» »

Серологическое исследование крови антиген с. Зачем делают серологический анализ крови

02.07.2020

Объект серологии — антигены и антитела

Серологическое исследование (СИ) основано на способности антигенов и антител связываться друг с другом. СИ позволяет с точностью выявить наличие у пациента определённого вируса либо бактерии, группу крови и резус, реактивность организма к антибиотикам, аутоиммунные заболевания, гормональные нарушения, индивидуальную специфичность белков, определить эффективность терапии.

Антиген и антитело подходят друг другу как замочная скважина и ключ, при встрече они непременно связываются. Эта серологическая реакция позволяет выявлять различные виды антител либо антигенов.

Способность иммунитета вырабатывать особые вещества, нейтрализующие вредоносные частицы, была известна учёным давно. Но увидеть реакцию антиген-антитело в лабораторных условиях удалось только в конце XIX века. Было обнаружено, что в результате образования связки, комплексы выпадают в осадок, образуя хлопья либо помутнение. Такие реакции получили названия агглютинации и преципитации. В XX веке серология — наука о свойствах сыворотки, стремительно развивалась, обнаруживались новые методы диагностирования на основе реакций антиген-антитело. На сегодняшний день существует множество способов выявления иммунных комплексов, а СИ являются незаменимым звеном в диагностике, лечении, создании новых медицинских препаратов и вакцин.

Показания к проведению анализа.

Серологические исследования широко применяется в акушерстве

Серологические исследования сопровождают современного человека на протяжении всей жизни. Первые анализы на выявление определённых антител проводятся, когда малыш находится ещё в утробе. Беременная женщина сдаёт кровь на различные СИ для определения возможного резус-конфликта либо инфекций, способных навредить вынашиваемому плоду. Когда ребёнок появляется на свет, его ожидают серологические исследования, позволяющие диагностировать врождённые заболевания. Впоследствии анализы сдаются по следующим причинам:

Прием препаратов желательно отменить накануне теста

Так как серологические исследования охватывают широкий спектр анализов, в каждом конкретном случае может понадобиться определённая подготовка, но существуют общие правила сдачи серологического теста:

  • За сутки до исследования следует ограничить в рационе жирное и жареное, исключить алкоголь.
  • Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до анализа.
  • В день сдачи крови не следует употреблять кофе, чай либо иные напитки. Можно в небольшом количестве пить чистую воду.
  • Лекарственные средства перед анализом исключаются. Если приём отменить невозможно, необходимо предоставить врачу полный перечень препаратов, в том числе витаминов, пероральных контрацептивов.
  • Все другие исследования либо медицинские манипуляции проводятся после СИ.
  • Курение рекомендуется прекратить за 12 часов до взятия образца крови.
  • В предыдущий день следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, а перед исследованием желательно 15 минут посидеть в полном покое.
  • СИ назначаются на утреннее время и сдаются натощак.

Методы проведения серологического исследования.

В серологии может применяться большое число методов

Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.

Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).

Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики

Методы серологических исследований:

  • Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
  • Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
  • Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
  • Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
  • Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
  • Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
  • Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
  • Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
  • Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
  • Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
  • Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.

Иммунофлюорисцентный метод.

«Свечение» в темнопольном микроскопе

Данный метод основан на использовании Ат, меченных флуоресцентным веществом. Чаще всего в качестве метки используется флуоресцеинизотиоционат, обладающий зелёным свечением в лучах ультрафиолета. Результат анализа оценивается по степени яркости свечения. Может быть использован ручной метод определения при помощи люминесцентного микроскопа, оптического микроскопа с люминесцентной насадкой, а также автоматический способ с применением микрочипового цитомера, проточного цитомера либо роботизированного флуоресцентного микроскопа.

РИФ проводится прямым и непрямым методом. Прямой способ означает непосредственное связывание сорбированного Аг с меченым Ат. Непрямой метод подразумевает использование немаркированных Ат для связки с Аг, а затем добавление меченых Ат, что позволяет избежать неспецифических реакций.

Иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ как метод серологической диагностики

ИФА основан на выявлении комплексов Аг-Ат при помощи маркирования одного из компонентов. В качестве метки используются различные ферменты, которые в результате ферментативной реакции образуют окрашивание. Существуют разнообразные методы ИФА, их можно классифицировать как гомогенные и гетерогенные методы.

Гомогенные означают, что все этапы реакции происходят в растворе.

Гетерогенные методы включают разделение на фазы с использованием твёрдого носителя.

Гомогенно-гетерогенные способы основываются на том, что комплексы Аг-Ат формируются в растворе, а затем для разделения используется твёрдая фаза.

Принцип «сэндвич»-метода

Существует множество вариаций методов ИФА, некоторые из них представлены ниже.

  1. Сэндвич-метод. К иммобилизованным Ат добавляется раствор с Аг, после образования комплексов носитель отмывают от лишних компонентов и добавляют маркированные Ат. В результате, Аг оказываются зажатыми иммобилизованными и мечеными Ат, откуда и произошло название метода.
  2. Неконкурентный непрямой ИФА. К иммобилизованным Аг присоединяют исследуемую сыворотку с Ат. Когда образуются комплексы, лишние Ат смывают и добавляют маркированные Ат, способные связаться с прикреплёнными к поверхностям лунок иммунными комплексами.
  3. Конкурентный прямой ИФА. К иммобилизованным Аг вносят исследуемую сыворотку и конъюгат, содержащий маркированные Ат. Формируются комплексы Аг-Ат нескольких видов: с мечеными Ат и с немаркированными Ат, которые вступают между собой в конкуренцию за связь с Аг.

Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.

Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя

СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.

Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.

Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:

  • вирус гепатита А, В, С, D, Е;
  • сифилис;
  • герпес;
  • цитомегаловирус;
  • краснуха;
  • корь;
  • паротит;
  • Эпштейн-Барр;
  • хеликобактер;
  • хламидии;
  • микоплазмы;
  • токсоплазмы;
  • лямблии;
  • гельминты;
  • уреаплазмы;
  • парвовирус;
  • вирус ветряной оспы;
  • вирус клещевого энцефалита;
  • вирус Денге;
  • коклюш;
  • боррелии;
  • легионеллы.

Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.

Преимущества серологического метода исследования в диагностике инфекций.

Серологическая диагностика — быстро и доступно

  1. Высокая чувствительность и специфичность.
  2. Широкий спектр определяемых инфекций.
  3. Ранняя диагностика инфицирования.
  4. Возможность мониторинга развития заболевания.
  5. Быстрота и удобство в исполнении.
  6. Возможность использования минимального объёма исследуемого материала.
  7. Безопасность исследования.

В основе серологических реакций находится способность антигенов и антител взаимодействовать, образовывая иммунные защитные комплексы в крови при заболевании. Анализ крови, таким образом, по характеру химической серологической реакции при добавлении или антигена, или антитела, помогает определить наличие инфекции в организме.

Что такое серологический анализ крови?

Серологический анализ крови – это метод лабораторного исследования крови, с помощью которого диагностируются инфекционные заболевания и определяется стадия развития инфекционного процесса. Основываются результаты на различной степени взаимодействия антигенов и антител, что помогает выявить серологическая химическая реакция.

Серологический анализ крови используют в таких ситуациях:

  • определение количества антител против инфекционных возбудителей в организме; при таком анализе изначально в сыворотку крови добавляют антиген возбудителя болезни, и тогда оценивают химическую реакцию, которая происходит;
  • противоположная ситуация – когда инфекция определяется по содержащимся антигенам; тогда в кровь добавляют антитела, чтобы выявить антиген;
  • также данный анализ используют при определении группы крови пациента.

