenterită cu rotavirus se realizează atât cu infecții toxice de origine alimentară, cât și cu alte infecții virale (norovirusuri, astrovirusuri, adenovirusuri, coronavirusuri, enterovirusuri Coxsackie și ECHO) și bacteriene (salmoneloză, dizenterie, holeră, yersinioză, microorganisme oportuniste). Din păcate, nu toate instituțiile medicale specializate din Federația Rusă efectuează diagnosticarea infecției cu rotavirus.

Metodele de diagnosticare pentru RVI au ca scop detectarea virionilor întregi, antigenului viral sau ARN-ului specific virusului în fecale. O abordare promițătoare pentru detectarea directă a virușilor atât în ​​materialul clinic, cât și în obiectele de mediu este metoda reacției în lanț a polimerazei-transcripție inversă (RT-PCR). În ultimii ani, au fost create sisteme de testare pe baza dezvoltărilor științifice moderne cu o combinație de diverse metode de detectare a rotavirusurilor: PCR multiplex cu detectarea prin hibridizare-fluorescență a produselor de amplificare „prin punct final”; imuno-PCR final (IPCR) cu detectare în timp real; RT-PCR cantitativ cu detectare în timp real. Laboratoarele de cercetare folosesc microscopia electronică pentru a identifica rapid rotavirusurile. Cu toate acestea, toate metodele de mai sus necesită destul de multă muncă și necesită echipamente scumpe și personal înalt calificat. Prin urmare, atunci când se efectuează diagnostice de laborator în spitale și în ambulatoriu, se acordă preferință metodelor bazate pe detectarea antigenului viral în fecale folosind testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) cu anticorpi mono și poliponali împotriva rotavirusurilor. Această metodă este disponibilă pentru laboratoarele practice, este ușor de configurat și vă permite să obțineți rapid rezultate.

Scopul acestei lucrări este de a studia eficacitatea diagnostică a noului set de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” dezvoltat la JSC „Vector-Best”, Novosibirsk.

^septembrie-decembrie

Materiale și metode

Materialul de studiu a inclus probe de fecale de la copii mici diagnosticați cu infecție intestinală acută și fără manifestări clinice de infecție intestinală, care urmau un tratament internat în secțiile de infecții intestinale și infecții respiratorii ale Spitalului Clinic Orașului pentru Copii nr. 3 din Novosibirsk. Probele de fecale au fost colectate în recipiente de plastic steril de unică folosință în volum de 2-3 ml la internarea pacienților în secția spitalului și păstrate la -20 °C timp de 15 zile. Depozitarea mai lungă a materialului a fost efectuată la -70 °C.

În această lucrare a fost utilizat un panou de 104 probe de fecale, testate anterior pentru prezența agenților patogeni ACI. Dintre ei:

30 de probe în care numai rotavirusuri de grup A au fost detectate prin ELISA și RT-PCR; genotiparea folosind metoda RT-PCR a arătat că probele fecale conțin rotavirusuri de genotip PG1 (18 probe), PG2 (4 probe), PG3 (3 probe), PG4 (2 probe), PG4 (1 probă), PG9 (1 probă) , PG3 (1 probă);

14 probe în care numai norovirusuri ale celui de-al doilea genotip au fost detectate prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide a regiunii 5" a genei capsidei situată pe genomul norovirusului în regiunea 5085-5485 h.;

15 probe în care au fost identificate doar astrovirusuri prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide a regiunii 5" a genei capsidei situată pe genomul astrovirusului în regiunea 4526 - 4955 nt; 15 probe în care au fost doar adenovirusuri identificate prin PCR;

30 de probe de fecale (martor) de la copii fără manifestări clinice de infecție intestinală internați în secția respiratorie a spitalului; Analiza preliminară nu a identificat agenții patogeni virali menționați mai sus în aceste probe.

Testarea probelor pentru prezența sau absența rota-, noro-, astro- și adenovirusuri a fost efectuată folosind metoda RT-PCR folosind truse comerciale înregistrate în Federația Rusă „AmpliSens No. virus 1, 2 genotips - 306/322” , „AmpliSens Astrovirus -165”, „AmpliSens Adenovirus - 462”, „AmpliSens Rotavirus - 290” (produs de Institutul Central de Cercetare de Epidemiologie, Federația Rusă). Probele au fost examinate în conformitate cu instrucțiunile de utilizare a truselor de reactivi corespunzătoare în perioada de expirare. Probele pozitive pentru rotavirus au fost genotipizate folosind RT-PCR. Determinarea prezenței sau absenței antigenului rotavirus a fost, de asemenea, efectuată prin ELISA utilizând sistemul comercial de testare IDEIA™ Rotavirus (DakoCytomation, UK) în conformitate cu instrucțiunile pentru trusă.

