Anti HIV 1 2 ce. Metode moderne de diagnosticare a infecției cu HIV

Deținătorii brevetului RU 2283497:

Invenția se referă la domeniul biotehnologiei și medicinei. Sistemul de testare imunoabsorbant legat de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi la virusul imunodeficienței umane (HIV) de primul și al doilea tip, primul tip de grup O și identificarea antigenului la virusul imunodeficienței umane de primul tip p24 include un imunosorbent bazat pe antigene ale virusului imunodeficienței umane reprezentând gp41 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env HIV-2), anticorpi la antigenul HIV 1 p24 și reactivii de detecție, antigenii HIV de mai sus și anticorpii HIV absorbiți în diferite godeuri ale plăcilor pentru testul imunosorbant legat de enzime și plăci cu 96 de godeuri din polistiren pliabile sau neseparabile sunt utilizate pentru sorbție. Invenția asigură o sensibilitate crescută, simplificare și eliminarea subiectivității în evaluarea rezultatelor. 1 salariu dosare, 10 tabele, 1 ill.

Invenția se referă la domeniul biotehnologiei și medicinei. Utilizare: detectarea diferențiată a tuturor claselor de anticorpi specifici la proteinele 1 și 2 ale virusului imunodeficienței umane, HIV 1 grup O și antigen HIV 1 p24.

Esență: obținerea unui sistem de testare imunosorbantă legată de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi de toate clasele împotriva proteinelor individuale și HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și HIV 1 p24 antigen în serul sanguin (plasmă), imunoglobulinele și produsele din sânge uman în pentru a identifica spectrul de anticorpi la HIV 1 și 2, HIV 1 grup O, detectarea antigenului HIV 1 p24 și confirmarea rezultatelor de screening pozitive sau discutabile pentru anticorpii HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și antigen HIV 1 p24.

DESCRIEREA INVENŢIEI

Diagnosticul de laborator al infecției cu HIV se bazează pe trei domenii: a) indicarea HIV și a componentelor acestuia; b) detectarea anticorpilor la HIV; c) determinarea modificărilor sistemului imunitar. Dintre metodele de diagnostic de laborator existente, cele mai frecvente sunt cele serologice - detectarea anticorpilor la antigeni virali.

Pentru a detecta anticorpii în infecția cu HIV, testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) și imunoblotting (IB) sunt utilizate în principal. ELISA se bazează pe imobilizarea antigenelor virale pe plăci de care se leagă anticorpii pacientului, iar complexul antigen-anticorp este detectat folosind anticorpi monoclonali de șoarece conjugați cu peroxidază de hrean la imunoglobulinele umane G și M. Metoda este destul de specifică și sensibilă și permite detectarea anticorpilor specifici virusului la 95% dintre pacienți. Restul de 5% din cazuri apar în stadiile incipiente ale infecției, când sunt încă puțini anticorpi în serul sanguin, sau în fazele terminale ale bolii, când organismul nu mai este capabil să sintetizeze anticorpi din cauza unei epuizări accentuate a sistemul imunitar. Rezultatele ELISA fals pozitive sunt, de asemenea, posibile, în principal la pacienții cu boli autoimune și oncologice, precum și în cazurile de infecție cauzată de virusul Eshptain-Barr. În acest caz, o reacție încrucișată a anticorpilor la factorul reumatoid, virusul Epstein-Barr sau la determinanți antigenici similare proteinelor din clasa 1 și 2 a complexului major de histocompatibilitate (HLA-4 și DQW3) și având capacitatea de a se lega de antigenele HIV. apare. Rezultatele fals pozitive sunt frecvente la femeile însărcinate și la vârstnici. Hemoliza, lipemia și contaminarea bacteriană a serului pot provoca, de asemenea, rezultate nesigure.

În acest sens, au fost propuse și utilizate o serie de metode pentru a testa specificitatea rezultatelor detectării anticorpilor. Dintre aceste metode, cea mai frecvent utilizată reacție este „blotting imun” în modificarea „Western Blot”. Esența metodei este următoarea: în prima etapă, proteinele HIV sunt separate în funcție de greutatea moleculară folosind electroforeza pe gel de poliacrilamidă. Transferul electroforetic este apoi efectuat de la gelul de poliacrilamidă la suprafața membranei de nitroceluloză. Antigenii transferați în acest mod sunt detectați pe membrană prin analiză indirectă: membrana este incubată cu materialul de testat; anticorpii conținuti se leagă la antigenele HIV transferate pe o membrană de nitroceluloză, apoi benzile de membrană sunt incubate cu conjugatul; Când se formează un complex antigen-anticorp, conjugatul se atașează de acesta; după spălarea din conjugat și incubarea cu substratul, are loc colorarea în acele zone de nitroceluloză în care a avut loc formarea complexului antigen-anticorp-conjugat. Desenul prezintă exemple de rezultate pozitive, slab pozitive și negative ale imunoblot.

Anticorpii la următoarele proteine ​​(p) și glicoproteine ​​(gp) sunt detectați în serul persoanelor infectate cu HIV-1 și HIV-2: Tabelul A.

Tabelul B prezintă criteriile de evaluare a rezultatelor imunoblotării recomandate de OMS și Centrul Rus pentru Prevenirea și Controlul SIDA.

Pe baza criteriilor OMS, serurile în care sunt detectați anticorpi la oricare două proteine ​​ale anvelopei HIV-1 prin metoda IB sunt considerate pozitive. Dacă există o reacție doar cu una dintre proteinele învelișului (gp160, gp120, gp41) în combinație cu sau fără o reacție cu alte proteine, rezultatul este considerat îndoielnic. Potrivit Centrului Federal Științific și Metodologic al Ministerului Sănătății al Federației Ruse pentru Prevenirea și Controlul SIDA, este posibil să se interpreteze serurile ca pozitive chiar și în prezența anticorpilor la o singură proteină membranară.

Detectarea anticorpilor la antigenul p24 poate indica perioada de debut a seroconversiei, deoarece anticorpii la această proteină apar primii. Reacțiile pozitive cu proteinele gag și pol fără prezența unei reacții cu proteinele env pot reflecta stadiul de seroconversie timpurie și, de asemenea, pot indica prezența infecției HIV-2 sau o reacție nespecifică.