Если в процессе свертываемости крови присутствуют отклонения, тем более, если есть гиперкоагуляция, то это может привести к плохим последствиям, таким как инфаркт, инсульт или тромбоз.

Подготовка к серологическому анализу крови для диагностики инфекций

Анализ крови на серологические реакции проводится натощак. Для исследований используется сыворотка крови. В ней во время исследования определяют взаимодействие антител и антигенов.

Показания к серологическому анализу крови для диагностики инфекций

Данный метод лабораторного исследования используют для определения инфекционных заболеваний, таких как:

  • лямлиоз;
  • амебиаз;
  • токсоплазмоз;
  • цистицеркоз;
  • описторхоз;
  • токсокароз;
  • трихинеллез;
  • эхинококкоз.

Также серологический анализ назначается в таких ситуациях:

  • при болезни печени;
  • при аутоиммунных заболеваниях;
  • при варикозном расширении вен;
  • при сердечно-сосудистой патологии;
  • при отклонениях в свертываемости крови;
  • при обследовании беременных;
  • обследование перед и после операции;
  • чтобы определить насколько эффективно проходит лечение;
  • повторно после окончания курса лечения.

В основном этот анализ используют в венерологии и урологии.

Серологический анализ крови для диагностики инфекций – норма

Нормой результата анализа на серологические реакции является отсутствие антител к возбудителям, что говорит об отсутствии инфекций в организме. Однако, как правило, этого не бывает, раз уже есть основания для назначения данного серологического анализа.

Он всегда проводится два раза, чтобы определить динамику заболевания, поскольку однократное определение взаимодействия антител или антигенов не отражает картины заражения. Показатель заражения – это увеличение количества связей между антителами (иммуноглобулинами) и антигенами при следующем исследовании.

Серологический анализ крови для диагностики инфекций – повышенный

Повышенное количество комплексов антител и антигенов в организме говорит о присутствии инфекционной болезни в организме. При возрастании показателей в крови проводят специфические химические реакции, которые помогают определить болезнь и ее стадию.

Серологический анализ крови для диагностики инфекций – пониженный

Пониженным результат быть не может, поскольку «ноль» является показателем нормы.

Что может влиять на результат?

При сдаче любого анализа – главное соблюдать правила подготовки к нему. И проследить, чтобы забор крови проходил в санитарных условиях, чтобы в испытываемую кровь не попало ничего постороннего. И важно сдавать анализ натощак. На предыдущий день не перегружать организм жирной едой, алкоголем и сладкими напитками. Исключить стресс и физические нагрузки.

В каких случаях используется серологический анализ крови

Серология представляет собой науку, которая позволяет качественная изучить свойства сыворотки человеческой крови. Это один из важнейших разделов иммунологии, который уделяет особенное внимание взаимодействию антигенов и антител.

Существует две основные разновидности серологической реакции по способу действия:

  1. Прямая. Также имеет название двухкомпонентная. К данному типу относятся реакции агглютинации, а также пассивной гемагглютинации.
  2. Косвенная, или трехкомпонентная. Происходит торможение гемагглютинации или реакции нейтрализации.


На данный момент этот вид исследований активно применяется в следующих целях:

  1. Определение группы крови человека.
  2. Выявление числа антител, которые возникли в результате появления инфекционного возбудителя в организме человека. В этом случае необходимо провести комплексную оценку химической реакции, которая появилась из-за добавления в сыворотку специального антигена болезни.
  3. Определение инфекционного заболевания по антигенам, при этом в кровь необходимо добавить антитела для эффективного проявления антигена.

Если в процессе свертываемости возникли какие-либо проблемы, в таком случае следует срочно принять соответствующие меры. В противном случае бездействие может привести к инфарктам, тромбозу или инсульту.

Основные показания для выполнения серологического анализа крови

На сегодняшний день данная методика активно используется для определения следующих болезней:

  • амебиаз;
  • лямблиоз;
  • описторхоз;
  • сифилис;
  • токсокароз;
  • токсоплазмоз;
  • трихинеллез;
  • цистицеркоз;
  • эхинококкоз.