La testarea trusei de reactiv „Rota-virus-antigen-ELISA-BEST”, toate probele de mai sus (104) au fost criptate și testate de trei ori cu kitul de testare. După finalizarea testării, probele au fost decriptate și rezultatele au fost analizate.

Rezultate și discuții

Sensibilitatea trusei de reactivi Rotavirus-antigen-ELISA-BEST a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale probelor de testare cu rezultate pozitive (în%) folosind sistemul de testare testat și medicamentele de referință. În același timp, s-a dezvăluit că la utilizarea trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”, toate cele 30 de probe cu prezența confirmată a rotavirusului A au fost pozitive (Tabelul 1). În consecință, sensibilitatea setului de test de reactivi în detectarea rotavirusurilor A a fost de 100%. Trebuie remarcat faptul că panoul a inclus probe cu șapte genotipuri diferite de rotavirusuri și toate au fost detectate cu succes de trusa de reactiv „Rota virus rus - antigen - AND FA-B EST”.

Specificitatea sistemului de testare a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale rezultatelor negative (în %) ale probelor de testare folosind sistemul de testare testat cu acele studii preliminare trecute. Pentru evaluarea specificității, panelul utilizat a inclus 30 de probe în care nu au fost identificați agenți patogeni virali, precum și 14 probe în care au fost detectate doar norovirusuri din al doilea genotip folosind metoda RT-PCR, 15 probe în care metoda RT-PCR a detectat numai astrovirusuri; 15 probe în care au fost detectate doar adenovirusuri prin PCR. S-a stabilit că în 69 din 74 de probe negative, valorile densității optice detectate de kitul de reactivi Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST pentru prezența rotavirusului A nu au depășit valorile de fond, adică valorile ​obținută ca urmare a măsurării densității optice în probele de control negative. Două probe care conţin astrovirusuri, o probă conţinând un norovirus al celui de-al doilea genotip, o probă conţinând un adenovirus şi două probe în care niciunul dintre agenţii patogeni virali de mai sus nu a fost detectat au demonstrat citiri pozitive ale densităţii optice. Trebuie remarcat faptul că în probele în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior, semnalele pozitive au fost înregistrate doar în unul dintre studiile repetate (Tabelul 2). Astfel, specificitatea trusei de reactivi Rotavirus-antigen-ELISA-BEST a fost de 93,2%.

În timpul testelor, a fost evaluată reproductibilitatea rezultatelor obținute la utilizarea setului de test de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” pe material clinic - toate probele au fost testate de trei ori în diferite experimente pentru a determina variația rezultatelor. În aproape toate cazurile, s-au obținut rezultate similare: sistemul de testare a detectat toate probele negative și pozitive în mod egal. Excepțiile au fost două probe în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost identificat anterior: într-una dintre replici pentru ambele probe, valorile densității optice au depășit OPcrit. De remarcat faptul că excesul a fost nesemnificativ (Tabelul 2). Astfel, reproductibilitatea rezultatelor a fost de 98,8%.

Rezultatele testelor au arătat că setul de reactivi testat „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” în eficacitatea sa de diagnosticare - specificitate, sensibilitate și reproductibilitate - este comparabil cu cei disponibili în Federația Rusă pentru diagnosticare.

sisteme de testare chimică, ceea ce face posibilă prezicerea fiabilității diagnostice a rezultatelor atunci când se utilizează setul de reactivi studiat „Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST” pentru a detecta antigenul rotavirus grup A în materialul clinic.

Literatură

1. Bogomolov B.P. // „Boli infecțioase: diagnostic de urgență, tratament, prevenire.” - M., New Diamed. - 2007.

2. Vasiliev B.Ya., Vasilyeva R.I., Lobzin Yu.V.// „Boli intestinale acute. Rotavirusuri și infecție cu rotavirus.” - Sankt Petersburg, Lan. - 2000.

3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., și colab.// „BIOpreparations”. - 2008 - Nr. 2. - str. 15 - 18.

4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. și altele // JMEI - 2008 - Nr. 4. - Cu. 12 - 16.

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S., și colab. // „Întrebări de virologie”. - 2003. - or. 48. - Nr. 6. - str. 1721.