Utilizarea reacției de imunoblotare ca metodă expertă pentru diagnosticarea HIV are o serie de dezavantaje semnificative:

1. Imposibilitatea de a confirma detectarea antigenului HIV 1 p24 în cazul utilizării testelor care detectează simultan antigenul și anticorpii HIV, ceea ce face inadecvată (fără sens) utilizarea testelor de screening pentru depistarea simultană a antigenului și a anticorpilor HIV ( Ordinul Ministerului Sănătății al Federației Ruse nr. 292 din 30 iulie 2001: „pentru a examina donatorii în stațiile de transfuzie de sânge, este necesar să se utilizeze sisteme de testare care detectează simultan antigenul și anticorpii HIV”).

2. Detectarea numai a anticorpilor din clasa IgG. Este imposibil să se confirme pe deplin rezultatele pozitive obținute folosind teste de generația a 3-a și a 4-a (detectarea anticorpilor IgG și IgM).

3. Subiectivitatea în interpretarea evaluării testului, mai ales în cazurile de rezultate „dubioase” și „incerte” și în stadiile inițiale de seroconversie (benzile detectate pe membranele de nitroceluloză în aceste cazuri sunt neclare, abia vizibile cu ochiul liber, și există adesea dezacord atunci când sunt evaluate de persoane diferite).

4. Imposibilitatea evaluării cantitative automatizate a rezultatelor analizei.

5. Sensibilitate mai mică comparativ cu ELISA.

6. Perioada de valabilitate scurtă (în timpul depozitării, benzile de membrană de nitroceluloză se estompează și nu pot fi o confirmare obiectivă a detectării sau nedetecției HIV în cazuri controversate).

7. Dificultate în configurarea reacției și depozitare (benzile de membrană de nitroceluloză sunt foarte fragile și se sparg adesea).

8. Costul ridicat al truselor de securitate a informațiilor.

Un reactiv cunoscut este un kit pentru determinarea simultană a antigenelor și anticorpilor la același agent patogen, inclusiv HIV (DE 4236189 F1, 28.04.1994). Cu toate acestea, nu este dezvăluit un sistem de testare care permite diagnosticarea infecției cu HIV în diferite stadii.

Obiectivul prezentei invenții este de a obține un sistem de testare cu care să fie posibilă confirmarea rezultatelor pozitive sau discutabile ale testelor de screening pentru anticorpi la HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și HIV 1 p24 antigen atunci când se utilizează teste pentru detecția simultană. de antigene și anticorpi.

Soluția tehnică propusă este realizată printr-un sistem de testare imunosorbantă legată de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane (HIV) de primul și al doilea tip, primul tip de grup O și identificarea antigenului p24 la imunodeficiența umană. virus de primul tip p24, caracterizat prin aceea că include un imunosorbant pe bază de antigene virusul imunodeficienței umane, reprezentând gp41 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol) , gp36 (env HIV-2), anticorpi la antigenul HIV 1 p24 și reactivii de detecție, în timp ce antigenele HIV și anticorpii HIV menționați mai sus sunt adsorbiți în diferite godeuri ale plăcilor de test imunosorbant legat de enzime.

În plus, pentru sorbție sunt utilizate plăci de polistiren pliabile sau nedemontabile cu 96 de godeuri pentru imunotestul enzimatic.

Rezultatul tehnic obținut prin prezenta invenție este posibilitatea confirmării rezultatelor pozitive pentru anticorpii HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și HIV 1 p24 antigen, sensibilitate ridicată, posibilitatea interpretării automate a rezultatelor, ceea ce elimină subiectivitatea evaluare, ușurința efectuării testului, mai puțin decât cu seturile existente de securitate a informațiilor de cost.

Această soluție tehnică diferă de cele cunoscute:

1. Utilizarea unei plăci pentru reacții imunologice ca purtător în fază solidă.

2. Utilizarea simultană a anticorpilor la HIV p 24 și a unui set de antigene HIV ca absorbant.

Invenţia este ilustrată prin următorul exemplu.

Principiile active ale sistemului de testare dezvoltat „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM + AG p24 HIV 1” sunt:

Imunosorbent - antigeni recombinanți similari cu proteinele structurale ale HIV-1: gp41 (env HIV-1 și HIV 1 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), HIV-2: gp36 (env) și anticorpi monoclonali de șoarece la antigenul HIV 1(p24), adsorbiți separat pe benzi dintr-o placă pliabilă din polistiren.

Pentru a pregăti utilizarea imunosorbanților:

1. HIV-1 gp41 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 103.

2. HIV-1 gp120 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 109.

3. HIV-1 p24 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 105.

4. HIV-1 p31 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 108.

5. HIV-2 p36 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 106.

Conjugatul 1, liofilizat sau lichid, este un anticorp monoclonal de șoarece la antigenul HIV1 p24 conjugat cu biotină.

1. Conjugatul 2, liofilizat sau lichid, este un amestec de antigene recombinante similare cu proteinele structurale ale HIV-1: gp41 (env HIV-1 si HIV 1 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31( po1); HIV-2: gp36 (env), conjugat cu biotină;

2. Conjugatele 3, 4 - liofilizate sau lichide - streptavidină, marcate cu peroxidază de hrean;

În timpul studiilor preliminare, a fost selectat proiectarea sistemului de testare, a fost dezvoltată tehnologia de preparare a componentelor acestuia și au fost optimizate condițiile de desfășurare a reacției imunoenzimatice.

La efectuarea ELISA în sistemul de testare „DS - ELISA - ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM + Ag p24 HIV 1”, se adaugă 25 μl de conjugat-1 în godeurile plăcii cu anticorpi absorbiți la p24 și 25 μl. de conjugat-1 se adaugă în godeurile cu antigene sorbite.25 µl de conjugat-2. Schema de reacție este prezentată mai jos. Apoi, în fiecare godeu se adaugă 25 μl de probă de testat. În același timp, în godeurile cu antigeni culoarea se schimbă de la portocaliu la roz, iar în godeul cu anticorpi - de la verde la gri. Amestecul este incubat timp de 45 de minute la 37°C pe un agitator (sau 1 oră la 37°C într-un termostat). Apoi, fără spălare, adăugați 50 μl de conjugat-3 în godeurile plăcii pentru determinarea antigenului p24 și 50 μl de conjugat-4 în godeurile pentru determinarea anticorpilor. După incubare timp de 20 de minute la 37°C pe un agitator (sau 30 de minute la 37°C într-un termostat), placa este spălată și dezvoltată cu un amestec de substrat. Timp total de reacție 1 oră 25 minute (sau 1 oră 50 minute). Antigenul p24 prezent în proba de testat se leagă de anticorpi monoclonali la p24, iar anticorpii specifici formează un complex cu antigeni recombinanți de pe placă. Complexul imun rezultat al anti-p24 cu p24 este detectat cu conjugați anti-p24-biotină, apoi cu streptavidin-peroxidază, iar complexele imune Ag-HIV cu At-HIV sunt detectate cu un conjugat Ag-biotină, apoi cu streptavidin- peroxidaza.