Кроме того, такие исследования применяются в следующих случаях:

  • обследование беременной женщины;
  • выявление болезней сердечно-сосудистой системы;
  • обследования, которые необходимы в венерологии и урологии;
  • исследования печени;
  • различные обследования перед или после выполнения операций;
  • определение патологий в процессе свертываемости крови;
  • варикозное расширение вен;
  • аутоиммунные болезни;
  • выявление эффективно проведения лечения;
  • после окончания соответствующей терапии.

Таким образом, при помощи серологического исследования крови человек можно своевременно выявить различные виды сложнейших заболеваний. Это позволяет назначить эффективный план лечения.

Серологический анализ крови: плюсы и минусы

Каждый вид обследования имеет свои преимущества и недостатки, которые стоит учитывать.

К достоинствам методики можно отнести следующие аспекты:

  • достоверность результата;
  • доступная стоимость;
  • результат готов в довольно короткие сроки – всего сутки необходимы для полной готовности;
  • способ позволяет проводить контроль за качеством и эффективностью всего лечения.

Главным недостатком считается то, что определенные заболевания можно выявить не сразу, так как существует инкубационный период.

Как подготовиться к сдаче анализа

Данный анализ сдается исключительно натощак. Чтобы избежать различных ошибок и получить максимально достоверный результат, рекомендуется придерживаться следующих правил:

  1. За несколько дней лучше исключить из своего рациона слишком жирные и острые блюда.
  2. Постараться меньше нервничать и беспокоиться.
  3. Минимизировать употребление продуктов, содержащих большое количество сахара.
  4. Ограничить физические упражнения.
  5. Отказаться от алкогольных напитков и никотина.

Благодаря вышеперечисленным правилам вы сможете получить максимально достоверный результат.

Расшифровка

Нетрепонемные Трепонемные
RPR тестирование быстрых плазменных реагинов, имеющих микрореакцию преципитации FTA Реакция иммунофлюрооресценции (РИФ)
RST тестирование отбора реагинов RW реакция связывания комплимента
TRUST определение результата с использованием толуидиновым красным и непрогретой сывороткой ELISA анализ на определение иммунных ферментов
USR определение плазменной активности реанинов TPHA реакция гемагглютинации (пассив)
Western-blot метод иммуноблота

Метод иммуноблота

Нетрепонемные реакции оцениваются в лабораторных условиях. При отрицательном результате в графе выставляется прочерк. Если были найдены хлопья достаточно крупных размеров, то показатель будет составлять от +3 до +4. Если были выявлены средние по размеру хлопья, то в результате будет указано +1 и +2.

Важно помнить, что инфицирование выявляется только по прошествии одного-двух месяцев.

Трепонемные тесты более точные. Но обозначения во многом совпадают.

Помните, что анализы индивидуальны, и только профессиональный лаборант может по-настоящему точно расшифровать их. Не стоит заниматься самостоятельным лечением, так как здоровье можно доверить только специализированным докторам.

Серология-это раздел иммунобиологии, изучающий взаимоотношение антигенов и антител в сыворотке (serum) крови животных и человека. Серологический анализ крови — это современный метод анализ, проводимый для распознавания инфекционных заболеваний и нарушений работы иммунной системы организма. Проведение серологического анализа делает возможным определение причины болезни. С помощью реакций serum определяют , тестируют компоненты на совместимость перед , контролируют эффективность вакцин. Задачей серологии является разработка и производство диагностических и лечебных сывороток.

В серологии используют следующие реакции:

  • склеивания (агглютинации);
  • осаждения (преципитации);
  • уничтожения (нейтрализации);
  • обнаружения активированных белков (связывания комплемента);
  • использование меченых антигенов или .