6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // „Întrebări de virologie”. - 2007. - t.52. -Nr. 3 - s. 19-23.

7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A., et al.//

"Boli infecțioase". - 2004. - vol. 2. - Nr. 4. - str. 85 -91.

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// „Arhiva terapeutică”. - 2007. - or. 79. - Nr. 11. - str. 10-16.

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., și colab. // „Epidemiologie și boli infecțioase”. -2004.-Nr 6.-p. 17-20.

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., ș.a. // Igienă și salubritate. - 2007. - Nr. 1. - str. 56 -58.

11. Arcangeletti M. S., De Conto E., Pinardi F., at al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76(3). - P. 165 -170.

12.Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., at al. // Epidemiol. Infecta. - 2008. V. 136(3). - P. 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. Metode. -2006. - V. 137 (2). - P. 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., at al. //J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46 (2). - P. 462 - 469.

15. Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., at al. //Appl. Mediul. Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - P. 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., at al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - P. 1842 - 1843.

Evaluarea sensibilității și specificității trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”

tabelul 1

Nr. Număr de probe Rezultate detecție cu medicamente de referință IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Rezultate detecție cu kitul „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

Evaluarea specificității trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST>-

masa 2

PCR AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotavirus-antigen-ELISA-BEST JSC „Vector-Best”

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£septembrie

decembrie 2009

AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0,150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

Rotavirus-

OPCrit 0,250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"

OPCrit OPCrit 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO „BeKTop-EecT”

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

decembrie 2009

PCR AmpliSense

adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0,150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotavirus - antigen - ELISA-BEST JSC "Vector-Best"

OPCrit O P Crit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Număr de definiții 96 (48 în duplicat)
Format tabletă de lucru: dungi 12x8, rupte într-o gaură.
Sensibilitate: 1,5 U/ml.
Domeniu de măsurare: 0-400 U/ml.
Volumul probei de testat nu depășește 25 µl.
Standardizarea condițiilor pentru efectuarea unei reacții enzimatice cu cromogen într-un agitator termostatic la 37ºC.
Conținutul setului:
1. Placă cu dungi 12 x 8 godeuri, gata de utilizare - 1 buc.
2. Probe de calibrare gata de utilizare (0-400 U/ml) colorate cu diferite grade de intensitate in functie de concentratie - 6 sticle.
3. Proba de control - 1 flacon.
4. Conjugat monocomponent, gata de utilizare, care nu necesită diluare - 1 flacon.
5. Soluție pentru diluarea serurilor - 1 flacon.
6. Substrat cromogen, monocomponent - soluție de tetrametilbesidină plus (TMB+), gata de utilizare, care nu necesită diluare - 1 flacon.
7. Soluție salină tamponată cu fosfat cu Tween - 2 sticle.
8. Opriți reactivul, gata de utilizare - 1 flacon.
9. Film pentru etanșarea tabletei - 1 buc.
10. Stencil pentru construirea unui grafic de calibrare - 1 buc.
11. Baie de reactiv - 2 buc.
12. Vârfuri de pipetă pentru 5-200 µl - 16 buc.
Tableta este ambalată într-o pungă cu fermoar de tec.
Stabilitatea soluției de lucru FST-T este de cel puțin 5 zile la o temperatură de +2...8°C.
Depozitați trusa la o temperatură de +2...8°C. Perioada de valabilitate - 1 an de la data producției.
Înregistrat la Roszdravnadzor.

Tratamentul helmintiazelor la copii este extrem de important, deoarece consecințele acestui lucru pot fi o întârziere în dezvoltarea fizică și mentală, procese patologice în organele și sistemele interne, chiar și moartea. În plus, infestările cu helminți sunt foarte contagioase, motiv pentru care se răspândesc atât de ușor în instituțiile preșcolare și școlare. Pe baza acestui fapt, este clar cât de important este tratamentul în timp util al helmintiazelor la copii.

Primele semne de helminți la copii

Viermii sunt agenți oportuniști ai corpului uman, viermi pentru care oamenii sunt gazda finală. În plus, vârsta proprietarului nu joacă niciun rol în această problemă; diferite tipuri de helmintiază pot fi observate atât la copii, cât și la pacienții adulți.

Cât de periculoasă este helmintiaza pentru un copil?