Schema de stabilire a reacției.

Rezultatele sunt luate în considerare spectrofotometric la două lungimi de undă: 450/620-680 nm cu dispozitivul configurat „pe aer”. Să luăm în considerare rezultatele la o lungime de undă de 450 nm.

Rezultatele analizei sunt luate în considerare dacă valorile medii ale densității optice (OD) în godeurile cu K- nu sunt mai mari de 0,2, în godeurile cu K+ - nu mai puțin de 1,0. OP crit. calculat prin formula:

OP crit. gp41 = mediu sens OP K-(gp41)+0,15

OP crit. gp120 = mediu sens OP K-(gp120)+0,15

OP crit. p24 = mediu sens OP K-(р24)+0,15

OP crit. p31 = mediu sens OP K-(р31)+0,15

OP crit. gp36 = mediu sens OP K-(gp36)+0,15

OP crit. Ag p24 = medie. sens OP k- (Ag p24)+0,04

unde 0,15 și 0,04 sunt coeficienți stabiliți prin prelucrare statistică la producător. În timpul dezvoltării sistemului de testare au fost utilizate următoarele:

1. Probe de ser de sânge de la donatori sănătoși (n=610).

2. Probe de ser de sânge de la pacienți cu diferite boli infecțioase care nu au legătură cu HIV (infecții respiratorii acute, pneumonie, amigdalite, infecții herpetice și citomegalovirus, sifilis, chlamydia, hepatită virală A, B și C (n=224)).

3. Probe de ser de sânge de la pacienți cu diverse boli neinfecțioase - traumatisme, boli ale sistemului cardiovascular, oncologie (n=35).

4. Probele de ser sanguin de la gravide (n=40).

5. Probele de ser de sânge seropozitive în ELISA și confirmate în imunoblot (n=428).

6. Probe de ser cu rezultat pozitiv obținut în sisteme de testare imunoenzimatică pentru determinarea simultană a anticorpilor HIV 1.2 și a antigenului p24 și rezultat nedeterminat prin imunoblot (n=123).

7. Panoul intern de seruri care conțin și nu conțin anticorpi la HIV 1,2, testate pe sisteme de testare imunoenzimatică și imunoblot înregistrate de Ministerul Sănătății al Federației Ruse (n=21).

8. Standard „STANDARD ANTIGEN HIV 1”, „BIO RAD”, Franța, cat. Nr. 72217, care este un antigen obţinut din lizat viral.

9. Standardul intern al întreprinderii. O probă care conține antigen p 24 la o concentrație de 200 pg/ml, obținută din lizat viral și titrată conform „HIV 1 ANTIGEN STANDARD” companie „BIO RAD”, Franța, cat. Nr. 72217.

10. Panou standard de seruri care conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane tip 1 (HIV 1) - OSO 42-28-212-93-02P, „Medical and Biological Union”, Novosibirsk.

11. Panoul standard de seruri care conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane de tip 2 (HIV 2) - OSO-42-28-216-02P, „Medical and Biological Union”, Novosibirsk.

12. Panoul standard de seruri care nu conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane de tip 1 și 2 (HIV 1, 2) - OSO-42-28-214-94-02P, „Medical and Biological Union”, Novosibirsk.

Sensibilitatea sistemului de testare pentru detectarea antigenului p24 a fost evaluată folosind „STANDARDUL ANTIGEN HIV I”, „BIO RAD” și standardul intern al întreprinderii. Folosind Standardul Intern, s-au preparat 4 diluții în serie de 2 ori de la 40 pg/ml până la 5 pg/ml cu plasmă normală de donor, fără anticorpi HIV 1, 2, ca diluant. Cea mai mică cantitate de antigen detectabil a fost luată ca criteriu de sensibilitate. Datele obținute sunt prezentate în Tabelul 1.

Pentru a evalua sensibilitatea sistemului de testare în detectarea anticorpilor specifici, s-au folosit panouri standard de probe care conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane (HIV 1, 2) (OSO 42-28-212-93-02P p.012, OSO 42-). 28-216- 02P (HIV 2) p.003).

Datele obținute sunt prezentate în tabelele 3, 4.

Eficiența de diagnosticare a sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1” a fost comparată cu sistemele de testare „Jenskrin-HIV-Ag/At” (Bio-Rad), „DIA-HIV 1/2" (Diaprof-Med), "Vironostika HIV Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Recombinant-HIV1,2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-HIV-1,2 K" (Amercard ), „HIV-1, HIV-2-ELISA-Avicenna” (Avicenna). În acest scop, probele de ser din panoul intern au fost testate în toate testele specificate. Rezultatele prezentate în Tabelul 5 indică eficiența diagnostică ridicată a „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1”.

Studiile de sensibilitate ale sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1” au fost efectuate și cu seruri de sânge de la pacienți confirmați prin imunoblotting ca HIV pozitivi. Au fost testate un total de 428 de probe din astfel de seruri. Au fost obținute mai multe opțiuni pentru detectarea anticorpilor la diferite proteine ​​HIV și antigenul p24. Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 6.

La testarea probelor HIV 1 pozitive, 3% din seruri au prezentat o reacție pozitivă cu gp36 (HIV 2 env). OP/OPcrit. în aceste probe nu a depăşit 2,0. Datele noastre privind reactivitatea încrucișată a proteinelor exterioare ale HIV 1 (gp41) și HIV 2 (gp36) coincid cu datele din literatură.

Interpretarea rezultatelor

Analiza testării serurilor HIV pozitive și a probelor din panourile standard și interne în „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1” ne-a permis să dezvoltăm criterii de interpretare a rezultatelor acestui test. Criteriile recomandate sunt prezentate în Tabelul 7.