Типы исследований

Многих интересует вопрос: серологический анализ крови-что это? Это диагностика заболеваний при помощи серологических реакций (seroreaction), иначе говоря, процесс взаимодействия антигенов и антител. Существует два типа исследования серум или два пути диагностики заболевания с помощью seroreaction: В первом случае к серум добавляют антиген известного болезнетворного фактора и определяют титр антител. То есть, степень готовности организма бороться с фактором, вызывающим заболевание.

Во втором случае к серум добавляют антитела для обнаружения антигена болезнетворного фактора. То есть, проник ли болезнетворный фактор в кровь пациента. Серологический анализ крови применяют в тех случаях, когда необходимо провести дифференциальную диагностику заболевания. Только в том случае, когда установлена причина патологии, врач сумеет назначить соответствующий курс лечения. Потому, что против каждого возбудителя болезни существуют специфические лекарственные средства.

Если при диагностировании заболевания поставлена цель определить количественный и качественный состав антител и антигенов, требуется провести (ИФА). С помощью такого анализа определяется уровень концентрации гормонов, иммуногенетических сочетаний или иных биологически активных составляющих сыворотки крови, околоплодных вод, спинномозговой жидкости, лёгочного пунктата. Все исследования проводят инвитро (in vitro), то есть вне организма, в пробирке.

Известно, что в ответ на внедрение в организм чуждых для него белоксодержащих агентов, мобилизуются иммуноглобулины. Происходит нейтрализация чужеродных белков путём образования химического соединения с протеинсодержащими антителами организма. Обнаружение таких комплексных соединений и определение их количества и является задачей иммуноферментного анализа.

Антитела представляют собой молекулы белков-иммуноглобулинов. Смысл существования антител заключается в нейтрализации болезнетворных антигенов путём синтеза из двух биологически активных молекул белков одной инактивированной.

Медицинской наукой открыто пять видов иммуноглобулинов серум. При проведении серологического анализа крови контролируют три вида. Наиболее востребован контроль за иммуноглобулином А. Он располагается на поверхности слизистых оболочек и отвечает за блокировку чуждого для организма агента.

Серологический анализ на коклюш проводят наряду с молекулярно-генетическим и бактериологическим методами исследований. Это зависит от стадии заболевания.

Преимущества и недостатки

Сильными местами иммуноферментного анализа является диагностика патологий на ранних стадиях, проведение постоянного контроля за развитием заболевания и за динамикой результатов лечения. Время ожидания результата исследования невелико, достоверность высока, стоимость серологического анализа невелика, а в предварительной подготовке пациента к процедуре нет необходимости.

Слабым местом иммуноферментного анализа является необходимость частого контрольного во избежание получения ложноотрицательного результата.

Иммуноферментный анализ успешно применяется при различной этиологии, инфекций вирусного происхождения, инфекций гениталий, нарушений в работе органов внутренней секреции.

Диагностические мероприятия с использованием методов иммуноферментного анализа особенно эффективны в неблагополучных по тем или иным инфекциям регионах, когда требуются решительные меры для борьбы с эпидемиями.

Преимущества и недостатки присущи всем методам исследований. Но, у ИФА крови сильных мест больше, чем слабых.

Расшифровка

Проводится врачами-лаборантами и сводится к обнаружению либо положительного результата, либо его отсутствия. Например, при проведении реакции преципитации, осадок либо есть, либо его нет. Результаты анализов помогают врачам-клиницистам, ставить и уточнять диагноз болезни, назначать лечение и контролировать состояние пациента в процессе заболевания и выздоровления.

Серологические исследования подтверждают или опровергают предварительный диагноз, основанный на симптоматике. В случае подтверждения диагноза, исследования повторяют для изучения динамики титра антител, что позволяет судить о развитии или редукции заболевания.

Для здорового человека, нормальным является полное отсутствие антител. А, если таковые обнаружены, необходимы дополнительные исследования.