După cum am menționat mai devreme, helminții la copii pot provoca boli și patologii grave, în urma cărora dezvoltarea mentală și fizică încetinește. Posibilele complicații pentru fiecare tip de helmintiază pot fi complet diferite, de exemplu:

Prin urmare, helmintiazele din copilărie necesită și mai multă atenție, asistență în timp util din partea unui medic, observație pe termen lung de către un specialist și prevenire.

Principalele simptome la copii

Simptomele helmintiazelor la un copil pot fi diferite, în funcție de tipul de viermi:

1. Viermii rotunzi se manifestă imediat cu o reacție alergică, febră și greață la copil. Primele apariții sunt de obicei luminoase, dar dispar rapid. După care pot fi observate următoarele simptome:

• colici și disbacterioză și nou-născuți;
• la bebelușii cu vârsta sub 1 an, dureri în zona buricului, probleme cu scaunul, alergii și diateză;
• copiii mai mari au probleme cu somnul, comportament neliniştit, coşmaruri;
• Copiii de 3-7 ani se caracterizează prin greață, febră, tuse, dureri abdominale și erupții cutanate.

2. Enterobiaza, cauzată de oxiuri, se manifestă cu un tablou clinic neclar. Și numai după 1 lună puteți observa următoarele simptome:

• la nou-născuți, inflamație, umflare și roșeață a anusului, refuz de a mânca, plâns noaptea, lipsă de apetit;
• copiii sub un an prezintă aceleași simptome, precum și mâncărimi severe ale anusului pe timp de noapte (de la 23:00 la 1:00); fetele suferă de inflamație a organelor genitale;
• la copiii mai mari, durere în abdomen în apropierea buricului, tulburări de somn, mâncărime în fese.

3. Simptomele Toxocarozei sunt greu de recunoscut, cu excepția temperaturii scăzute a corpului și a reacțiilor alergice (erupții cutanate, urticarie, mâncărime și umflături). După infecție, poate apărea o tuse, care ulterior provoacă pneumonie sau bronșită, în special la cei mai tineri pacienți.

Trichineloza presupune simptome ușoare la nou-născuți, în caz contrar se observă următoarele semne:

• stare febrilă;
• umflarea feței;
• dureri musculare;
• reactii alergice;
• Copiii cu vârsta peste 5 ani pot prezenta amigdale mărite, spline, erupții cutanate și dureri în gât.

Cel mai dificil este să diagnosticați simptomele helmintiazelor la copiii cu vârsta de 2 ani și mai mici, deoarece copilul nu poate explica comportamentul și starea sa. Prin urmare, pentru orice manifestări și comportament atipice al copilului, este mai bine să-l arătați medicului.

Ce ar trebui să faci mai întâi?

Viermii care au fost găsiți în fecalele unui copil sunt cel mai important semn al bolii, după care ar trebui să solicitați imediat ajutor de la un medic. Niciun tratament pentru helminți nu poate avea succes fără un diagnostic adecvat. Metodele de examinare în acest caz ar trebui să fie cuprinzătoare, inclusiv următoarele proceduri:

• luarea zgârieturilor din anus;
• examinarea scaunului copilului;
• analize de sânge;
• biopsie musculară în cazuri rare când se suspectează trichineloza;
• test serologic de sânge;
• radiografie, ecografie, tomografie;
• ELISA pentru detectarea anticorpilor în sânge.

Metode de tratament

Tratamentul helmintiazelor la copii ar trebui să fie cuprinzător, bine gândit, prescris cu doze precise și frecvență de administrare a medicamentelor. Acest lucru se datorează faptului că medicamentele cu componente toxice sunt utilizate pentru efectul antihelmintic, ceea ce înseamnă că utilizarea irațională poate duce la efecte secundare. În plus, tratamentul popular cu plante medicinale este potrivit la domiciliu.

Remedii populare

Tratamentul modern cu remedii populare pentru astfel de boli pentru copii implică 4 metode eficiente:

Orice metodă de tratament la domiciliu trebuie discutată în prealabil cu medicul dumneavoastră. Trebuie amintit că plantele medicinale și remediile populare au contraindicații sub formă de intoleranță individuală.