Pe baza acestor criterii, toate probele de ser HIV pozitive (n=428) au fost determinate a fi pozitive în „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV1”. Din cele 16 probe din panoul standard care conține anticorpi la HIV 1, 14 au fost determinate a fi pozitive și 2 au fost determinate a fi nedeterminate. Toate cele 8 probe din panoul standard care conţin anticorpi la HIV 2 au fost determinate a fi pozitive. Din cele 10 probe din panoul interior care conține anticorpi la HIV 1, 7 au fost determinate a fi pozitive și 3 au fost determinate a fi nedeterminate.

De asemenea, au fost efectuate studii de sensibilitate ale sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1” cu seruri de sânge de la pacienți care au avut un rezultat pozitiv la sistemele de testare imunosorbente legate de enzime care detectează simultan anticorpi și antigenul p24 și nedeterminat în imunoblot. Au fost testate un total de 123 de astfel de probe. Datele sunt prezentate în Tabelul 8.

La testarea serurilor cu un rezultat imunoblot nedeterminat (n=123) în „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1”, 72 de probe (58,5%) au arătat un rezultat pozitiv. Dintre acestea, 26 de seruri (21,1%) au fost pozitive numai pentru p24, 20 (16,3%) - numai pentru anticorpi, 16 (13%) - pentru p24 cu anticorpi la una dintre proteine, 10 (8,1%) - pe p24 cu anticorpi la două sau mai multe dintre proteine. Astfel, testarea numai pentru anticorpi (fără detectarea p24) ar identifica 30 de probe (24,4%) ca fiind pozitive. Detectarea antigenului p24 în test a permis ca încă 42 de probe (34,1%) să fie identificate ca pozitive.

Pentru a evalua specificitatea sistemului de testare, a fost utilizat un panou standard de seruri care nu conțineau anticorpi la HIV 1, 2 (n=20); probe de ser de sânge de la donatori sănătoși (n=610), probe de ser de sânge de la pacienți cu diverse boli infecțioase (n=224) fără legătură cu HIV; probe de ser de sânge de la pacienți cu diverse boli neinfecțioase - traumatisme, boli ale sistemului cardiovascular, oncologie (n=35); probe de ser sanguin de la femei gravide (n=40). Au fost testate un total de 929 de probe. O probă din serurile de sânge ale donatorilor sănătoși a arătat un rezultat fals pozitiv - au fost detectați anticorpi la gp41 și p24. 7 probe de ser de sânge de la donatori sănătoși și 2 probe de ser de sânge de la pacienți cu boli infecțioase care nu au legătură cu HIV au arătat un rezultat fals pozitiv pentru p24.

Pentru a evalua specificitatea sistemului de testare, a fost utilizat un panou standard de probe negative (OSO 42-28-214-94-02p, p. 009). Specificitatea a fost de 100%.

Astfel, studiile au arătat că specificitatea sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1” este de 99% la examinarea probelor de ser sanguin de la donatori normali și de la pacienți cu diferite boli infecțioase și somatice. .

Datele obținute arată eficiența diagnostică ridicată a sistemului de testare dezvoltat „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1”. Sistemul de testare poate fi utilizat pentru a detecta anticorpi la proteinele individuale ale HIV tip 1 și 2 și antigenul HIV1 p24 pentru a confirma un rezultat pozitiv al screening-ului cu sisteme de testare care detectează anticorpi sau sisteme de testare care detectează simultan anticorpii și antigenul HIV1 p24. Sistemul de testare poate fi folosit ca alternativă la testul imunoblot pentru a confirma rezultatele pozitive, precum și pentru a studia dinamica anticorpilor HIV și a antigenului p24 în diferite stadii de infecție.

AVANTAJELE TESTULUI

1. Test de confirmare imunoenzimatică în format tabletă

2. Test de confirmare care combină determinarea spectrului de anticorpi HIV 1, 2 și antigenul HIV 1 p24

3. Detectarea anticorpilor din toate clasele de Ig

4. Sensibilitatea pentru detectarea p24 este de cel puțin 5 pg/ml

5. Reduce rezultatele nedeterminate comparativ cu imunoblot

6. Timp de analiză - 1 oră 25 de minute (imunoblot - de la 3 la 20 de ore)

7. Evaluarea vizuală a adăugării tuturor componentelor și probelor.

1. Un sistem de testare imunoabsorbant legat de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi la virusul imunodeficienței umane (HIV) de primul și al doilea tip, primul tip de grup O și identificarea antigenului p24 la virusul imunodeficienței umane de primul tip p24, caracterizat prin aceea că include un imunosorbant pe bază de antigene ale virusului imunodeficienței umane, reprezentând gp41 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), -2), anticorpi la antigenul HIV 1 p24 și reactivii de detectare, în timp ce antigenele HIV și anticorpii HIV menționați mai sus sunt absorbiți în diferite godeuri ale plăcilor pentru testul imunosorbant legat de enzime.

2. Sistem de testare imunoenzimatică conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că pentru sorbţie se utilizează plăci de polistiren pliabile sau neseparabile cu 96 de godeuri pentru imunotestul enzimatic.

Informații generale despre studiu

HIV (virusul imunodeficienței umane) este un virus din familia retrovirusurilor care infectează celulele sistemului imunitar uman (CD4, celule T helper). Provoacă SIDA.

HIV-1 este cel mai frecvent tip de virus, cel mai des întâlnit în Rusia, SUA, Europa, Japonia și Australia (de obicei subtipul B).

HIV-2 este un tip rar, comun în Africa de Vest.

Pentru a diagnostica virusul imunodeficienței umane, se folosește un sistem de testare combinat de a patra generație, care este capabil să detecteze infecția cu HIV în decurs de 2 săptămâni de la intrarea virusului în sânge, în timp ce sistemele de testare din prima generație fac acest lucru la doar 6-12 săptămâni după infectare.

Avantajul acestui test HIV combinat este detectarea, datorită utilizării anticorpilor la HIV-1 p24 ca reactivi, a antigenului specific p24 (proteina capside virală), care poate fi detectat prin acest test în decurs de 1-4 săptămâni de la momentul infecției, adică chiar înainte de seroconversie, care scurtează semnificativ „perioada fereastră”.

În plus, acest test HIV detectează anticorpi la HIV-1 și HIV-2 în sânge (folosind reacția antigen-anticorp), care sunt produși în cantități suficiente pentru a fi detectați de sistemul de testare la 2-8 săptămâni după infectare.

După seroconversie, anticorpii încep să se lege de antigenul p24, rezultând un test de anticorpi HIV pozitiv și un test p24 negativ. Cu toate acestea, după ceva timp, atât anticorpii, cât și antigenul vor fi detectați în sânge în același timp. În stadiul terminal, un test SIDA pentru anticorpi la HIV poate da un rezultat negativ, deoarece mecanismul de producere a anticorpilor este perturbat.

Stadiile infecției cu HIV

1. Perioada de incubație, sau „perioada fereastră seronegativă”, este timpul de la momentul infecției până la dezvoltarea anticorpilor de protecție împotriva virusului în sânge, când testele pentru anticorpi la HIV sunt negative, dar persoana poate deja transmite virusul. altor persoane. Durata acestei perioade este de la 2 săptămâni la 6 luni.
2. Perioada de infecție acută cu HIV începe în medie la 2-4 săptămâni din momentul infectării și durează aproximativ 2-3 săptămâni. În această etapă, unii oameni pot dezvolta simptome nespecifice asemănătoare gripei din cauza replicării active a virusului.
3. Stadiul latent este asimptomatic, dar în timpul acestuia are loc o scădere treptată a imunității și o creștere a cantității de virus din sânge.
4. SIDA (sindromul imunodeficienței dobândite) este etapa finală de dezvoltare a infecției cu HIV, care se caracterizează prin supresia severă a sistemului imunitar, precum și boli concomitente, encefalopatie sau cancer.

În ciuda faptului că infecția cu HIV este incurabilă, astăzi există terapie antiretrovială (ART) foarte activă, care poate prelungi semnificativ viața unei persoane infectate cu HIV și poate îmbunătăți calitatea acesteia.

Acest test are o valoare diagnostică deosebit de mare dacă infecția cu HIV a apărut cu puțin timp înainte de momentul testării (2-4 săptămâni).

La ce se folosește cercetarea?

Analiza este utilizată pentru diagnosticarea precoce a HIV, ceea ce permite prevenirea transmiterii ulterioare a virusului către alte persoane, precum și inițierea în timp util a terapiei antiretrovirale și tratamentul bolilor care contribuie la progresia infecției cu HIV.

Când este programat studiul?

• Cu simptome persistente (timp de 2-3 săptămâni) de etiologie necunoscută: febră scăzută, diaree, transpirații nocturne, scădere bruscă în greutate, ganglioni limfatici măriți.
• Pentru infecții recurente cu herpes, hepatită virală, pneumonie, tuberculoză, toxoplasmoză.
• Dacă pacientul suferă de boli cu transmitere sexuală (sifilis, chlamydia, gonoree, herpes genital, vaginoză bacteriană).
• Dacă pacienta a avut sex vaginal, anal sau oral neprotejat cu mai mulți parteneri sexuali, un nou partener sau un partener de care pacientul nu este sigur de starea HIV.
• Când pacientul a fost supus unei transfuzii de sânge de la donator (deși cazurile de infecție în acest fel sunt practic excluse, deoarece sângele este testat cu atenție pentru prezența particulelor virale și este supus unui tratament termic special).
• Dacă pacientul a injectat droguri folosind instrumente sterile.
• În timpul sarcinii/planificarea sarcinii (luarea de azidotimidină în timpul sarcinii, operația cezariană pentru a evita transmiterea virusului la copil în timpul trecerii prin canalul de naștere și evitarea alăptării reduce riscul de transmitere a HIV de la mamă la copil de la 30% la 1% ).
• Injectarea accidentală cu o seringă sau alt obiect (de exemplu, un instrument medical) care conține sânge infectat (în astfel de cazuri probabilitatea de infecție este extrem de scăzută).

Cel mai răspândit virus în lume astăzi este SIDA, un virus din subfamilia retrovirusurilor; ei mai sunt denumiti și lentivirusuri sau „lenti”. Într-adevăr, în corpul uman încep să manifeste activitate după un timp relativ lung, aproximativ 10 ani.

Există imunodeficiențe de primul și al doilea tip. Dar putem vorbi în siguranță despre extinderea primului tip de virus. Odată ajuns în sânge și alăturându-se celulei responsabile de imunitate, virusul începe să se înmulțească rapid. În timp ce molecula CD4, responsabilă de recunoașterea sa, identifică inamicul insidios, aceasta reușește să infecteze întregul organism. Prin urmare, cu cât este diagnosticat mai devreme, cu atât sunt mai mari șansele pacientului de a primi un tratament în timp util și de a trăi mai mult.

Dacă o persoană are un motiv să se testeze pentru SIDA, acest lucru ar trebui făcut imediat. Cel mai adesea, baza unui astfel de diagnostic este determinarea anticorpilor împotriva imunodeficienței în sânge - proteine ​​care apar ca reacție la prezența virusului și încep să se formeze în perioada de la 1,5 la 6 luni de la momentul posibil. infecţie. Prin urmare, este mai recomandabil să faceți diagnosticare după această perioadă.

Cantitatea de anticorpi este determinată folosind o analiză numită test imunosorbent legat de enzime (ELISA). Această metodă este de încredere, este relativ precisă și foarte sensibilă, aceste cifre sunt de peste 99,5%. Piața farmaceutică oferă o serie de truse de diagnosticare pentru ELISA: CombiBest HIV, Anti-HIV 1 2, CombiBest anti-HIV, CombiBest anti-HIV 1 2, CombiBest anti-HIV 1 2 d 0172. Aceste sisteme de testare aparțin celui de-al treilea. generaţie. Dezavantajul acestor reactivi este că nu detectează întotdeauna boala devreme. Persoana este deja purtătoare de virus, este potențial periculoasă pentru parteneri, dar anticorpii nu sunt încă prezenți în sânge.

Trusele sunt echipate în principal cu un număr de teste pentru a efectua 12*8 sau 192 de teste anti-HIV. Nu este recomandat să le folosiți pe cont propriu. Descrierea medicamentelor indică faptul că scopul lor principal este de a detecta cantitatea de anticorpi împotriva ambelor tipuri de SIDA. Și, de asemenea, determinați anticorpi de toate clasele împotriva SIDA. Dacă nu există anticorpi, atunci boala nu a fost diagnosticată.

A patra generație de teste „văd”, pe lângă anticorpi, și antigenele SIDA; ele sunt capabile să detecteze infecția mai devreme decât metodele de a treia generație. Pentru comparație: antigenul HIV este în sânge începând cu a 5-a zi, iar primii anticorpi apar nu mai devreme de o lună mai târziu. CombiBest HIV 1, 2 AG/AT (setul 1) și CombiBest HIV 1, 2 AG/AT (setul 2) aparțin testelor de generația a 4-a. Folosind un set de acești reactivi, anticorpii la antigenul de tip 1, 2 și p24 sunt detectați prin examinarea serului sau plasmei din sânge uman. Multe țări folosesc testarea ELISA de a 4-a generație, care se mai numește și Antigen/Anticorp, abreviat AGAT.