Tratament medicamentos

• Pentru enterobiaza si ascariaza se folosesc de obicei medicamente precum Pyrantel si Mebendazol. Luarea Pyrantel este adecvată într-o doză de 10 mg de substanță pe kilogram de greutate pentru oxiuri și 5 mg/kg pentru viermi rotunzi. Mebendazol se ia de două ori pe zi, 50 mg, pentru copiii de 2-3 ani timp de trei zile la rând, de două ori pe zi, 100 mg timp de trei zile la rând pentru copiii de peste 3 ani, după 3 săptămâni, terapia este repetate.
• Pentru toxocaroză, Mebendazol este prescris într-o doză diferită - pentru copiii cu vârsta de 2 ani și peste, 100 mg de două ori pe zi timp de 14-10 zile.
• Trichineloza se tratează cu Mebendazol 5 mg pe kilogram de greutate, după care doza este împărțită în trei doze pe zi. Cursul tratamentului este de 1 săptămână sub strictă supraveghere medicală.

Prevenirea helmintiazelor

• spălarea mâinilor imediat după contactul cu animalele, după ce a ieșit afară și în cutii cu nisip, a mers la toaletă și înainte de a mânca;
• consumul numai de alimente curate;
• tratamentul termic efectuat corect al produselor din carne și pește;
• bea apă fiartă;
• menținerea igienei personale și a salubrității;
• deparazitarea regulată a animalelor de companie;
• efectuarea deparazitarii preventive la copiii cu varsta de 2 ani si peste.

Test de sânge pentru toxocara

Caracteristicile infecției umane cu toxocarioză

Purtătorii infecției sunt câinii, mai rar pisicile. Ouăle de Toxocara sunt răspândite în fecalele câinilor fără stăpân. Odată ajunse la pământ, în apă sau zăbovind pe blana unui animal, acestea sunt introduse într-un corp sănătos în diferite moduri.

Reacția la intruziunea unui străin

Din statisticile medicale se știe că adulții sunt mai puțin susceptibili de a se infecta cu toxocariază, cu excepția cazului în care ocupația lor este în pericol. Copiii sunt mult mai susceptibili de a face infectie.

Cele mai frecvente simptome ale toxocarozei:

• Febră fără semne de boală.
• Creșterea temperaturii.
• Durere în creștere și atenuare în cap sau stomac.
• Apariția unei erupții cutanate care nu poate fi eliminată.
• Umflarea feței.
• O creștere a nivelului de eozinofile din sânge, detectată în timpul unei analize generale.

Pentru a face un diagnostic precis, este prescris un test imunologic pentru toxocara. Prezența compușilor proteici în sânge care poartă informația genetică a helminților (antigene) provoacă sistemul imunitar să producă anticorpi din clasa igg. Acesta este primul semn de infecție cu toxocaroză.

Diagnosticul preliminar

Stadiul inițial al istoricului medical al pacientului este colectiv. Înainte de a trimite un pacient să ia un test de sânge pentru toxocaroză, este necesar să se studieze fundalul bolii și să se facă o examinare preliminară.

Diagnosticul primar:

• Studiul circumstanțelor agravante care ar putea provoca infecția - lucru specific cu animale sau prezența unui animal de companie, lucrări de excavare într-o zonă potențial periculoasă, copii care se joacă în zonele de plimbare a câinilor.
• Examenul fizic al pacientului. Examinarea pielii pentru invazia subcutanată de către Toxocara, pleoapele și globii oculari, palpare.
• Prescrierea unui test de sânge complet. În timpul infecției cu toxocariază, este caracteristică o creștere semnificativă a unor indicatori - eozinofile (70-80%), limfocite, VSH. În timp ce nivelul hemoglobinei scade considerabil.
• Prelevarea de probe de ficat. Cu o invazie severă, sarcina asupra ficatului este afectată, care se manifestă printr-un salt puternic al bilirubinei.

Este imposibil să se obțină confirmarea directă a infestării cu Toxocara folosind teste convenționale (sânge, coprogram, frotiu). Examenul duodenal este, de asemenea, neinformativ, deoarece este dificil din cauza naturii migratoare a larvelor.

După primirea rezultatelor unei examinări preliminare care indică o posibilă infecție cu toxocarioză și diferențierea presupusului diagnostic de boli cu simptome similare, pacientului i se prescrie un test ELISA pentru toxocaroză.

Test imunosorbant legat

Scopul principal al acestui studiu este de a confirma prezența Toxocara în corpul uman. Anticorpii împotriva acestor helminți se găsesc în plasma sanguină, deci este prelevat dintr-o venă.

Testarea pentru Toxocara necesită o anumită pregătire:

• Nu mâncați alimente grase sau grele cu o zi înainte de procedură.
• Nu beți băuturi dulci, carbogazoase sau alcoolice în timpul zilei înainte de a vizita laboratorul.
• Luați mostre pe stomacul gol.
• Nu luați medicamente în ziua anterioară și în ziua în care este programat testul.