Testarea se face anonim.

Diagnosticul în timp util al infecției cu HIV devine o măsură extrem de importantă, deoarece inițierea timpurie a tratamentului poate determina în mare măsură dezvoltarea ulterioară a bolii și poate prelungi viața pacientului. În ultimii ani, s-au înregistrat progrese semnificative în identificarea acestei boli groaznice: sistemele de testare mai vechi sunt înlocuite cu altele mai avansate, metodele de examinare devin din ce în ce mai accesibile, iar acuratețea lor crește semnificativ.

În acest articol vom vorbi despre metode moderne de diagnosticare a infecției cu HIV, cunoașterea cărora este utilă pentru tratarea în timp util a acestei probleme și pentru menținerea unei calități normale a vieții pacientului.

Metode de diagnosticare HIV

În Rusia, se efectuează o procedură standard pentru a diagnostica infecția cu HIV, care include două niveluri:

• Sistem de testare ELISA (analiza screening);
• imunoblot (IB).

Pentru diagnosticare pot fi utilizate și alte metode:

• teste rapide.

Sisteme de testare ELISA

În prima etapă a diagnosticului, un test de screening (ELISA) este utilizat pentru a detecta infecția cu HIV, care se bazează pe proteinele HIV create în laboratoare care captează anticorpi specifici produși în organism ca răspuns la infecție. După interacțiunea lor cu reactivii (enzimele) sistemului de testare, culoarea indicatorului se schimbă. În continuare, aceste modificări de culoare sunt procesate cu ajutorul unor echipamente speciale, care determină rezultatul analizei efectuate.

Astfel de teste ELISA pot arăta rezultate în câteva săptămâni de la introducerea infecției cu HIV. Acest test nu determină prezența virusului, ci detectează producția de anticorpi împotriva acestuia. Uneori, în corpul uman, producția de anticorpi împotriva HIV începe după 2 săptămâni de la infectare, dar la majoritatea oamenilor aceștia sunt produși la o dată ulterioară, după 3-6 săptămâni.

Există patru generații de teste ELISA cu sensibilități diferite. În ultimii ani, au fost din ce în ce mai utilizate sisteme de testare de generația a treia și a patra, care se bazează pe peptide sintetice sau proteine ​​recombinate și au o specificitate și o precizie mai mare. Acestea pot fi utilizate pentru a diagnostica infecția cu HIV, pentru a monitoriza prevalența HIV și pentru a asigura siguranța la testarea sângelui donat. Precizia sistemelor de testare ELISA din generațiile III și IV este de 93-99% (testele produse în Europa de Vest sunt mai sensibile - 99%).

Pentru a efectua un test ELISA, se prelevează 5 ml de sânge din vena pacientului. Între ultima masă și analiză trebuie să treacă cel puțin 8 ore (de obicei se face dimineața pe stomacul gol). Se recomandă efectuarea unui astfel de test nu mai devreme de 3 săptămâni de la infecția suspectată (de exemplu, după un contact sexual neprotejat cu un nou partener sexual).

Rezultatele testului ELISA se obțin în 2-10 zile:

• rezultat negativ: indică absența infecției cu HIV și nu necesită contactarea unui specialist;
• rezultat fals negativ: poate fi observat în stadiile incipiente ale infecției (până la 3 săptămâni), în stadiile ulterioare ale SIDA cu suprimarea severă a sistemului imunitar și cu pregătirea necorespunzătoare a sângelui;
• rezultat fals pozitiv: poate fi observat în unele boli și în caz de pregătire necorespunzătoare a sângelui;
• rezultat pozitiv: indică infecția cu HIV, necesită efectuarea unui IB și contactarea pacientului cu un specialist la centrul SIDA.

De ce poate un test ELISA să dea rezultate fals pozitive?

Rezultatele fals pozitive ale testelor HIV ELISA pot apărea din cauza procesării necorespunzătoare a sângelui sau la pacienții cu următoarele afecțiuni și boli:

• mielom multiplu;
• boli infecțioase cauzate de virusul Epstein-Barr;
• stare dupa ;
• boală autoimună;
• pe fundalul sarcinii;
• starea după vaccinare.

Din motivele descrise mai sus, anticorpii nespecifici cu reacție încrucișată pot fi prezenți în sânge, a căror producție nu a fost provocată de infecția cu HIV.

În ultimii ani, frecvența rezultatelor fals pozitive a scăzut semnificativ datorită utilizării sistemelor de testare din generația III și IV, care conțin peptide mai sensibile și proteine ​​recombinante (sunt sintetizate prin inginerie genetică in vitro). După introducerea unor astfel de teste ELISA, frecvența rezultatelor fals pozitive a scăzut semnificativ și este de aproximativ 0,02-0,5%.

Un rezultat fals pozitiv nu înseamnă că persoana este infectată cu HIV. În astfel de cazuri, OMS recomandă efectuarea unui alt test ELISA (neapărat generația IV).

Sângele pacientului este trimis la un laborator de referință sau de arbitraj cu marcajul „repetare” și testat folosind un sistem de testare ELISA de generația IV. Dacă rezultatul noii analize este negativ, atunci primul rezultat este considerat eronat (fals pozitiv) și IS nu este efectuat. Dacă rezultatul este pozitiv sau discutabil în timpul celui de-al doilea test, pacientul trebuie să fie supus IB după 4-6 săptămâni pentru a confirma sau infirma infecția cu HIV.

Blotting imun

Un diagnostic definitiv de infecție cu HIV poate fi pus doar după obținerea unui rezultat pozitiv al imunoblotării (IB). Pentru a-l realiza, se folosește o bandă de nitroceluloză, pe care se aplică proteine ​​virale.

Prelevarea de sânge pentru IB se efectuează dintr-o venă. În continuare, suferă o prelucrare specială, iar proteinele conținute în serul său sunt separate într-un gel special în funcție de sarcina și greutatea moleculară a acestora (manipularea se realizează folosind echipamente speciale sub influența unui câmp electric). Pe gelul de ser sanguin se aplică o bandă de nitroceluloză și se efectuează blotting („blotting”) într-o cameră specială. Banda este procesată și dacă materialele folosite conțin anticorpi împotriva HIV, aceștia se leagă de benzile antigenice de pe IB și apar ca linii.

IB este considerat pozitiv dacă:

• conform criteriilor americane CDC - există două sau trei linii gp41, p24, gp120/gp160 pe bandă;
• conform criteriilor FDA americane, banda are două linii p24, p31 și o linie gp41 sau gp120/gp160.

În 99,9% din cazuri, un rezultat pozitiv IB indică infecția cu HIV.

Dacă nu există linii, IB este negativ.

La identificarea liniilor cu gr160, gr120 și gr41, IB este îndoielnic. Acest rezultat poate apărea atunci când:

• boli oncologice;
• sarcina;
• transfuzii de sânge frecvente.

În astfel de cazuri, se recomandă repetarea testului folosind un kit de la o altă companie. Dacă după IB suplimentar rezultatul rămâne îndoielnic, atunci observarea este necesară timp de șase luni (IB se efectuează la fiecare 3 luni).

Reacția polimerazei în lanț

Un test PCR poate detecta ARN-ul virusului. Sensibilitatea sa este destul de mare și permite detectarea infecției cu HIV în 10 zile de la infectare. În unele cazuri, PCR poate da rezultate fals pozitive, deoarece sensibilitatea sa ridicată poate răspunde și la anticorpii la alte infecții.

Această tehnică de diagnosticare este costisitoare și necesită echipamente speciale și specialiști cu înaltă calificare. Aceste motive nu fac posibilă efectuarea de teste în masă a populației.

PCR este utilizată în următoarele cazuri:

• depistarea HIV la nou-născuții născuți din mame infectate cu HIV;
• pentru a detecta HIV în „perioada fereastră” sau în caz de IB îndoielnic;
• pentru a controla concentrația HIV în sânge;
• pentru studiul sângelui donatorului.

Testul PCR singur nu pune un diagnostic de HIV, ci este efectuat ca o metodă suplimentară de diagnosticare pentru a rezolva situațiile controversate.

Metode exprese

Una dintre inovațiile în diagnosticarea HIV sunt testele rapide, ale căror rezultate pot fi evaluate în 10-15 minute. Cele mai eficiente și precise rezultate se obțin cu ajutorul testelor imunocromatografice bazate pe principiul fluxului capilar. Sunt benzi speciale pe care se aplică sânge sau alte fluide de testare (salivă, urină). Dacă sunt prezenți anticorpi împotriva HIV, după 10-15 minute pe test apare o bandă colorată și de control - un rezultat pozitiv. Dacă rezultatul este negativ, apare doar banda de control.

Ca și în cazul testelor ELISA, rezultatele testelor rapide trebuie confirmate prin analiza IB. Numai după aceasta se poate face un diagnostic de infecție cu HIV.

Există kituri de testare rapidă la domiciliu disponibile. Testul OraSure Technologies1 (SUA) este aprobat de FDA, disponibil la ghișeu și poate fi folosit pentru a detecta HIV. După test, dacă rezultatul este pozitiv, pacientului i se recomandă să fie supus unei examinări la un centru specializat pentru confirmarea diagnosticului.

Alte teste pentru uz casnic nu au fost încă aprobate de FDA și rezultatele lor pot fi foarte discutabile.

În ciuda faptului că testele rapide sunt inferioare ca precizie față de testele ELISA de generația IV, acestea sunt utilizate pe scară largă pentru testarea suplimentară a populației.

Puteți face teste pentru depistarea infecției cu HIV la orice clinică, spital central raional sau centre specializate SIDA. Pe teritoriul Rusiei, acestea se desfășoară în mod absolut confidențial sau anonim. Fiecare pacient se poate aștepta să primească consult medical sau psihologic înainte sau după test. Nu va trebui să plătiți decât pentru testele HIV în instituțiile medicale comerciale, în timp ce în clinicile publice și spitalele acestea se efectuează gratuit.

Citiți despre modalitățile prin care vă puteți infecta cu HIV și ce mituri există despre posibilitățile de a vă infecta.

Descriere

Pregătirea

Indicatii

Interpretarea rezultatelor

Descriere

Metoda de determinare Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA).

Material în studiu Ser de sânge

Vizita la domiciliu disponibila

Detectarea combinată a anticorpilor la HIV tipurile 1 și 2 și a antigenului HIV p24, test calitativ.

Atenţie. În cazul reacțiilor pozitive și discutabile, perioada de eliberare a rezultatelor poate fi prelungită la 10 zile lucrătoare. HIV (virusul imunodeficienței umane), care provoacă SIDA (sindromul imunodeficienței dobândite), aparține familiei retrovirusurilor. Se transmite de la persoană la persoană prin utilizarea de ace și seringi contaminate pentru administrarea intravenoasă de medicamente sau proceduri terapeutice, în timpul contactului sexual, atât heterosexual, cât și homosexual. Transmiterea virusului se poate produce prin transfuzia de sânge infectat și a produselor acestuia, donarea de organe sau lichid seminal și în rândul lucrătorilor medicali - prin rănirea cauzată de ace sau instrumente contaminate. Infecția cu HIV este posibilă prin transmiterea de la o mamă infectată la copil (cale verticală), deși metodele moderne de prevenire care utilizează terapia antiretrovială, dacă sunt respectate toate recomandările, pot reduce acest risc la minimum.

Procesul de interacțiune a unui virus cu o celulă include o serie de etape: legarea virusului de celulă, eliberarea acestuia din plic, pătrunderea în citoplasmă, sinteza ADN-ului folosind ARN viral, integrarea ADN-ului viral în genomul celula gazdă. După aceasta, începe stadiul latent al infecției. În această stare, ADN-ul proviral poate exista o perioadă de timp fără a prezenta activitate și fără a afecta viața celulei gazdă. Deși nu există o expresie a proteinelor virale, nu există niciun răspuns imun la virus. Anticorpii împotriva HIV, care caracterizează răspunsul imun al organismului, apar după activarea ADN-ului viral și începutul reproducerii active a virusului. Durata perioadei latente depinde de o serie de factori, inclusiv de caracteristicile genetice individuale ale organismului.

Anticorpii împotriva HIV pot apărea începând cu a doua săptămână după infectare; continutul lor creste in 2-4 saptamani si ramane multi ani. La 90-95% dintre persoanele infectate apar în primele trei luni după infectare, la 5-9% - în perioada de la trei până la șase luni, în 0,5-1% - la o dată ulterioară.