Este necesar să se țină cont de faptul că această metodă foarte informativă de identificare a invaziei poate fi afectată de anumite circumstanțe. Un rezultat fals pozitiv poate apărea dacă pacientul are:

• Boli oncologice.
• Tuberculoza pulmonara.
• Patologii hepatice severe.
• Sindromul autoimun.
• Sindromul antifosfolipidic.
• Sarcina.

În acest caz, nu va fi posibilă obținerea unei analize de confirmare 100%, deoarece în circumstanțele de mai sus sistemul de apărare produce și imunoglobuline (anticorpi). Este necesar să se efectueze diagnostice suplimentare și să se diferențieze toxocarioza de factorii enumerați.

Concentrația de imunoglobuline (titrul) din clasa IgG atinge valoarea maximă posibilă la 2-3 luni de la debutul invaziei. Cu cât infecția este mai gravă, cu atât este mai mare acest indicator.

Rezultate ELISA

Pentru a pune un diagnostic, se studiază cu atenție un imunotest enzimatic, iar rezultatele obținute sunt comparate cu valorile de referință. Un titru de anticorpi de 1:100 cu un indice de pozitivitate mai mic de 0,9 este considerat normal.

Valorile numerice ale titrurilor

Rezultatele obținute pot fi negative, pozitive, slab pozitive sau discutabile. Numărul de titruri AT depinde de severitatea invaziei și de cât timp a avut loc în urmă.

transcrierea analizei:

• AT titru până la 1:100 – rezultatul este negativ. În corpul pacientului nu au fost găsite larve de Toxocara.
• Titrul AT de până la 1:400 este un rezultat slab pozitiv. Pacientul are o invazie slabă sau dezvoltă o formă oculară de toxocariază. În unele cazuri, indicatorul indică o infecție recentă.
• AT titru până la 1:600 ​​– rezultatul este pozitiv. O persoană suferă de o formă clinică de helmintiază, care, dacă este detectată, necesită tratament imediat.
• Titrul AT până la 1:800 – rezultatul este pozitiv. Vorbește despre o invazie severă de natură progresivă și o probabilitate mare de a dezvolta un proces patologic al organelor interne.

Cu rare excepții, studiile ELISA relevă o formă avansată de invazie cu un amestec de helmintiază de altă origine. În acest caz, anticorpii totali pot fi mai mari de 1:800.

Rata de pozitivitate

Când se utilizează un imunotest enzimatic pentru toxocaroză cu un titru de 1:400 – 1:600 ​​pentru a diferenția invazia de factorii secundari, indicatorii obținuți sunt comparați cu valoarea de referință. Diferența dintre aceste numere este de obicei numită indice sau coeficient de pozitivitate.

De obicei, în forma ELISA, un indicator este opus celuilalt. Prima este norma, a doua poate însemna:

• Până la 0,9 – rezultatul este negativ. Nu au fost găsite larve de Toxocara.
• 0,9-1,1 – rezultatul este îndoielnic. În acest caz, sunt prescrise diagnostice repetate.
• 1.1-2.2 – rezultatul este ușor pozitiv. O persoană este un transportator cu o invazie slabă.
• 2.2-4.2 – rezultatul este pozitiv. Toxocarioza de severitate moderată se dezvoltă destul de mult timp.
• Peste 4,4 – rezultatul indică vârful infestării helmintice sau helmintiaza recentă.

Un CP cu un rezultat de 4,4 și o creștere detectată a eozinofiliei cu 10% poate indica dezvoltarea formei oculare de toxocaroză și prezența anticorpilor împotriva invaziei încrucișate, total până la toxocaroza.

Reacția imună și densitatea optică a anticorpilor (rata de pozitivitate) depind de gradul de infecție cu Toxocara și de localizarea acestora. Cel mai mic titru și indicatorii CP ne permit doar să presupunem absența helminților, dar nu să confirmăm acest lucru.

Informațiile prezentate nu pot servi ca sursă de autodiagnostic sau auto-tratament. Rezultatele ELISA în combinație cu o examinare preliminară pot spune doar unui specialist despre prezența unei probleme. În laboratorul Invitro, diagnosticele de sânge sunt efectuate cu mare acuratețe; rezultatul analizei este însoțit de comentarii ale specialiștilor despre rata de pozitivitate. Acest lucru ajută în mod semnificativ medicul să facă un diagnostic mai precis.