În primele săptămâni de infecție, chiar înainte de apariția anticorpilor împotriva virusului (adică înainte de seroconversie), prezența antigenelor HIV, inclusiv a proteinei capsidei p24, poate fi detectată în probele de ser sau plasmă. Mai târziu, după seroconversie, devine de obicei nedetectabil.

Sistemele de testare combinate de generația a 4-a, care includ testul HIV Ag/Ab Combo (Arhitect, Abbott), detectează atât anticorpii la HIV tipurile 1 și 2, cât și antigenul HIV p24, ceea ce permite detectarea precoce a infecției. Caracteristicile speciale ale testului de screening utilizat în laboratorul INVITRO pentru depistarea infecției cu HIV includ specificitatea ridicată a studiului (> 99,5%); Testul este 100% sensibil la anticorpii caracteristici perioadei de seroconversie, iar sensibilitatea testului la antigenul p24 este de aproximativ 18 pg/ml.

Procedura de efectuare a unei examinări de laborator pentru HIV este strict reglementată de ordinele Ministerului Sănătății al Federației Ruse și include etapa unui studiu de screening (selecție) a prezenței anticorpilor la HIV utilizând testul imunosorbent legat de enzime (ELISA). metode aprobate pentru utilizare, și stadiul unui studiu de verificare (confirmare) mai detaliat în laboratorul centrului SIDA al orașului. Trebuie remarcat faptul că nici cele mai bune sisteme ELISA de screening nu garantează o specificitate de 100%, adică există o anumită probabilitate de a obține rezultate nespecifice, fals pozitive, asociate cu caracteristicile serului sanguin al pacientului. Prin urmare, un rezultat pozitiv al unei examinări ELISA de screening poate să nu fie confirmat în testele de confirmare, după care pacientului i se va da un rezultat negativ sau nedeterminat. Dacă rezultatul studiului de confirmare este incert, testarea trebuie repetată în timp după 2-3 săptămâni.

Diagnosticul de laborator al infecției cu HIV la copiii născuți din mame infectate cu HIV are propriile sale caracteristici. Anticorpii materni împotriva HIV (clasa IgG) pot circula în sângele lor timp de până la 18 luni din momentul nașterii. Absența anticorpilor împotriva HIV la nou-născuți nu înseamnă că virusul nu a pătruns în bariera placentară. Copiii mamelor infectate cu HIV sunt supuși examinării diagnostice de laborator în termen de 36 de luni de la naștere.

Pregătirea

Nu necesită pregătire specială. Se recomandă ca sângele să fie luat nu mai devreme de 4 ore după ultima masă. Recomandări generale pentru pregătirea pentru cercetare pot fi găsite. Este recomandabil să se efectueze un test pentru a detecta antigenul și anticorpii HIV nu mai devreme de două săptămâni de la o posibilă infecție, cu un test repetat după trei și șase săptămâni în cazul unui rezultat negativ. Cererile de cercetare la INVITRO SRL se completează cu un pașaport sau un document care îl înlocuiește (carte de migrare, înregistrare temporară la locul de reședință, legitimație de personal militar, certificat de la oficiul de pașapoarte în caz de pierdere a pașaportului, carte de înregistrare de la un hotel). Documentul prezentat trebuie să conțină în mod necesar informații despre înregistrarea temporară sau permanentă în Federația Rusă și o fotografie. În lipsa unui pașaport (un document care îl înlocuiește), pacientul are dreptul de a completa o cerere anonimă pentru donarea de biomaterial. În cadrul unei examinări anonime, a unei cereri și a unei mostre de biomaterial primite de la client, i se atribuie un număr care este cunoscut doar de pacient și de personalul medical care a plasat comanda. ! Rezultatele studiilor efectuate anonim nu pot fi depuse pentru internare, examene profesionale si nu fac obiectul inregistrarii in ORUIB.

Indicatii de utilizare

• Ganglioni limfatici măriți în mai mult de două zone.
• Leucopenie cu limfopenie.
• Transpirații nocturne.
• Pierdere bruscă în greutate de cauză necunoscută.
• Diaree de mai mult de trei săptămâni de cauză necunoscută.
• Febră de cauză necunoscută.
• Planificarea sarcinii.
• Pregătirea preoperatorie, spitalizare.
• Detectarea următoarelor infecții sau combinații ale acestora: tuberculoză, toxoplasmoză manifestă, infecție cu herpesvirus adesea recurentă, candidoză a organelor interne, nevralgie herpes zoster repetată, pneumonie cauzată de micoplasme, pneumocystis sau legionella.
• Sarcomul lui Kaposi la o vârstă fragedă.
• Contacte sexuale ocazionale.

Interpretarea rezultatelor

Interpretarea rezultatelor cercetării conține informații pentru medicul curant și nu reprezintă un diagnostic. Informațiile din această secțiune nu trebuie utilizate pentru auto-diagnosticare sau auto-tratament. Medicul pune un diagnostic precis folosind atât rezultatele acestei examinări, cât și informațiile necesare din alte surse: istoric medical, rezultate ale altor examinări etc.

Unitati de masura in Laboratorul Independent INVITRO: test calitativ. Forma de prezentare a rezultatelor: în absența anticorpilor împotriva antigenului HIV 1 și 2 și p24, răspunsul este „negativ”. Dacă sunt detectați anticorpi la HIV sau un antigen într-un test de screening imunosorbent legat de enzime, o probă de ser este trimisă pentru confirmare prin imunoblot la centrul orașului SIDA, care verifică rezultatele pozitive și nedeterminate.

Rezultat pozitiv:

1. infecție cu HIV;
2. rezultat fals pozitiv care necesită studii repetate sau suplimentare *);
3. studiul nu este informativ la copiii sub 18 luni născuți din mame infectate cu HIV.

*Specificitatea sistemului de teste de screening Anticorpi la HIV 1 și 2 și antigen HIV 1 și 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott), conform estimărilor furnizate de producătorul de reactiv, este de aproximativ 99,6% atât în ​​populația generală, cât și în grupați pacienți cu potențiale interferențe (infecții HBV, HCV, rubeolă, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E. coli, Chl. trach. etc., patologii autoimune (inclusiv artrita reumatoidă, prezența anticorpilor antinucleari) , sarcina, niveluri crescute de IgG, IgM, gammapatii monoclonale, hemodializa, transfuzii multiple de sange).